Darbo tikslas. Sprendžiant uždegiminio proceso sąnariuose lokalaus gydymo problemas, išanalizuoti fotodinaminės terapijos (FDT) poveikį antigenu sukeltai artrito eigai. Metodai. Tyrimui pasirinktas antigenu indukuoto artrito (AIA) modelis, kuriam būdingi vieno sąnario (monoartrito) uždegiminiai požymiai. Triušiams (n=17) artritas buvo sukeltas ovalbumino (OA) tirpalo injekcija į dešiniuosius kelio sąnarius (DKS), prieš tai juos imunizavus ovalbumino ir Froido adjuvanto mišiniu. AIA modeliui buvo stebima kelio sąnarių apimtis, matuojamas kūno svoris, vertinti bendrieji kraujo rodikliai: eritrocitų nusėdimo greitis (ENG), leukocitų ir eritrocitų skaičius. Protoporfirino IX (PpIX) susikaupimas tirtas fluorescencinės spektroskopijos metodu. Rezultatai. Pirmajame tyrimo etape vertintas AIA modelio (n=17) vystymasis bei tinkamumas eksperimentui. Uždegiminio proceso stiprumą parodė nuolat statistiškai patikimai didėjantis ENG imunizacijos eigoje, o po intrasąnarinės antigeno (OA) injekcijos trečią parą ENG buvo apie 20 kartų didesnis lyginant su sveikais gyvūnais, eritrocitų skaičius uždegiminio proceso pasekoje turėjo tendenciją mažėti (sveikų – 4,48 ×1012L, o 3 parą po OA injekcijos – 3,8×1012L), o leukocitų skaičius – didėti (sveikų – 7,27×109L, o po OA – 21,74×109L). Svarbus AIA modelio rodiklis buvo skirtumai tarp uždegiminių DKS ir kontrolinių kairiųjų kelio sąnarių (KKS), kurie 1-ą ir 2-ą paras po antigeno injekcijos buvo apie 2 cm. Antrajame tyrimų etape... [toliau žr. visą tekstą] / The aim of this study was to analyze the effect of photodynamic therapy (PDT)for the local treatment of inflammed knees in case of antigen induced arthritis. For our tests we have chosen the model of antigen induced arthritis (AIA), characterized by the features of monoarthritis. AIA was provoked in rabbits (n=17) by injecting an ovalbumin (OA) solution in the right knee of previously immunized animals using OA and Freund’s adjuvant solution. Different concentrations of 5-aminolevulinic acid, a precursor of PpIX, were injected intraarticulary or intravenously. The measurements of the knee have been performed, the body weight was measured, blood test results (i.e. ESR., the number of erythrocytes and leukocytes) were evaluated. The accumulation of PpIX was determined by measuring fluorescence spectra. In the first stage of the experiment the development and suitability of AIA model (n=17) was evaluated. The process of inflammation was characterized by statistically significantly increased ESR following the immunization, furthermore, after intraarticulary injection with OA, ESR at day 3 was 20 times increased as compared with the healthy animals. The number of erythrocytes had the tendency to decrease due to the inflammation (control group -4.48 ×1012L, at day three after the injection – 3.8 ×1012L). On the contrary, the number of leukocytes was increasing (control group – 7.27×109L, after the injection with OA – 21.74×109L). A significant feature of AIA model is the difference... [to full text]

Emerging evidence has shown that the capacity of a tumor to grow and propagate is dependent on a small subset of cells, termed “cancer stem cells“. Conventional treatments, however, may miss the cancer stem cells, which have been shown in several tumor types to be more resistant to standard chemotherapeutic agents, because the cancer stem cell survives and regenerates the neoplasm. The aim of this study was to investigate the applicability of quantum dots in detection and eradication of cancer stem cells. The properties of stem cells were inestigated in breast, pancreatic, ovarian cancer and melanoma cells. The accumulation and distribution of quantum dots was assessed by the means of laser scanning confocal and fluorescence lifetime imaging microscopy. It was shown, that anti-CD44 and quantum dot conjugates are internalized selectively inside CD44+ cells, while anti-CD44 and organic dye FITC conjugates remained attached to cell membrane for at least 24 hours. Moreover, the complex of quantum dot (QD) and photosensitizer chlorin e6 (Ce6) accumulates inside cells and initiate cell death upon QD-directed exposure of 470 nm irradiation. These results show the capability of quantum dots not only to detect and internalize stem-like cells but also to carry the therapeutic agent inside cells without losing its activity. / Pastaruoju metu vis gausėja įrodymų apie vėžyje esančią nedidelę subpopuliaciją, pavadintą „vėžio kamieninėmis ląstelėmis“. Teigiama, jog būtent vėžio kamieninės ląstelės yra atsakingos už naviko formavimą, atsparumą taikomai terapijai bei metastazių formavimą. Šio darbo tyrimo tikslas – ištirti nanodarinių pritaikymo galimybes vėžinių kamieninių ląstelių aptikimui ir sunaikinimui. Darbe buvo ištirtos krūties, kasos, kiaušidžių vėžio ir melanomos ląstelių savybės, pagal literatūroje nurodytą vėžio kamieninių ląstelių aptikimo metodiką. Panaudojant lazerinę skenuojančią konfokalinę ir gyvavimo trukmių vaizdinimo mikroskopiją buvo įvertintas kvantinių taškų, kaip galimų diagnostiką ir terapiją atliekančių nanodarinių kaupimosi ir lokalizacijos ląstelėse tyrimai. Buvo parodyta, jog antikūnais prieš paviršiaus antigeną CD44 padengti kvantiniai taškai selektyviai pateko tik į CD44+ fenotipo ląstelių vidų. Anti-CD44-FITC konjugatai taip pat selektyviai žymėjo norimas ląsteles, tačiau net po 24 valandų nepateko į ląstelių vidų. Taip pat buvo parodyta, jog kvantinio taško (KT) ir sensibilizatoriaus chlorino e6 (Ce6) nanodarinys lokalizuojasi ląstelių viduje pūslelėse ir sukelia ląstelių žūtį tik toms ląstelėms, kurioms pritaikytas apjungtas KT-Ce6 komplekso ir 470 nm spinduliuotės poveikis. Tokie rezultatai parodo, jog galima kvantinį tašką ne tik selektyviai nukreipti į norimas ląsteles, bet taip pat ir įnešti į jų vidų, neprarandant terapinės molekulės aktyvumo.

Pastaruoju metu vis gausėja įrodymų apie vėžyje esančią nedidelę subpopuliaciją, pavadintą „vėžio kamieninėmis ląstelėmis“. Teigiama, jog būtent vėžio kamieninės ląstelės yra atsakingos už naviko formavimą, atsparumą taikomai terapijai bei metastazių formavimą. Šio darbo tyrimo tikslas – ištirti nanodarinių pritaikymo galimybes vėžinių kamieninių ląstelių aptikimui ir sunaikinimui. Darbe buvo ištirtos krūties, kasos, kiaušidžių vėžio ir melanomos ląstelių savybės, pagal literatūroje nurodytą vėžio kamieninių ląstelių aptikimo metodiką. Panaudojant lazerinę skenuojančią konfokalinę ir gyvavimo trukmių vaizdinimo mikroskopiją buvo įvertintas kvantinių taškų, kaip galimų diagnostiką ir terapiją atliekančių nanodarinių kaupimosi ir lokalizacijos ląstelėse tyrimai. Buvo parodyta, jog antikūnais prieš paviršiaus antigeną CD44 padengti kvantiniai taškai selektyviai pateko tik į CD44+ fenotipo ląstelių vidų. Anti-CD44-FITC konjugatai taip pat selektyviai žymėjo norimas ląsteles, tačiau net po 24 valandų nepateko į ląstelių vidų. Taip pat buvo parodyta, jog kvantinio taško (KT) ir sensibilizatoriaus chlorino e6 (Ce6) nanodarinys lokalizuojasi ląstelių viduje pūslelėse ir sukelia ląstelių žūtį tik toms ląstelėms, kurioms pritaikytas apjungtas KT-Ce6 komplekso ir 470 nm spinduliuotės poveikis. Tokie rezultatai parodo, jog galima kvantinį tašką ne tik selektyviai nukreipti į norimas ląsteles, bet taip pat ir įnešti į jų vidų, neprarandant terapinės molekulės aktyvumo. / Emerging evidence has shown that the capacity of a tumor to grow and propagate is dependent on a small subset of cells, termed “cancer stem cells“. Conventional treatments, however, may miss the cancer stem cells, which have been shown in several tumor types to be more resistant to standard chemotherapeutic agents, because the cancer stem cell survives and regenerates the neoplasm. The aim of this study was to investigate the applicability of quantum dots in detection and eradication of cancer stem cells. The properties of stem cells were inestigated in breast, pancreatic, ovarian cancer and melanoma cells. The accumulation and distribution of quantum dots was assessed by the means of laser scanning confocal and fluorescence lifetime imaging microscopy. It was shown, that anti-CD44 and quantum dot conjugates are internalized selectively inside CD44+ cells, while anti-CD44 and organic dye FITC conjugates remained attached to cell membrane for at least 24 hours. Moreover, the complex of quantum dot (QD) and photosensitizer chlorin e6 (Ce6) accumulates inside cells and initiate cell death upon QD-directed exposure of 470 nm irradiation. These results show the capability of quantum dots not only to detect and internalize stem-like cells but also to carry the therapeutic agent inside cells without losing its activity.