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Prospecção de genes regulatórios e estruturais expressos em botão floral do algodoeiro (Gossypium hirsutum)

PINHEIRO, Morganna Pollynne Nóbrega 18 February 2011 (has links)
Submitted by (ana.araujo@ufrpe.br) on 2017-02-21T13:15:52Z No. of bitstreams: 1 Morganna Pollynne Nobrega Pinheiro.pdf: 878308 bytes, checksum: a4236d2ac8451c4536fac545f2b19b94 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-21T13:15:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Morganna Pollynne Nobrega Pinheiro.pdf: 878308 bytes, checksum: a4236d2ac8451c4536fac545f2b19b94 (MD5) Previous issue date: 2011-02-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The cotton crop is present in several sectors, from agriculture to the industry, generating about 70% of employment to level of primary production, putting the cotton as a major international commodities. The Brazil has been increasing in terms of production, currently the fifth largest world producer and exporter quarter. Despite this, the management of the crop is very high and the main costs for machinery and to control pests and diseases. With the advent of the current practices of modern biotechnology, biological strategies for the control of pests and diseases have been used, including the use of plants genetically modified to contain genes that defend these evils. These genes, often regulated by constitutive expression promoters provide protection throughout the plant, although the levels are different in appearance tissue. In this case, the use of tissue-specific promoters to drive the sequence codante allows more direct action to protect and lowest power plant to promote target protein. The cotton crop is vulnerable to various pests that affect the reproductive structures, especially lepidopters and coleopters. With a view to ascertaining genes expressed in flower buds to subsequently use them in the area of trangenics, a subtractive cDNA library from flower buds built.We generated 768 sequences, having been formed 168 clusters with 126 contigs and 42 singlets. The in silico analysis were performed against the database of cotton (CottonDB) and Bank of Arapidopisis thaliana (TAIR) and many genes have been identified. From this analysis we selected six genes related to the development of eggs, fibers, pollen tube and pistil (ANTIFIB010, ASH, OVU, FIB010, FIBEARLY and GLUCANASE) to studies of semiquantitative RT-PCR. The results showed that the selected genes are expressed in all tissues studied (button, stem, leaf and root), however we could observe a higher level of expression in flower buds. / A cultura do algodão está presente em vários setores, desde o agrícola até o industrial, gerando cerca de 70% de toda mão-de-obra em nível de produção primária. Isso coloca o algodão como uma das principais commodities internacionais. O Brasil vem se destacando no âmbito da produção, sendo atualmente o quinto maior produtor mundial e o quarto exportador. A despeito disso, o manejo da lavoura é muito elevado sendo os principais custos destinados com maquinários e controle de pragas e doenças. Com o advento das práticas atuais da biotecnologia moderna, estratégias biológicas visando o controle de pragas e doenças vêm sendo utilizadas, dentre elas o uso de plantas geneticamente modificadas expressando genes que a defendem desses males. Tais genes, frequentemente regulados por promotores de expressão constitutiva oferecem proteção em toda a planta, embora os níveis sejam diferenciados no aspecto tissular. Nesse caso, o uso de promotores tecido-específico para guiar a sequência codante possibilita ação mais direta de proteção e menor gasto de energia da planta para promover a proteína alvo. A lavoura do algodoeiro é vulnerável a várias pragas que incidem nas estruturas reprodutivas, especialmente lepidópteros e coleópteros. Com a finalidade de conhecer genes expressos nos botões florais, a fim de, posteriormente, utilizá-los na área de transgenia, uma biblioteca subtrativa de cDNA de botão floral construída. Foram geradas 768 sequências, tendo sido formado 168 agrupamentos com 126 singlets e 42 contigs. As análises in silico foram realizadas contra o banco de dados do algodão (CottonDB) e o banco de Arapidopisis thaliana (TAIR) e muitos genes foram identificados. A partir dessas análises foram selecionados seis genes relacionados ao desenvolvimento de óvulos, fibras, tubo polínico e pistilo (ANTIFIB010, ASH, OVU, FIB010, FIBEARLY e GLUCANASE) para estudos de RT-PCR semiquantitativo. Os resultados mostraram que os genes selecionados são expressos nos tecidos estudados (botão, haste, folha e raiz), no entanto pôde-se observar um maior nível de expressão nos botões florais.

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