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Avaliação de dois isolados do fungo nematófago Duddingtonia flagrans no controle de larvas infectantes de Ancylostoma spp. de cães / Evaluation of two isolates of the nematophagous fungus Duddingtonia flagrans in the control of infective larvae of Ancylostoma spp. dogs

Mello, Ingrid Ney Kramer de 18 February 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 526637 bytes, checksum: 81fabf0a6dfa647d3b2eecba6334fa04 (MD5) Previous issue date: 2013-02-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The nematodes of the genus Ancylostoma are endoparasites of dogs and also zoonotic geohelminths that can infect humans. The control these nematodes in adult stage is based on the use of anthelmintics. However, the use of biocontrol agents may be an additional action to reduce the population in pre-parasitic stages developing in the environment. This study aimed to evaluate the Duddingtonia flagrans predator fungus for the control of the larval form (L3) of Ancylostoma spp., in beach sand. We evaluated the in vitro infectivity of two isolates of the nematophagous fungus D. flagrans (AC001 and CG768) on infective larvae (L3) of Ancylostoma spp. dogs. Vegetative structures (mycelium), reproductive (conidia) and survival (chlamydospores) were used as fungal inoculum. The interaction was evaluated at the end of 10 days of incubation in Petridishes containing agar-water 2% medium in a temperature of 25 ° C. The antagonism in semi-natural conditions was assessed by use of a mass production of fungal inoculum in grains of milled maize. The fungus was introduced into the sand in colonized milled maize at the concentration of 15,000 chlamydospores / gram of sand. This concentration was the most effective in the preliminary in vitro assay (reduction of 59.2%). The results showed the efficiency of the fungus D. flagrans in the control of infective larvae of Ancylostoma spp. in beach sand. This suggests that isolates of this fungus may be used as part of a control program of Ancylostoma spp. in the environment. / Os nematóides do gênero Ancylostoma são endoparasitas de cães e também geohelmintos zoonóticos que podem infectar o ser humano. O controle destes nematóides em estágio adulto é baseado na utilização de anti-helmínticos. No entanto, o uso de agentes biocontroladores pode ser uma medida complementar para reduzir a população em estágios pré-parasitários em desenvolvimento no ambiente. Este estudo objetivou avaliar o fungo predador Duddingtonia flagrans no controle da forma larval infectante (L3) de Ancylostoma spp., em areia de praia. Foi avaliada a infectividade in vitro de dois isolados do fungo nematófago D. flagrans (AC001 e CG768) sobre larvas infectantes (L3) de Ancylostoma spp. de cães. Utilizou-se como inóculos fúngicos estruturas vegetativas (micélio), reprodutivas (conídios) e de sobrevivência (clamidósporos). A interação foi avaliada ao final de 10 dias de incubação em placas de Petri contendo meio ágar-água 2% em temperatura de 25 °C. O antagonismo em condições semi-naturais foi avaliado por meio da utilização de uma produção massal de inóculo fúngico em grãos de milho moído. O fungo foi incorporado à areia, em grãos colonizados de milho moído na concentração de 15.000 clamidósporos/grama de areia. Essa concentração se mostrou a mais efetiva em ensaio in vitro preliminar (redução de 59,2%). Os resultados mostraram a eficiência do fungo D. flagrans no controle de larvas infectantes de Ancylostoma spp. em areia de praia. Isso sugere que isolados desse fungo podem ser utilizados como parte de um programa de controle de Ancylostoma spp. no ambiente.
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Diversidade genética de isolados do fungo predador de nematóides Arthrobotrys spp. por marcadores moleculares RAPD e PCR-RFLP do rDNA / Genetic diversity of nematophagous predacius fungi Arthrobotrys spp. by RAPD and rDNA PCR-RFLP molecular markers

Ramos, Moema Lopes 08 August 2000 (has links)
Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-07T17:11:15Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 927356 bytes, checksum: 6c422db022d62f1130f3945fa49dd101 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-07T17:11:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 927356 bytes, checksum: 6c422db022d62f1130f3945fa49dd101 (MD5) Previous issue date: 2000-08-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A diversidade genética de seis isolados Arthrobotrys conoides, três isolados A. oligospora e sete isolados A. robusta foi avaliada por meio de RAPD. A amplificação resultou em um total de 107 fragmentos de DNA polimórficos, utilizando 11 oligonucleotídeos. As distâncias genéticas variaram de 9 a 83%, quando analisadas em conjunto, demonstrando grande diversidade genética nos isolados dessas três espécies. Por meio dessas análises, pôde-se diferenciar os isolados A51 (A. robusta) e A78 (A. conoides) das suas respectivas espécies. Além desses, o isolado A183 (A. oligospora) também se diferenciou de sua espécie agrupando-se com isolados de A. robusta. A variação dentro da região ITS do rDNA de seis isolados A. conoides e sete isolados A. robusta foi analisada por PCR seguida pela análise do polimorfismo de comprimento de restrição (RFLP). Essa região amplificada inclui o espaçador interno transcrito (ITS), que possui um baixo grau de conservação. Dois isolados fúngicos, A51 e A78, apresentaram polimorfismo de tamanho dentro de suas respectivas espécies. Os produtos da amplificação da região ITS foram hidrolisados com diferentes endonucleases de restrição. Análises de agrupamento, baseadas nos fragmentos de DNA de restrição, separaram os isolados em três distintos grupos: o Grupo 1, que contém os isolados pertencentes à espécie A. conoides, exceto o isolado A78; o Grupo 2, que contém os isolados da espécie A. robusta, exceto o isolado A51; e o Grupo 3, formado pelos isolados A78 e A51, sugerindo uma nova análise na sua classificação. / The genetic diversity of six isolates of Arthrobotys conoides, three of A. oligospora, and seven of A. robusta was evaluated by RAPD. Total DNA amplification using 11 oligonucleotides resulted in 107 distinct polymorphic DNA fragments. The genetic distances varied from 9 to 38%, showing high genetic diversity among the isolates of the three species. By means of RAPD analysis, the isolates A51 (A. robusta) and A78 (A. conoides) could be differentiated from their respective species. Besides A51 and A78, the isolate A183 (A. oligospora) also differentiated from its species, grouping with the isolates of A. robusta. Variation within the rDNA ITS region of six isolates of A. robusta was analyzed by PCR, followed by restriction fragment length polymorphism analysis (RFLP). The amplified region included the internal transcribed spacer (ITS), which possesses a low degree of conservation. Two fungal isolates presented length polymorphism within their respective species. Amplification products of the ITS region were cleaved with different restriction endonucleases. Cluster analysis based on restriction fragments divided the isolates into three groups: Group 1, containing the A conoides isolates, except ixA78; Group 2, containing the A robusta isolates, except A51; and Group 3, formed by A78 and A51, suggesting that their classification should be revised.

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