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ESTABELECIMENTO DE CONDIÇÕES ANALÍTICAS PARA DETERMINAÇÃO DE HORMÔNIOS ESTRÓGENOS EM ÁGUA POTÁVEL DISTRIBUÍDA NA CIDADE DE SÃO LUÍS-MA / ESTABLISHMENT OF ANALYTICAL CONDITIONS FOR DETERMINATION Of THE HORMONE ESTROGEN DISTRIBUTED IN DRINKING WATER CITY OF SÃO LUIS-MAVerbinnen, Raphael Teixeira 28 April 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009-04-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Given the humanity perception of necessity to preserve the environment and the incessant
search for sustainable development, today the preservation of natural water sources is by far
one of the most worrying factors for the preservation of life. Besides the most common
aquatics pollutants, also there is one called emerging pollutants, which in recent decades have
been detected due the technological advances. These involve mainly the organic
micropollutants, which present the endocrine disrupters (ED's) main group. Among the ED's,
the natural and synthetic sex steroids hormones have significant importance because their
daily use in medicine, in the replacement therapy and contraceptive methods, which has
contributed to the continuous release in domestic sewage. There are several consequences of
this effect, including fertility declining, occurrence of various cancers and disorders in the
development and homeostasis of organisms. The domestic and industrial sewage and leaching
from agricultural fields fertilized with sludge from sewage treatment plants (STP's) are the
main sources of contamination. This study allowed the chromatographic separation of the
hormones estriol (E3), 17 β-estradiol (E2), estrone (E1) and 17 α-ethynylestradiol (EE2) in
relatively short duration (16,5 minutes), using the acetonitrile:water (ACN: H2O) mixture as
mobile phase in gradient mode, constant flow of 1 mL min-1, injection volume of 20 μL, λ =
280 nm and temperature of 27 ºC. The method was developed in two laboratories, involving
different instruments. Four procedures and two adsorbents (C18 e OPT) of SPE were tested.
The sample preparation method, including dechlorination and the SPE procedure with C18
cartridge, resulted in the recovery values within the acceptable limit. The developed method
was validated according to guidelines of the ANVISA`s Guide for Validation, and
bioanalytical methods was adapted for this study. The method was then applied in the analysis
of the natural (17β-estradiol, estrone and estriol) and the synthetic (17α-ethinylestradiol)
hormone in drinking water from the city of São Luís Peaks were not identified for the
substances studied, probably substances concentrations below the limits of detection and
quantification of the method were found. / Diante da percepção do homem sobre a necessidade de se preservar o ambiente e da busca
incessante pelo desenvolvimento sustentável, hoje a proteção das fontes de água natural é de
longe um dos fatores mais preocupantes para a conservação da vida. Além dos poluentes
aquáticos mais comuns, existem também os chamados poluentes emergentes, que nas últimas
décadas vêm sendo detectados em função do aprimoramento de métodos e técnicas de
detecção. Estes envolvem principalmente os micropoluentes orgânicos, que por sua vez
apresentam os desreguladores endócrinos (DEs) como principal grupo. Dentre os DEs, os
hormônios sexuais esteróides, naturais e sintéticos, têm significativa importância, devido ao
seu uso diário na medicina, em terapias de reposição e métodos contraceptivos, o que tem
provocado o contínuo lançamento em esgotos sanitários. Várias são as conseqüências do
efeito destas substâncias, dentre elas: diminuição da fertilidade, ocorrência de cânceres
diversos e perturbações no desenvolvimento e na homeostase de organismos. Os esgotos
sanitários e industriais, além da lixiviação de campos de agricultura adubados com lodo
proveniente de estações de tratamento de esgotos (ETEs) são as principais fontes de
contaminação. Este trabalho possibilitou a separação cromatográfica dos hormônios estriol
(E3), 17 β-estradiol (E2), estrona (E1) e 17 α-etinilestradiol (EE2) em tempo relativamente
curto (16,5 min), utilizando como fase móvel a mistura acetonitrila:água (ACN:H2O), em
modo gradiente, fluxo de 1 mL min-1, λ = 280 nm e temperatura de 27 ºC. O método foi
desenvolvido em dois laboratórios, envolvendo dois instrumentos diferentes. Foram testados 4
procedimentos e 2 adsorventes de extração em fase sólida (C18 e OPT). O método de preparo
da amostra, incluindo a descloração e o procedimento de EFS, com cartucho C18 resultou em
valores de recuperação dentro dos limites considerados adequados. O método desenvolvido
foi validado segundo as orientações do Guia para Validação de Métodos Analíticos e
Bioanalíticos publicado pela ANVISA, tomando-se por base os procedimentos para os
métodos bioanalíticos, os quais foram adaptados para este estudo. O método foi, então,
aplicado na análise dos hormônios naturais (17β-estradiol, estrona e estriol) e o sintético (17α-
etinilestradiol) em água potável distribuída na cidade de São Luís. Para as amostras
analisadas, não foram identificados picos referentes às substâncias de interesse, portanto
pode-se afirmar que estas foram encontradas em concentrações inferiores aos limites de
detecção e de quantificação do método.
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