Thèse (M.Sc.)--Université Laval, 2004. / Bibliogr.: f. 85-94. Publié aussi en version électronique.

Thèse (M.Sc.)--Université Laval, 2003. / Bibliogr.: f. 70-83. Publié aussi en version électronique.

Thèse (M.Sc.) -- Université Laval, 1996. / Bibliogr.: f. 72-96. Publié aussi en version électronique.

Thèse (Ph. D.) -- Université Laval, 1997. / Bibliogr.: f. 159-176. Publ. aussi en version électronique.

Thèse (M.Sc.) -- Université Laval, 1997. / Les chapitres 2 et 3 ont été rédigés par l'auteur et collab. en anglais, avec résumés en français, et publiés ou soumis dans différents titres de périodiques. Bibliogr. Publ. aussi en version électronique.

Ces dernières années, il est apparu que le stroma péritumoral et en particulier les fibroblastes associés au cancer exprimant l’actine musculaire lisse (CAFs : carcinoma-associated fibroblasts/ myofibroblasts) faisaient partie intégrante du processus carcinologique observé dans diverses tumeurs épithéliales y compris dans les carcinomes mammaires.L’objectif de ce travail de thèse a donc été :1) D’analyser la distribution « in situ » de ses CAFs/myofibroblastes dans les lésions mammaires de carcinome intraductal (CID), de carcinomes invasifs non spécifiques (No Special Type – CaNST) et de carcinomes métastatiques.2) De déterminer si cette réaction myofibroblastique pouvait prendre naissance à partir des fibroblastes « résidents » CD 34 positifs par l’intermédiaire du TGF-1 et de son récepteur.3) De déterminer si l’action pro carcinogénique de cette réaction myofibroblastique pouvait être liée à la surexpression stromale de la métalloprotéinase de la matrice de type-2 (MMP-2).4) De déterminer si l’expression des récepteurs aux glucocorticoïdes (GR) était présente au sein de ces cellules stromales afin de constituer une cible thérapeutique potentielle. Nos trois premiers travaux ont consisté en une analyse semi-quantitative par immunohistochimie de l’expression de l’anticorps anti- CD 34, marqueur de fibroblastes mammaires, et de l’anticorps anti–actine musculaire lisse (AML), marqueur de myofibroblastes, au sein du stroma de lésions CID, de CaNST et de lésions métastatiques, hépatiques et ganglionnaires. Ces expériences ont mis en évidence la perte progressive de l’expression stromale du CD34 et l’apparition progressive, « en miroir », de l’expression stromale de l’AML autour des foyers de CID et ce de manière proportionnelle au grade nucléaire de ces lésions. En ce qui concerne les CaNST, nous avons constaté la perte de l’expression stromale du CD34 et la présence de la réaction myofibroblastique AML positive dans 100 % des cas. L'intensité d'expression de l'actine musculaire lisse était corrélée de manière significative avec la présence de métastases ganglionnaires. Enfin, cette réaction myofibroblastique a été également retrouvée de manière constante au sein des métastases ganglionnaires et hépatiques. Notre quatrième travail a consisté en l’étude immunohistochimique du TGF-1 et de son récepteur (TGF-R1) dans les lésions de CaNST et au traitement in vitro de lignées cellulaires de fibrocytes mammaires par du TGF-1. Nous avons pu constater une augmentation statistiquement significative de l’expression du TGF-1 au sein des cellules tumorales et une augmentation statistiquement significative de l’expression du TGF-R1 au sein du stroma péritumoral par rapport au tissu mammaire normal. Par ailleurs, le traitement in vitro d’une lignée de fibroblastes mammaires par le TGF-1 faisait apparaître une expression d’AML au sein de ces cellules.Notre cinquième travail a permis de mettre en évidence, par immunohistochimie, une relation entre l’expression stromale de la métalloprotéinase de la matrice de type 2 (MMP-2) et le sous-type tumoral selon la classification luminale. Les tumeurs exprimant HER-2/Neu présentaient une plus forte expression stromale de MMP-2, considérée comme potentiellement pro-invasive.Enfin, notre dernier travail a mis en évidence l’expression fréquente (>90% des cas) des récepteurs aux glucocorticoïdes (GR) au sein des CAFs/ myofibroblastes des CaNST. Cette expression était corrélée de manière significative avec le grade tumoral, l’indice de Ki-67 et l’expression de ces mêmes GR au sein des cellules tumorales épithéliales.En conclusion, les résultats découlant de ces différents travaux démontrent une réaction stromale péritumorale constante et ce tout au long du processus de développement tumoral, dès le stade de carcinome in situ jusqu’au stade métastatique.Une des origines potentielles de ces myofibroblastes est vraisemblablement la transformation des fibroblastes « résidents » mammaires par l’intermédiaire du TGF- et de son récepteur. Ces myofibroblastes présentent par ailleurs des caractéristiques d’expression de MMP-2 différentes en fonction des sous types de carcinomes mammaires suggérant que le stroma péritumoral est en partie différent en fonction du sous type tumoral. Enfin, les récepteurs aux glucocorticoïdes (GR) qui sont fréquemment observés dans ces cellules myofibroblastiques pourraient à l’avenir constituer de nouvelles cibles dans la régulation de l’action de ces cellules. / Doctorat en Sciences médicales (Médecine) / info:eu-repo/semantics/nonPublished

La sénescence, perte irréversible des capacités réplicatives des cellules associée à la sécrétion de médiateurs inflammatoires, pourrait participer au développement de l'atteinte pulmonaire dans la bronchopneumopathie chronique obstructive (BPCO) en initiant, maintenant et propageant un état inflammatoire. L'objectif de ce travail était d'évaluer les mécanismes de la sénescence impliqués dans l'induction et le maintien de l'inflammation au cours de la BPCO. Ainsi, des fibroblastes pulmonaires de témoins et de patients atteints de BPCO ont été mis en culture à long terme. Un phénotype sénescent majoré associée à un sécrétome pro-inflammatoire était détectée dans les fibroblastes de patients avec BPCO par rapport aux témoins. Par ailleurs, ces fibroblastes présentaient une expression accrue des récepteurs à la PGE2 (EP2 /4)au stade non sénescent et une production accrue de PGE2, un médiateur lipidique pro-inflammatoire, au stade sénescent. Dans cette optique, une partie du travail a consisté à déterminer si la PGE2 pouvait induire la sénescence et l'inflammation des fibroblastes pulmonaires de sujets atteints ou non de BPCO. Nous avons pu démontrer que la PGE2 synthétisée par les fibroblastes sénescents induisait, maintenait (effet autocrine) et propageait (effet paracrine) la sénescence et l'inflammation associée via une voie EP2/4 / COX-2 / oxydants / p53. L'implication des oxydants dans l'induction de la sénescence nous a conduit à étudier les effets de l'hème oxygénase (HO)-1, un système anti-oxydant et anti-inflammatoire sur la prévention de la sénescence des fibroblastes pulmonaires. Ainsi, des fibroblastes pulmonaires ont été traités chroniquement avec des substances pharmacologiques modulant l'activité d'HO-1. Des résultats préliminaires nous ont permis d'observer que l'activation de HO-1 prévenait l'induction de la sénescence chez des fibroblastes pulmonaires de témoins et de BPCO. Au total, la modulation des voies de la PGE2 et de l'HO-1 pourrait contribuer à limiter la sénescence des fibroblastes pulmonaires dans la BPCO / Cellular senescence, a state of irreversible loss of replicative capacity associated with the secretion of inflammatory mediators, could participate in the development of chronic obstructive pulmonary disease (COPD) by initiating, maintaining and propagating an inflammatory state. The aim of this PhD project was to evaluate the mechanisms involved in senescence induction in COPD lung fibroblasts. COPD fibroblasts exhibited an increased senescent phenotype as compared to control cells. In addition, COPD fibroblasts showed an increased PGE2 receptors (EP2 /4) expression at non senescent stage and PGE2 production, apro-inflammatory lipid mediator at senescent stage. In this context, one part of the study was devoted to determine whether PGE2 could induce senescence of lung fibroblasts of subjects with and without COPD. We have shown that PGE2 synthesized by senescent fibroblasts induced, maintained (autocrine effect) and propagated (paracrine effect) senescence and associated inflammation via EP2 /4 / COX-2 / oxidants / p53 pathway. The essential role of oxidants production in the induction of senescence in COPD led us to study the effects of heme oxygenase (HO)-1, an antioxidant and anti-inflammatory system on the prevention of senescence in COPD fibroblasts. Pharmacological activation of HO-1 by hemin prevented the induction of senescence in lung fibroblasts from COPD patients probably in relation with an anti -oxidant effect. The modulation of PGE2 and HO-1 pathways may contribute to attenuate fibroblasts senescence in COPD

L'adénocarcinome pancréatique canalaire présente une composante stromale très abondante. Les fibroblastes associés au cancer (CAFs) sécrètent énormément de facteurs participant à la survie des cellules cancéreuses ainsi qu'à leur chimiorésistance. Nos travaux démontrent la possibilité d'atténuer les propriétés chmioprotectrices des CAF en ciblant leur voie de signalisation mTOR/4E-BP1 qui est retrouvée fortement activée notamment dans les primo cultures de CAF isolées à partir de résections chirurgicales humaines. Les CAF expriment exclusivement le récepteur de somatostatine sst1. L'analogue SOM230 (Pasiréotide) active ce récepteur et inhibe la signalisation mTOR/4E-BP1 conduisant à une nette diminution du niveau de synthèse protéique des CAF. En conséquence, la croissance tumorale ainsi que la chimiorésistance des tumeurs (co xénogreffes réalisées chez la souris nude) ont été limitées lorsque la combinaison thérapeutique SOM230 / Gemcitabine a été appliquée. Tandis que, seule, la gemcitabine ne présente pas d'effet, le SOM230 sensibilise la tumeur à son action cytotoxique en agissant sur le stroma et en présentant un rôle anti fibrotique. Nous proposons alors une nouvelle approche thérapeutique qui consiste à cibler la synthèse protéique des CAF exprimant sst1 par un analogue de la somatostatine afin de limiter leur potentiel chimio protecteur et restaurer indirectement la sensibilité des cellules cancéreuses pancréatiques à l'action cytotoxique de la gemcitabine. / Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) is extremely stroma-rich. Cancer-associated fibroblasts (CAFs) secrete proteins that activate survival and promote chemoresistance of cancer cells. Our results demonstrate that CAF secretome-triggered chemoresistance is abolished upon inhibition of the protein synthesis mTOR/4E-BP1 regulatory pathway which we found highly activated in primary cultures of a-SMA-positive CAFs, isolated from human PDAC resections. CAFs selectively express the sst1 somatostatin receptor. The SOM230 analogue (Pasireotide) activates the sst1 receptor and inhibits the mTOR/4E-BP1 pathway and the resultant synthesis of secreted proteins including IL-6. Consequently, tumour growth and chemoresistance in nude mice xenografted with pancreatic cancer cells and CAFs, or with pieces of resected human PDACs, are reduced when chemotherapy (gemcitabine) is combined with SOM230 treatment. While gemcitabine alone has marginal effects, SOM230 is permissive to gemcitabine-induced cancer cell apoptosis and acts as an antifibrotic agent. We propose that selective inhibition of CAF protein synthesis with sst1-directed pharmacological compounds represents an anti-stromal-targeted therapy with promising chemosensitization potential.

Dans cette étude, les effets toxiques de la nicotine, seule et en combinaison avec le lipopolysaccharide de bactéries parodontopathogènes, sur les cellules épithéliales et les fibroblastes d'origine buccale ont été déterminés. La capacité de polyphenols à neutraliser les effets cytotoxiques et inflammatoires de la nicotine a également été évaluée. Les cellules mucosales buccales ont été traitées avec la nicotine (± lipopolysaccharide), en présence et en absence de polyphenols. La viabilité cellulaire a été évaluée à l'aide d'un test colorimétrique mesurant la respiration cellulaire alors que la sécrétion de cytokines a été déterminée par un test immuno-enzymatique. Il a été démontré que la nicotine cause une perte de viabilité cellulaire de manière dose-dépendante. Une combinaison de nicotine et de lipopolysaccharide a entraîné des effets cytotoxiques additifs. Certaines anthocyanines pures ou présentes dans un extrait de cassis de même que l'épigallocatéchine-3-gallate ont permis de neutraliser les effets cytotoxiques et inflammatoires induits par la nicotine. Les résultats de cette étude supportent le potentiel thérapeutique des polyphenols pour la maladie parodontale.

L’objectif principal de cette étude est d’étudier l’effet de la fumée de cigarette (FC) sur C. albicans et sur son interaction avec les fibroblastes gingivaux humains. Nous avons démontré que Candida se multiplie présence FC, en adoptant la forme hyphe. La FC rende C. albicans sensible au H2O2, mais résistant aux la chaleur et au NaCl. La FC augmente la production de chitine par C. albicans. Préincubé avec le FC, C. albicans adhère beaucoup plus aux cellules gingivales en monocouche, prolifère plus et adopte la forme hyphe plus facilement. Les fibroblastes quant à eux ils montrent une réduction de leur croissance, mais produisent plus de l’IL-1b. En conclusion: le CFC module d’un côté C. albicans et de l’autre côté les cel-lules de l’hôte. Ceci suggère un négatif important de la fumée de cigarette favorisant les candidoses orales chez les fumeurs. / The main objective of this study was to investigate the effect of cigarette smoke (CS) on C. albicans and its interaction with human gingival fibroblasts. We have shown that Candida multiplies presence CS, by adopting the hyphae form. CS makes C. albicans sensitive H2O2, but resistant to heat and NaCl. CS in-creases chitin production by C. albicans. Preincubated with CS, C. albicans adheres more to gingival cells in monolayer, proliferating more and adopts the hyphae form more easily. Fibroblasts show a reduction of their growth, but produce more IL-1b. CSC modulates C. albicans and on the other side also CS modulates the host cells. This suggests a significant negative cigarette smoke promotes oral candidiasis in smokers.