Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-03-19T17:17:11Z No. of bitstreams: 1 Lorena Ana Pinto Efeito...pdf: 4813973 bytes, checksum: 919ea1532d5e21e5ccc608fc3405b3fd (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-03-19T17:17:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Lorena Ana Pinto Efeito...pdf: 4813973 bytes, checksum: 919ea1532d5e21e5ccc608fc3405b3fd (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-19T17:17:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lorena Ana Pinto Efeito...pdf: 4813973 bytes, checksum: 919ea1532d5e21e5ccc608fc3405b3fd (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / A proliferação espontânea de linfócitos é um marcador da infecção pelo Vírus Linfotrópico de Célula T Humana do tipo 1 (HTL V -l)o Esta é mais elevada em pacientes com paraparesia espástica tropical/mielopatia associada ao HTL V (HAMJTSP) que em indivíduos assintomáticos. Embora o seu papel na patogênese da HAM/TSP ainda seja desconhecido, a identificação de drogas capazes de modular a proliferação espontânea pode ser relevante para o tratamento da HAM/TSP. Neste estudo nós avaliamos os efeitos dos derivados quinoIínicos BS373, Ql e Q2 e da fisalina F em culturas de células mononucleares do sangue periférico (PBMC) de indivíduos infectados pelo HTL V com HAM/TSP. Estes compostos inibiram, ex vivo, a proliferação espontânea em culturas de PBMC, conforme avaliado pela incorporação de 3H-timidina. Além disso, a produção espontânea, ex vivo, de citocinas inflamatórias foi significativamente inibida pelo composto BS373 (25 j.tM) e pela tlsahna F (10 j.tM). A expressão da proteína viral Tax foi reduzida cerca de 80% após incubação de PBMC com BS373 (25 uM). BS373 e fisalina F induziram um aumento na porcentagem de células em apoptose, como demonstrado por análise da marcação do PBMC com anexina V por citometri~ de fluxo. A análise ultraestrutural de células cultivadas na presença destes compostos mostrou vacúolos apresentando membranas de mielina, que se assemelham a compartimentos autofágicos. Em conclusão, as quinolinas e a fisalina F foram capaz de inibir a proliferação espontânea de células de indivíduos infectados pelo HTL V-I. Outros estudos são necessários para compreendermos os mecanismos pelos quais estes compostos agem no PBMC de indivíduos infectados pelo HTL V-I. / Spontaneous lymphocyte proliferation, a hallmark ofHuman- T Lymphocyte Virus Type 1 (HTL V -1) infection, is particular1y high in HTL V -associated myelopathy/tropical spastic paraparesis (HAM/TSP) patients compared to asymptomatic carriers. Although its role in the pathogenesis of HAM/TSP is stiH unknown, the identification of drugs capable of modulating the spontaneous proliferation may be reievant for the treatment ofHAM/TSP. Here we evaluated the effects ofthe quinoline derivative BS373, Q1 and Q2 and physalin F in cultures of peripheral blood mononuclear ceHs (PBMC) obtained from HTL V-infected subjects with HAM/TSP. Compounds inhibited of spontaneous proliferation in PBMC cultures, as assessed by 3H-thymidine incorporation. Additionally, the spontaneous production of inflammatory cytokines by PBMC was significantly inhibited by BS373 (25 flM) and physalin F (10 flM). The expression of the viral transcription factor Tax was reduced about 80% after incubation of PBMC with 8S373 (25 I-tM). BS373 and physalin F induced an increase in the percentage of apoptotic cells, as shown by flow cytometry analysis of annexin V-stained PBMC. Ultrastructural analysis of cultured cells in the presence of compounds showed vacuoles presented with myelin-like membranes, resembling autophagic vacuole-like compartments. In conc1usion, quinolines and physalin F was able to inhibit the spontaneous proliferation of cells from HTL V -l-infected individuaIs. Further studies are required to understand the mechanisms by which the compounds affect HTL V -1 PBMC.

Submitted by Carla Santos (biblioteca.cp2.carla@bahiana.edu.br) on 2018-11-20T14:37:25Z No. of bitstreams: 1 TESE L??A FERREIRA 25.10 (1).pdf: 6244693 bytes, checksum: 5600d70870dc026a33f3dbe749da1a1a (MD5) / Approved for entry into archive by JOELMA MAIA (ebmsp-bibliotecacp2@bahiana.edu.br) on 2018-11-20T18:42:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TESE L??A FERREIRA 25.10 (1).pdf: 6244693 bytes, checksum: 5600d70870dc026a33f3dbe749da1a1a (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-20T18:42:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE L??A FERREIRA 25.10 (1).pdf: 6244693 bytes, checksum: 5600d70870dc026a33f3dbe749da1a1a (MD5) Previous issue date: 2018-07-24 / Physalis angulata L. ?? uma planta da fam??lia Solanaceae amplamente utilizada na medicina popular. Metab??litos secund??rios com potencial farmacol??gico, incluindo fisalinas que exibem atividades anti-inflamat??rias, imunomoduladoras e antiparasit??rias, foram identificados nesta esp??cie. Poucos estudos investigaram os locais de armazenamento de metab??litos secund??rios na planta e o efeito dos bioativos na linfoprolifera????o causada pelo v??rus linfotr??pico de c??lulas T humanas (HTLV-1). Objetivos: Caracterizar as estruturas anat??micas vegetais, o perfil fitoqu??mico dos extratos e avaliar o efeito da Physalis angulata em linf??citos de indiv??duos infectados pelo HTLV-1 Material e m??todos: Foram empregadas t??cnicas de microscopia eletr??nica e ??ptica convencional para a caracteriza????o anat??mica dos ??rg??os da P. angulata (folha, raiz, caule e frutos). Extratos metan??licos de folhas, ra??zes, caule e frutos foram qualitativamente caracterizados pela presen??a de esteroides, terpenoides, taninos, alcaloides, saponinas, flavonoides, antraquinonas, cumarinas, teor de compostos fen??licos totais e conte??dos de flavonoides. A capacidade antioxidante desses extratos foi determinada pela atividade de sequestro de radicais livres do DPPH. Para avaliar o efeito do extrato da P. angulata e Fisalina F sobre a linfoprolifera????o, c??lulas de tr??s indiv??duos infectados pelo HTLV-1 e tr??s controles n??o infectados foram cultivadas em presen??a de dilui????es seriadas do extrato e da Fisalina F por 5 dias. As c??lulas foram pulsadas por 18h com 1??Ci 3H- Timidina. Al??m disso, foi realizado a an??lise do ciclo celular, na presen??a ou aus??ncia da Fisalina F e do extrato. Resultados: Os est??matos anisoc??ticos localizados na face abaxial foram mais abundantes que os est??matos na face adaxial. Tricomas foram evidenciados mais abundantes ao longo das nervuras do pec??olo, caules, al??m da margem nas s??palas e p??talas e dispersos no ov??rio. Esteroides e terpenoides estiveram presentes nas folhas, caules e frutos de P. angulata. Saponinas eram exclusivas nos frutos. A triagem fitoqu??mica n??o detectou flavonoides, antraquinonas e alcaloides em todas os extratos metan??licos das partes testadas da planta. As maiores capacidades antioxidantes foram identificadas nos extratos foliares e frut??feros, possivelmente devido ?? presen??a de compostos fen??licos nesses ??rg??os. O IC50 encontrado para Fisalina F foi 3,0 ??M e o IC50 do extrato etan??lico do caule de P. angulata foi de 7,0 ??g. A Fisalina F e o extrato da P. angulata inibiram a prolifera????o espont??nea de c??lulas infectadas de HTLV-1 e reduziram o n??mero de c??lulas em processo de mitose. Conclus??o: Este estudo descreveu as caracter??sticas anat??micas e bioqu??micas de P angulata e identificou ??rg??os do indiv??duo abundantes em antioxidantes (folhas e frutos) e esteroides (possivelmente fisalinas; folhas). Fisalina F e extrato de P. angulata apresentaram um efeito inibit??rio sobre c??lulas de indiv??duos infectados pelo HTLV-1, diminuindo a propor????o de c??lulas em divis??o celular.