La deficiencia de vitamina A (VAD) es un problema importante de salud pública, que afectaclínicamente a más de 5 millones de personas al año. En países en vías de desarrollo afectagravemente a niños aumentando la morbilidad y mortalidad de diferentes infecciones yenfermedades del tracto respiratorio.Los retinoides, metabolitos activos de la vitamina A, son necesarios en mamíferos para eldesarrollo pulmonar y la diferenciación de células pulmonares, y su deficiencia altera la estructuray función de los pulmones. Las membranas basales (MBs), que están asociadas al epitelio yendotelio alveolar y forman parte de la pared alveolar, también están implicadas en estos procesos,y el ácido retinoico, principal forma biológicamente activa de la vitamina A, modula la expresiónde macromoléculas de la matriz extracelular.Por este motivo, el propósito de nuestro trabajo ha sido analizar los efectos de la deficienciacrónica de vitamina A en la estructura y composición de la MB pulmonar durante el desarrollopostnatal de los pulmones, y el del tratamiento posterior con ácido all-trans-retinoico sobre lasalteraciones encontradas. Crías macho, recién destetadas, fueron alimentadas con dieta completa odeficiente en vitamina A hasta que cumplieron 60 días de vida. Y un grupo de crías VAD fueronrecuperadas con inyecciones intraperitoneales de ácido all-trans-retinoico durante 10 días. Elanálisis concreto de la MB alveolar, cuya integridad es de gran importancia para el intercambio degases durante la función respiratoria, mostró en la deficiencia un engrosamiento de la misma,deposiciones ectópicas de fibrillas de colágeno I en su interior, un aumento del contenido total delos colágenos I y IV, y cambios en su composición en cadenas α. Además, la deficiencia de vitaminaA produjo una disminución en el contenido de las cadenas de laminina mayoritarias en las MBspulmonares, y modificó la actividad proteolítica de la MMP2 y MMP9, encargadas de ladegradación y renovación de las MBs, disminuyéndola. También observamos que la privación devitamina A durante este periodo del desarrollo provocó un aumento del factor fibrogénico TGF-β1, un incremento del estrés oxidativo y una respuesta inflamatoria leve en los pulmones. Por otrolado, también demostramos que la mayoría de estas alteraciones, al menos parcialmente,revirtieron al estado control tras tratar con ácido all-trans-retinoico. Interesantemente, lacapacidad de recuperación por parte del ácido retinoico ocurre aún existiendo un estrés oxidativoaumentado. En conclusión, la deficiencia de vitamina A ocasiona alteraciones en la estructura ycomposición de la MB alveolar que probablemente estén mediadas por el TGF-β1 y el ácidoretinoico es capaz de revertirlas. Estas alteraciones podrían contribuir a un mal funcionamientopulmonar y predisponer a diferentes enfermedades pulmonares. / Vitamin A deficiency (VAD) is an important public health problem, affecting clinically more than 5millions of persons per year. Particularly, VAD affects children of developing countries, increasingthe morbidity and mortality of several respiratory tract infections and illnesses.Retinoids, active metabolites of Vitamin A, are essential for lung development and pulmonary celldifferentiation and its deficiency results in alterations of lung structure and function. Basementmembranes (BMs), that are associated with the alveolar epithelium and endothelium andconstitutes part of the air-blood barrier, are also involved in those processes, and retinoic acid, themain biologically active form of vitamin A, influences the expression of extracellular matrixmacromolecules.Therefore, the aims of our work have been to analyze the ultrastructure and collagen content oflung alveolar BM in growing rats deficient in vitamin A and the recovering effect of all-transretinoic acid. Alveolar BM, which is very important for the gas exchange and lung function, wasenlarged in VAD rats (doubled its thickness) and contained irregularly scattered collagen fibrils.Immunocytochemistry revealed that these fibrils were composed of collagen I. Total content ofboth collagen I protein and its mRNA was greater in vitamin-deficient lungs. In agreement withthe greater size of the BM the amount of collagen IV was also increased. VAD altered the α chaincomposition of collagen I and IV, and also reduced the content of the main laminin chains of lungBMs. Moreover proteolitic activity of MMP2 and MMP9 were decreased in VAD animals.Proinflammatory cytokines, IL-1α, IL-1β and TNF-α, did not change, but myeloperoxidase andTGF-β1 were increased. Treatment of VAD rats with retinoic acid reversed to the control statenearly all the alterations, at least partially. Interestingly, retinoic acid recovering activity occurredin the presence of increasing oxidative stress. In conclusion, vitamin A deficiency results inalterations of the structure and composition of the alveolar BM which are probably mediated byTGF-β1 and reverted by retinoic acid. These alterations could contribute to the impairment oflung function and predispose to pulmonary disease.

En la presente memoria se plantea un estudio clínico prospectivo de cohortes, cuyos objetivos son: 1. Validar una técnica analítica para determinar vancomicina tanto en suero como en líquido peritoneal.2. Diseñar un modelo compartimental que describa el comportamiento de la vancomicina tras su administración intraperitoneal a pacientes sometidos a DPCA con peritonitis y calcular los parámetros farmacocinéticos que definen este modelo.3. Analizar la relación de los parámetros farmacocinéticos con las características biométricas y fisiopatológicas de los pacientes.4. Simplificar este modelo en uno que permita en análisis farmacocinético de la vancomicina en estos pacientes en la práctica clínica.5.Establecer un protocolo de tratamiento y monitorización de vancomicina tras la administración intraperitoneal en pacientes sometidos a DPCA con peritonitis. En una primera cohorte se va a desarrollar un modelo farmacocinético que describa la evolución de las concentraciones sérica y peritoneal del antibiótico, en el cual se tendrá en cuenta que la administración y la eliminación se producen en compartimentos distintos. Posteriormente, se adaptará este modelo a otro más sencillo que permita monitorizar la vancomicina administrada por vía intraperitoneal en la practica clínica. Conclusiones más importantes:1. El sistema AxSYM® puede utilizarse para la cuantificación de vancomicina en líquido peritoneal en el intervalo de concentraciones de 100 a 1000 µg/ml.2. El análisis de los resultados de la cohorte 1 muestran que el 50% de las concentraciones plasmáticas y el 70% en LP de vancomicina a las 168 horas postdosificación son menores que el límite inferior del intervalo terapéutico usual y no garantizan la efectividad del tratamiento. 3. El análisis compartimental conjunto de los resultados experimentales de concentración sérica y peritoneal de vancomicina, utilizando un modelo bicompartimental con administración del fármaco en el compartimento peritoneal y eliminación en el compartimento plasmático, constituye un modelo fisiológico que se adapta adecuadamente a la farmacoterapia intraperitoneal.4. Los parámetros farmacocinéticos que definen el modelo bicompartimental son Vd: 41L , Cl: 0.22L/h Cla: 0.5L/h Ka: 0.24 h-1; Kd: 0.01 h-1, y Kel: 0.05 h-1. 5. Se puede simplificar el modelo bicompartimental en otro monocompartimental que permite la monitorización de la vancomicina durante la diálisis peritoneal continua ambulatoria en la práctica clínica.6. Los parámetros farmacocinéticos que definen el modelo monocompartimental son Vd: 0.52L/kg , Cl: 0.006 L/h/kg , Ka: 2.14h-1.7. La introducción del factor de disposición de los pacientes predice de forma más exacta y precisa las concentraciones experimentales solamente en la primera fase del tratamiento . En la fase final del tratamiento el modelo que mejor predice las concentraciones experimentales es aquel que no introduce el factor de disposición, debido posiblemente a que la duración del tratamiento contribuya a la reducción del aclaramiento y del volumen de distribución al no encontrarse la membrana peritoneal tan inflamada.9. El número de peritonitis que haya sufrido el paciente en episodios anteriores no influye en el porcentaje de vancomicina absorbido a través de la pared peritoneal, aunque en aquellos pacientes que han sufrido 3 o más episodios de peritonitis no se observan porcentajes de absorción superiores al 65%.10. A partir de los resultados obtenidos en la presente memoria, se propone el siguiente protocolo de tratamiento y monitorización: - Administración de una dosis única de 2 g de vancomicina + 1g de ceftacidima en administración intraperitoneal.-Determinación de las concentraciones plasmáticas y peritoneales a las 6 horas postinfusión ycálculo de la dosis absorbida.-Cálculo de los parámetros farmacocinéticos individuales. -Determinación de la concentración plasmática a las 120 horas postadministración.-Administración, si procede, de una nueva dosis. / This report presents a clinical study of prospective study with patients, whose aims are: 1. To validate an analytical technique to determine vancomycin in both serum and peritoneal liquid forms.2. To design a compartmental model which describes the behaviour of vancomycin after its intraperitoneally administration to patients undergoing CAPD with peritonitis and calculate the pharmacokinetics parameters which define this model.3. To analyse the relation of the pharmacokinetics parameters with the antropometric and biological parameters of the patients.4. To simplify this model so that it permits the pharmacokinetic analysis of the vancomycin in these patients in clinical practice.5.To establish a protocol of treatment and monitoring of vancomycin after the intraperitoneally administration in patients undergoing a DPCA with peritonitis.In a first cohort a pharmacokinetic model will be developed, describing the evolution of the serum and peritoneal concentrations concentrations of the antibiotic, in which we notice the fact that the administration and the elimination happen in different compartments. Subsequently, this model will be adapted to another more simple one which permits monitoring the vancomycin administered via intraperitoneally in clinical practice.

La importancia de la artritis reumatoide como enfermedad crónica y progresiva, prevalente e incapacitante, plantea el problema de establecer un tratamiento efectivo y precoz para ralentizar en lo posible el curso de la enfermedad y evitar la utilización de medicamentos innecesarios teniendo en cuenta que los medicamentos biológicos de última generación no están exentos de reacciones adversas importantes.En este trabajo se aborda la capacidad de los polimorfismos en los genes del TNF-alfa en las posiciones 238 y 308, de la Interleukina-10 en la posición 1082, de gen de la metilen-tetra-hidro-folato-reductasa (MTHFR) en la posición 677, así como del indicador DAS28 como predictores de la respuesta al tratamiento con infliximab en los pacientes con Artritis Reumatoide.Se trata de un estudio observacional prospectivo-retrospectivo sobre 74 pacientes, a los que se le ha realizado un seguimiento clínico durante unas 30 administraciones del fármaco, aproximadamente unos 4 años, según protocolo habitual de utilización (0, 2 semanas, 4 semanas, y luego cada 8 semanas).Se han agrupado los pacientes en función de su grado de respuesta al tratamiento con infliximab, clasificándose a los pacientes en tres grupos; pacientes respondedores, no respondedores y respondedores temporales que son aquellos que inicialmente han respondido al tratamiento, pero que durante el seguimiento, atendiendo al juicio clínico de los reumatólogos, siendo este la variable independiente del estudio. Se recogen, entre otros, los parámetros clínicos habituales necesarios para el cálculo del DAS28, y que son la Velocidad de sedimentación sanguínea (VSG), el número de articulaciones dolorosas, el número de articulaciones tumefactas, el estado general valorado por el enfermo, y finalmente las reacciones adversas acontecidas durante el seguimiento.La determinación de los polimorfismos genéticos se ha realizado mediante la técnica de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR).Para el tratamiento estadístico de los polimorfismos se han realizado análisis de frecuencia, y para la comparación de los datos clínicos entre los grupos de pacientes, tanto basales como tras cada administración, se ha realizado un análisis de la varianza, determinandose con posterioridad los grupos diferenciados mediante pruebas de diferencia mínima significativa (DMS) y Bonferroni y para determinar la evolución a lo largo del tiempo del DAS28 se realiza un análisis lineal multivariante, con posterior comparación entre las distintas administraciones mediante DMS y Bonferroni.Los resultados obtenidos a partir de los análisis de frecuencias parecen indicar que la influencia de los polimorfismos estudiados, el sexo, el factor reumatoide y las causas de finalización del tratamiento, no tienen relación significativa con la mejor o peor respuesta al tratamiento.Así mismo, la correlación entre la valoración clínica del reumatólogo y la valoración según el indicador DAS-28 no parece ser alta, por lo que se plantean posibles limitaciones para la utilización de este indicador, como serían la forma en que se establece el valor basal de partida, ya que las variaciones antes de iniciar el tratamiento pueden ser muy significativas y de una magnitud similar a las que este indicador registra cuando se produce respuesta al tratamiento. Así mismo, el tiempo de evolución necesario y conveniente para observar la totalidad de de la eficacia del tratamiento puede no ser suficiente tal y como se lleva a cabo actualmente. Finalmente el hecho de que este indicador no tenga en cuenta la intensidad de partida de la enfermedad, son elementos de controversia en la utilización de este indicador.Así mismo se propone la conveniencia de utilizar el %DAS28 como elemento de valoración de la respuesta al tratamiento con Infliximab, pues parece que esta simple transformación es capaz de predecir de forma más precoz que el DAS-28, la respuesta de los pacientes. / Rheumatoid arthritis (RA) is a systemic chronic inflammatory disease that mainly affects the synovial joints and that has a worldwide prevalence of 1%, affecting women and men disproportionately (2:1, respectively). Early, aggressive disease management is critical for halting disease progression and joint destruction in these patients. Biologic therapies represent more affective and tolerable treatment options than clasical antirheumatic drugs. Currently, two classes of biologic agents are approved for RA: tumor necrosis factor (TNF) inhibitors and interleukin-1 receptor antagonists. In the present study we have investigated whether two polymorphisms in the promoter region of the TNF-alpha gene (-308 G/A and -238 G/A), one of the interleukin-10 gene (IL-10)( -1082 G/A), and one of 5,10-methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR)(-677C/T), as well as the DAS28 index can be used as predictive on the response of RA patients to infliximab (a TNF-alpha inhibitor) treatment. This is an observational prospective/retrospective non-randomized clinical follow-up study on 74 RA patients submitted to infliximab treatment following the standard protocol (0, 2, 4 and 8 weeks and then 1 dose every 8 weeks) for a total of 30 doses. Depending on the clinical response to the drug (the independent variable of the study) patients were considered responders, non-responders and temporarily responders. Data on standard clinical parameters needed for DAS28 calculation were collected, including Globular Sedimentation Speed, number of painful and tumefied joints, general wellness state self-evaluated by the patient and, finally, adverse reactions to the drug observed along treatment period. Genetic polymorphisms were studied by polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphisms analysis, and the significance of difference in allele frequency calculated. To compare the evolution of DAS28 index a lineal multivariate analysis was performed. A statistical relationship between the evolution of RA in response to the infliximab treatment and allele frequency of the different polymorphisms or between infliximab treatment and clinical and laboratory parameters studied could not be found. Moreover, there are controversial elements as to the convenience to use DAS28 as an index to evaluate the response to infliximab treatment

El objetivo principal es establecer un modelo estructural farmacocinético poblacional, en pacientes con cáncer de mama de alto riesgo tratados con ciclofosfamida a dosis altas, para predecir su respuesta individual.Los objetivos Secundarios son explorar mecanismos fisiológicos condicionantes de la autoinducción metabólica de ciclofosfamida. Detección de subpoblaciones de pacientes a través de parámetros de eliminación de ciclofosfamida. Plantear la influencia de covariables, a través del análisis exploratorio, sobre los valores centrales de los parámetros farmacocinéticos de ciclofosfamida.La población de estudio está compuesta por pacientes atendidas en el Hospital Clínico Universitario y en el Hospital Universitario Dr. Peset de Valencia, diagnosticadas de cáncer de mama de alto riesgo, en tratamiento con quimioterapia a altas dosis (ciclofosfamida, carboplatino y tiotepa) y posterior rescate hematológico. La ciclofosfamida es administrada en perfusión IV continua durante 96 horas, sin embargo las concentraciones plasmáticas no alcanzan un estado estacionario debido a que el aclaramiento no es constante. La caracterización del modelo farmacoestadístico poblacional que describe la evolución temporal de ciclofosfamida se realizo mediante el modelo no lineal de efectos mixtos, a través de la regresión no lineal por mínimos cuadrados extendidos, con doble precisión y estimación de primer orden (FO) y estimación de primer orden condicional con interacción (FOCEI), implementada en la aplicación NONMEM.Se utilizó la subrutina $MIX (modelo mixture) que permite caracterizar a priori diferentes subpoblaciones para uno o más parámetros en el modeloEl modelo con inducción enzimática lineal propuesto es capaz de describir adecuadamente la evolución temporal de las concentraciones plasmáticas de ciclofosfamida tras su administración a dosis altas de ciclofosfamida. La característica principal de este modelo es el significado fisiológico de sus parámetros puesto que coinciden con los estimados por otros autores a través de diferentes metodologías. El modelo mecanístico basado en la inducción enzimática, donde la farmacocinética del inductor y el pool de enzima hacen un buen balance para describir la autoinducción de la ciclofosfamida. Es razonable creer que la ciclofosfamida afecte su propia eliminación e incremente la velocidad de producción del enzima y por tanto incrementando la cantidad de enzima incremente su eliminación. Desde el punto de vista farmacogenómico, la existencia de diversos isoenzimas encargados de metabolizar la ciclofosfamida sugiere la posibilidad de identificar diferentes subpoblaciones de pacientes en cuanto a su perfil de autoinducción. Con el modelo 5 se pueden de diferenciar dos subpoblaciones con diferente aclaramiento. Los parámetros farmacocinéticos poblacionales de ciclofosfamida, estimados mediante el modelo no lineal de efectos mixtos, son el volumen de distribución 23.7 L (IC95% 17.8 a 28.2 L), aclaramiento plasmático 1.7 L/h (IC95%: 1.25 a 2.15 L/h) y incremento del aclaramiento plasmático 1.3 L/h (IC95%: 0.93 a 1.67 L/h) que diferencia a las dos subpoblaciones, constante de inducción KENZ 0.0179 h-1 (IC95%: 0.0042 a 0.0316 h-1) y lapendiente SCp 0.0212 mL/µg¿h-1 (IC95%: 0.0075 a 0.0349 mL/µg¿h-1). La proporción de pacientes pertenecientes a subpoblación 1(CL=1.7 L/h) y 2 (CL= 3.0 L/h) es 43.1% (IC95%: 23.1 a 63.1%) y 56.9% (IC95%: 36.9 a 76.9%),respectivamente. El modelo ha sido evaluado mediante la comprobación visual predictiva Visual Predictive Check para cada subpoblación. En el análisis exploratorio de las covariables posiblemente las más importantes son las relacionadas con la función hepática (LDH, relación ALAT/ASAT.) y las interacciones como la administración de antagonistas 5-HT3.El incremento de la dosis produce un efecto no lineal tanto en la exposición como en el Cmax debido a la autoinducción dependiente de la concentración plasmática de ciclofosfamida. / Cyclophosphamide (CP) was used in high dose chemotherapy (HDCT) prior to peripheral blood stem cell transplantation (PBSCT) in high risk breast cancer. CP is known to induce it own metabolism following repeated or continuous administration.The main objective was:To establish the structural population pharmacokinetic model of high dose of CP in high risk breast cancer patients. Patients and Methods: 52 females with high risk breast cancer diagnosis with normal renal and hepatic function were included in the study. Patients received a STAMP-V protocol of HDCT: cyclophosphamide 6 g/m2, thiotepa 500 mg/m2 and carboplatin 800 mg/m2 administered in intravenous continuous infusion of 96 hours and PBSCT was performed three days later. Blood samples were drawn at the 6, 24, 48, 72, 96, 97 and 99 hours since begin continuous infusion, plasma was separated and stored at -20ºC until assayed for CP using a validated high performance liquid chromatography procedure. CP plasma concentration-time profiles were described by a one-compartment model with zero-order absorption and first-order inducible elimination. CP autoinduction was modeled with an enzyme turn-over model, under the assumption that CP increases the production rate of enzyme in a linear fashion, where SCp is the slope of linear function for induction by CP. Kenz is the rate constant for first-order degradation (time-1) of the pool. To normalize the enzyme concentration to unity at baseline, the zero-order production rate of enzyme was set to Kenz (amount·time-1).Data analysis was performed using the nonlinear mixed effects modeling program (NONMEM) and the subroutine $MIX. Population and individual estimations for Cl, V, SCp, Kenz, were obtained using a general nonlinear population pharmacokinetic with first order processes and differential equations (AVDAN 6 TOL=5). Interindividual and residual variability was assumed to be proportional error model. The analysis of population pharmacokinetic behavior of CP administered in high dose can be used such a prior information in order to get an individualized dose by bayesian forecasting.Two subpopulations were identified, a fraction 43.1 % of the patient has CL equal 1.7 L/h , and that the remaining fraction 56.9% has CL 3 L/h.

En la actualidad, se comercializa una amplia variedad de productos para laalimentación infantil. La calidad de las materias primas, los tratamientostecnológicos y las condiciones de almacenamiento pueden modificar el valornutritivo de su fracción lipídica e influir en su seguridad por la formación decompuestos tóxicos.El conocimiento de la calidad de la fracción lipídica de los alimentos infantilespermite evaluar los efectos que el procesado y/o almacenamiento ejercen sobre ellay optimizar los procesos tecnológicos utilizados en su elaboración.El objeto del estudio es conocer la evolución, a lo largo de su vida útil, de lafracción lipídica en papillas de cereales con leche (PCL) listas para el consumodestinadas a la alimentación infantil.Los parámetros analizados son: perfil lipídico, TBARS, compuestos volátiles,esteroles y sus productos de oxidación (SOP). Para evaluar la influencia del tiempoy de la temperatura de almacenamiento en la estabilidad de la fracción lipídica delas muestras, se aplica un diseño factorial completo con 3 factores: a) Tiempo dealmacenamiento (0, 1, 2, 4, 5, 7, 8 y 9 meses), b) Temperatura dealmacenamiento (25, 30 y 37 ºC) y c) Tipo de muestra (A- con miel y B- confrutas).Las conclusiones más relevantes son:- La determinación de TBARS es poco útil para monitorizar el estado de oxidación,ya que, debido a las reacciones entre los distintos componentes de las papillas, seproducen durante el almacenamiento aumentos y disminuciones delmalondialdehido.- El método por SPME-CG, puesto a punto y validado para la determinación decompuestos volátiles, es útil para evaluar la estabilidad de la fracción lipídica defórmulas para lactantes (FL) y PCL.- A lo largo del almacenamiento disminuyen los contenidos de pentanal, hexanal yheptanal de las PCL, mientras que el de pentano aumenta; en ambos casos influyela temperatura. Se propone un modelo predictivo útil para estimar el tiempo dealmacenamiento de las PCL a partir de los contenidos de pentanal y heptanal.- El aumento del contenido de pentano durante el almacenamiento indica que ladegradación lipídica iniciada en el procesado continúa. Su determinación puedeusarse para evaluar la oxidación de las PCL.- El hexanal es el compuesto volátil mayoritario de PCL y FL. El mayor contenido dehexanal de las FL puede atribuirse a su menor actividad del agua y su mayorcontenido de grasa (25%).- Las PCL tienen un contenido de esteroles de 6.4%, de los cuales el 5.1% sonfitosteroles. El β-sitosterol es el mayoritario (3.4%), seguido del campesterol(1.2%); estigmasterol y brassicasterol son menos abundantes.- Se han detectado y cuantificado un total de 22 compuestos distintos procedentesde la oxidación de esteroles, siendo mayoritario el 7-cetositosterol. Elalmacenamiento no influye en los contenidos de esteroles oxidados, a excepción delepoxicampesterol y el sitostanotriol.- Las diferencias obtenidas entre los SOP, con respecto a los esteroles deprocedencia, indican el distinto grado de oxidación de la grasa de la leche y losaceites vegetales; estas diferencias pueden atribuirse a las distintas condiciones aque han sido sometidos durante su procesado.Como conclusión general del estudio realizado se señala que durante la vida útil delas PCL, el grado de oxidación de los ácidos grasos y de los esteroles es bajo. Sinembargo, los potenciales efectos negativos para la salud de los productos de oxidación lipídica hacen necesario su control. Es de destacar la gran influencia queejercen la calidad de las materias primas y el proceso de elaboración sobre elestado de la grasa del producto final, pues sus efectos son superiores a los delalmacenamiento. / The quality of raw materials, technological treatments and storage conditions ofproducts for infant feeding can modify the nutritional value of their lipid fractionand affect their safety due to formation of toxic compounds.The objective is to know the evolution of the lipid fraction in cereals and milk-basedready-to-eat foodstuffs for infant feeding (MCF) throughout their shelf-life.The parameters analysed are: fatty acid profile, TBARS, volatile compounds, sterolsand their oxidation products (SOP). In order to evaluate the influence of storagetime and temperature, a three-factor design is applied: Storage time (0-9 months),storage temperature (25, 30 and 37 ºC) and kind of sample (honey and fruits).The most relevant conclusions are:- TBARS determination is not useful for monitoring the oxidation stage, due toreactions between the different components of the MCF, increases and decreases onMDA contents are produced.- The SPME-GC method, developed and optimized, for the determination of volatilecompounds, is useful to evaluate the stability of the lipid fraction.- Pentanal, hexanal and heptanal contents decrease through storage, whereaspentane content increases. A predictive model useful for estimating the storagetime of the MCF from pentanal and heptanal contents is proposed.- The increase in pentane content throughout storage points out that lipid oxidationinitiated during processing continues. Its determination can be used in order toevaluate the oxidation in MCF.- The sterol content of MCF is 6.4%, from which a 5.1% are phytosterols. β-Sitosterol is the most representative, followed by campesterol, stigmasterol andbrassicasterol.- A total of 22 different SOP have been identified and quantified, being the 7-ketositosterol the most abundant.- The differences obtained between SOP, with respect to the original sterols,indicate the different oxidation level of milk and vegetable oils; these differencesmay be attributed to the quality of the raw materials and different conditionsapplied during processing.As a final conclusion it can be stated that during the shelf-life of MCF, fatty acidsand sterols show a low oxidation pattern. However, the potential negative healtheffects of the lipid oxidation products confirm the need of their control.

La patogénesis de la fasciolosis depende de la carga parasitaria y del tamaño de los trematodos adultos. En zonas de hiperendemia, las intensidades individuales de parasitación humana pueden alcanzar niveles muy altos, estando la mayoría de los individuos parasitados en la fase de cronicidad avanzada. En este estudio se ha utilizado el modelo experimental de fasciolosis en rata Wistar por ser un modelo animal útil que mimetiza la fasciolosis crónica avanzada en humanos. Se ha infectado un total de 169 ratas con 20 metacercarias/rata vía oral, llevándose a cabo los siguientes análisis: A) Estudio la influencia de la intensidad individual de infección por rata (entendiendo la intensidad de infección como el número de trematodos por hospedador en el canal biliar principal) sobre: a) el desarrollo del adulto; b) el tiempo comprendido entre la ingestión de metacercarias y la presencia de huevos en heces (el periodo prepatente, pp) y c) el número de huevos por gramo de heces y por adulto (hgh/adulto). B) Estudio la influencia de la presencia de litiasis sobre el desarrollo del adulto. C) Estudio la influencia del género del hospedador definitivo experimental sobre la producción de huevos (hgh). Se ha calculado las trayectorias ontogenéticas de las siguientes medidas biométricas: área corporal (AC), perímetro corporal (P), anchura corporal (AnC) y longitud corporal (LoC). En los grupos analizados las trayectorias ontogenéticas de las medidas siguen un modelo logístico [y = ym / {1 + z0 exp (-kt)}, donde ym es el valor máximo al cual tiende la variable biométrica y; z0 y k = parámetros de las trayectorias; t= tiempo]. Los resultados obtenidos muestran que cuando el número de adultos aumenta, el valor de ym de estas medidas (AC, P, LoC y AnC) disminuye. El “crowding effect” se manifiesta cuando las medidas corporales del Trematodo adulto se aproximan a los valores máximos alcanzados en la fase de cronicidad avanzada. En las últimas fases de desarrollo, las tasas de crecimiento de las medidas corporales son más altas cuando menor es la carga parasitaria. El pp y los hgh/adulto se muestran dependientes del nivel de infección, disminuyendo cuando la carga parasitaria aumenta. Esto significa que el número de huevos por gramo de heces tiende a desestimar la carga parasitaria. En todas las medidas biométricas analizadas, los valores del tiempo en el punto de inflexión en el modelo logístico son similares a los datos empíricos sobre el pp, es decir, el momento donde empieza la emisión de huevos. Los resultados muestran que los adultos de F. hepatica alcanzan un menor desarrollo corporal cuando existe la presencia de litiasis concomitante en los conductos hepáticos. El estudio de la influencia del género del hospedador definitivo experimental revela que, en la fasciolosis crónica avanzada, en hembras Wistar (con una intensidad individual de infección de Trematodos adultos por rata similar a los machos) existe una mayor producción de hgh que en machos. Los resultados obtenidos muestran que la intensidad de infección, la litiasis y el género del hospedador definitivo son factores a tener en consideración cuando estudiamos el desarrollo de los adultos de F. hepatica en el modelo Wistar en la fase crónica avanzada. La consideración de estos factores es de interés tanto en estudios epidemiológicos, como en estudios experimentales in vivo sobre la acción de fármacos antihelmínticos y vacunas, patología, inmunología y resistencia. / Fascioliasis pathogenesis depends on fluke burden and size. In human hyperendemic zones, individual infection intensities can reach very high levels being the majority of infected subjects in the advanced chronic phase. Wistar rat model has been used due to the fact it offers a useful approach for pathological research in the advanced chronic period in humans. 169 rats have been orally infected with 20 metacercariae/rat, developing the following tests: (i) influence of infection intensity per rat on fluke development (adult’s development, time between metacarcariae intake and presence of eggs in faeces, and number of eggs per gramme of faeces and adult); (ii) influence of lytiasis on the adult’s development; and (iii) influence of the experimental definitive host genus on egg production. Ontogenetic trajectories of fluke body measurements (AC, P, AnC and LoC), followed a logistic model. Results showed that (i) when burden increases, maximum values of fluke body measurements decrease; (ii) crowding effect is apparent when fluke measurements approximate their maximums in the advanced chronic stage; (iii) pre-patent period (pp) and egg production (hgh) decrease when fluke burden increases, meaning that measurements of eggs per gramme of faeces tend to underestimate the fluke burden; (iv) adults of F. hepatica reach a lower body development when concomitant lytiasis is observed in liver ducts; (v) when fasciolasis chronic stage, egg production is higher in Wistar rat females. Thus, intensity of infection, lytiasis and definitive host genus are factors to take into consideraction when studying the development of the adults of F. hepatica in Wistar model on an advanced fasciolasis chronic stage. This quantification may be of great interest in both, epidemiological studies and experimental research on the in vivo actions of different anthelminthic drugs and vaccines, pathology, immunology and resistance studies.

En los últimos años, la industria alimentaria ha incrementado su interés en el desarrollo de alimentos funcionales, siendo el enriquecimiento de bebidas a base de zumo de frutas con vitaminas y minerales uno de los métodos empleados. Esta estrategia persigue mejorar el estado nutricional de la población, o de grupos específicos de población y/o corregir posibles deficiencias en la ingesta diaria de vitaminas o minerales, debidas a cambios en los hábitos alimentarios. No obstante, se precisa un mayor conocimiento sobre las interacciones que puedan producirse entre los compuestos bioactivos de las bebidas a base de zumo de frutas y los minerales adicionados, o viceversa. Para ello, se estudia la influencia del almacenamiento en refrigeración (2-4 ºC) y digestión gastrointestinal simulada en las muestras objeto de estudio (bebidas a base de zumo de frutas (uva-naranja-melocotón) con o sin leche y/o minerales (Fe y Zn)) sobre la capacidad antioxidante total (métodos ORAC y TEAC), polifenoles solubles totales y contenido de ácido ascórbico. Se observa que las propiedades antioxidantes de las bebidas no disminuyen durante su período de vida útil (135 días) tras el almacenamiento en refrigeración así como después de un proceso de digestión gastrointestinal in vitro. Destacar que la presencia de hierro y/o cinc y/o leche, disminuye el contenido de polifenoles solubles totales, observando, sin embargo, un efecto positivo del cinc sobre los flavan-3-oles tras la digestión gastrointestinal. Asimismo, se evalúan los efectos biológicos, en cultivos celulares, de las fracciones bioaccesibles de las bebidas objeto de estudio a través de la actividad citoprotectora frente a estrés oxidativo inducido y mediante la actividad antiproliferativa en células tumorales de cáncer de colon (Caco-2 y HT-29). Las bebidas a base de zumo de frutas que contienen cinc y cinc-leche son aquellas con mayores efectos beneficiosos, ya que ejercen un efecto citoprotector manteniendo la integridad mitocondrial y metabólica de las células, inducen la enzima GSH-Rd, ejercen una respuesta adaptativa del ciclo celular y previenen de la apoptosis caspasa-dependiente. Además, inhiben la proliferación de las células de cáncer de colon a través de un efecto citostático, debido al bloqueo en la progresión del ciclo celular en la fase S, acompañado de un descenso en la expresión de las ciclinas B1 y D1. Por otra parte, se determina la influencia del consumo de las bebidas objeto de estudio sobre el estatus antioxidante de mujeres sanas en edad fértil. Tras el estudio de intervención, no se mejora de la capacidad antioxidante total sérica por el bajo estrés oxidativo endógeno y la ausencia de cambios drásticos en los hábitos alimentarios de la población de estudio, aunque se induce la actividad de la enzima superóxido dismutasa , la cual podría ejercer un efecto protector en forma de "tolerancia" frente a un daño oxidativo posterior. Finalmente, se determina la bioaccesibilidad de hierro y cinc tras el proceso de digestión gastrointestinal simulada, junto a la biodisponibilidad de hierro en células Caco-2 utilizando la síntesis de ferritina como criterio estimador de la misma. La interacción negativa del cinc sobre la bioaccesibilidad del hierro es contrarrestada en presencia de leche, posiblemente debido a los caseinofosfopéptidos formados durante el proceso de digestión, mientras que la síntesis de ferritina es 3 veces superior en las bebidas que contienen leche y hierro, poniendo de manifiesto que la presencia de caseinofosfopéptidos mejora la captación celular de hierro. / In last years food industry has focused its interest in the development of functional foods, being fortification of fruit beverages with vitamins and minerals one of the methods employed. However, more knowledge about interactions between bioactive compounds of fruit beverages and minerals is needed. To do this task, it was evaluated total antioxidant capacity (ORAC and TEAC methods), total soluble phenolic compounds and ascorbic acid content as influenced by cold storage (2-4 ºC) and an in vitro simulated gastrointestinal digestion in fruit beverages supplemented with/without iron and/or zinc and/or milk. Results showed that antioxidant properties did not diminish after cold storage and the digestion process. Likewise, biological effects such as cytoprotection against H2O2-induced oxidative stress and antiproliferative activity were determined using the bioaccesible fraction of fruit beverages upon cell cultures (Caco-2 and HT-29 cells). Fruit beverages with zinc and zinc-milk conferred the biggest effects against oxidative stress maintaining the functionality of cells and showing an antiproliferative activity due to a cytostatic mode of action. On the other hand, it was evaluated the impact of fruit beverage consumption upon antioxidant status in healthy woman of fertile age. After the intervention study, serum total antioxidant capacity was not improved but increase erythrocyte superoxide dismutase activity what could imply a protective effect in the form of “tolerance” to a subsequent larger challenge. Finally, iron and zinc bioaccessibility together with iron bioavailability determined by means ferritin synthesis in Caco-2 cells was assessed. The negative interaction of zinc on iron bioaccessibility was overcome in the presence of milk probably due to caseinophosphopeptides formed during the digestion process, while ferritin synthesis was 3-fold higher in fruit beverages with iron and milk, what implies that possibly caseinophosphopeptides could improve iron cellular uptake.

Son muchos los estudios que se han realizado para determinar la absorción intestinal de fármacos y cada grupo de trabajo utiliza su propia técnica experimental adaptada a sus condiciones de laboratorio y para las que se ha establecido previamente su capacidad predictiva sobre el resultado final in vivo en humanos. En el modelado de procesos cinéticos, como la absorción, para establecer correlaciones estructura actividad es frecuente combinar y comparar datos obtenidos en la misma especie animal o cultivos celulares en diferentes laboratorios a fin de incrementar la significación del modelo y su ámbito de aplicación a mayor número de moléculas. No obstante es frecuente observar disparidad en los valores obtenidos para un mismo fármaco en distintos laboratorios a pesar de utilizar técnicas experimentales similares. Este trabajo es parte de un proyecto en el que se pretende caracterizar la variabilidad asociada a los experimentos de perfusión in situ en rata y modelos de cálculo de permeabilidad en cultivos celulares en distintos laboratorios y estimar cuales son los factores principales responsables de la misma y de que modo pueden estandarizarse y/o ponderarse los distintos resultados si se dispone de información sobre el protocolo experimental. Con este fin en este trabajo se ha caracterizado la permeabilidad intestinal de dos fármacos modelo: Metoprolol y Verapamilo en cinco razas de rata utilizando en ambas machos y hembras y en 4 líneas celulares utilizando distintos pases, es decir monocapas celulares formadas en un rango de generaciones entre 10 y 80. Se seleccionó Metoprolol porque es el patrón utilizado para clasificar los compuestos en alta o baja permeabilidad y Verapamilo como conocido sustrato de glicoproteina-P. El objetivo principal es caracterizar la variabilidad asociada a los experimentos de perfusión in situ en rata y modelos de cálculo de permeabilidad en cultivos celulares en distintos laboratorios y estimando cuales son los factores principales responsables de dicha variabilidad y de qué modo pueden estandarizarse y/o ponderarse los distintos resultados si se dispone de información sobre el protocolo experimental. / Absorption of drugs from the gastrointestinal (GI) tract is very complex and is influenced by many factors, which fall into three classes. The first class of factors comprises physicochemical properties of drugs, including pKa, solubility, stability, diffusivity, and lipophilicity. The second class comprises physiological factors such as GI pH, gastric emptying, intestinal transit, gut wall metabolism, and active transport including drug efflux. Finally, the third class includes the formulation factors such as surface area, drug particle size and crystal form, and type of dosage form. In any animal model to predict human absorption it is important to take into account the factors that can add variability to the results in order to standardize the protocols and to obtain more predictive and accurate parameters. Nowadays, mathematical analysis of kinetics and dynamics of these processes in the GI tract try to establish a correlation between clinical and pre-clinical data. These studies use data obtained in different laboratories and different breeds. However, it is very common to observe statistical differences in permeability results obtained in different laboratories or different breed using the same drug. This work is part of a bigger project, which tries to characterize the variability included in experimental techniques, like in situ closed loop technique in rats, due to breed and gender in rats. Two standard drugs, metoprolol and verapamil, were selected to determine intestinal permeability in five breed of rats and in both sexes. metoprolol was selected because it is the standard reference compound (for high-low permability classification) and the other one, verapamil was chosen as a known P-glycoprotein substrate.

INTRODUCCIÓN: El cáncer de mama adquiere cada vez mayor relevancia por ser la enfermedad maligna que afecta a mujeres más común del mundo desarrollado. Aunque la mortalidad por cáncer de mama ha descendido, en los últimos años la incidencia de cáncer de mama se ha mantenido estancada. Se vuelve, por tanto, fundamental realizar esfuerzos encaminados a la prevención de esta enfermedad, siendo necesario para ello conocer el perfil de la paciente diagnosticada de cáncer de mama en la actualidad para valorar los posibles cambios producidos en este perfil en los últimos tiempos. Este estudio pretende obtener el perfil actual de las pacientes diagnosticadas de cáncer de mama en el momento de la detección, en el que se ponga de manifiesto la relación, si la hubiera, entre una serie de factores a estudiar y el desarrollo de cáncer de mama, con el fin de poder diseñar un programa de prevención de cáncer de mama. Se pretende, también, comprobar si el método definido por Gail es aplicable y predictivo en la población de mujeres valencianas, y por último, conocer la influencia que sobre la supervivencia global de los pacientes con cáncer de mama tienen ciertas variables de estudio. PACIENTES Y MÉTODOS: Se realizó un estudio retrospectivo mediante revisión de la información obtenida por el facultativo en la primera visita a casos incidentes de cáncer de mama, que habían sido atendidos en el Hospital Clínic Universitari de Valencia y en la Fundación Instituto Valenciano de Oncología durante el periodo comprendido entre enero de 2000 y diciembre de 2001. Se realizó un estudio de casos y controles, un análisis multivariante y, por último, se evaluó la supervivencia global de los pacientes con cáncer de mama, así como la supervivencia obtenida en función de determinados factores. Además, se realizó un estudio sobre la aplicación del método de Gail de cálculo de riesgo en la población de estudio. RESULTADOS: Los resultados obtenidos demuestran que las patologías benignas de mama, particularmente las lesiones calificadas como proliferativas, incrementan el riesgo de desarrollar cáncer de mama. Se corroboró la importancia del autoexamen mamario en la mujer. Se obtuvo una disminución del riesgo para aquellas mujeres con menos un hijo. Y la menopausia>55 años aumentó significativamente el riesgo. El método de Gail sólo habría detectado al 41% de las pacientes que han desarrollado un cáncer de mama. CONCLUSIONES: Sería recomendable incorporar la variable patología mamaria previa en los criterios de selección de mujeres para el cribado del cáncer de mama. Se confirma la paridad como un importante factor protector El método de Gail no parece adaptarse a la población valenciana. En nuestra población sería útil para mujeres de edades avanzadas con antecedentes de cáncer de mama. / INTRODUCTION: Breast cancer is the most common malignant disease affecting women in the developed world. It seems essential to make efforts at the prevention of breast cancer, being necessary to know the profile of the patient diagnosed with breast cancer nowadays to assess possible changes. This study seeks to obtain a current profile of patients diagnosed with breast cancer at the time of detection, to highlight the relationship between a number of factors and breast cancer, in order to improve the prevention programs for breast cancer. It is to check whether the method defined by Gail is applicable and predictive in Valencian women and know the influence on overall survival of certain variables. PATIENTS AND METHODS: A retrospective method was carried out by a review of information obtained at the first sight of incident cases treated at the University Hospital of Valencia and the Valencian Institute of Oncology Foundation between January 2000 and December 2001. It realized a case-control study, a multivariate analysis and assessed the overall survival of patients, the survival obtained in certain factors. Besides, it examined the application of the method of Gail risk calculation. RESULTS: Breast benign pathologies, particularly those classified as proliferative lesions, increase the risk of developing breast cancer. It confirmed the importance of breast self-examination in women. It was obtained a reduction of risk for women with at least one child and menopause > 55 years old significantly increased the risk. I would only have detected 41% of patients who have developed breast cancer using the Gail method. CONCLUSIONS: It would be advisable to incorporate the variable previous breast disease screening criteria for breast cancer. Parity is confirmed as an important protective factor. The method of Gail does not seem to fit in the population of Valencia. It would be useful in our population for older women with a history of breast cancer.

INTRODUCCIÓN Los anestésicos locales (AL) son empleados en las técnicas de anestesia locoregional por su capacidad de bloquear la conducción de impulsos nerviosos, de modo que la función sensitiva o motora de las fibras nerviosas queda inhibida transitoriamente. Estas técnicas locoregionales pueden utilizarse como técnica única o en combinación con anestesia general. El bloqueo combinado del plexo lumbar (PL) y del nervio ciático (NC) para cirugía ortotraumática de miembros inferiores es la modalidad de elección frente a la anestesia espinal y general. Existen pocos estudios referentes a la administración de mezclas de AL de acción prolongada. Para el adecuado desarrollo de la técnica anestésica debe garantizarse, la compatibilidad fisico-química de la mezcla de bupivacaína con ropivacaína. Además, la eficacia y seguridad del procedimiento anestésico depende del comportamiento cinético de la solución anestésica administrada. OBJETIVOS La hipótesis que se pretende demostrar, es que mediante la administración de bupivacaína y ropivacaína en PL y NC, las concentraciones plasmáticas alcanzadas no son tóxicas, y que dicha técnica consigue un intraoperatorio y un postoperatorio satisfactorio. MÉTODOS El presente estudio es observacional, de una única cohorte, en el contexto de la rutina clínica asistencial, de pacientes sometidos a una técnica anestésica en PL y NC, e intervenidos de prótesis de rodilla o de cadera La técnica anestésica empleada es la descrita por Winnie para el bloqueo del PL y por Labat para el bloqueo del NC. Se administra una dosis única, previamente a la intervención quirúrgica, de ropivacaina 7,5 mg/ml y bupivacaína 5 mg/ml con adrenalina 0,005 mg/ml en PL y en NC. La técnica de valoración utilizada ha sido la cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). RESULTADOS El tiempo de retención para la ropivacaína fue de 2.49min. y para la bupivacaína de 4.06min. Se incluyeron 32 pacientes (60% mujeres). El estudio ha supuesto la monitorización de 88 concentraciones plasmáticas. El modelo farmacocinético base ha sido un modelo monocompartimental con cinética de incorporación de orden 1 para ropivacaína y bicompartimental con cinética de incorporación de orden 1 para bupivacaína, y eliminación de orden 1 para los dos fármacos. El modelo farmacocinético con covariables seleccionado ha sido un modelo en el que los parámetros farmacocinéticos de la ropivacaína, no dependen de ninguna de las covariables probadas, mientras que el Vd de la bupivacaína depende de la variable peso, y la Ka depende de la covariable edad. Los parámetros farmacocinéticos obtenidos, para la ropivacaína son Vd 63,2L y Cl 3,61L/h. Para la bupivacaína el Vd es de 417,2L, y Cl de 4,42 L/h. La constante de transferencia del plexo al torrente sanguíneo es de Ka 2,21 h-1 para la ropivacaína y de Ka 1,36 h-1 para la bupivacaína. Los dos lugares de administración de los AL, se comportan cinéticamente como un único compartimento El modelo farmacodinámico, ha sido un modelo en el que la probabilidad de dolor depende del efecto basal y de la cantidad de bupivacaína de manera lineal. En el análisis de supervivencia global, a las 6 horas el 93,8% de los pacientes no requieren de analgesia tras la intervención quirúrgica. Cuando realizamos un análisis de supervivencia, estratificado por sexo, se observa que a las 24h el 66,7% de las mujeres y el 92,3% de los hombres no requieren analgesia (p=0,096). CONCLUSIONES La mezcla de los dos anestésicos locales se considera una opción adecuada para realizar el bloqueo en pacientes sometidos a cirugías ortotraumáticas, debido a que se combina la mayor rapidez del inicio del bloqueo inducido por la ropivacaína y la analgesia más duradera provocada por la bupivacaína. / Background Lumbar-plexus (LP) and sciatic-nerve (SN) blocks are commonly combined for lower extremity anesthesia using local anesthetics (LA). Limited information is available about the pharmacokinetics of this practice and about the administration of mixtures of long-acting LA. We analyzed plasma ropivacaine and bupivacaine concentrations after single-injection LP blocks and SN blocks. The hypothesis that seeks to demonstrate is that the plasma concentrations achieved are not toxic, and that the technique achieves a satisfactory intraoperative and postoperative course. Methods A prospective cohort study was performed in patients undergoing an anesthetic technique in LP and SN, and treated for knee or hip replacement. A single dose prior to surgery, of ropivacaine 7.5 mg/ml and bupivacaine 5 mg/ml with adrenaline 0.005 mg/ml in LP and SN was administered. Results 32 patients (60% women) were enrolled. The base pharmacokinetic model was one compartment model for ropivacaine and two compartment model for bupivacaine, with first order elimination for both drugs. In the covariate selection, pharmacokinetic parameters of ropivacaine, not dependent on any of the covariates tested, while the Vd of bupivacaine depends on the weight, and the Ka depends on the age . The pharmacokinetic parameters for ropivacaine are Vd 63.2L and CL3.61 L/h. For bupivacaine, Vd is 417.2L, and Cl of 4.42 L/h. The transfer constant plexus into the bloodstream is Ka 2.21h-1 for ropivacaine and Ka 1.36h-1 for bupivacaine. The two sites of administration of the AL, kinetically behave as a single compartment. The pharmacodynamic model has been a model in which the probability of pain depends on the baseline effect and the amount of bupivacaine. In the analysis of overall survival at 6 hours, 93.8% of patients required no analgesia after surgery. When we conducted a survival analysis, stratified by gender shows that at 24h 66.7% of women and 92.3% of men do not require analgesia (p = 0.096). Conclusion The mixture of the two LA is considered an appropriate option for LP and SN blocks in patients undergoing orthopaedic surgery, because it combines the faster onset of block induced by ropivacaine and more prolonged analgesia produced by bupivacaine.