Orientador: Jose Francisco Hofling / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-19T08:38:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Verlengia_Rozangela_M.pdf: 3969224 bytes, checksum: e0f965d8c6467d623c5f5304232ca940 (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: Aspectos imunológicos de camundongos portadores do tumor de Ehrlich, linhagens 1-G e 2-S, foram avaliados através do emprego de técnicas de eletroforese. O soro dos animais utilizados nos testes foi colhidos nos períodos de 7 e 13 dias após a inoculação de 2,0 x '10 POT. 6' células tumorais da linhagem 1-G na cavidade peritoneal e da mesma concentração de células das linhagens 1-G ou 2-S no coxim plantar de camundogos. O fenômeno de imunidade concomitante relacionado a esse tipo de tumor foi investigado reinoculando-se os camundongos no coxim plantar esquerdo 12 dias após o implante do tumor primário (coxim plantar direito), com uma concentração de 1,0 x '10 POT. 6' células tumorais das linhagens 1-G ou 2-S. Os resultados da eletroforese em agarose do soro de camundongos inoculados com as células tumorais das linhagens 1-G e 2-S mostraram uma diminuição na concentração de albumina e um aumento nas concentrações das frações de alfa-2 e beta globulina. Usando-se a écnica de gel de poliacrilamida, o perfil eletroforético do soro de camundongos inoculados com células tumorais da linhagem 1-G revelou a ocorrência de proteínas com Rm 0,88 após 7 dias de desenvolvimento do tumor. Soro de animais com 13 dias de desenvolvimento do tumor, mostrou a presença de bandas protéicas com Rm 0,11, 0,12 e 0,31. Com o I desenvolvimento do tumor, uma elevação na concentração de IgG e uma diminuição do omplemento foram observados através da imunodifusão radial, e eletroforese em foguete, respectivamente. O crescimento das células tumorais das linhagens 1-G e 2-S, na forma sólida, demonstrou um desenvolvimento contInuo e dependente do número de células inoculadas. As células tumorais 2-S demonstraram ser mais proliferativas, uma vez que o inóculo de 5,0 x '10 POT. 5' células promoveu o crescimento do tumor em 100% dos camundongos, enquanto que resultados semelhantes somente foram conseguidos após o inóculo de 1,0 x '10 POT. 6' células da linhagem 1-G. As medidas da espessura da pata, revelaram que o desenvolvimento do tumor de Ehrlich, na forma sólida, apresentou um crescimento exponencial inicial, quando as concentrações de 1,0 x '10 POT. 7' e 5,0 x '10 POT. 6' células da linhagem 1-G e 2,5 x '10 POT. 6' e 1,0 x '10 POT. 6' células da linhagem 2-5 foram inoculadas. Concentrações inferiores de células apresentaram um crescimento inicial moderado. Camundongos portadores do tumor de Ehrlich, linhagens 1-G ou 2-S, testados para imunidade concomitante, demonstraram não serem capazes de rejeitar um segundo inóculo das mesmas células doze dias apos o inoculo primário. Com relação ao número de cromossomos, as análises citológicas revelaram que as linhagens 1-G e 2-5 representam diferentes clones das células do tumor de Ehrlich, com um número modal de 62 e 78 cromossomos, respectivamente / Abstract: Immunological aspects of mice bearing Ehrlich's carcinoma, lines 1-G and 2-S, were evaluated by using electrophoresis technics. The serum was collected 7 and 13 days after the inoculation of 2.0 x '10 POT. 6' tumor cells, line 1-G, in the peritoneal cavity and the same concentration of tumor cells, lines 1-G and 2-S, in the footpad. The concomitant immunity phenomenon was investigated by reinoculating 1.0 x '10 POT. 6' of either 1-G or 2-S tumor cells 12 days after the implant of the primary tumor. Electrophoresis in agarose showed that both cell types induced a decrease of albumin and an increase of alpha 2 and beta globulins levels. Using polyacrilamide gel electrophoresis the serum of mice inoculated with tumor cells line 1-G revealed proteins bands with Rm 0.88 at 7 and 13 days of tumor development. Afier 13 days of tumor growth the serum also showed the presence of proteins barids with Rm 0.11, 0.12 and 0.31. The increase of IgG levels with tumor development and a decrease in complement levels were observed in radial immunodiffusion and rocket electrophoresis respectively. The growth of tumor cells, lines 1-G and 2-S, in solid form, was continuous and dose dependent. The 2-S tumor cells were more invasive, since the inoculation of 5.0 x '10 POT. 5' cells promoted 100% of growth, while to achieve similar results with 1-G it was necessary the inoculation of 1.0 x '10 POT. 6', cells. The measurement of the degree of swelling of the footpad, when 1.0 x '10 POT. 7' and 5.0 x '10 POT. 6' cells of 1-G line were inoculated, revealed an exponencial growth in the begining of tumor development. Lower concentrations of cells showed only moderate growth. Mice with Ehrlich's tumor either, from lines 1-G or 2-S, tested for concomitant immunity, did not reject a second inoculum of the same cells 12 days after the first inoculum. The cytological analysis showed that 1-G and 2-S lines represent different clones of Ehrlich's carcinoma, displaying a modal number of 62 and 78 cromosomes respectively / Mestrado / Biologia e Patologia Buco-Dental / Mestre em Odontologia

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-06-09T15:32:09Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 804627 bytes, checksum: c2b8d6549b8b514609e1554d802931a4 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-09T15:32:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 804627 bytes, checksum: c2b8d6549b8b514609e1554d802931a4 (MD5) Previous issue date: 2011-03-01 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / As operárias da formiga Ectatomma tuberculatum (Ectatomminae) apresentam ovários desenvolvidos e produzem ovos que são utilizados na alimentação da cria e da rainha (ovos tróficos). As vitelogeninas são as principais proteínas encontradas nos ovos de insetos, sendo potencial fonte de nutrientes para o embrião e adultos. Em insetos sociais, os níveis de vitelogenina variam entre os indivíduos e influenciam a determinação das castas reprodutivas e operárias, atividades de cuidado com a cria e forrageio, longevidade, manutenção somática e imunidade. Em formigas que produzem ovos tróficos, a vitelogenina é uma das fontes de alimento para larvas e rainhas. Em geral, a síntese de vitelogenina é regulada em nível transcricional principalmente por hormônio juvenil (HJ), mas em operárias de formigas essa relação não está muito bem caracterizada. Os objetivos deste trabalho foram verificar o período de produção de vitelogenina em operárias de E. tuberculatum e o efeito do HJ na síntese dessa proteína. A vitelogenina foi identificada a partir de extratos de ovos de rainhas e operárias por SDS-PAGE. Anticorpos anti-vitelogenina foram obtidos e utilizados para detecção dessa proteína no corpo gorduroso e na hemolinfa de operárias de diferentes idades. Também foi observado o efeito da aplicação de HJ III na síntese de vitelogenina no corpo gorduroso e nos níveis de vitelogenina circulantes na hemolinfa de operárias, através de PCR quantitativo em tempo real e ELISA. As vitelogeninas de E. tuberculatum são constituídas por dois polipeptídios de 31 e 156 kDa. Nos ovos de rainhas, a vitelogenina de 156 kDa é clivada em duas subunidades de 36 e 123 kDa. As análises da hemolinfa de operárias mostraram que a secreção de vitelogenina varia de acordo com a idade, com picos de produção entre os 20 e 60 dias de idade e cessando por volta dos 100 dias. Essa variação mostra uma relação com as diferentes atividades exercidas pelas operárias na colônia, sugerindo que a vitelogenina pode ter uma importante função na manutenção do polietismo etário em E. tuberculatum. As análises também mostraram que aplicação de HJ III reduz a síntese de vitelogenina no corpo gorduroso, assim como reduz os níveis de vitelogenina circulante na hemolinfa. Esses dados mostram que o HJ regula a produção de vitelogenina em operárias, sugerindo que em operárias adultas de E. tuberculatum o hormônio juvenil não tem função de gonadotropina. / Workers of the ant Ectatomma tuberculatum (Ectatomminae) have active ovaries and lay eggs that are eaten by the queen and larvae (trophic eggs). Vitellogenins are the main proteins found in the eggs of insects and are a source of nutrients to embryo and adults. In social insects, the vitellogenin levels vary between the castes and influences the reproductive social status, nursing and foraging activities, longevity, somatic maintenance and immunity. In most of the insects, the vitellogenin synthesis is regulated mainly by juvenile hormone. However, in non-reproductive worker ants this relationship is poorly characterized. The aims of this study were to characterize the period of vitellogenin secretion in workers of E. tuberculatum and to verify the effects of juvenile hormone application in vitellogenin synthesis. The vitellogenin was identified from queen and worker eggs by SDS-PAGE. Anti-vitellogenin antibodies were obtained and used to detect this protein in the fat body and haemolymph of workers at different ages. Also, juvenile hormone III was applied topically in workers and their effect on vitellogenin synthesis in the fat body and vitellogenin levels in the haemolymph were analyzed by quantitative real time PCR and ELISA. Vitellogenin from E. tuberculatum consists of two polypeptides of 31 and 156 kDa. In the eggs of queens, the 156 kDa polypeptide is cleaved into two subunits of 36 and 123 kDa. The analysis of the haemolymph of workers showed that the secretion of vitellogenin varies with age. The secretion is initiated around the fifth day after emergence, with peak production from days 20 to 60, and stops around day 100. The analyses also showed that juvenile hormone down regulates the vitellogenin mRNA expression and protein synthesis in the fat body, and reduces the vitellogenin levels in the haemolymph. Our data showed that vitellogenin may have an important role in maintaining age polyethism and its synthesis is down regulated by juvenile hormone in E. tuberculatum.