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Emprego de matriz polimérica biodegradável em dispositivos vaginais para liberação sustentada de progesterona em fêmeas bovinas: testes in vitro e in vivo / Use of biodegradable polymeric matrix, in vaginal devices, to sustained progesterone release in cows: in vitro e in vivo tests

José Rodrigo Valim Pimentel 26 June 2006 (has links)
Com o aumento do número de animais inseminados por IATF (inseminação artificial em tempo fixo), a diminuição de custos e o incremento de índices reprodutivos têm sido os objetivos de vários grupos de pesquisa. Nos protocolos de IATF utilizados, empregam-se dispositivos de liberação sustentada de progesterona (P4), que são, em sua maioria, constituídos de um esqueleto de nylon, recoberto com uma camada de silicone com P4 . Visando a diminuição dos custos de produção e impacto ambiental, foi desenvolvido um dispositivo à base de biopolímeros. Neste estudo, foram comparados dispositivos confeccionados com uma blenda constituída de Poli-hidroxi-butirato (PHB) e Poli-&epsion;-caprolactona (PCL), com o Dispositivo Interno Bovino (DIB&reg;), utilizado como controle . No teste in vitro, utilizaram-se dois tipos de dispositivo à base de biopolímeros, com uma área superficial de 147 cm2: DISP8 (46% PHB, 46% PCL e 8% P4; n=4), DISP10 (45% PHB, 45% PCL, 10% P4; n=4) e o DIB&reg; (1 g de P4, área de 120 cm2; n=3). Os testes in vitro foram conduzidos segundo especificações da USP 23, em um dissolutor de comprimidos, empregando-se uma mistura de álcool/água (60/40) como meio de difusão. Amostras do meio foram colhidas aos 2 min., 2, 4, 8, 12, 24, 48, 60, 72, 84 e 96 h. Os teores de P4 foram dosados por espectrofotometria, em 244 nm de comprimento de onda. Realizaram-se as comparações 3 a 3 dos coeficientes angulares das retas obtidas pela regressão das concentrações acumuladas de P4, em função da raiz quadrada do tempo. As médias e respectivos erros-padrão dos coeficientes angulares foram de 677,39 ± 16.13 µg/cm2/t1/2 para o DIB&reg;, 566,17 ± 3.68 µg/cm2/t1/2 para o Disp8 e 774,63 ± 45.26 µg/cm2/t1/2 para o Disp10. Houve diferença entre o DISP8 e o DISP10 (p< 0,05), mas ambos não diferiram do DIB. Para análise das quantidades liberadas por dia de teste in vitro, consideraram-se 4 períodos: 0-24, 24-48, 48-72 e 72-96 h. Houve interação entre tratamento e tempo (p=0,0024). Nas primeiras 24 horas, o DISP8 liberou significativamente menos P4 do que o DISP10 e o DIB&reg;, cujas liberações não diferiram entre si. No intervalo entre 24 e 48h, o DISP 10 liberou significativamente mais P4 do que o DIB&reg;. O DISP8 liberou uma quantidade de P4 intermediária e não se diferenciou significativamente nem do DIB&reg; e nem do DISP10. No intervalo entre 48 e 72h a quantidade de P4 liberada pelo DISP10 foi significativamente maior do que a do DIB&reg; e a do DISP8, que não diferiram entre si. No intervalo entre 72 e 96h, o DISP10 liberou significativamente mais P4 do que o DIB&reg; e o DISP8 liberou uma quantidade intermediária que não diferiu do DIB&reg; nem do DISP10. No teste in vivo, seis vacas mestiças ovariectomizadas receberam DIB (n=4) ou DISP8 (n=8), em um delineamento alternado, com seqüência não balanceada (cross-over), adicionado de medidas repetidas no tempo, referentes aos 16 dias de colheita das amostras de sangue. As amostras foram analisadas por rádio-imuno-ensaio, em fase sólida, utilizando-se &quotkit&quot comercial da DPC (Diagnostics Products Corporation). As concentrações de pico foram atingidas 4 h após a colocação dos dispositivos e este foi o único momento em que as concentrações plasmáticas de P4 diferiram segundo dispositivo (11,45±1,96 vs 9,23±1,15 ng/mL, respectivamente para DIB e DISP8; p= 0,027). No dia 8 do ensaio, as concentrações plasmáticas de P4 proporcionadas pelo DIB e pelo DISP8 foram respectivamente 2,44±0,09 e 1,89±0,13 ng/mL (p=0.58). Ambos dispositivos mantiveram teores de P4 superiores a 1 ng/mL, durante os 16 dias do teste in vivo. Concluiu-se que os dispositivos confeccionados com a blenda dos biopolímeros PHB/PCL, podem liberar P4 de maneira sustentada, tanto quanto os que empregam silicone em sua fabricação. / With the increase in the number of animals inseminated by TAI (timed artificial insemination) the decrease of costs and the improvement of reproductive performance are the goals of several research groups. Progesterone devices which are majority constituted of a nylon skeleton covered with a silicone layer with P4, are used in TAI protocols. Aiming the decrease of the production costs and the environmental impact, was a new device developed with biopolymers matrix. In this study, were compared a blend of Poli-hidroxi-butirate (PHB) and poli-?-caprolactone (PCL) device with the Bovine Internal Device (DIB&reg;). In the in vitro test, two kinds of the new device with a superficial area of 147 cm2: DISP8 (46% PHB, 46% PCL and 8% P4; n=4), DISP10 (45% PHB, 45% PCL, 10% P4; n=4) and DIB&reg; (1 g of P4, area of 120 cm2; n=3). The in vitro tests were led following USP 23 specifications in a drug dissolutor in alcohol/water (60/40) solution as a diffusion medium. Samples were collected at 2 min., 2, 4, 8, 12, 24, 48, 60, 72, 84 and 96 hours. Progesterone concentrations were estimated by spectrophotometry at UV 244 nm wavelenght. Comparisons 3 by 3 of the angular coefficients of the straight lines obtained by the regression of the accumulated P4 concentrations in function of the square root of time were performed. The averages and respective standard-errors of the angular coefficients were 677,39 ± 16.13 µg/cm2/t1/2 to DIB&reg;, 566,17 ± 3.68 µg/cm2/t1/2 to Disp8 and 774,63 ± 45.26 µg/cm2/t1/2 to Disp10. Difference were observed between DISP8 and DISP10 (p< 0.05) but both did not differ to DIB&reg;. Four periods were considered for analysis of the amounts released per day of in vitro test: 0-24, 24-48, 48-72 and 72-96 hours. Interaction between treatment and time was observed (p=0.0024). In the first 24 hours DISP8 released significantly less P4 than DISP10 and DIB&reg; but the lathers did not differ from each other. In the interval between 24 and 48 hours DISP10 released significantly more P4 than DIB&reg;. The device DISP8 released an intermediary concentration of P4 and was similar to DIB&reg; and to DISP10. In the interval between 48 and 72 hours the progesterone concentration released by DISP10 was significantly higher than DIB&reg; and DISP8 but lathers did not differ from each other. In the interval between 72 and 96 hours DISP10 released significantly more P4 than DIB&reg; while DISP8 released an intermediary amount which did not differ to DIB&reg; or to DISP10. In the test in vivo test, six ovariectomized beef cows received the devices DIB&reg; (n=4) or DISP8 (n=8) in an alternated delineation in a nom balanced sequence (cross-over) added of repeated measures in time, related to the 16 days of blood samples collects. Progesterone concentration from these samples were measured by radioimmunoassay in solid phase using the commercial kit from DPC (Diagnostics Products Corporation). The peak of the progesterone concentrations were observed 4 hours after the devices insertion and this was the unique moment in which plasmatic progesterone concentrations differed depending on device (11,45 ± 1,96 vs 9,23 ± 1,15 ng/mL, respectively for DIB and DISP8; p= 0,027). After 8 days from the device insertion plasmatic progesterone concentrations provided by DIB and DISP8 were respectively 2,44 ± 0,09 and 1,89 ± 0,13 ng/mL (p=0.58). Both devices kept the progesterone concentration higher than 1 ng/mL during the 16 days of the in vivo test. In conclusion, the devices made with biopolymers blends of PHB/PCL can release sustained P4 comparable with silicone matrix.
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Desempenho de novilhas de corte super precoces suplementadas a pasto / Performance of beef heifers super early supplemented to pasture

Martins, Leandro Soares 19 March 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2015-03-26T13:55:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1063429 bytes, checksum: d03db996184b33819ba8246a6cf10d87 (MD5) Previous issue date: 2013-03-19 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / For the preparation of this dissertation it was conducted three experiments with the Nelore heifers under different supplementation strategies to pasture. In the first experiment the objective was to evaluate the effect of different levels of crude protein supplement on performance, intake, digestibility and also in microbial efficiency of animals. For this were used 40 newly weaned heifers, with an initial average age of 8 months and an initial average weight of 230 + 3,39 kg. The experimental design was completely randomized. The experiment contained five treatments and eight replications. The treatments were: mineral mix provided ad libitum, supplement containing 10%, 20%, 30% and 40% crude protein (CP), representing the treatments PB10, PB20, PB30, PB40, respectively. The supplements were provided in the amount of 1 kg / animal / day. There was a higher final body weight and weight gain in the supplemented animals compared to non-supplemented (P <0.10), these two parameters did not differ between animals supplemented with different levels of CP. The intake of dry matter (DM), organic matter (OM), crude protein (CP), total digestible nutrients (TDN), digested dry matter (DDM) and dry matter in g /kg of body weight were higher (P <0.10) for the supplemented animals compared to non-supplemented. The crude protein intake had increased linearly with increasing levels of CP in supplements. The digestibility of DM, OM, CP and TDN were higher (P <0.10) for the supplemented animals compared to non-supplemented. There was a quadratic effect on digestibility of CP with increased levels of CP in supplements. The production of microbial nitrogen (N mic), serum urea nitrogen (NUS) and reason urea nitrogen in the urine/creatinine nitrogen (NUU/Ncre) were higher (P <0.10) for the supplemented animals. Quadratic effect was observed in the production of Nmic, microbial efficiency (Emic), NUS and NUU/Ncre with increased levels of CP in multiple supplements. It was concluded that multiple supplementation provides higher weight gain and final body weight in the period after weaning from Nellore females. The second experiment aimed to evaluate the effect of replacing soybean meal by cottonseed meal 38% in supplements containing 15 and 30% of crude protein (CP) on performance and nutritional parameters of beef heifers. It 40 Nelore heifers was used, initial age of 12 months and average weight of 250 + 3,97 kg, which were conducted for five paddocks evenly formed with Brachiaria decumbens Stapf. The experimental design was completely randomized. The experiment contained five treatments and eight replications. The treatments were: Supplement containing soybean meal, with 15% CP (S15), supplement containing cottonseed meal, 15% CP (A15), supplement containing soybean meal, with 30% CP (S30), supplement containing cottonseed meal, 30% CP (A30) and treatment control receiving mineral mix ad libitum. Supplemented heifers had higher daily weight gains and final body weights also increased (P <0.10) when compared to the control treatment. The animals that received multiple supplementation also had higher intakes of all nutrients evaluated (P <0.10), as well as the digestibility of the same when compared to animals in the control treatment. The animals receiving supplements containing 15% CP had lower digestibility of DM, OM, CP, TDN and neutral detergent fiber corrected for ash and protein (NDFap), compared with those who received supplemental containing 30% CP (P <0.10). Treatments containing cottonseed meal provided greater digestibility of DM (P <0.10). It was concluded that supplementation of grazing heifers provide better performance productive and nutritional and the soybean meal can be substituted for cottonseed meal. In the third experiment, it was evaluated the effect of two additives, as well as their combination, on performance, intake, digestibility and also the efficiency of microbial synthesis. It was used a total of 40 Nelore heifers with age and weight of 16 months and 308 + 4,79 kg, respectively. These animals were divided into five paddocks evenly covered by Brachiaria decumbens Stapf. The experiment had five treatments and eight replications and was conducted during the transition rainy season dry season. The experimental design was completely randomized. The treatments were: ad libitum fed mineral mixture (MM), no additive supplement (SUP), supplement containing enzyme complex (Allzyme ® SSF) (SE), supplement containing live yeast (Yea-Sacc ®) (SL) and supplement containing both (SEL). The average gain and also the final body weight were greater for the supplemented animals, when compared to the MM treatment. These parameters were also higher for animals receiving yeast as an additive, when compared to animals in SUP treatment. The supplemented animals showed higher intake of all nutrients (P <0.10) compared to animals fed MM. The addition of additives did not influence intake between the supplemented animals. When contrasted treatments SE and SL showed higher DM intake, dry matter of forage (DMf), OM, organic matter forage (MOf), DM g / kg of body weight, DMf g / kg of body weight and NDFap g / kg of body weight for animals in SL treatment. The digestibility was higher for animals receiving supplementation for all nutrients. It was observed the effect of yeast presence (SL) in increasing the digestibility of DM, OM and CP comparing to treatment without additives. It was also observed higher microbial production, serum and reason urea nitrogen in the urine/creatinine nitrogen for animals receiving supplementation for animals in MM treatment. It was concluded that multiple supplementation improves better performance and nutritional parameters of heifers, as well as the addition of active yeast enhances this effect, during the transition rainy season dry season. / Para a elaboração dessa dissertação foram realizados três experimentos com fêmeas bovinas da raça Nelore, submetidas a diferentes estratégias de suplementação a pasto. No primeiro experimento o objetivo foi avaliar o efeito de diferentes níveis de proteína bruta no suplemento, no desempenho, consumo, digestibilidade e também na eficiência microbiana dos animais. Para isso foram utilizadas 40 novilhas recém desmamadas, com idade inicial média de 8 meses e peso inicial médio de 230 + 3,39 kg. O delineamento utilizado foi o inteiramente casualizado. O experimento continha cinco tratamentos e oito repetições. Os tratamentos foram: mistura mineral fornecida ad libitum (MM), suplemento contendo 10%, 20%, 30% e 40% de proteína bruta (PB), sendo os tratamentos PB10, PB20, PB30, PB40, respectivamente. Os suplementos foram fornecidos na quantidade de 1 Kg/animal/dia. Observou-se maior peso corporal final (PCF) e ganho médio diário de peso (GMD) para os animais suplementados em relação aos não suplementados (P<0,10), não diferindo esses dois parâmetros entre os animais suplementados com diferentes níveis de PB. O consumo de matéria seca (MS), matéria orgânica (MO), proteína bruta (PB), nutrientes digestíveis totais (NDT), matéria seca digerida (MSD) e matéria seca em g/kg de peso corporal, foram maiores (P<0,10) para os animais suplementados em relação aos não suplementados. O consumo de proteína bruta apresentou efeito linear crescente, com o aumento dos níveis de PB nos suplementos. Observou-se um efeito quadrático na digestibilidade da PB com o aumento dos níveis de PB nos suplementos. A produção de nitrogênio microbiano (Nmic), nitrogênio ureico no soro (NUS) e a relação nitrogênio ureico na urina/nitrogênio da creatinina (NUU/Ncre) foram maiores (P<0,10) para os animais suplementados. Observou-se efeito quadrático na produção de Nmic, eficiência microbiana (Emic), NUS e NUU/Ncre com o aumento dos níveis de PB nos suplementos múltiplos. Concluiu-se que a suplementação múltipla proporciona maiores ganhos de peso e peso corporal final no período pós desmama de novilhas Nelore. No segundo experimento objetivou-se avaliar o efeito da substituição do farelo de soja pelo farelo de algodão 38%, em suplementos contendo 15 e 30% de proteína bruta (PB), no desempenho e nos parâmetros nutricionais de novilhas de corte. Foram utilizadas para a execução deste experimento, 40 novilhas Nelore com idade inicial de 12 meses e peso inicial médio de 250 + 3,97 kg, as quais foram conduzidas para cinco piquetes uniformemente formados com Brachiaria decumbens Stapf. O delineamento utilizado foi o inteiramente casualizado. O experimento continha cinco tratamentos e oito repetições. Os tratamentos foram: suplemento contendo farelo de soja, com 15% de PB (S15), suplemento contendo farelo de algodão, com 15% de PB (A15), suplemento contendo farelo de soja, com 30% de PB (S30), suplemento contendo farelo de algodão, com 30% de PB (A30) e tratamento controle, recebendo mistura mineral ad libitum (MM). As novilhas suplementadas apresentaram maiores ganhos diários de peso e também maiores pesos corporais finais (P<0,10), quando comparadas às do tratamento controle. Os animais que receberam suplementação múltipla também apresentaram maiores consumos de todos os nutrientes avaliados (P<0,10), assim como também maior digestibilidade dos mesmos, quando comparados aos animais do tratamento controle. Os animais recebendo suplementos contendo 15% de PB apresentaram menores digestibilidades da MS, MO, PB, NDT e fibra insolúvel em detergente neutro corrigida para cinzas e proteína (FDNcp), quando comparados aos que receberam suplemento contendo 30% de PB (P<0,10). Os tratamentos contendo farelo de algodão proporcionaram maiores digestibilidades da MS (P<0,10). Concluiu-se que a suplementação de fêmeas em pastejo proporciona melhor desempenho produtivo e nutricional e que o farelo de soja pode ser totalmente substituído por farelo de algodão 38%. No terceiro experimento foi avaliado o efeito de dois aditivos, assim como a combinação de ambos, no desempenho, consumo, digestibilidade e também na eficiência da síntese microbiana. Foram utilizadas 40 novilhas Nelore de idade e peso médio de 16 meses e 308 + 4,79 kg, respectivamente. Esses animais foram alocados em cinco piquetes uniformemente cobertos por Brachiaria decumbens Stapf. O experimento apresentava cinco tratamentos e oito repetições e foi realizado no período de transição águas - seca. O delineamento utilizado foi o inteiramente casualizado. Os tratamentos eram: mistura mineral fornecida ad libitum (MM), suplemento sem aditivo (SUP), suplemento contendo complexo enzimático (Allzyme SSF®) (SE), suplemento contendo levedura ativa (Yea-Sacc®) (SL) e suplemento contendo ambas (SEL). O ganho médio diário e também o peso corporal final foram maiores para os animais suplementados, quando comparados aos do tratamento MM. Esses parâmetros também foram maiores para os animais recebendo a levedura como aditivo, quando comparados aos animais do tratamento SUP. Os animais suplementados apresentaram maior consumo de todos os nutrientes (P<0,10), quando comparados aos animais do tratamento MM. A adição dos aditivos não influenciou no consumo entre os animais suplementados. Quando contrastados os tratamentos SE e SL, observou-se maior consumo de MS, matéria seca de forragem (MSf), MO, matéria orgânica de forragem (MOf), MS em g/kg de peso corporal, MSf em g/ kg de peso corporal e FDNcp em g/kg de peso corporal, para os animais do tratamento SL. A digestibilidade foi maior para os animais recebendo suplementação, para todos os nutrientes. Observou-se efeito da presença da levedura (SL) no aumento da digestibilidade da MS, MO e da PB em relação ao tratamento que recebia suplemento sem aditivos. Foi também observada maior produção microbiana, nitrogênio uréico no soro e relação nitrogênio ureico na urina/nitrogênio da creatinina para animais recebendo suplementação em relação aos animais do tratamento MM. Concluiu-se que a suplementação múltipla melhora o desempenho e os parâmetros nutricionais de novilhas Nelore, assim como a adição de leveduras ativas (Yea-Sacc®) potencializa esse efeito, no período de transição águas - seca.
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Emprego de matriz polimérica biodegradável em dispositivos vaginais para liberação sustentada de progesterona em fêmeas bovinas: testes in vitro e in vivo / Use of biodegradable polymeric matrix, in vaginal devices, to sustained progesterone release in cows: in vitro e in vivo tests

Pimentel, José Rodrigo Valim 26 June 2006 (has links)
Com o aumento do número de animais inseminados por IATF (inseminação artificial em tempo fixo), a diminuição de custos e o incremento de índices reprodutivos têm sido os objetivos de vários grupos de pesquisa. Nos protocolos de IATF utilizados, empregam-se dispositivos de liberação sustentada de progesterona (P4), que são, em sua maioria, constituídos de um esqueleto de nylon, recoberto com uma camada de silicone com P4 . Visando a diminuição dos custos de produção e impacto ambiental, foi desenvolvido um dispositivo à base de biopolímeros. Neste estudo, foram comparados dispositivos confeccionados com uma blenda constituída de Poli-hidroxi-butirato (PHB) e Poli-&epsion;-caprolactona (PCL), com o Dispositivo Interno Bovino (DIB&reg;), utilizado como controle . No teste in vitro, utilizaram-se dois tipos de dispositivo à base de biopolímeros, com uma área superficial de 147 cm2: DISP8 (46% PHB, 46% PCL e 8% P4; n=4), DISP10 (45% PHB, 45% PCL, 10% P4; n=4) e o DIB&reg; (1 g de P4, área de 120 cm2; n=3). Os testes in vitro foram conduzidos segundo especificações da USP 23, em um dissolutor de comprimidos, empregando-se uma mistura de álcool/água (60/40) como meio de difusão. Amostras do meio foram colhidas aos 2 min., 2, 4, 8, 12, 24, 48, 60, 72, 84 e 96 h. Os teores de P4 foram dosados por espectrofotometria, em 244 nm de comprimento de onda. Realizaram-se as comparações 3 a 3 dos coeficientes angulares das retas obtidas pela regressão das concentrações acumuladas de P4, em função da raiz quadrada do tempo. As médias e respectivos erros-padrão dos coeficientes angulares foram de 677,39 ± 16.13 µg/cm2/t1/2 para o DIB&reg;, 566,17 ± 3.68 µg/cm2/t1/2 para o Disp8 e 774,63 ± 45.26 µg/cm2/t1/2 para o Disp10. Houve diferença entre o DISP8 e o DISP10 (p< 0,05), mas ambos não diferiram do DIB. Para análise das quantidades liberadas por dia de teste in vitro, consideraram-se 4 períodos: 0-24, 24-48, 48-72 e 72-96 h. Houve interação entre tratamento e tempo (p=0,0024). Nas primeiras 24 horas, o DISP8 liberou significativamente menos P4 do que o DISP10 e o DIB&reg;, cujas liberações não diferiram entre si. No intervalo entre 24 e 48h, o DISP 10 liberou significativamente mais P4 do que o DIB&reg;. O DISP8 liberou uma quantidade de P4 intermediária e não se diferenciou significativamente nem do DIB&reg; e nem do DISP10. No intervalo entre 48 e 72h a quantidade de P4 liberada pelo DISP10 foi significativamente maior do que a do DIB&reg; e a do DISP8, que não diferiram entre si. No intervalo entre 72 e 96h, o DISP10 liberou significativamente mais P4 do que o DIB&reg; e o DISP8 liberou uma quantidade intermediária que não diferiu do DIB&reg; nem do DISP10. No teste in vivo, seis vacas mestiças ovariectomizadas receberam DIB (n=4) ou DISP8 (n=8), em um delineamento alternado, com seqüência não balanceada (cross-over), adicionado de medidas repetidas no tempo, referentes aos 16 dias de colheita das amostras de sangue. As amostras foram analisadas por rádio-imuno-ensaio, em fase sólida, utilizando-se &quotkit&quot comercial da DPC (Diagnostics Products Corporation). As concentrações de pico foram atingidas 4 h após a colocação dos dispositivos e este foi o único momento em que as concentrações plasmáticas de P4 diferiram segundo dispositivo (11,45±1,96 vs 9,23±1,15 ng/mL, respectivamente para DIB e DISP8; p= 0,027). No dia 8 do ensaio, as concentrações plasmáticas de P4 proporcionadas pelo DIB e pelo DISP8 foram respectivamente 2,44±0,09 e 1,89±0,13 ng/mL (p=0.58). Ambos dispositivos mantiveram teores de P4 superiores a 1 ng/mL, durante os 16 dias do teste in vivo. Concluiu-se que os dispositivos confeccionados com a blenda dos biopolímeros PHB/PCL, podem liberar P4 de maneira sustentada, tanto quanto os que empregam silicone em sua fabricação. / With the increase in the number of animals inseminated by TAI (timed artificial insemination) the decrease of costs and the improvement of reproductive performance are the goals of several research groups. Progesterone devices which are majority constituted of a nylon skeleton covered with a silicone layer with P4, are used in TAI protocols. Aiming the decrease of the production costs and the environmental impact, was a new device developed with biopolymers matrix. In this study, were compared a blend of Poli-hidroxi-butirate (PHB) and poli-?-caprolactone (PCL) device with the Bovine Internal Device (DIB&reg;). In the in vitro test, two kinds of the new device with a superficial area of 147 cm2: DISP8 (46% PHB, 46% PCL and 8% P4; n=4), DISP10 (45% PHB, 45% PCL, 10% P4; n=4) and DIB&reg; (1 g of P4, area of 120 cm2; n=3). The in vitro tests were led following USP 23 specifications in a drug dissolutor in alcohol/water (60/40) solution as a diffusion medium. Samples were collected at 2 min., 2, 4, 8, 12, 24, 48, 60, 72, 84 and 96 hours. Progesterone concentrations were estimated by spectrophotometry at UV 244 nm wavelenght. Comparisons 3 by 3 of the angular coefficients of the straight lines obtained by the regression of the accumulated P4 concentrations in function of the square root of time were performed. The averages and respective standard-errors of the angular coefficients were 677,39 ± 16.13 µg/cm2/t1/2 to DIB&reg;, 566,17 ± 3.68 µg/cm2/t1/2 to Disp8 and 774,63 ± 45.26 µg/cm2/t1/2 to Disp10. Difference were observed between DISP8 and DISP10 (p< 0.05) but both did not differ to DIB&reg;. Four periods were considered for analysis of the amounts released per day of in vitro test: 0-24, 24-48, 48-72 and 72-96 hours. Interaction between treatment and time was observed (p=0.0024). In the first 24 hours DISP8 released significantly less P4 than DISP10 and DIB&reg; but the lathers did not differ from each other. In the interval between 24 and 48 hours DISP10 released significantly more P4 than DIB&reg;. The device DISP8 released an intermediary concentration of P4 and was similar to DIB&reg; and to DISP10. In the interval between 48 and 72 hours the progesterone concentration released by DISP10 was significantly higher than DIB&reg; and DISP8 but lathers did not differ from each other. In the interval between 72 and 96 hours DISP10 released significantly more P4 than DIB&reg; while DISP8 released an intermediary amount which did not differ to DIB&reg; or to DISP10. In the test in vivo test, six ovariectomized beef cows received the devices DIB&reg; (n=4) or DISP8 (n=8) in an alternated delineation in a nom balanced sequence (cross-over) added of repeated measures in time, related to the 16 days of blood samples collects. Progesterone concentration from these samples were measured by radioimmunoassay in solid phase using the commercial kit from DPC (Diagnostics Products Corporation). The peak of the progesterone concentrations were observed 4 hours after the devices insertion and this was the unique moment in which plasmatic progesterone concentrations differed depending on device (11,45 ± 1,96 vs 9,23 ± 1,15 ng/mL, respectively for DIB and DISP8; p= 0,027). After 8 days from the device insertion plasmatic progesterone concentrations provided by DIB and DISP8 were respectively 2,44 ± 0,09 and 1,89 ± 0,13 ng/mL (p=0.58). Both devices kept the progesterone concentration higher than 1 ng/mL during the 16 days of the in vivo test. In conclusion, the devices made with biopolymers blends of PHB/PCL can release sustained P4 comparable with silicone matrix.
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Detecção sorológica e molecular do herpesvírus bovino 1 em estruturas reprodutivas de fêmeas bovinas / Serological and molecular bovine herpesvirus-1 detectation on reproductive structures of bovine females

Pereira, Emílio César Martins 28 February 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 518698 bytes, checksum: 9b98b706a52c45c02159a500d2de2177 (MD5) Previous issue date: 2011-02-28 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The aim of this study was to evaluate the serological status of slaughterderived cows for the presence of antibodies against bovine herpesvirus 1 (BoHV-1), viral DNA in ovarian tissue, oocyte, follicular fluid and blood of these animals by polymerase chain reaction (PCR) and correlate it with the serological profile. Serum samples, blood, ovarian tissue, follicular fluid and cumulus-oocyte complex were collected from 147 animals that had no history of vaccination against BoHV-1. Toxic or insufficient samples were discarded. Serological tests allowed the detection of the antibody titers from 2 to 1024. Molecular tests were preceded by the extraction of DNA from the samples, according to manufacturer's recommendations. The PCR reaction to use the primers previously described by Takiuchi et al. (2005). A total of 83.6% (117/140) of serum-positive for BoHV-1 in serum samples were observed. The positive samples were divided into groups according to serological profile, to get 10% of Down Titer (2 &#8804; X <8), 32.9% of Moderate Titer (8 &#8804; X <64); 40.7% High Titer (64 &#8804; X &#8804; 512). In molecular tests, viral DNA was detected only in groups of positive samples. From positive animals, viral DNA was detected in 0.9% (1/115) of oocytes, at 4.3% (5/117) of ovarian tissue, 2.8% (3/108) of blood and any of follicular fluid sample. Comparing the results among groups of samples, the differences were not significant (p>0.05). Thus, animals showed high prevalence of antibodies against BoHV-1 and molecular tests that have provensuccessful in detecting DNA in genital samples from cows, suggesting that these structures could be sites of tropism of this virus. / O objetivo do presente trabalho foi avaliar a condição sorológica de fêmeas bovinas abatidas em um frigorífico quanto à presença de anticorpos contra o Bovine Herpesvirus 1 (Herpesvírus Bovino 1 - BoHV-1). Objetivou-se também avaliar a presença do DNA viral no tecido ovariano, nos ovócitos, líquido folicular e sangue destes animais por meio da Reação de Cadeia de Polimerase (PCR) e correlacioná-la com o perfil sorológico. Foram coletadas amostras de soro, sangue, tecido ovariano, líquido folicular e complexo cumulus-ovócitos de 147 animais que não tinham histórico de vacinação com o BoHV-1. Amostras tóxicas ou insuficientes foram descartadas. Os testes sorológicos foram realizados permitindo a detecção de títulos virais de anticorpos de 2 a 1024. Os testes moleculares foram precedidos da extração do DNA das amostras, de acordo com recomendações do fabricante. Sucessivamente, foram realizadas as PCRs utilizando os oligonucleotídeos previamente descritos por Takiuchi et al. (2005). Observou-se 83,6% (117/140) de soropositividade para o BoHV-1 nas amostras sorológicas. As amostras positivas, divididas em grupos, de acordo com o título sorológico, apresentaram-se 10% de Título Baixo (2 &#8804; X < 8); 32,9% de Título Médio (8 &#8804; X < 64); 40,7% de Título Alto (64 &#8804; X &#8804; 512). Em relação aos testes moleculares, o DNA viral foi detectado somente nos grupos de amostras soropositivas. Dos animais soropositivos, foi evidenciado o DNA viral em 0,9%(1/115) dos ovócitos, em 4,3%(5/117) do tecido ovariano, 2,8%(3/108) do sangue e em nenhuma amostra de líquido folicular. Comparando os resultados entre os grupos de amostras, as diferenças não se mostraram significativas (P > 0,05). Conclui-se que do rebanho analisado foi detectada alta prevalência de anticorpos contra o BoHV-1 e que os testes moleculares se mostraram eficientes na detecção do DNA nas amostras de genitais de fêmeas bovinas, sugerindo que estas estruturas poderiam ser sítios de tropismo deste vírus.

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