Orientador: João Aristeu da Rosa / Banca: Marlene Tiduko Ueta / Banca: Elenice Messias do Nascimento Gonçalves / Banca: Silmara Marques Allegretti / Banca: Mara Cristina Pinto / Resumo: A estrongiloidíase é uma doença parasitária que tem distribuição mundial heterogênea, cuja prevalência é dividida em três categorias: esporádica (<1%), endêmica (1-5%) e hiperendêmica (>5%). Na região de Araraquara, estudos de frequência de enteroparasitoses vêm sendo conduzidos desde 1970 e mostram que a estrongiloidíase é endêmica na região. Com o intuito de realizar caracterização morfométrica de diferentes isolados humanos desse helminto, provenientes dos municípios de Araraquara, Américo Brasiliense, Gavião Peixoto, Motuca e Rincão foi feita a mensuração de larvas rabditóides e filarióides e sequenciamento da região ITS-1 do rDNA das larvas filarióides. Com o auxilio do programa de captura e mensuração de imagens Motic Images Advanced 3.2., os parâmetros das larvas rabditóides e filarióides propostos por TEIXEIRA, 1996, foram mensurados após fixação das mesmas em TAF. A extração do DNA genômico foi realizada segundo protocolo descrito por NILFOROUSHAN et al., 2007 e em seguida realizou-se a amplificação do ITS-1 por meio de NESTED-PCR. Os fragmentos de aproximadamente 680 pb obtidos foram purificados, sequenciados e a comparação de sequências foi realizada pelo programa ClustalW. Apenas com os resultados da análise morfométrica, não foi possível caracterizar diferentes cepas de S. stercoralis, uma vez que... (REsumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Strongyloidiasis is a parasitic disease that occurs worldwide heterogeneous, whose prevalence is divided into three categories: sporadic (<1%), endemic (1-5%) and hyperendemic (> 5%). In the region of Araraquara, studies the frequency of intestinal parasites have been conducted since 1970 and show that strongyloidiasis is endemic in the region. In order to perform morphometric characterization of different isolates of human intestinal worms, from the municipalities of Araraquara, Américo Brasiliense, Gavião Peixoto, Motuca and Rincão the measurement was made of rhabditiforms and filariforms larvae and sequencing of the ITS-1 rDNA filariform larvae. With the help of the program capture and measurement of images Motic Images Advanced 3.2., the rhabditiforms and filariforms larvae parameters proposed by TEIXEIRA, 1997, were measured after fixed on the TAF. The extraction of genomic DNA was performed according to protocol described by NILFOROUSHAN et al., 2007 and then held the amplification of ITS-1 by nested-PCR. Fragments of about 680 bp obtained were purified, sequenced and the sequence comparison was performed by the program ClustalW. Only the results of the morphometric analysis was not possible to characterize different S. stercoralis strains, since the values of the parameters measured were quite homogeneous in larvae... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: João Aristeu da Rosa / Banca: Vera Lucy de Santi Alvarenga / Banca: Vera Lucia Pagliusi Castilho / Resumo: Blastocystis hominis é protozoário causador da infecção intestinal denominada blastocistose humana, cujo diagnóstico é realizado pelo exame coproparasitológico e por meio de técnicas de colorações permanentes que foram utilizadas neste estudo para avaliar a prevalência de Blastocystis hominis nos espécimes fecais de habitantes na região de Araraquara-SP. Foram estudadas 503 amostras de fezes submetidas às técnicas de exame direto a fresco, de Faust e cols., de Lutz e de Rugai, Mattos e Brisola, além das colorações pela hematoxilina férrica, tricrômio e de Kinyoun modificada. Do total das amostras analisadas 174 (34,6%) apresentaram-se positivas para a presença de parasitas intestinais. O protozoário e helminto mais freqüentes foram respectivamente: Entamoeba coli (14,6%) e Strongyloides stercoralis (6,7%). Blastocystis hominis foi observado em 23 (4,6%) amostras fecais com consistência predominantemente pastosa, não caracterizando quadro diarréico. Apesar da baixa prevalência de Blastocystis hominis encontrada na região de Araraquara, comparativamente a outras regiões brasileiras, é importante a realização do diagnóstico laboratorial desse protozoário. O encontro de Blastocystis hominis em material fecal é indicativo de contaminação de alimentos e água de consumo, desde que se admita a rota de transmissão oral-fecal deste parasita, o que implica na orientação da população sobre as medidas de saneamento básico e higiene como meio para se controlar problemas de saúde ocasionados pelos enteroparasitas. / Abstract: Blastocystis hominis is a protozoan which causes an intestinal infection called human blasticistosis. Its diganosis is perfomed by stool examination and permanent staining techniques. Such methodologies were carried out on the present study in order to evaluate the prevalence of Blastocystis hominis in faecal specimens from the Araraquara region inhabitants. A total of 503 faecal samples were evaluated by the following techniques: examination fo fresh specimens, Lutz, Faust et al. and Rugai et al. besides the iron hemotoxylin, trichrome and modified Kinyon staining. Out of 503 stool samples examined 174 (34,6) were found to be positive for intestinal parasites. The most prevalent protozoan and helminth parasites were Entamoeba coli (14,6%) and Strongyloides stercoralis (6,7%) respectively. Balstocystis hominis was present in 23 (4,6%) stool samples, most of all of soft consistence and without diarrheic reports. Blastocystis hominis laboratorial diagnosis is important althought its prevalence has been low in Araraquara region. Blastocystis hominis findings is faecal specimens indicates the food and water contamination and since the transmission of this parasite is iral-faecal it implies that the population needs orientation about hygiene and basic sanitation conditions in order to control health problems caused by enteroparasites. / Mestre

Resumo: O presente estudo foi realizado para investigar a prevalência de enteroparasitas em crianças e funcionários da creche do município de Pratânia, Estado de São Paulo, e caracterizar geneticamente os isolados de Giardia duodenalis obtidos dos indivíduos desse grupo empregando gdh e tpi como genes-alvo. Para isso, amostras de fezes de 141 crianças com idade de zero a seis anos e de 18 colaboradores foram colhidas e processadas pelo método de centrífugo-flutuação e pelo kit TF-test®. Nas 141 crianças, parasitas e/ou comensais intestinais foram diagnosticados em 64 (45,4%), das amostras, sendo Giardia (22%) e Cryptosporidium (22%) os parasitas mais freqüentes. Nos funcionários, Giardia foi diagnosticada em apenas uma amostra (5,5%) e o protozoário comensal Entamoeba coli (22,2%) foi o mais prevalente. Empregando técnicas baseadas em PCR, o DNA extraído de 86 (31 amostras positivas e 55 negativas para Giardia no exame microscópico) foi amplificado e os produtos obtidos foram seqüenciados. A análise de 35 seqüências revelou a ocorrência de infecção pelos genótipos A (28,6%) e B (71,4%), subtipos AI, AII, BIII/BSI e BIV, no entanto, associações entre os genótipos e fatores de risco para a infecção não foram observadas. O alinhamento das seqüências de gdh e tpi, revelou a presença de um a 12 SNPs (Single Nucleotide Polymorphisms) em isolados dos genótipos A e B, sendo que em alguns deles, as mutações foram responsáveis por alterações nas seqüências de aminoácidos. A infecção de seis crianças de um mesmo grupo e de uma funcionária por isolados classificados como genótipo B e apresentando seqüências nucleotídicas 100% idênticas entre si sugere a ocorrência de transmissão antroponótica na população estudada. Além disso, a maior prevalência do genótipo B, grupo predominante nas infecções humanas, reforça o fato de que a transmissão... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The present study was conducted to investigate the prevalence of intestinal parasites in children and employees of a daycare center of Pratania, São Paulo State, and to evaluate the genotypes Giardia duodenalis isolates obtained from individuals in this group by using gdh and tpi genes as targets. Fecal samples of 141 children aged zero to six years and 18 employees were processed by a flotation method and the TF-Test® kit. Of the 141 children samples, parasites and/or commensal organisms were diagnosed in 64 (45.4%) samples, and Giardia (22%) and Cryptosporidium (22%) were the most frequent parasites. In employees, Giardia was diagnosed in only one sample (5.5%) and the commensal protozoan Entamoeba coli (22.2%) was the most prevalent. DNA extracted from 86 samples (31 samples positive and 55 negative for Giardia by microscopic examination) was amplified by PCR and the products were sequenced. The analysis of 35 sequences revealed the occurrence of infection with genotypes A (28.6%) and B (71.4%) subtypes AI, AII, BIII / BIV and BSI, however, associations between genotypes and risk factors for infection were not observed. The alignment of the sequences revealed SNPs (Single Nucleotide Polymorphisms) in both genotypes A and B, altering the amino acid sequence of some isolates. Among isolates identified as genotype B, six obtained from children of the same group and one from the only one employee infected with Giardia showed gdh and tpi sequences different from reference ones, but 100% identical to each other. This data is suggestive of anthroponotic transmission in the studied population. In addition this finding, the higher prevalence of genotype B, the main group associated to human infections, reinforces the fact that anthroponotic transmission has importance in collective environments that meet children at an age that they still have not practice the basic precepts of hygiene. / Orientador: Semíramis Guimarães Ferraz Viana / Coorientador: Teresa Cristina G. de Oliveira-Sequeira / Banca: Paulo Eduardo Martins Ribolla / Banca: Marcelo Urbano Ferreira / Mestre