Cette thèse est centrée sur l’analyse du rôle de l’adhésion cellule-substrat et des facteurs de détectionde Quorum sur la migration amibienne de Dictyostelium . Des outils pour automatiser les enregistrementsde vidéoomicroscopie et l’analyse d’image ont été développés afin de travailler avec de trèsgrands échantillons de cellules et de quantifier la migration cellulaire. Un dispositif microfluidique dedétachement cellulaire sous flux hydrodynamique combiné une platine motorisée a permis une étude statistique de l’adhésion mais aussi de la dynamique de détachement. L’analyse de la migration de Dictyostelium en milieu non nutritif met en évidence le rôle de la densité sur la différentiation des celluleset leur capacité de migration. Nous observons la présence d’une vitesse maximale de migrationaprès 6h de carence. Nous montrons que l’adhésion sur verre est deux fois plus faible en milieu carenc´equ’en milieu nutritif. Les exp´eriences de migration en milieu nutritif ont révélé la présence d’un facteur de détection de densité sécrété par les cellules et régulant leur migration aléatoire. Le coefficient de diffusion, la persistance du mouvement et la morphologie des cellules varient en fonction de la concentrationde ce facteur. Ce facteur ne modifie pas l’adhésion cellulaire mais uniquement la dynamique de d´etachement. Enfin, le protocole d’analyse développé nous a permis de faire une étude comparative de la migration en faisant varier d’autres paramètres tel que la surface ou la composition chimique du milieu expérimental. Ce travail se conclue en exposant le possible rôle de l’adhésion sur la migrationchez Dictyostelium en milieu nutritif. / This thesis focuses on the analysis of the role of adhesion between substrate and cell and factors of Quorum sensing on the migration of Dictyostelium amoeba. Tools to automate the recordings of videomicroscopy and image analysis have been developed to work with very large samples of cells and toquantify cell migration. A microfluidic device for cell detachment in hydrodynamic flow combined witha motorized stage has allowed a statistical study of adhesion but also the dynamics of detachment. The analysis of the migration of Dictyostelium in non nutritive medium highlights the role of density on celldifferentiation and migration capacity. We observe the presence of a maximum speed of migration after6 hours of starvation. We show that the adhesion to glass is twice as low in deprivation buffer as inthe nutrient medium. The experiences of migration in growth medium revealed the presence of a factorof detection of density secreted by the cells and regulating their random migration. The diffusion coefficient, the persistence of the movement and morphology of cells vary depending on the concentrationof this factor. This factor does not affect cell adhesion but only the dynamics of detachment. Finally, the testing protocol developed allowed us to make a comparative study of migration by varying otherparameters such as surface or the chemical composition of experimental medium. This work concludesby outlining the possible role of adhesion to the migration of Dictyostelium in nutrient medium.

La translocation de biopolymères à travers un nanopore intervient dans de nombreux processus biologiques et technologiques, comme le transport nucléocytoplasmique dans le pore nucléaire des cellules eucaryotes, la sécrétion de protéines, le séquençage rapide de l’ADN ou l’électrophorèse capillaire.Nous proposons une technique optique en molécule unique originale pour l’étude de la translocation de biopolymères à travers un nanopore basée sur l’effet Zero-Mode Waveguide. Nous nous sommes intéressés au passage d’ADN double-brin de plusieurs tailles, d’ADN simple-brin et d’ARN, entraînés par un flux à travers une membrane nanoporeuse track-etched. Nous montrons qu’il existe un flux critique régissant le passage des biopolymères indépendant du rayon des pores ainsi que de la taille des biopolymères et de leur nature, conformément aux prédictions théoriques de Brochard et de Gennes.Le pore nucléaire est un nanopore biologique responsable du transport sélectif entre le noyau et lecytoplasme des cellules. Nous avons étudié l’influence de la concentration en importinBeta1 – une protéine nécessaire au transport nucléocytoplasmique – sur l’organisation du canal central du pore nucléaire deXenopus laevis en mesurant la diffusion de molécules de Dextran fluorescentes à travers celui-ci. Nous observons une ouverture du canal central à basse concentration suivi d’un rétrécissement de celui-ci à plus forte concentration. Cette évolution du rayon du canal central avec la concentration en importin Beta1est conforme aux modèles en champ moyen de Opferman et coll. et de Ando et coll. et aux observations expérimentales sur des systèmes reconstitués in vitro de Lim et coll. et Zahn et coll. / The translocation of biopolymers through a nanopore is a feature common to many biological andtechnological processes such as the nucleocytoplasmic transport through the nuclear pore complex(NPC), protein secretion, fast DNA sequencing or capillary electrophoresis.We have developed an original single molecule optical detection technique for the study of biopolymerstranslocation through a nanopore based on the Zero-Mode Waveguide effect. We studied thepassage of double stranded DNA of different sizes, of single stranded DNA and of double-stranded RNAdriven by a flux through track-etched nanoporous membranes. We demonstrate that translocation isgoverned by a critical flux independent of both biopolymer size and nature and of the pore radius inagreement with the theoretical predictions of Brochard and de Gennes.The NPC is a biological nanopore responsible for the selective transport between cytoplasm andnucleus in cells. We studied the influence of importinBeta1 concentration – a protein involved in the nucleocytoplasmictransport – on the structure of the central channel of the NPC of Xenopus laevis byassessing the diffusion of fluorescently labeled Dextran molecules through the NPC. We observe anopening of the central channel at low concentration followed by a shrinking at higher concentrationin importinBeta1 in agreement with mean-field models from Opferman et al. and Ando et al. and withexperiments on biomimetic in vitro systems from Lim et al. and Zahn et al.