Orientador: Nereu Carlos Prestes / Banca: Maria Denise Lopes / Banca: Fabiana Ferreira de Souza / Banca: Luiz Henrique de Araújo Machado / Banca: Maria Isabel de Mello Martins / Resumo: O feto prematuro não sobrevive à vida extra-uterina devido a imaturidade de órgãos vitais como os pulmões e rins. O objetivo desse trabalho foi avaliar a maturidade renal através da identificação de proteínas de baixa massa molecular; pulmonar através da citologia com azul de Nilo (0,1%), teste de Clements modificado e densidade óptica dos fluidos; alfa-fetoproteína através da eletroforese em SDS-PAGE (12%) e concentração de cortisol nos líquidos fetais por radioimunoensaio. Foram obtidas 40 amostras de líquido amniótico e alantoideano de 16 cadelas gestantes pela cesariana. Ajustes no teste de Clements favorecem a análise de fluidos caninos promovendo resultados confiáveis (p<0,05) para as diluições. Células morfologicamente diferentes e com porcentagem de células orangeofílicas e cianofílicas refletem a maturidade pulmonar sugerindo feto em estágio de pós-maturidade. Na densidade óptica (DO) dos líquidos fetais encontramos 220l0,190 para os líquidos amniótico e 0,250l0,02 para o alantoideano sendo indicativo de maturidade (= 0,150). A concentração proteica nos fluidos estudados reflete a fisiologia fetal (p<0,05). A dosagem de cortisol indica a exposição do feto no ambiente uterino (p<0,05). A IOD da banda protéica de 66kDa foi de 15,94 para o líquido amniótico e 13,3 para o alantoideano. Cinco bandas proteicas presentes nos dois fluidos podem espelhar a maturidade renal (32; 30; 28; 20 e 12). Com base nestes dados conclui-se que a obtenção de informações básicas sobre a maturidade e viabilidade do feto canino podem ser avaliada com os testes propostos. / Abstract: The premature fetus is unable to survive in extra-uterine environment due to immaturity of its vital organs as the lungs and kidneys. The objective of this work was to evaluate the renal maturity through the identification of low molecular mass proteins; pulmonary maturity through the cytology with Nile blue (0,1%), modified Clements test and optic density of fluids; moreover, the alpha-fetoprotein was evaluated through electrophoresis using SDS-PAGE (12%); and the cortisol concentration from fetal liquids was determinated by radioimunoassay. Forty amniotic and allantoic liquid samples from 16 pregnant bitches were colleted by punction during cesarean section. The Clements test was adapted to canine fluid analysis to promote true results (p<0,05) for the diluitions. Cells morphologically and with percentage of different orangeo and cyanophilia cells reflect the maturity. The optic density (DO) of the fetal fluids liquids were 220l0,190 and 0,250l0,02 to the amniotic and allantoic liquid, respectively, indicating maturity (= 0,150). The protein concentractions reflect the fetal physiology (p<0,05) in evaluated fluids. The cortisol concentration indicates the fetal exposition in the uterine environment (p<0,05). The IOD of 66 kDa protein band was 15,94 to amniotic and 13,30 to allantoic liquid. Five protein band in two fluids can reflect the renal maturity (32; 30; 28; 20 e 12). Based in these results we conclude that the tests considered in the study can evaluate the maturity and viability of canine fetus. / Doutor

Orientador: Nereu Carlos Prestes / Banca: Fernada da Cruz Landim-Alvarenga / Banca: Regina Kiomi Takahira / Banca: Wilter Ricardo Russiano Vicente / Banca: Mara Regina S. Balarin / Resumo: Os líquidos fetais possuem diversas funções que são vitais para o feto. Para a espécie eqüina até o presente momento, não está totalmente definida a composição bioquímica do líquido amniótico no decorrer da gestação. O presente trabalho teve como objetivo verificar a composição bioquímica do liquido amniótico e alantoideano das éguas em diferentes fases da gestação. Para isso analisou-se 60 amostras de fluidos fetais, empregando-se kits comerciais para se determinar a concentração bioquímica da Fosfatase Alcalina, Glicose, Proteínas Totais, Uréia, Creatinina, Cálcio, Cloreto, Sódio e Potássio durante a gestação. A concentração da alfa-fetoproteína foi avaliada empregando-se a eletroforese em gel de poliacrilamida. A concentração da Fosfatase Alcalina no liquido amniótico foi maior quando comparada ao liquido alantoideano nas três fases da gestação (p < 0,05). Para a glicose o valor médio entre os dois fluidos não apresentou variações (p < 0,05). Para a Proteína total o valor médio do liquido amniótico foi maior que o alantoideano (p < 0,05). A Uréia sofreu variações na concentração entre as fases, mas não há diferenças dos valores médios (p > 0,05) entre os fluidos. Para a Creatinina os valores presentes no liquido alantoideano são mais altos que os valores do liquido amniótico (p < 0,05). As concentrações dos íons Cloreto e Sódio apresentaram-se mais elevados (p < 0,05) no liquido amniótico. As concentrações dos íons Cálcio e Potássio foram mais elevadas nos líquidos alantoideanos (p<0,05). A eletroforese identificou duas bandas protéicas que podem ser a alfa-fetoproteína, ela parece aumentar a concentração durante o período gestacional. Porém, faltam estudos na espécie eqüina para a comparação dos resultados do presente trabalho. / Abstract: Fetal fluids play a vital role in the development of the fetus. The biochemical composition of the amniotic fluid along pregnancy in horses had not been described until this present study. Sixty samples of fetal fluids were collected and the concentrations of Alkaline Phosphatase (FA), Glucose, Total Proteins (PT), Urea, Creatinin, Calcium (Ca), Chloride (Cl), Sodium (Na) and Potassium (K) along pregnancy were determined using commercially available kits. The levels of alpha-fetoprotein (AFT) were measured by polyacrylamide gel electrophoresis. During the three stages of pregnancy the concentrations of FA in the amniotic fluid were higher than those determined in the allantoic fluid (p < 0,05). The glucose levels did not differ between the fluids (p < 0,05). The mean values for the concentrations of PT were higher in the amniotic fluid than in the allantoic (p < 0,05). The urea levels differ among the pregnancy stages, but there were no differences in the mean values of urea (p > 0,05) between the two fluids. The concentrations of creatinin obtained in the allantoic fluid were higher than those obtained in the amniotic fluid (p < 0,05). The concentrations of Cl and Na were elevated (p < 0,05) in the amniotic fluid. The levels of the ions Ca e K were higher in the allantoic fluid (p<0,05). Polyacrylamide gel electrophoresis identified two protein bands that could be alpha-fetoprotein, which appears to have its concentration increased during pregnancy. There is a need for more studies in the biochemical composition of fetal fluids in horses to compare the results obtained in this study. / Doutor