Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Introducción: La población adulta mayor (60 años o más), ha ido en aumento en los últimos años en Chile. La enfermedad oral más prevalente en los sujetos portadores de prótesis removible de este grupo etario es la estomatitis protésica (EP), la cual se caracteriza por inflamación y eritema de la mucosa adyacente a la prótesis removible. La etiología es multifactorial, siendo uno de los principales factores los elevados recuentos de levaduras del género Candida. Debido a que el tratamiento convencional con fármacos no está exento de efectos adversos, en desmedro de la salud general de los adultos mayores, es que se han realizado novedosos estudios que involucran el uso de cepas de Lactobacillus como probióticos para el tratamiento de enfermedades infecciosas, incluida la estomatitis protésica asociada a candidiasis oral. El objetivo de este estudio es evaluar el efecto del consumo de un lácteo enriquecido con probiótico durante 6 meses en el recuento de levaduras del género Candida y bacterias del género Lactobacillus en adultos mayores portadores de prótesis removible con y sin estomatitis protésica asociada a candidiasis oral. Metodología: En este estudio participaron 53 adultos mayores portadores de prótesis removible con y sin EP pertenecientes a un ELEAM y a la Clínica Odontológica de la Universidad de Chile (COUCH), respectivamente. Previa firma de consentimiento informado, a cada individuo se le realizó un examen clínico y ficha clínica para conformar los grupos de estudio: EP con probiótico (n=20), EP con placebo (n=15), sano con probiótico (n=8), sano con placebo (n=10). Se tomaron muestras de saliva no estimulada para su procesamiento y análisis, al inicio y a los 6 meses de tratamiento. Para el recuento microbiológico, diluciones de saliva se sembraron en medio Sabouraud-agar para levaduras del género Candida (LGC) y medio MRS agar para bacterias del género Lactobacillus (BGL). Los datos se analizaron con los Test estadístico Shapiro-Wilk y Wilcoxon, considerando significativo un valor p<0,05. Resultados: Al comparar los grupos de estudio al inicio y a los 6 meses de tratamiento, se observó una disminución significativa en los recuentos de LGC en los sujetos con EP que consumieron el probiótico. El grupo sano con probiótico y los grupos que consumieron el placebo presentaron una disminución en los 2 recuentos de LGC pero sin diferencia estadística. En relación al recuento de BGL, todos los grupos presentaron disminución pero ésta no fue significativa. Conclusiones: El consumo de un lácteo enriquecido con probiótico, de manera regular, disminuye el recuento de LGC, en adultos mayores portadores de prótesis removible con estomatitis protésica asociada a candidiasis oral, sugiriendo su uso como coadyuvante en la prevención y tratamiento de esta enfermedad. El consumo de un lácteo enriquecido con probiótico influye en forma variable en el recuento de BGL. La asociación entre los Lactobacillus y su rol en la patogenia de la EP asociada a candidiasis oral aun no está definida. / Adscrita al Proyecto FONIS SA13/10116

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Introducción: La población de adultos mayores ha presentado un importante incremento a nivel nacional y mundial. La lesión de la mucosa oral más prevalente en esta población es la estomatitis protésica (EP), definida como proceso inflamatorio crónico de la mucosa masticatoria, asociada al uso de prótesis removible (PR). Su etiología aún no está determinada, pero se asocia fuertemente a factores del hospedero y levaduras del género Candida. La alteración de los parámetros bioquímicos salivales como pH, velocidad de flujo salival (VFS) y concentración total de proteínas en saliva ha sido relacionada con esta enfermedad, pudiendo jugar un rol en la patogenia de la EP. El uso de probióticos genera un efecto beneficioso en el sistema inmune, mejorando así la salud general, pero aún es escasa la información sobre su potencial rol en la cavidad oral. El propósito de este estudio fue analizar el efecto del consumo de un lácteo enriquecido con probiótico, durante 6 meses, en los parámetros salivales de adultos mayores portadores de PR con y sin EP a los 12 meses de iniciado el estudio. Material y Métodos: El estudio incluyó 43 adultos mayores, pertenecientes a un establecimiento de larga estadía para adultos mayores (ELEAM) o a la clínica de Prótesis Totales, de la Clínica Odontológica de la Universidad de Chile (COUCH), todos portadores de PR con o sin EP, que consumieron el lácteo los primeros 6 meses. La muestra se dividió en 4 grupos: individuos con EP que consumieron el lácteo con probiótico, individuos con EP que consumieron el lácteo sin probiótico, individuos sanos que consumieron el lácteo con probiótico e individuos sanos que consumieron el lácteo sin probiótico. Se obtuvieron muestras salivales al inicio del estudio (T 0 ) y luego a los 12 meses (T 12 ), las cuales fueron analizadas para determinar VFS, pH y concentración total de proteínas en la saliva. Resultados: Hubo una disminución significativa en el pH de aquellos sujetos que consumieron el lácteo sin probiótico al T 12 . En cuanto a la VFS, se observó una disminución significativa en ambos grupos de individuos con EP al T 12 . En la concentración de proteínas totales en saliva hubo diferencias estadísticas en todos los grupos analizados al T 12 . Conclusiones: No es posible comprobar un efecto del probiótico en el pH salival o VFS. Es posible relacionar el consumo de probiótico con un aumento en la concentración total de proteínas en saliva, sin embargo, para comprobar esta correlación son necesarios futuros estudios cualitativos que establezcan un perfil proteico de cada grupo estudiado. / Adscrito a Proyecto FONIS SAE 13|20116

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Introducción: La estomatitis protésica (EP) es una de las lesiones orales más frecuentes en adultos mayores (AM) portadores de prótesis removible (PR). Alteraciones salivales asociadas al envejecimiento, como acidificación y disminución de velocidad de flujo salival (VFS), favorecería la proliferación de levaduras del género Candida (LGC), microorganismos generalmente asociados a EP. Los probióticos, microorganismos vivos que administrados en cantidades adecuadas brindan beneficios a la salud del hospedero, podrían modificar parámetros salivales y consecuentemente, el recuento y diversidad de especies del género Candida. El objetivo de esta investigación es determinar el efecto del consumo de leche suplementada con probiótico, durante 6 meses, en el recuento y diversidad de especies del género Candida asociado a cambios en el pH y VFS de AM, portadores de PR con EP. Materiales y métodos: 53 AM portadores de PR, con y sin EP, consumieron diariamente y durante 6 meses leche suplementada con cepa probiótica Lactobacillus rhamnosus GG o con placebo. Se tomó y procesó muestras de saliva no estimulada al inicio del estudio (T0) y a los 6 meses después del consumo del lácteo (T6). Las variables estudiadas fueron pH, VFS, recuento y especies del género Candida. Se utilizaron los test estadísticos Wilcoxon y t-test, considerando una significancia del 95%. Las especies de LGC y su asociación con parámetros salivales se analizaron descriptivamente. Resultados: El consumo de leche con probiótico disminuyó el recuento de LGC en los AM con EP, con diferencia estadística. C. albicans disminuyó pero siguió siendo la especie más prevalente, independiente del tipo de leche consumida. El perfil de Candida no Candida albicans (CNCA) fue modificado en todos los grupos de estudio. En T0, C. albicans fue la especie más prevalente a pH<6,5 y en AM con hiposialia. CNCA presentó mayor diversidad a un pH cercano a la neutralidad o alcalino (pH>7,1) y a flujos salivales normales, en AM con EP. En T6, la asociación entre diversidad de especies del género Candida y parámetros salivales sufrió una modificación, independiente del tipo de leche consumida. Se observó una disminución con diferencia estadística en las variables pH y VFS solo en el grupo con EP que consumió leche con placebo. Conclusiones: En nuestro estudio, el consumo de leche suplementada con cepa probiótica Lactobacillus rhamnosus GG fue eficaz en la reducción del recuento de levaduras del género Candida en la cavidad oral, de AM portadores de PR con EP. No fue posible comprobar su efecto en el pH salival, VFS, diversidad de especies del género Candida y en su asociación con alteraciones salivales. / Adscrita al Proyecto FONIS SA13/10116

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Introducción: La Estomatitis Protésica (EP) es una patología muy común que afecta entre un 15 a un 70% de los pacientes portadores de prótesis removible (PR). Se caracteriza por la presencia de inflamación y eritema en la mucosa de soporte y actualmente es entendida como un proceso multifactorial, en el cual se identifican al uso protésico y altos recuentos de levaduras del género Candida como los principales agentes etiológicos de la enfermedad. La resistencia de las levaduras al tratamiento farmacológico convencional ha hecho surgir nuevas estrategias terapéuticas como el uso de probióticos, que han demostrado tener un efecto positivo en el tratamiento de la EP a través de la reducción del recuento de Candida en la cavidad oral. Sin embargo, no existen estudios acerca del efecto del probiótico en las características clínicas de la EP. El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto del consumo de leche enriquecida con probiótico en la prevalencia y severidad clínica de EP en adultos mayores (AM) portadores de PR a los 6 y 12 meses del inicio del estudio. Materiales y métodos: Ensayo clínico controlado randomizado triple ciego. Este estudio incluyó a 36 AM institucionalizados portadores de PR con diagnóstico de EP, divididos equitativamente en grupo caso y control, de 18 personas cada uno. Al inicio del estudio se realizó un examen clínico junto a una intervención educativa. Posteriormente, se inició el consumo diario de 200 mL del lácteo enriquecido con la cepa Lactobacillus rhamnosus GG en el grupo caso, y sin el probiótico en el grupo control, durante 6 meses. Una vez finalizado este periodo se realizó un nuevo examen clínico, y seguidamente otro a los 6 meses posteriores a finalizar el tratamiento. Las variables evaluadas fueron “preval encia” y “severidad” de EP a través de los Test Wilcoxon y Kruskal Wallis, respectivamente, considerando significativo un valor de p<0,05. Resultados: Al analizar las variables se observó que hubo diferencia estadística en la reducción de la prevalencia de EP tanto en el grupo caso como en grupo control, aunque los sujetos que consumieron el lácteo enriquecido con probiótico presentaron mayor número de casos con mejorías clínicas. En cuanto a la 2 severidad de las lesiones, sólo el grupo caso presentó diferencia estadística. Al comparar la prevalencia y la severidad entre casos y controles en cada tiempo de estudio no se observó diferencia estadística. Conclusión: El consumo de un lácteo enriquecido con probiótico podría constituir un efectivo coayudante en el tratamiento convencional de la EP, sin embargo, la reducción de la prevalencia y la severidad de las lesiones orales se deben al control de múltiples factores, entre estos, el control de la placa bacteriana, la mantención de medidas de higiene oral y protésica y el desuso nocturno de la PR. / Adscrita al Proyecto FONIS SA13/20116

Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / La creciente resistencia a los fármacos antifúngicos es un problema de salud pública mundial. Según estadísticas de la Organización Mundial de la Salud (OMS), las infecciones por estos patógenos han aumentado por diversas causas entre las que se encuentran el aumento de pacientes inmunocomprometidos y el uso masivo de antibióticos de amplio espectro. Lo más alarmante es la alta tasa de morbilidad que exhibe este tipo de infecciones, las que se asocian con una alta tasa de resistencia a los fármacos actualmente ocupados. Uno de los mecanismos de resistencia más relevantes es la formación de biofilms, que se definen como comunidades microbianas rodeadas por una matriz de sustancias poliméricas extracelulares, la cual les otorgaría una protección mecánica frente a la acción de antimicrobianos. Una de las patologías donde la formación de biofilms está directamente asociada con el fracaso terapéutico es la estomatitis protésica, una inflamación crónica de la mucosa oral en contacto con una prótesis removible y que tiene una directa asociación con la presencia de biofilms de levaduras del género Candida. Por estas razones es de gran interés investigar novedosas estrategias farmacológicas para reducir o revertir los biofilms. Debido al escaso desarrollo de nuevas moléculas antifúngicas, es que se ha buscado potenciar el efecto de los antifúngicos convencionales con fármacos “no antimicrobianos”. En este sentido, se ha descrito que los antiinflamatorios no esteroidales (AINES), que inhiben la formación de prostaglandinas, poseen efecto antibiofilm. Esto estaría relacionado con el rol de la Prostaglandina E2 en los procesos claves involucrados en la formación de biofilms; entre ellos, la morfogénesis de Candida y la adhesión a superficies abióticas. Entre los AINES destaca la aspirina que es la que ha presentado mejor efecto antibiofilm. Otra molécula de interés como agente antimicrobiano, es el óxido nítrico (NO), cuya acción se ha ensayado con compuestos dadores de NO como el nitroprusiato de sodio o el isosorbide mononitrato. Estos han presentado efectos antibiofilm presumiblemente por los efectos antimicrobianos que presentan el NO y por su capacidad como inmunomodulador. Por estas razones en esta investigación se evaluó el efecto antibiofilm de la aspirina liberadora de óxido nítrico, cuya estructura aparece en la Figura 1; en este caso el efecto sobre los biofilms sería dual. En este trabajo se determinó la susceptibilidad a fluconazol de los aislados clínicos de C. albicans y se cuantificó el efecto antibiofilm de la aspirina liberadora de óxido nítrico. Para este efecto, se evaluaron los siguientes parámetros: adhesión, morfogénesis, morfología de los biofilms y viabilidad de los biofilms en presencia de fluconazol y aspirina liberadora de óxido nítrico. Este último fármaco fue eficaz sobre los biofilms, pero su efecto no fue sinérgico en presencia de fluconazol, confirmando que fluconazol no presenta efecto antifúngico frente a los biofilms. Estos resultados son prometedores y nuevos estudios están en progreso para confirmar su posible uso en este tipo de patologías / The growing resistance to antifungal drugs is a global public health problem. According to statistics from the World Health Organization (WHO), infections with these pathogens have increased for various reasons, among which are the increase of immunocompromised patients and the widespread use of broadspectrum antibiotics. Most alarming is the high rate of morbidity exhibiting these infections, which are associated with a high rate of resistance to drugs currently occupied. One of the most important mechanisms of resistance is the formation of biofilms, which are defined as microbial communities surrounded by a matrix of extracellular polymeric substances, which would provide them with mechanical protection against the action of antimicrobials. One of the conditions where the formation of biofilms is directly associated with treatment failure is denture stomatitis, a chronic inflammation of the oral mucosa in contact with a removable prosthesis and has a direct association with the presence of biofilms of Candida yeasts. For these reasons it is of great interest to investigate novel pharmacological strategies to reduce or reverse the biofilms. Due to the limited development of new antifungal molecules it is that they have sought to enhance the effect of conventional antifungals with "no antimicrobial" drugs. In this regard, it described those nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) which inhibit the formation of prostaglandins, have antibiofilm effect. This would be related to the role of Prostaglandin E2 in the key processes involved in the formation of biofilms; including Candida morphogenesis and adherence to abiotic surfaces. Among the highlights NSAIDs aspirin presents the antibiofilm best effect. Another molecule of interest as an antimicrobial agent is nitric oxide (NO), whose action has been tested with NO donor compounds such as sodium nitroprusside or isosorbide mononitrate. These have presented antibiofilm effects presumably by antimicrobial effects of NO and its ability as an immunomodulatory agent. For these reasons in this investigation antibiofilm effect of aspirin releasing nitric oxide, was evaluated; in this case the effect on biofilms would be dual. Therefore, we evaluated fluconazole susceptibility of C. albicans clinical isolates and quantified the antibiofilm effect of aspirin releasing nitric oxide. For this purpose, adhesion, morphogenesis, morphology and viability of biofilms in the presence of fluconazole biofilms and aspirin releasing nitric oxide were evaluated. The latter drug was effective against biofilms, but its effect was not synergistic with those of fluconazole. This confirmed that fluconazole have no effect against biofilms. These results are promising and further studies are in progress to confirm their possible use in this type of pathology

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / INTRODUCCIÓN: La estomatitis subprotésica (ES) es una de las enfermedades de la mucosa oral más prevalentes en la población portadora de prótesis removible (PR). La mala higiene protésica y el uso nocturno de la prótesis, junto al aumento en el recuento de levaduras del género Candida son sus principales factores etiológicos. Considerando que los adultos mayores (AM) institucionalizados suelen presentar una deficiente salud oral respecto a los no institucionalizados, el objetivo de este estudio es evaluar si la influencia de una intervención educativa en higiene oral y protésica a los AM y sus cuidadores, durante la ingesta diaria de un lácteo con probiótico, disminuye los signos clínicos de ES y el recuento de levaduras Candida en saliva. METODOLOGÍA: Ensayo clínico controlado aleatorizado de triple enmascaramiento que incluyó a 28 AM institucionalizados portadores de PR con diagnóstico de ES, divididos en un grupo experimental y otro control, a quienes se les instruyó en higiene oral y protésica. Posteriormente, se realizó un examen clínico intraoral y recolección de muestras de saliva no estimulada, lo cual se repitió a los 6 meses (T1) de la administración diaria de un lácteo (que para el grupo experimental incluía 10⁷ Unidades Formadoras de Colonias por gramo (UFC/g) de Lactobacillus rhamnosus Sp1); y a los 6 meses posteriores (T2), durante los que no se administró el lácteo. El plan de análisis de datos incluyó “recuento de levaduras”, “prevalencia” y “severidad” de ES a través de las pruebas estadísticas de Wilcoxon y Kruskal Wallis y Correlación de Spearman, considerando significativo un valor de p<0,05. RESULTADOS: Existe diferencia estadística en la reducción de la prevalencia de ES en ambos grupos en T1, siendo mayor el número de casos en el grupo que recibió el lácteo con probiótico. En cuanto a la severidad no se registraron diferencias significativas. Finalmente, se registró diferencia estadística en la reducción del recuento de UFC/mL de Candida sólo en el grupo experimental en T1. CONCLUSIÓN: La ingesta diaria de un lácteo enriquecido con probiótico, junto a la aplicación de una intervención educativa en salud oral son medidas efectivas para la reducción del recuento de Candida y de la prevalencia de ES. Aunque en la variable prevalencia, la disminución se debe principalmente a las buenas prácticas de higiene oral y protésica. ⁷ / Adscrito a Proyecto FONIS SA 13|20116