Submitted by Cristiane Chim (cristiane.chim@ucpel.edu.br) on 2017-12-19T11:50:51Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Laisa Camerini da Rosa.pdf: 1870844 bytes, checksum: 9e13176b49329435bc52cf8b9cfe0db1 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-19T11:50:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Laisa Camerini da Rosa.pdf: 1870844 bytes, checksum: 9e13176b49329435bc52cf8b9cfe0db1 (MD5) Previous issue date: 2017-12-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES# / #2075167498588264571# / #600 / Tissue engineering typically involves three major components, which are termed tissue engineering pillars: responsive cells (stem cells), scaffolds and signaling molecules (such as proteins and growth factors). Scaffolds are three-dimensional structures that provide cell support and serve as a guide for cell colonization, proliferation and differentiation. In recent years, synthetic and natural polymers have been investigated as biomaterials for a wide range of applications, including tissue regeneration and tissue engineering. However, national biomaterials, for the most varied applications, are not available, leading to dependence on external technology and causing an expanding market to be discredited on the national scene. In this sense, the present study aims to develop and characterize a new injectable scaffold from Gigartina skottsbergii algae found in the Latin American continent, which together with its bioproducts can be used in tissue engineering and cell therapy, with initial application in the medical area. To do so, a gel was synthesized and processed from G. Skottsbergii, which was analyzed and tested as a new scaffold. Thus, the viability and cell adhesion capacity of the scaffold were evaluated using the WST-1 colorimetric assay, and scanning electron microscopy (SEM), against an immortalized mouse embryonic fibroblast (NIH/3T3) cell line. Data evaluation was performed using the two-way ANOVA followed by the Tukey test with a significance level of p <0.05. In this sense, it is possible to observe the three-dimensional structure of the G. skottsbergii algae, as well as the NIH/3T3 cells in this structure. It is observed that the cells are in great quantity and strongly adhered to the algae structure, maintaining an elongated morphology and with extensions. In relation to the evaluation of the three-dimensional structure of the hydrogel from the G. Skottsbergii algae and the morphology of the NIH/3T3 cells seeded on it, large areas can be observed for the cellular adhesion, and laminar and filamentar structures that interconnect are seen, adhered to this structure it is possible to observe NIH/3T3 cells with elongated morphology and extensions. Also, it is observed that there was a greater cell viability in the group containing a 1/4 dilution of the gel from the G. Skottsbergii algae with 5 hours and culture and also with 48 hours of culture. Keywords: carrageenan, injectable hydrogel, Gigartina skottsbergii / A engenharia tecidual envolve tipicamente três componentes principais, os quais são denominados de pilares da engenharia tecidual: células responsivas (ex. células tronco), scaffolds e moléculas sinalizadoras (tais como proteínas e fatores de crescimento). Os scaffolds são estruturas tridimensionais que proporcionam um suporte para as células e servem de guia para a colonização, proliferação e diferenciação celular. Nos últimos anos, polímeros sintéticos e naturais, vêm sendo investigados como biomateriais para ampla gama de aplicações, incluindo regeneração tecidual e engenharia de tecidos. No entanto, biomateriais nacionais, para as mais variadas aplicações, não são disponíveis, levando à dependência de tecnologia externa e fazendo com que um mercado em ampla expansão seja desprestigiado no cenário nacional. Neste sentido, o presente estudo tem por objetivo desenvolver e caracterizar um novo scaffold injetável proveniente da alga rodofícea Gigartina skottsbergii encontrada no continente latino americano, o qual juntamente com os seus bioprodutos possa ser empregado em engenharia tecidual e terapia celular, com aplicação inicial na área médica. Para tanto, foi sintetizado e processado um gel a partir da alga G. Skottsbergii, o qual foi analisado e testado como um novo scaffold. Assim, foi avaliada a viabilidade e capacidade de adesão celular do scaffold, utilizando-se o ensaio colorimétrico de WST-1 e microscopia eletrônica de varredura (MEV), frente a uma linhagem celular imortalizada de fibroblastos embrionários de rato (NIH/3T3). A avaliação dos dados foi realizada utilizando a Análise de Variância (ANOVA) de duas vias seguido pelo teste de Tukey com nível de significância de p<0,05. Neste sentindo, foi possível observar a estrutura tridimensional da alga marinha, assim como o comportamento das células NIH/3T3 frente a esta estrutura. Observa-se que as células encontram-se em grande quantidade e fortemente aderidas a estrutura da alga, mantendo uma morfologia alongada e com prolongamentos. Com relação a avaliação da estrutura tridimensional do hidrogel proveniente da alga G. Skottsbergii e a morfologia das células NIH/3T3 semeadas sobre este, foram ser observadas grandes áreas para a adesão celular, onde são visualizadas estruturas laminares e filamentares que se interconectam, aderido a esta estrutura é possível observar células NIH/3T3 com morfologia alongada e prolongamentos. Alem disso, observou-se que houve uma maior viabilidade celular no grupo que continha uma diluição de 1/4 do gel proveniente da alga G. Skottsbergii com 5 horas e cultivo e com 48 horas de cultivo.

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:32:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6464_1.pdf: 1145875 bytes, checksum: b7c1f3cf01c88de1f3680636ebeb0127 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006 / Faculdade de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / A &#946;-lapachona (C15H14O3, MM 242,3), de nome químico 3,4-dihidro-2,2-dimetil-2H-naftol[1,2-b]pirano-5,6-diona, é uma ortonaftoquinona de ocorrência natural proveniente do ipê roxo, ou pau d arco roxo (Tabebuia avellandae Lor), da família Bigoneaceae. A &#946;-lapachona tem sido alvo de diversas pesquisas, muitas delas visando explorar seu elevado potencial antineoplásico. Atuando contra diversos tipos de câncer humano, especialmente em neoplasias de ciclo celular muito lento, como determinadas linhagens de câncer de próstata que são refratárias aos tratamentos convencionais, especula-se que sua ação se dê por um mecanismo particular de apoptose. A principal barreira no desenvolvimento de uma forma farmacêutica aceitável tem sido sua baixa solubilidade aquosa, o que possivelmente acarretaria numa baixa biodisponibilidade. O presente estudo teve como objetivo executar estudos de solubilidade da &#946;-lapachona em diferentes solventes farmacêuticos, bem como promover sua complexação com ciclodextrinas, para alcançar uma série de formulações que pudessem ser utilizadas em ensaios pré-clínicos. Embora o processo de complexação tenha sido bastante demorado, a utilização de ciclodextrinas mostrou-se como uma opção farmacotecnicamente viável, uma vez que resolvido o problema de baixa solubilidade aquosa, há um possível aumento na biodisponibilidade da &#946;-lapachona. As formulações alcançadas foram doseadas através de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), por uma metodologia analítica previamente validada, e duas delas foram eleitas para serem utilizadas nos ensaios in vivo: &#946;-lapachona complexada com cilcodextrina em água e &#946;-lapachona livre incorporada em óleo de gergelim, ambas com 2% do ativo e administradas por duas vias distintas: oral e intramuscular. Os resultados demonstraram que a resposta farmacológica à &#946;-lapachona complexada é significativa, porém, as formulações ainda necessitam ser otimizadas

Os minerais sáo essenciais para a saúde e para reprodução de vacas leiteiras. O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito da utilização de um suplemento de microminerais injetável contendo cobre, manganês, selênio e zinco, 20 dias antes da inseminação artificial, sobre a saúde uterina, perfil de progesterona, desenvolvimento do embrião e fertilidade de vacas Holandesas. O experimento doi dividido em duas fases. Na primeira fase foram usados 306 vacas, entre 2 a 8 anos de idade, foram divididas em um grupo que recebeu suplemento de microminerais injetável (SIM)contendo cobre, manganês, selênio e zinco, 20 dias antes da inseminação artificial (IA) e um grupo controle, que não recebeu nenhum tratamento. Esses animais foram bloqueados por pariedade (primíparas e multíparas), período voluntário de espera (pequeno período de espera PPE e longo período de espera - LPE) e por fazenda (fazenda 1 e 2). Nessa etapa foi avaliada saúde uterina, atraves do corrimento vaginal uterino e pela endometrite citológica. Na segunda fase foram separados 130 animais, divididos em um grupo que recebeu suplemento de microminerais injetável contendo cobre, manganês, selênio e zinco, 20 dias antes da inseminação artificial e um grupo controle, que não recebeu nenhum tratamento, esse animais foram bloqueados por pariedade (primíparas e multíparas). Foi avaliada a concentração de progesterona, o diagnóstico de gestação e a morfometria da vesícula amniótica e do embrião/feto. Não foi encontrado diferença estatística entre grupos experimentais nas avaliações do corrimento vaginal purulento e na endometrite citológica, quando foi bloqueado por pariedade, período voluntário de espera e fazenda, também não foi encontrado diferença estatística. Não houve diferença entre os grupos no ferfil de progesterona, mas quando foi analisada a porcentagem de animais que estava púberes, encontrou-se diferença estatística dentre os grupos no dia 4 (dias após IA), onde a porcentagem de animais púberes no grupo que recebeu SIM foi maior que o grupo tratamento (P = 0,0319). Não foi encontrada diferença no diagnostico de gestação e na perda de prenhez. Na avaliação da morfometria do embrião, os animais que receberam SIM, a vesícula amniótica (longitudinal) e o comprimento do embrião (cabeça-nádega e abdominal) foram maiores que o grupo controle com 36 dias. Em conclusão o emprego com o tratamento com Sim 20 dias antes da IA, não tem efeito sobre a saúde uterina, prenhez e na perda de prenhez, mas melhorou a porcentagem de animais púberes e o tamanho do embrião. / Minerals are essentials to the health and reproduction of dairy cattle. The aim of this study was to evaluate the effect of the use of na injectable trace element supplement containing copper, manganese, selenium and zinc 20 days before the artificial insemination, on the uterine health, progesterone profile, embryo development and fertility of Hostein dairy cows. The trial was divided in two steps. In the first step, 306 cows, between 2 and 8 years old were divided in two groups. The first group received injectable trace element supplement (ITES) containing copper, manganese, selenium and zinc 20 days before the artificial insemination (AI). The second group did not receive the treatment, constituting the control group. These animals were blocked by parity (primiparous and multiparous), voluntary waiting period (short voluntary waiting period SVWP and long voluntary waiting period - LVWP) and farm (farm 1 and 2).In this step, uterine healthy was evaluated by checking the uterine vaginal discharge and by cytological endimetritis. In the second step, 130 cows were divided in two groups, which cows received same treatments used in the first step. These cows were blocked by parity (primiparous and multiparous) and progesterone concentration, pregnancy diagnosis, and amniotic vesicle and embryo/fetus morfology were evaluated. The evaluation of purulent vaginal discharge and cytological endometritis showed no statistical significance between treatment groups. When cows were blocked by parity, the voluntary waiting period and farm did not show any difference. While no differences were detected between groups when progesterone proflile was evaluated, the percentage of pubescent animais on day 4 after showed diferences. In the ITES group, the percentage of pubescent animals was increased compared to the treatment group (P = 0.0319). No differences were detected to pregnancy diagnosis and pregnancy loss. Studying embryo morphometry, the amniotic vesicle (longitudinal) and embryo length (head-buttock) were higher in ITES group compared to treatment group at 36 days. In conclusion, although the use of ITES 20 days before AI did not show any effect on the uterine healthy, pregnancy and pregnancy loss, the percentage of pubescent animais and embryo length was increased.

Os minerais sáo essenciais para a saúde e para reprodução de vacas leiteiras. O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito da utilização de um suplemento de microminerais injetável contendo cobre, manganês, selênio e zinco, 20 dias antes da inseminação artificial, sobre a saúde uterina, perfil de progesterona, desenvolvimento do embrião e fertilidade de vacas Holandesas. O experimento doi dividido em duas fases. Na primeira fase foram usados 306 vacas, entre 2 a 8 anos de idade, foram divididas em um grupo que recebeu suplemento de microminerais injetável (SIM)contendo cobre, manganês, selênio e zinco, 20 dias antes da inseminação artificial (IA) e um grupo controle, que não recebeu nenhum tratamento. Esses animais foram bloqueados por pariedade (primíparas e multíparas), período voluntário de espera (pequeno período de espera PPE e longo período de espera - LPE) e por fazenda (fazenda 1 e 2). Nessa etapa foi avaliada saúde uterina, atraves do corrimento vaginal uterino e pela endometrite citológica. Na segunda fase foram separados 130 animais, divididos em um grupo que recebeu suplemento de microminerais injetável contendo cobre, manganês, selênio e zinco, 20 dias antes da inseminação artificial e um grupo controle, que não recebeu nenhum tratamento, esse animais foram bloqueados por pariedade (primíparas e multíparas). Foi avaliada a concentração de progesterona, o diagnóstico de gestação e a morfometria da vesícula amniótica e do embrião/feto. Não foi encontrado diferença estatística entre grupos experimentais nas avaliações do corrimento vaginal purulento e na endometrite citológica, quando foi bloqueado por pariedade, período voluntário de espera e fazenda, também não foi encontrado diferença estatística. Não houve diferença entre os grupos no ferfil de progesterona, mas quando foi analisada a porcentagem de animais que estava púberes, encontrou-se diferença estatística dentre os grupos no dia 4 (dias após IA), onde a porcentagem de animais púberes no grupo que recebeu SIM foi maior que o grupo tratamento (P = 0,0319). Não foi encontrada diferença no diagnostico de gestação e na perda de prenhez. Na avaliação da morfometria do embrião, os animais que receberam SIM, a vesícula amniótica (longitudinal) e o comprimento do embrião (cabeça-nádega e abdominal) foram maiores que o grupo controle com 36 dias. Em conclusão o emprego com o tratamento com Sim 20 dias antes da IA, não tem efeito sobre a saúde uterina, prenhez e na perda de prenhez, mas melhorou a porcentagem de animais púberes e o tamanho do embrião. / Minerals are essentials to the health and reproduction of dairy cattle. The aim of this study was to evaluate the effect of the use of na injectable trace element supplement containing copper, manganese, selenium and zinc 20 days before the artificial insemination, on the uterine health, progesterone profile, embryo development and fertility of Hostein dairy cows. The trial was divided in two steps. In the first step, 306 cows, between 2 and 8 years old were divided in two groups. The first group received injectable trace element supplement (ITES) containing copper, manganese, selenium and zinc 20 days before the artificial insemination (AI). The second group did not receive the treatment, constituting the control group. These animals were blocked by parity (primiparous and multiparous), voluntary waiting period (short voluntary waiting period SVWP and long voluntary waiting period - LVWP) and farm (farm 1 and 2).In this step, uterine healthy was evaluated by checking the uterine vaginal discharge and by cytological endimetritis. In the second step, 130 cows were divided in two groups, which cows received same treatments used in the first step. These cows were blocked by parity (primiparous and multiparous) and progesterone concentration, pregnancy diagnosis, and amniotic vesicle and embryo/fetus morfology were evaluated. The evaluation of purulent vaginal discharge and cytological endometritis showed no statistical significance between treatment groups. When cows were blocked by parity, the voluntary waiting period and farm did not show any difference. While no differences were detected between groups when progesterone proflile was evaluated, the percentage of pubescent animais on day 4 after showed diferences. In the ITES group, the percentage of pubescent animals was increased compared to the treatment group (P = 0.0319). No differences were detected to pregnancy diagnosis and pregnancy loss. Studying embryo morphometry, the amniotic vesicle (longitudinal) and embryo length (head-buttock) were higher in ITES group compared to treatment group at 36 days. In conclusion, although the use of ITES 20 days before AI did not show any effect on the uterine healthy, pregnancy and pregnancy loss, the percentage of pubescent animais and embryo length was increased.

The control of chronic pain in equines is growing up recent years in function of the highest performance required of the animals in the different sportive modalities and the new look for methodologies of combat to animal maltreatment. It is cited even, the economic potentialities in the economic chain of the equine breeding to stimulation of the development of new technologies and products. In attendance to these rules, the work presented here brings the evaluation of the effectiveness and clinical security of a injectable neurolytic formulation for perineural use in equines. This type of drug is not yet available in Brazilian market. The Injectable Neurolytic Suspension (SNI) was formulated with ethanol, triamcinolone and bupivacaine, aiming at to use to advantage the neurolytic effect of ethanol, with no collateral inflammatory reactions and painful in local injection. The evaluation of chemical stability was carried through the evaluation of the loss of weight of the samples, variation of pH, time of sedimentation after the agitation and development of chromatographic method for identification and simultaneous determination of bupivacaine and triamcinolone. The clinical test was carried through per 180 days in five horses, having approached two aspects: (a)evaluation of the effectiveness of the neurolytic action and pain suppression of the SNI, and (b)the eventual toxicity related to the composition. The lameness was induced in the horses through the development of horseshoes method, carrying later through perineural infiltration of 5 mL of SNI in each branch of the palmar nerves. The evaluation of the SNI toxicity was carried out monitoring of the hepatic, kidney and skeletal muscle functions, measuring the serum levels of alanina aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), creatinofosfokinase (CK), Gamaglutamiltransferase (GGT), Urea and Creatinine. The SNI presented satisfactory chemical stability in temperatures of 4ºC and 20ºC. The clinical test indicated abolition of podal pain in the horses from 96 hours of infiltration, with effect kept up to 180 days. The SNI did not caused hepatic, kidney and/or skeletal muscle toxicity. All the results lead to a very promissory drug to this specific market in Brazil. / O controle da dor crônica em eqüinos tem evoluído nos últimos anos em função da maior exigência esportiva dos animais nas diferentes modalidades e da implantação de metodologias de combate aos maus tratos. Cite-se ainda que as potencialidades econômicas geradas no círculo da eqüinocultura acabam por estimular o desenvolvimento de novas tecnologias e produtos. Em atendimento a estes preceitos, o trabalho aqui apresentado traz a avaliação da eficácia e segurança clínica de uma formulação neurolítica injetável para uso perineural em eqüinos, até o momento inexistente no mercado nacional. A Suspensão Neurolítica Injetável foi formulada com etanol, triancinolona e bupivacaína, visando aproveitar o efeito neurolítico do etanol, sem causar as reações inflamatórias e dolorosas locais causadas pelo mesmo. A avaliação de estabilidade química foi realizada através da avaliação da perda de peso das amostras, variação de pH, tempo de sedimentação após a agitação e desenvolvimento de método cromatográfico para identificação e determinação simultânea dos teores de Bupivacaína e Triancinolona. O teste clínico foi realizado por 180 dias em cinco equinos, abordando dois aspectos: avaliação da eficácia da ação neurolítica e abolição da dor da SNI; e a eventual toxicidade relacionada à composição. Para a indução de claudicação nos eqüinos, foi desenvolvido método através de ferraduras, realizando posteriormente a infiltração perineural de 5 mL de SNI em cada ramo dos nervos palmares. A avaliação de toxicidade da SNI realizou-se através de monitoração das funções hepática, renal e muscular após as infiltrações, mensurando os níveis séricos de Alanina Aminotransferase (ALT), Aspartato Aminotransferase (AST), Creatinofosfoquinase (CK), Gamaglutamiltransferase (GGT), Uréia e Creatinina. A SNI apresentou estabilidade química satisfatória em temperaturas de 4ºC e 20ºC. O teste clínico indicou abolição da dor podal nos animais a partir de 96 horas da infiltração, com efeito mantido até 180 dias. A SNI não demonstrou causar toxicidade hepática, renal e/ou muscular, evidenciando a potencialidade de transformação em produto comercial.