Four successive groups of four calves each (~ 4 mo old) were individually penned and observed during a 14 d trial period for choice of concentrate. Prior calf diets contained soybean meal (SBM) (for two groups and distillers grains in place of SBM for two groups. Concentrates contained approximately equal amounts of corn with either SBM, peanut meal (PNM), fish meal (FSM), or corn gluten meal (CGM). Each day of four trials, .45 kg of each concentrate was randomly assigned to one of four equal feed box sections. Calf feeding position was recorded every 30 sec for no more than 50 min or until calves stopped eating. In addition, 1.36 kg of first cutting orchardgrass hay was offered twice per day. Measurements of amount of each feed consumed, order of consumption and length of time spent eating each feed were analyzed statistically to determine preference. Overall preference was for SBM, closely followed by PNM, both over FSM and CGM, with the l preference status of FSM showing the most change over time by decreasing throughout the trial periods. Neither section in which feed was offered nor previous experience with SBM significantly influenced preference. In addition, twenty calves ranging in age from 4 mo to 7 mo were divided and housed in four groups of five and observed during a 30 d trial period for acceptability of the protein feeds tested for preference. Acceptability, measured subjectively as length of time required by calves to eat each feed, was greatest for SBM, closely followed by PNM and CGM, and least for FSM. Analysis of calf weight gain showed no differences between feeds. / Master of Science

Organic conducting polymers are essential for the development of various electronic devices, including field-effect transistors, light-emitting diodes, solar cells, and thermoelectric devices. Understanding the charge transport mechanisms within these materials, particularly the roles of polarons and bipolarons as charge carriers, is crucial. Despite the recognized importance of these carriers, there are ongoing debates regarding the interpretation of their mid-IR absorption spectral signatures in the 0.3-0.7 eV range. This is mainly due to challenges in applying the conventional mid-gap state model, especially in the context of doped P3HT (poly(3-hexylthiophene)) films. The conventional model predicts a blueshift for the mid-IR P1 band of bipolarons compared to polarons, yet recent experiments reveal both blueshifted and redshifted bands, at elevated oxidation levels, leading to confusion about the true mid-IR spectral hallmark of spinless singlet bipolarons. This thesis aims to resolve these inconsistencies by proposing a Holstein-style model for singlet bipolarons in π-conjugated polymers with nondegenerate ground states. The model incorporates hole hopping, electron−vibration coupling involving the prominent aromatic-quinoidal mode, and Coulombic interactions between (hole) polarons and between polarons and dopant anions. In contrast to the conventional interpretation where bipolaron formation results from self-trapping, our findings indicate that it is primarily driven by attractive electrostatic interactions with dopant anions. Without these anions, two holes would not pair to form singlet bipolarons. More importantly, our results indicate that the observed blueshift at lower oxidation levels signifies the increased localization of Coulombically interacting polarons, whereas at higher oxidation levels, the simultaneous emergence of both redshifted and blueshifted bands is indeed the spectral signature of spinless singlet bipolarons formation. Furthermore, we find that the binding energy of bipolarons in π-stacks of P3HT chains is significantly higher, nearly threefold, than in a single chain, highlighting the profound influence of long-range order and chain stacking on bipolarons formation. This work contributes to resolving the theoretical ambiguities surrounding charge carrier dynamics in organic conjugated polymers and enhances our understanding of their optoelectronic properties. / Chemistry

Eight mature Holstein and Jersey cows beginning their third or later lactation were used throughout this study to evaluate various aspects of the lactation cycle. The lactation (control) diet consisted of 28.8% corn silage, 22.4% alfalfa haylage, and 48.8% concentrate dry matter. Breeds responded differently to the stress of calving. Jerseys had higher plasma somatotropin on day after calving, but Holsteins had higher glucose on day of and day after calving. Plasma parathyroid hormone did not differ between breeds, but Jerseys had higher 1,25-dihydroxyvitamin D₃ than Holsteins on both days after calving. Plasma total calcium and ionized calcium concentrations were lower for Jerseys on both days. Holsteins and Jerseys had similar concentrations of hormones and calcium at 4 and 8 wk. Ionized calcium as a percent of total calcium was elevated at calving, as compared to other times in the lactation cycle, in both breeds. From 9 to 21 wk, 4 of 8 Holsteins and 4 of 8 Jerseys were fed a diet supplemented with tallow. Holsteins fed tallow had lower somatotropin than Holsteins fed control diet at 14 and 18 wk. Plasma glucose, parathyroid hormone, and 1,25-dihydroxyvitamin D₃ were similar between tallow- and control-fed cows in both breeds. Plasma total calcium and ionized calcium were higher at 20 wk for Holsteins and Jerseys fed tallow. Dry matter intake was not influenced by diet in either breed. However, Holsteins, but not Jerseys, fed tallow produced more milk and higher body weights than Holsteins fed the control diet. Balance trials results indicated dietary tallow addition increased energy intake, energy digestibility, and metabolizable energy, but it decreased partial efficiency of metabolizable energy utilization for lactation. Although digestibility of calcium and magnesium was unchanged, tallow-fed cows were in greater positive calcium and magnesium balance than control-fed cows. Stage of lactation had little effect on specific gravity, shear stress, percent mineral, and histological measurements of biopsied rib samples. However, Jersey rib had higher specific gravity than Holstein rib. All cows had similar bone histological features throughout lactation. / Ph. D.

Two data sets of first-parity classification records were analyzed to examine heterogeneity of variances for conformation in the U. S. Holstein population. Data set I included records for final score and linear descriptive traits on cows scored from 1983 through 1986. Results indicated a strong negative correlation (r = -.59) between within-herd standard deviation for final score and herd-mean final score. Regression analysis suggested a curvilinear decrease (concave up) in within-herd standard deviation for final score with increasing herd-mean final score. Within-herd standard deviations for linear descriptive traits demonstrated a linear decline with increases in herd-mean final score. Daughter contemporary deviation for final score was regressed on her sire’s Predicted Difference type within 25 mean/standard deviation subclasses. Response to selection was greatest in high-mean/variance herds and least in low-mean/variance herds. Restricted maximum likelihood estimates of sire and error variance were approximated within each of 5 herd-mean subclasses of the data. Regressions revealed environmental variance for final score decreased curvilinearly (concave up) with increasing herd-mean final score. Genetic variance declined linearly. Heritability demonstrated no significant trend. For most linear traits, environmental variance decreased linearly with increasing herd-mean final score. Linear decreases in genetic variance were noted for foot angle, udder depth and rump angle, Heritability had positive trends for body depth, angularity, rear udder height, udder support, and teat placement. Data set II included first-parity final scores on cows classified from 1967 to 1986. Relationships estimated between herd mean and within-herd variance for final score on recent data were confirmed. Positive trends over time were noted for: within-herd standard deviation for final score, the antagonistic relationship between herd mean and within-herd variance, the antagonistic relationship between average Predicted Difference type and within-herd variance, and average herd-mean Predicted Difference type. Results indicate selection for final score was occurring in the population. Differences in within-herd selection differentials accounted for 24% of the differences in within-herd variance for final score. / Ph. D.

L’objectif de ce projet de recherche était de déterminer les effets d’une supplémentation de probiotiques du genre Bacillus sur les performances de production de vaches de race holstein en mi-lactation et sur le profil en acides gras de leur lait. Pour ce faire, six vaches multipares porteuses d’une canule ruminale ont été utilisées selon un dispositif en chassé croisé répliqué et randomisé. Les vaches ont ainsi reçu soit 200 g/j de poudre de lactosérum comme traitement témoin ou 200 g/j de BioPlus 2B (Chr Hansen, Milwaukee, WI), un probiotique commercial de Bacillus subtilis et de Bacillus licheniformis, représentant un apport quotidien de 6,4 × 10¹¹ UFC et utilisant la poudre de lactosérum comme diluant. La production laitière, la composition du lait et son profil en acides gras, les paramètres de fermentation ruminale et le microbiote ruminal ont été évalués. Les traitements n’ont pas affecté les performances laitières. L’utilisation du probiotique a cependant augmenté la concentration relative d’anteiso 13:0 et d’anteiso 15:0 et tendait à augmenter la concentration totale d’acides gras à chaîne ramifiée dans les matières grasses du lait lorsque comparé au traitement témoin. Les traitements n’ont pas modifié le pH, l’azote ammoniacal ou les concentrations en acétate, propionate et butyrate du rumen. Cependant,le probiotique a augmenté la concentration ruminale d’isovalérate et tendait à augmenter celle de l’isobutyrate. Cette expérience a permis d’observer la sensibilité du profil en acides gras du lait face aux modifications du microbiote ruminal. Les bactéries probiotiques du genre Bacillus pourraient donc être utilisées dans un protocole de maximisation des acides gras à chaîne ramifiée du lait pour permettre une augmentation du niveau de ces acides gras dans les produits laitiers. / The aim of the study was to determine the effect of a Bacillus-based direct-fed microbial on dairy performance of mid-lactating Holstein dairy cows and on their milk fatty acid composition. To this end, six multiparous cows fitted with a rumen cannula were used in a randomized replicated crossover design. Cows received 200 g/d of either whey powder, as a control, or BioPlus 2B (Chr Hansen, Milwaukee, WI), a commercial direct-fed microbial providing Bacillus subtilis and Bacillus licheniformis, representing a daily dose of 6.4 ×10¹¹ cfu, and using whey powder as a carrier. Milk production, composition and fatty acid profile, as well as ruminal parameters and microbiota were evaluated. Bacillus concentrationin the rumen increased with the addition of the direct-fed microbial supplement. Treatmentdid not affect ruminal pH, NH3-N and concentrations of acetate, propionate, and butyrate.However, direct-fed Bacillus increased ruminal concentration of isovalerate and tended to increase the concentration of isobutyrate. Treatments did not affect milk performance. The direct-fed Bacillus increased the relative concentration of anteiso 13:0 and anteiso 15:0 in milk fat, and tended to increase total concentration of branched-chain fatty acids as compared with control. This trial indicates that milk fatty acid composition is sensitive to ruminal microbiota modifications. Direct-fed Bacillus could be used as part of a standard protocol aiming to produce milk enriched in branched-chain fatty acids.

L'objectif du présent mémoire était de comparer, en situation commerciale, le comportement de génisses laitières Holstein nourries selon la recommandation canadienne (20 % du poids à la naissance) et ad libitum au pic de la consommation lactée, pendant le sevrage et après le sevrage. Pour ce faire, 114 génisses de deux fermes laitières commerciales ont été réparties aléatoirement entre les régimes d'alimentation lactée et étaient logées en groupe avec un distributeur automatique de lactoremplaceur du 7ième au 76ième jour de vie (sevrage). Des accéléromètres ont été utilisés pour déterminer le temps passé couché, la durée des épisodes passés couchés et la fréquence des épisodes passés couchés. Des observations comportementales directes par un observateur en continu (tétée entre veaux, veau qui déplace un autre veau à la louve) et en discontinu (comportement alimentaire, d'abreuvement en eau et de couchée) ont été réalisées pendant deux fois une heure dans chacune des trois périodes de consommation visées par l'étude. Indépendamment du régime lacté, le temps passé couché était plus élevé au pic de la consommation lactée alors que la durée des épisodes passés couchés variait en fonction de la période et du traitement lacté. La fréquence des épisodes passés couchés diminuait en post-sevrage et elle était plus élevée pour les animaux du traitement ad libitum que ceux du traitement suivant la recommandation canadienne au pic de la consommation. Les comportements d'alimentation et d'abreuvement étaient plus fréquent en post-sevrage alors que le comportement de couchée était le plus élevé en présevrage, indépendamment du traitement lacté. Il y avait une tendance à plus de tétée entre veaux en post-sevrage pour les veaux nourris en ad libitum. Cependant, pour les deux traitements, les nombres moyens d'évènements de tétée entre veaux et de déplacement d'un veau par un autre étaient dans des plages considérés acceptables. Malgré les différences observées, les deux traitements ont été adéquats en ce qui a trait aux comportements des veaux. / The objective of this study was to compare, on commercial farms, the behaviour of Holstein dairy calves fed milk replacer equivalent to the current Canadian recommendation or ad libitum at peak milk replacer intake, during the weaning period and after weaning. To do so, 114 heifers from two commercial dairy farms were randomly assigned to the two milk replacer feeding regimes and were group-housed, fed with an automatic milk replacer from day 7 to day 76 of age (weaning). Accelerometers were used to determine lying time, lying bouts, and bouts duration. Direct visual behavioural observations by an observer (feeding behaviour, drinking behaviour, and lying behaviour) were also assessed discontinuously while redirect behaviour (displacement of one calf by another at the automated milk feeder, and cross-suckling) were observed continuously for two one-hour periods of live observations for each of the three selected periods. Daily lying time increased at the peak of milk replacer intake relative to the other observational periods. Mean bout duration varied between periods and treatments. Lying bouts were more frequent after weaning and under the ad libitum treatment during peak milk replacer intake. Feeding and drinking behaviours were more frequent in the post-weaning period while lying time was higher at the peak milk replacer intake period. There was a tendency for more suckling between calves at postweaning when calves were fed ad libitum. Overall, all behavioral observations remained acceptable for both treatments. Therefore, despite the difference observed, both treatments appeared to be adequate in terms of calf behaviour

Au cours des dernières années, la production laitière a été en croissance constante en raison de plusieurs facteurs tels que l’utilisation d’individus plus performants. L’augmentation du nombre d’enregistrements de vaches de la race Jersey confirme l’intérêt économique des producteurs pour cette race en raison de la production élevée de protéines et de gras du lait par rapport aux autres races. Cependant, les embryons de la race Jersey ont montré des difficultés dans le processus de cryopréservation lequel peut aider à une commercialisation massive de matériel génétique de cette race. Il a été observé que la race Jersey présente un faible taux de gestation lors du transfert des embryons après la cryopréservation en comparaison aux embryons de la race Holstein. Nous proposons que cette différence entre les deux races bovines soit due à des caractéristiques spécifiques de la race au niveau du phénotype et du génome. Dans un premier temps, les résultats de cette étude ont mis en évidence des différences au niveau du phénotype et du profil lipidique et génomique de l’embryon Jersey. Celui-ci est caractérisé par un contenu de lipides associé à une faible fonction mitochondriale laquelle déterminera le faible succès à la cryopréservation. Par la suite, nous avons évalué au niveau du phénotype et de la génomique, l’utilisation de la L-carnitine dans le milieu de culture in vitro afin de compenser cette caractéristique des embryons de la race Jersey. Cette étude sur la supplémentation de L-carnitine a permis d'identifier une faible réponse chez les embryons Jersey qui est expliqué par le faible effet de la L-carnitine sur l’activité mitochondriale. Afin de définir l’impact de la fonction mitochondriale sur la viabilité de l’embryon lors de nos études, nous avons mis au point une méthode pour compenser la dysfonction mitochondriale sur le développement embryonnaire chez le bovin. Enfin, l’application de la vitamine K2 dans le milieu de culture in vitro montre un impact positif sur la fonction mitochondriale qui a mené à des changements phénotypiques et génomiques chez les embryons bovins. En conclusion, ce projet a permis de caractériser et d’identifier la race comme un facteur qui limite la cryopréservation des embryons et peut influencer sur le métabolisme embryonnaire au niveau des mitochondries. La fonction mitochondriale est une caractéristique importante sur le développement embryonnaire bovin qui peut ouvrir sur des perspectives d’amélioration de la viabilité embryonnaire. / For the past decades, milk production has been increasing due to several factors such as the use of high genetic merit individuals. In this regard, Jersey cows have been of interest for the producers because of high protein and fat indexes in their milk compared to others breeds. However, there are some challenges associated with Jersey particularly poor results using embryo cryopreservation which could help to massively commercialize the genetic material of this breed. It was observed that the Jersey breed have low pregnancy rates following embryo transfer of cryopreserved Jersey embryos compared to the Holstein breed. Here, we hypothesised that those differences between these two breeds in embryo cryopreservation are due to specific phenotypic and genotypic characteristics at the embryo level. Initially, the results of this study showed differences on the phenotype, lipid profile and genomic differences of Jersey embryo characterized by the higher lipid droplets content associated with low mitochondrial function which will determine the low success with cryopreservation. Subsequently, we assessed the phenotype and genotype of embryos using L-carnitine supplementation in the in vitro embryo culture medium in order to compensate those characteristics in Jersey embryos. The results of this study revealed moderate beneficial effects of L-carnitine supplementation in Jersey embryos through low effect of L-carnitine on mitochondrial activity. To define the impact of mitochondrial function on the embryo viability during our study, we developed a method to compensate the mitochondrial dysfunction during early embryo development in bovine model. To do that, Vitamin K2 supplementation in the in vitro embryo culture medium was applied which showed a positive effect on the mitochondrial function leading to satisfactory phenotypic and genotypic changes in the embryos. In conclusion, this study resulted in identification and characterization of the cattle breeds effects as a critical factor on cryopreservation performance and embryonic metabolism of the mitochondria. Our results emphasized that mitochondrial function is an important feature of embryonic development in cattle, which can provide opportunities to improve embryonic viability.

Ce mémoire porte sur la configuration des stalles et le confort des vaches. Cent troupeaux laitiers ont été visités au Québec (n=60) et en Ontario (n=40). La configuration des stalles, les dimensions corporelles, les blessures, la boiterie, la propreté et le temps de repos ont été mesurés pour 40 vaches Holstein en lactation. Plus de 50 % des vaches étaient logées dans une stalle trop petite, 79 % des vaches avaient au moins une blessure et 25 % étaient boiteuses, mais seulement 15 % étaient sales. Outre la hauteur de la barre d’attache, lorsque les dimensions des stalles étaient augmentées pour se rapprocher des recommandations, les risques de blessures et de boiteries diminuaient et le temps de repos ainsi que le nombre de changements de position debout/couchée augmentaient. Toutefois, une stalle plus grande augmentait les chances d’avoir des vaches sales. Ces résultats suggèrent, entre autres, qu’une barre d’attache bien positionnée et une chaine suffisamment longue améliorent le confort des vaches. / This thesis focuses on tie-stall configuration and cow comfort. One hundred dairy herds were visited in Quebec, (n = 60) and in Ontario (n = 40). Stall configuration, body dimensions, injuries, lameness, cleanliness and lying time were measured for 40 lactating Holstein cows. Over than 50% of the cows were in a stall too small, 79% of cows had at least one injury and 25% were lamed, but only 15% were dirty. Except for tie-rail height, every time the size of the stalls was increased closer to the recommendations, the risk of injuries and lameness decreased, and the lying time and the number of lying bouts increased. However, a larger stall size increased the chances of the cows to be dirty. These results suggest, among other, that a tie-rail forward position and a chain length that meet current recommendations would improve cow welfare.

Avec l'arrivée des techniques de reproduction assistée et de la génomique, le progrès génétique chez les bovins laitiers est plus rapide que jamais, favorisant maintenant l'utilisation d'animaux de plus en plus jeunes pour la reproduction. Cette situation aurait possiblement un impact sur la qualité des embryons, affectant potentiellement la génisse de la génération suivante. Ce projet vise à documenter l'effet de l'âge sur la qualité de l'embryon et, en l'occurence, à identifier des pistes pour corriger la situation. Dix jeunes femelles Holstein ont subi trois cycles de stimulation ovarienne (8, 11, 14 mois). Les ovules ont ensuite été fécondés in vitro (semence d'un même taureau adulte), générant trois lots d’embryons par animal. Grâce à la plateforme EmbryoGENE, il fut possible de mesurer l'expression génique ainsi que l'état de méthylation de l'ADN au stade blastocyste. En premier lieu, l'analyse transcriptomique des contrastes selon l'âge (8 vs 14 mois et 11 vs 14 mois) a permis de dénombrer 242 gènes différentiellement exprimés pour le premier contraste et 296 pour le deuxième. Parmi les voies géniques affectées par l'âge, on retrouve notamment les voies mTOR et PPAR, ainsi que la voie de réponse au stress oxydatif médiée par NRF2. Pour sa part, l'analyse épigénétique a permis d'identifier 5787 régions différentiellement méthylées pour le premier contraste et 3658 pour le deuxième. Il est possible d'observer une tendance à l'hyperméthylation chez les embryons obtenus à partir de donneuses de 8 mois, alors qu'une hypométhylation du génome plus marquée est notée chez les embryons provenant des donneuses de 11 mois. Le premier constat est que les embryons sont marginalement affectés par l'âge de la donneuse et que la qualité s’avère très bonne dès 8 mois. Les résultats suggèrent une causemétabolique pour expliquer les différences observées, trahissant un impact plus grand des conditions in vitrosur les embryons produits par les plus jeunes donneuses.

Le développement et la survie de l’embryon dépendent des nutriments fournis par les sécrétions utérines. Les objectifs de cette étude étaient de déterminer l’effet de la surovulation (SOV) sur la bactériologie et cytologie utérine et sur les paramètres biochimiques utérin et sérique et leurs effets sur le nombre d’embryons transférables (ET). Deux groupes de vaches Holstein (groupe I, non lactante, n=7 et groupe II, lactante, n=28) ont été respectivement induites en chaleur ou surovulées et ensuite inséminées. Au jour 7 du cycle œstral (J7) et lors du jour de la récolte (JR), un prélèvement individuel de sang et de liquide de lavage utérin a été fait pour l’analyse du statut bactériologique et cytologique de l’utérus et la mesure de la concentration de plusieurs paramètres biochimiques présélectionnés. Les embryons récoltés ont été évalués selon les critères de l’IETS. La SOV a donnée une moyenne de 7.39 ± 6.22 ovocytes/embryons dont 3.32 ± 4.81 ET. Il n’y avait pas de variation significative de la bactériologie et cytologie utérine des deux groupes entre J7 et JR. La concentration sérique de l’urée (P=0.0001), d’E2 (P=0.006); la concentration utérine du Glu (P=0.002), de Ck (p=0.0007), de LDH (P <0.0001), de PT (P=0.004), de P4 (P=0.008), de PGFM (P<0.0001) du groupe I et la concentration sérique de P4 (P<0.0001), de PGFM (P<0.0001); la concentration utérine de LDH (P=0.002), de PGFM (P<0.0001) du groupe II ont été significativement élevées à JR qu’à J7. La concentration utérine et sérique de l’urée (P<0.0001 et P<0.0001), de LDH (P<0.0001 et P=0.008), la concentration sérique de P4 (P=0.0002) et la concentration utérine de PT (P=0.0003) à JR du groupe II étaient différente du groupe I. Il n’y avait pas d’association entre la bactériologie et cytologie utérine et le nombre d’ET. Cependant, le nombre d’ET a été positivement corrélé avec la concentration sérique d’IGF-1 à J7 (r=0.45; P=0.001) et la concentration sérique de P4 à JR (r=0.43; P<0.05) et négativement corrélé avec la concentration utérine et sérique de PGFM à la fois à J7 (r=-0.54; P<0.005 et r=-0.67; P<0.001) et à JR (r=-0.48; P<0.01 et r=-0.57; P<0.002). Ces résultats suggèrent que la SOV induit des changements au niveau sérique et utérin qui affectent le nombre d’ET récoltés. / The developing embryo is dependent on the nutrients provided by the oviduct and the uterine fluid. The objectives of this study were to determine the effect of SOV on uterine bacteriology and cytology, on serum and uterine biochemical parameters and consequently on the number of TE. Non-lactating (n=7) and lactating (n=28) Holstein cows were synchronized for estrus and superovulated respectively and were inseminated twice. Uterine bacteriology and cytology and various uterine and serum biochemical parameters were measured at day 7 of estrus cycle (D7, starting day of the SOV protocol) and at the designated day of embryo recovery (DER). Harvested embryos were evaluated according to IETS’s criteria. Superovulated cows produced an average of 7.39 ± 6.22 ova/embryos of which 3.32 ± 4.81 were TE. There were no significant variations of uterine bacteriology and cytology between D7 and DER within the two groups. Serum urea (P=0.0001), E2 (P=0.006); uterine Glu (P=0.002), Ck (P=0.0007), LDH (P<0.0001), TP (P=0.004), P4 (P=0.008), PGFM (P<0.0001) in group I and serum P4 (P<0.0001), PGFM (P<0.0001); uterine LDH (P=0.002), PGFM (P<0.0001) in group II were significantly higher at DER than at D7. At DER, group I was different to group II’ uterine and serum urea (P<0.0001 and P<0.0001), LDH (P<0.0001 and P=0.008), PGFM (P=0.002 and P=0.009), serum P4 (P=0.0002) and uterine TP (P=0.0003). There was no association between uterine bacteriology and cytology and the number of TE. However, TE was positively correlated with serum IGF-1 at D7 (r=0.45; P=0.001) and P4 at DER (r=0.43; P<0.05) and negatively correlated with both serum and uterine PGFM respectively at D7 (r=-0.54; P<0.005 and r=-0.67; P<0.001) and DER (r=-0.48; P<0.01 and r=-0.57; P<0.002). The present results infer that changes following SOV in both serum and uterine secretion may affect the number of TE.