Orientador: Francisco Eduardo Martinez / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T19:06:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Almeida-Francia_CamilaContinDinizde_D.pdf: 36206900 bytes, checksum: d44823fb5bde1faf04aa09c33b7f7a87 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: O alcoolismo é o terceiro problema mais sério de Saúde Pública Mundial. A maioria é constituída de homens, entretanto, o índice de mulheres viciadas em bebidas alcoólicas vem aumentando. A tuba uterina promove o meio necessário para a maturação dos gametas femininos e masculinos (capacitação), a fertilização e o desenvolvimento inicial do embrião. As variedades UChA e UChB constituem modelos para os trabalhos relacionados aos aspectos genéticos, bioquímicos, fisiológicos, nutricionais e farmacológicos dos efeitos do álcool que são importantes fatores do alcoolismo humano. Dessa forma, o presente trabalho analisou o ciclo estral e as células epiteliais da tuba uterina da linhagem de ratos UChA e UChB, bebedores voluntários de etanol, divididos em três grupos: 1°) UChA de consumo voluntário de 6,05 glK.gIdia de etanol a 10%; 2°) UChB de consumo voluntário de 8,18 glK.gIdia de etanol a 100/Ó e 3j ratas Wistar (controle). Durante 20 dias seguidos procedeu-se à análise do ciclo estral através da coleta de esftegaços vaginais. Fêmeas em estro foram selecionadas para coleta e processamento dos órgãos, empregando-se técnicas microscópicas e morfométricas. Os grupos UChA e UChB apresentaram ciclo estral irregular. A região intramural (In) da tuba uterina dos ratos tratados apresentou vacúolos no citoplasma e cisternas dilatadas, núcleos com formatos irregulares e gotas lipídicas. A região do istmo (I) apresentou alteração de elétron-densidade dos microvilos e distribuição irregular dos cHios, além das características citadas na região In. A região da ampola (A) apresentou aumento de corpos lamelares e gotas lipídicas no citoplasma e na luz do epitélio. Da mesma forma, as regiões de infundíbulo (Inf) e fimbrias (F) dos ratos tratados apresentaram vacúolos e lacunas com conteúdo ou não em seu interior, mitocôndrias não preservadas, corpos lamelares, gotas lipídicas e cisternas dilatadas. Foram observados núcleos com formas irregulares e núcleos e conteúdo citoplasmático na luz do epitélio. A morfologia dos cHios apresentou-se alterada. O processo degenerativo adquiriu proporções crescentes do grupo UChA para o UChB. Os grupos tratados apresentaram menores áreas citoplasmáticas e nucleares comparados ao controle. Conclui-se que o etanol altera o ciclo estral e a estrutura das células epiteliais da tuba uterina. Devido às alterações, os processos de capacitação e fertilização estão comprometidos. Infere-se que devido à grande quantidade de lisosomos e formação de vacúolos, o álcool induza inicialmente morte celular diferente da apoptose / Abstract: Alcoholism is the third most serious problem of World Public Health. Although the majority consists of men, the index of women addicted to alcoholic beverages is increasing. The uterine tube promotes the necessary means for maturation of female and male gametes (capacitation), the fertilization and the initial development of the embI)'o. The varieties VChA and VChB constitute rare models for works related to genetic, biochemical, physiological, nutritional, and pharmacological effects of alcohol that are important factors in human alcoholism. Thus the present work analyzed the estrous cycle and the epithelial cells ofthe uterine tube (intramural- In, isthmus - I, ampulla - A, injUndibulum - Infandfimbrias - F) ofthe rat lineage VChA and VChB, voluntary drinkers of alcohol, divided into three groups: 1st) VChA, voluntary consumption of 6.05 gIKglday of ethanollO%; 2nd) VChB, voluntary consumption of8.18 gIKglday of ethanollO% and 3rd) Wistar rats (control). For 20 following days it was preceded to the ana1ysis ofthe estrous cycle through the collection of vaginal smears. Females in estrus were selected for collection and processing of organs, employing microscopic and morphometric techniques. The VChA and VChB rats show irregular estrous cycle. The In region of treated rats presented cytoplasmic vacuoles and dilated cisterna, nuclei with irregular forms and lipid droplets. The I region showed altered electrondensity and irregular distribution ofthe cilia, and the characteristics mentioned in the In region. The A region showed increase of lamellar bodies and lipid droplets in the cytoplasm and lumen of the epithelium. The Inf and F of treated rats showed vacuoles and lacunas with content or not in their interiors, non-preserved mitochondria, lamellar bodies, lipid droplets and dilated cisterna. There were observed nuclei with irregular forms and nuclei and cytoplasmic content in the lumen of the epithelium. Morphology of the cilia was observed to be altered. The degenera tive process acquired growing proportions ftom the VChA group to the VChB one. Treated groups presented smaller cytoplasmic and nuclear areas compared to the controI. It's concluded that ethanol alters the estrous cyc1e and the epithelial cell structure of uterine tube. Due the alterations, the fertilization and the capacitation process of ethanol-drinking rats are damaged. Yet it is inferred that due to the great quantity of lysosomes and formation of vacuoles, alcohol initially leads to cell death different ftom the apoptosis / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

As Distrofias Musculares Progressivas (DMPs) constituem um grupo de doenças genéticas caracterizadas por uma degeneração progressiva e irreversível da musculatura esquelética. Dentre as diferentes abordagens terapêuticas propostas para esse grupo de doenças, a terapia celular com células-tronco mesenquimais (CTMs) tem sido um foco importante de pesquisas. Muitos tipos de CTMs já foram descritas com o intuito de reconhecer qual o tipo ideal a ser usado em uma possível terapia celular para DMPs. Neste trabalho comparamos o potencial terapêutico de células-tronco de diferentes fontes obtidas de um mesmo doador. Escolhemos as células de pericito (CP) como ferramenta de estudo, uma vez que elas estão presentes em todos os tecidos irrigados por vasculatura. Isolamos pericitos de 4 tecidos da mesma doadora (endométrio, trompa, tecido adiposo e músculo). Em seguida, injetamos 1 milhão dessas células intraperitonialmente em camundongos Utrntm1KedDmdmdx/J (duplo knockout para o gene da distrofina e utrofina) semanalmente, por 8 semanas, e avaliamos a clínica e a sobrevida desses animais. Observamos que nas condições experimentais desse estudo, o potencial miogênico dessas células é insuficiente para ser utilizado como terapia regenerativa. Entretanto, apesar dos testes padronizados não detectarem nenhuma melhora clínica aparente, os animais tratado com pericitos de gordura mostraram uma curva de sobrevivência significativamente maior do que os controles não tratados. Como não houve diferenciação miogênica, esses resultados sugerem que os efeitos benéficos ocorreram através de liberação de fatores tróficos e imunoreguladores (efeito parácrino). É digno de nota que apesar das células serem todas derivadas de pericito e de uma mesma doadora o aumento de sobrevida só foi observado com células do tecido adiposo. Esses resultados indicam que o potencial terapêutico de CP difere de acordo com sua origem e que essa diferença não depende do genoma do doador. Esses resultados constituem um passo inicial, porém, valioso na compreensão do potencial de utilização dessas células em terapias / Progressive Muscular Disorders (PMDs) are a group of heterogeneous genetic diseases characterized by an irreversible degeneration of the muscle tissue due to mutation or absence of a protein. Among the many different available therapeutic approaches to treat PMDs, cell therapy using mesenchymal stem cells (MSCs) are one of the most studied ones. There are many types of MCSs described to date and the need to identify the best one suited to treat PMDs has yet to be addressed. In this thesis, we compared the therapeutic potential of different types of stem cells derived from the same donor. First, we chose pericytes as a tool of comparison, as this cell is unequivocally present in all vascularized tissues. We isolated pericytes of 4 different tissues from the same donor (endometrium, fallopian tubes, adipose tissue and muscle). We injected 1 million of these cells intraperitonially in Utrntm1KedDmdmdx/J mice (knockout for the dystrophin and utrophin gene) weekly for 8 weeks evaluating the clinical features and survival curve of these mice. We observed that, in the experimental conditions of this study, the myogenic potential of these cells is insufficient to be harnessed as therapy for regenerative purposes. However, despite the fact that the standardized tests did not detect any apparent clinical improvement, mice treated with pericytes derived from adipose tissue had a survival curve greater than control treated mice. As we could not observe any myogenic differentiation or cell engraftment, this results suggests that the beneficial effect observed could be due to the releasing of trophic and immune modulator factors (paracrine effect). It is noteworthy that despite all cells being derived from the same donor, the increase in life expectancy was only observed in pericytes derived from the adipose tissue. These results indicate that the therapeutic potential of pericytes differs according to their tissue of origin and the difference is not due to genetic differences. This is still preliminary data but it is valuable in understanding the therapeutic potential of these cells