CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A vitamina A (retinol) à um nutriente essencial necessÃrio em pequenas quantidades para o funcionamento normal do sistema visual, funÃÃo imune e reproduÃÃo. Nosso grupo de pesquisa investigou o efeito de altas doses por via oral em crianÃas com diarrÃia em estudos prospectivos em comunidade em Ãreas endÃmicas no Nordeste do Brasil e encontrou benefÃcios terapÃuticos com a utilizaÃÃo do retinol na reduÃÃo da mÃdia de duraÃÃo da diarrÃia, porÃm nÃo houve diminuiÃÃo da incidÃncia de episÃdios diarrÃicos. Esse estudo explorou o papel da suplementaÃÃo do retinol em linhas de cÃlulas intestinais frente ao dano citotÃxico da Toxina A do C. difficile (TxA). O C. difficile à principal patÃgeno causador da diarrÃia associada ao uso de antibiÃticos e da colite pseudomembranosa. Investigou-se alteraÃÃes da resistÃncia elÃtrica transepitelial (TER) em cÃlulas Caco-2, e nos modelos de proliferaÃÃo, migraÃÃo e morte celular em IEC-6, apÃs a injÃria induzida pela TxA. Os resultados mostraram que a suplementaÃÃo do retinol, principalmente no meio sem glutamina, aumentou a TER, migraÃÃo celular, como tambÃm promoveu uma reduÃÃo significativa da apoptose e necrose, porÃm este efeito nÃo foi visto no modelo de proliferaÃÃo celular. Para estudar a modulaÃÃo do retinol na diminuiÃÃo da TER induzida pela TxA, as cÃlulas foram expostas a TxA (0,1&#956;g/mL) durante 24h. O retinol aumentou a TER (% do valor inIcial) nas concentraÃÃes de 0,1 e 0,3nM Ãs 3h (59,3Â1,3; 69,8Â0,6vs 59,3Â1,3&#937;cm2,respectivamente), e Ãs 4h (36,1Â0,02; 33,5Â1,8 vs 27,3Â0,2&#937;cm2,respectivamente) em relaÃÃo ao controle sem retinol e com TxA. Nesses intervalos de tempo nÃo houve influÃncia da proliferaÃÃo celular nas cÃlulas Caco-2. O retinol aumentou a proliferaÃÃo celular na lesÃo induzida pela TxA (0,1&#956;g/mL) em 14,2; 23,8; 59,8; 8,4; 30,2; 44,1% (0,01; 0,03; 0,1; 1,0; 10; 100nM de retinol, respectivamente), apÃs 24h comparado com controle com TxA. Depois de 12 e 24h de exposiÃÃo a TxA (0,01&#956;g/mL), seguido do arranhÃo na monocamada da cÃlulas IEC-6, a suplementaÃÃo do retinol aumentou significantemente a migraÃÃo nas concentraÃÃes de 0,1-100nM em uma taxa de 30-80% e 60-100%, nas 12h e 24h, respectivamente. O retinol reduziu a apoptose e a necrose induzida pela TxA nas concentraÃÃes de 0,03-100nM, em comparaÃÃo com controle com a TxA. Os resultados sugerem que o retinol exerce um importante papel na reduÃÃo da apoptose, em aumentar a migraÃÃo e proliferaÃÃo e em prevenir a reduÃÃo da TER, na lesÃo pela TxA, sugerindo que a vitamina A à um nutriente essencial na proteÃÃo na barreira funcional epitelial / Vitamin A (retinol) is an essential nutrient that is necessary in small amounts for normal functioning of the visual system, immune function and reproduction. Our group has investigated the effect of oral dosis of vitamin A on the early childhood diarrhea in our prospective community-based studies in high endemic areas in the Northeast of Brazil and has found a benefit of retinol therapy in reducing the mean duration but not the incidence of diarrheal episodes. In this study, we have explored the role of retinol supplementation in intestinal cell lines, following Clostridium difficile toxin A (TxA) cytotoxic challenge. C. difficile is the most common anaerobic pathogen that causes antibiotic-associated diarrhea and pseudomembranous colitis. We have focused on changes in transepithelial electrical resistance (TER) in Caco-2, a more differentiated intestinal cell line, and on models of proliferation, migration and cell death in IEC-6 cells, an undifferentiated crypt cell line, following or not by TxA-induced cell injury. The results showed retinol alone increased the TER, cell migration and proliferation, and also promoved significant reduction of apoptosis and necrosis, however this effect was not observed at the cell proliferation. To study the retinol effect on the TxA-induced loss of TER, cells were exposed during 24h to 0,1&#956;g/mL TxA. Retinol improved TER (% of initial value) at the concentrations of 0,1nM and 0,3nM at 3h (59,3Â1,3; 69,8Â0,6 vs 59,3Â1,3&#937;cm2, respectively), and at 4h (36,1 0,02; 33,5 1,8 vs 27,3Â0,2&#937;cm2, respectively) in relation to the untreated control challenged with TxA. During this time there was no influence of the cell proliferation in the Caco-2 cells. Retinol increased cell proliferation after TxA-induced cell damage (0,1&#956;g/mL) at a rate of 14,2%, 23,8%, 59,8%; 8,4%; 30,2%; 44,1% after 24h (doses of 0,01; 0,03; 0,1; 1,0; 10; 100nM of retinol, respectively), compared to controls only with TxA. After 24h of TxA exposure (0,01&#956;g/ml), following plate scraping, the retinol supplementation improved significantly IEC-6 migration at the concentrations of 0,1-100nM in rate of 30-80% and 60-100%, in 12h and 24h, respectively. Retinol reduced TxA-induced apoptosis and necrosis at the concentration of 0,03: 0,1; 1; 10 and 100nM, p<0.05, in comparison to the control with TxA. These results suggest that retinol has a critical role in reducing apoptosis, improving cell migration and proliferation and preventing the reduction in TER, following TxA challenge, suggesting that vitamin A is an essential nutrient to protect the intestinal epithelial barrier function