Descreve-se uma enfermidade hereditária em bovinos caracterizada por acúmulo lisosssomal de glicogênio em diversos órgãos. A doença foi diagnosticada em um rebanho da raça Brahman com 20 vacas e um touro, mantidos em criação extensiva, no município de Porto Lucena, Rio Grande do Sul, Brasil. A doença afetou 3 de 16 bezerros nascidos (18,75%) no ano 2000, 5 de 19 (26,3%) em 2001 e 2 de 12 (16,6%) em 2002. Os animais afetados, após 1 mês de idade, apresentavam dificuldade de acompanharem a mãe e crescimento retardado, desenvolviam fraqueza e tremores musculares, letargia e perda de condição corporal progressivos. Com o agravamento dos sinais clínicos os animais eram eutanasiados por apresentarem dificuldade em se alimentar ou beber água sem auxílio. Todos os bezerros eram descendentes do mesmo touro. Após a retirada deste animal do plantel e introdução de um touro Nelore não houve o nascimento de animais doentes. Foi realizada necropsia em 3 bezerros doentes e palidez muscular do tronco e membros foi a única alteração macroscópica encontrada. Vacuolização citoplasmática de diversos órgãos foi a principal alteração histológica observada. Os vacúolos citoplasmáticos eram mais evidentes na musculatura esquelética, miocárdio, especialmente nas fibras de Purkinje e neurônios do Sistema Nervoso Central (SNC). Nos tecidos mais afetados, também foi observada grande quantidade de grânulos ácido periódico de Schiff (PAS) positivos e negativos quando o tecido era tratado previamente com diastase. A microscopia eletrônica de transmissão mostrou acúmulo anormal de glicogênio livre no citoplasma das células ou envolto por membrana na musculatura esquelética, neurônios do SNC e fígado As amostras processadas de pele, musculatura esquelética e tecido nervoso na histoquímica de lectinas apresentaram reação com as lectinas Griffonia simplicifolia (GS-II) e Concanavalia ensiformes (Con-A). Uma mutação letal no gene da alfa glicosidase ácida, causadora da glicogenose generalizada em bovinos da raça Brahman, a 1057∆TA, foi detectada pela técnica de reação em cadeia de polimerase (PCR) em tecidos dos animais necropsiados. Também foi detectada presença dessa mutação no gene da alfa glicosidase ácida, através da análise de amostra de sangue, de animais que tem parentesco com bezerros que nasceram com a doença. Os achados clínicos, patológicos e ultra-estruturais são semelhante ás descrições de glicogenose tipo II em bovinos da raça Brahman. Até o momento não há casos descritos de glicogenose tipo II em bovinos da raça Brahman no Brasil. O diagnóstico de glicogenose hereditária foi baseado nos dados epidemiológicos, sinais clínicos, achados histológicos e ultra-estruturais, histoquímica de lectinas e pelos resultados de PCR.

Descreve-se uma enfermidade hereditária em bovinos caracterizada por acúmulo lisosssomal de glicogênio em diversos órgãos. A doença foi diagnosticada em um rebanho da raça Brahman com 20 vacas e um touro, mantidos em criação extensiva, no município de Porto Lucena, Rio Grande do Sul, Brasil. A doença afetou 3 de 16 bezerros nascidos (18,75%) no ano 2000, 5 de 19 (26,3%) em 2001 e 2 de 12 (16,6%) em 2002. Os animais afetados, após 1 mês de idade, apresentavam dificuldade de acompanharem a mãe e crescimento retardado, desenvolviam fraqueza e tremores musculares, letargia e perda de condição corporal progressivos. Com o agravamento dos sinais clínicos os animais eram eutanasiados por apresentarem dificuldade em se alimentar ou beber água sem auxílio. Todos os bezerros eram descendentes do mesmo touro. Após a retirada deste animal do plantel e introdução de um touro Nelore não houve o nascimento de animais doentes. Foi realizada necropsia em 3 bezerros doentes e palidez muscular do tronco e membros foi a única alteração macroscópica encontrada. Vacuolização citoplasmática de diversos órgãos foi a principal alteração histológica observada. Os vacúolos citoplasmáticos eram mais evidentes na musculatura esquelética, miocárdio, especialmente nas fibras de Purkinje e neurônios do Sistema Nervoso Central (SNC). Nos tecidos mais afetados, também foi observada grande quantidade de grânulos ácido periódico de Schiff (PAS) positivos e negativos quando o tecido era tratado previamente com diastase. A microscopia eletrônica de transmissão mostrou acúmulo anormal de glicogênio livre no citoplasma das células ou envolto por membrana na musculatura esquelética, neurônios do SNC e fígado As amostras processadas de pele, musculatura esquelética e tecido nervoso na histoquímica de lectinas apresentaram reação com as lectinas Griffonia simplicifolia (GS-II) e Concanavalia ensiformes (Con-A). Uma mutação letal no gene da alfa glicosidase ácida, causadora da glicogenose generalizada em bovinos da raça Brahman, a 1057∆TA, foi detectada pela técnica de reação em cadeia de polimerase (PCR) em tecidos dos animais necropsiados. Também foi detectada presença dessa mutação no gene da alfa glicosidase ácida, através da análise de amostra de sangue, de animais que tem parentesco com bezerros que nasceram com a doença. Os achados clínicos, patológicos e ultra-estruturais são semelhante ás descrições de glicogenose tipo II em bovinos da raça Brahman. Até o momento não há casos descritos de glicogenose tipo II em bovinos da raça Brahman no Brasil. O diagnóstico de glicogenose hereditária foi baseado nos dados epidemiológicos, sinais clínicos, achados histológicos e ultra-estruturais, histoquímica de lectinas e pelos resultados de PCR.

Descreve-se uma enfermidade hereditária em bovinos caracterizada por acúmulo lisosssomal de glicogênio em diversos órgãos. A doença foi diagnosticada em um rebanho da raça Brahman com 20 vacas e um touro, mantidos em criação extensiva, no município de Porto Lucena, Rio Grande do Sul, Brasil. A doença afetou 3 de 16 bezerros nascidos (18,75%) no ano 2000, 5 de 19 (26,3%) em 2001 e 2 de 12 (16,6%) em 2002. Os animais afetados, após 1 mês de idade, apresentavam dificuldade de acompanharem a mãe e crescimento retardado, desenvolviam fraqueza e tremores musculares, letargia e perda de condição corporal progressivos. Com o agravamento dos sinais clínicos os animais eram eutanasiados por apresentarem dificuldade em se alimentar ou beber água sem auxílio. Todos os bezerros eram descendentes do mesmo touro. Após a retirada deste animal do plantel e introdução de um touro Nelore não houve o nascimento de animais doentes. Foi realizada necropsia em 3 bezerros doentes e palidez muscular do tronco e membros foi a única alteração macroscópica encontrada. Vacuolização citoplasmática de diversos órgãos foi a principal alteração histológica observada. Os vacúolos citoplasmáticos eram mais evidentes na musculatura esquelética, miocárdio, especialmente nas fibras de Purkinje e neurônios do Sistema Nervoso Central (SNC). Nos tecidos mais afetados, também foi observada grande quantidade de grânulos ácido periódico de Schiff (PAS) positivos e negativos quando o tecido era tratado previamente com diastase. A microscopia eletrônica de transmissão mostrou acúmulo anormal de glicogênio livre no citoplasma das células ou envolto por membrana na musculatura esquelética, neurônios do SNC e fígado As amostras processadas de pele, musculatura esquelética e tecido nervoso na histoquímica de lectinas apresentaram reação com as lectinas Griffonia simplicifolia (GS-II) e Concanavalia ensiformes (Con-A). Uma mutação letal no gene da alfa glicosidase ácida, causadora da glicogenose generalizada em bovinos da raça Brahman, a 1057∆TA, foi detectada pela técnica de reação em cadeia de polimerase (PCR) em tecidos dos animais necropsiados. Também foi detectada presença dessa mutação no gene da alfa glicosidase ácida, através da análise de amostra de sangue, de animais que tem parentesco com bezerros que nasceram com a doença. Os achados clínicos, patológicos e ultra-estruturais são semelhante ás descrições de glicogenose tipo II em bovinos da raça Brahman. Até o momento não há casos descritos de glicogenose tipo II em bovinos da raça Brahman no Brasil. O diagnóstico de glicogenose hereditária foi baseado nos dados epidemiológicos, sinais clínicos, achados histológicos e ultra-estruturais, histoquímica de lectinas e pelos resultados de PCR.

Orientador: José Paes de Oliveira Filho / Resumo: A doença de acúmulo de glicogênio tipo II (GSD-II) e a síndrome miastênica congênita (CMS) são enfermidades autossômicas recessivas importantes no gado Brahman. Nenhum estudo avaliou previamente a prevalência de mutações responsáveis pelo GSD II (E7, c.1057_1058delTA e E13, c.1783C> T) ou CMS (CHRNE, c.470del20) nos bovinos Brahman brasileiro. O objetivo deste estudo foi investigar a presença dessas mutações em 276 amostras de bulbos pilosos de bovinos PO brasileiros e em 35 amostras de sêmen de touros da raça Brahman, rotineiramente utilizadas em programas de melhoramento genético no Brasil. Dos 276 bovinos Brahman testados, 7,3% foram identificados como heterozigotos para E7. Enquanto, todos os bovinos Brahman estudados eram wild-type para E13. Para as amostras de sêmen foi identificado 8,6% (3/35) heterozigotos para a E7 e para a E13 nenhum animal foi identificado. A mutação CHRNE, 0,73% das amostras de bulbo piloso são heterozigotos, enquanto para as amostras de sêmen, nenhum animal foi considerado heterozigoto. Este resultado indica que as mutações E7 e CHRNE estão presentes no rebanho Brahman brasileiro, e medidas de controle devem ser adotadas para evitar um aumento na incidência de GSD-II e CMS no gado Brahman no Brasil. / Abstract: Glycogen storage disease type II (GSD-II) and congenital myasthenic syndrome (CMS) are important autosomal recessive disorders in Brahman cattle. No study has previously evaluated the prevalence of mutations responsible for GSD II (E7, c.1057_1058delTA; and E13, c.1783C>T) or CMS (CHRNE, c.470del20) in Brazilian Brahman cattle. The objective of this study was to investigate the presence of these mutations in 276 hair roots from purebred Brazilian Brahman cattle and in 35 semen samples from purebred Brahman bulls that were routinely used in breeding programmes in Brazil. Of the 276 Brahman cattle tested, 7.3% were identified as heterozygous for E7. All Brahman cattle studied were homozygous for the wild-type E13 allele. The E7 mutations was identified as heterozygous in 8.6% (3/35) of the commercial semen samples, whereas the E13 mutations was not identified. The CHRNE mutation was identified as heterozygous in 0.73% of the hair root samples, but this mutation was not present in any semen sample assessed. In summary, the E7 and CHRNE mutations are present in the Brazilian Brahman herd, and control measures should be adopted to prevent an increase in the incidence of GSD-II and CMS in Brahman cattle in Brazil. / Mestre

Submitted by Anelize de Souza Trecenti (anelize.ast@gmail.com) on 2017-11-28T13:57:19Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Anelize de Souza Trecenti.pdf: 742493 bytes, checksum: 1cc7f3125a676db3f05ac0229913179b (MD5) / Submitted by Anelize de Souza Trecenti (anelize.ast@gmail.com) on 2017-11-28T14:22:45Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Anelize de Souza Trecenti.pdf: 742493 bytes, checksum: 1cc7f3125a676db3f05ac0229913179b (MD5) / Submitted by Anelize de Souza Trecenti (anelize.ast@gmail.com) on 2017-11-28T14:31:57Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Anelize de Souza Trecenti.pdf: 742493 bytes, checksum: 1cc7f3125a676db3f05ac0229913179b (MD5) / Submitted by Anelize de Souza Trecenti (anelize.ast@gmail.com) on 2017-11-28T14:37:46Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Anelize de Souza Trecenti.pdf: 742493 bytes, checksum: 1cc7f3125a676db3f05ac0229913179b (MD5) / Approved for entry into archive by ROSANGELA APARECIDA LOBO null (rosangelalobo@btu.unesp.br) on 2017-11-28T16:31:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 trecenti_as_me_bot.pdf: 742493 bytes, checksum: 1cc7f3125a676db3f05ac0229913179b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-28T16:31:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 trecenti_as_me_bot.pdf: 742493 bytes, checksum: 1cc7f3125a676db3f05ac0229913179b (MD5) Previous issue date: 2017-11-01 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A doença de acúmulo de glicogênio tipo II (GSD-II) e a síndrome miastênica congênita (CMS) são enfermidades autossômicas recessivas importantes no gado Brahman. Nenhum estudo avaliou previamente a prevalência de mutações responsáveis pelo GSD II (E7, c.1057_1058delTA e E13, c.1783C> T) ou CMS (CHRNE, c.470del20) nos bovinos Brahman brasileiro. O objetivo deste estudo foi investigar a presença dessas mutações em 276 amostras de bulbos pilosos de bovinos PO brasileiros e em 35 amostras de sêmen de touros da raça Brahman, rotineiramente utilizadas em programas de melhoramento genético no Brasil. Dos 276 bovinos Brahman testados, 7,3% foram identificados como heterozigotos para E7. Enquanto, todos os bovinos Brahman estudados eram wild-type para E13. Para as amostras de sêmen foi identificado 8,6% (3/35) heterozigotos para a E7 e para a E13 nenhum animal foi identificado. A mutação CHRNE, 0,73% das amostras de bulbo piloso são heterozigotos, enquanto para as amostras de sêmen, nenhum animal foi considerado heterozigoto. Este resultado indica que as mutações E7 e CHRNE estão presentes no rebanho Brahman brasileiro, e medidas de controle devem ser adotadas para evitar um aumento na incidência de GSD-II e CMS no gado Brahman no Brasil. / Glycogen storage disease type II (GSD-II) and congenital myasthenic syndrome (CMS) are important autosomal recessive disorders in Brahman cattle. No study has previously evaluated the prevalence of mutations responsible for GSD II (E7, c.1057_1058delTA; and E13, c.1783C>T) or CMS (CHRNE, c.470del20) in Brazilian Brahman cattle. The objective of this study was to investigate the presence of these mutations in 276 hair roots from purebred Brazilian Brahman cattle and in 35 semen samples from purebred Brahman bulls that were routinely used in breeding programmes in Brazil. Of the 276 Brahman cattle tested, 7.3% were identified as heterozygous for E7. All Brahman cattle studied were homozygous for the wild-type E13 allele. The E7 mutations was identified as heterozygous in 8.6% (3/35) of the commercial semen samples, whereas the E13 mutations was not identified. The CHRNE mutation was identified as heterozygous in 0.73% of the hair root samples, but this mutation was not present in any semen sample assessed. In summary, the E7 and CHRNE mutations are present in the Brazilian Brahman herd, and control measures should be adopted to prevent an increase in the incidence of GSD-II and CMS in Brahman cattle in Brazil. / 432/2014