Orientador: José Joaquim Titton Ranzani / Banca: Claudia Valeria S. Brandão / Banca: Georgia Nadalini Rodrigues / Banca: Renato Linhares Sampaio / Resumo: A proposta do presente trabalho foi a de comparar o tratamento convencional a base de colírio com o sistema de liberação controlada no tratamento de ceratites por Staphylococcus aureus por ciprofloxacina. Foram utilizados 20 coelhos, divididos em quatro grupos. Os grupos G1, G3 e G4 foram inoculados com 2,5μl da bactéria (108UFC) no estroma corneano. O grupo G2 não recebeu a aplicação do inóculo. O tratamento foi realizado com solução fisiológica para o grupo G1 (a cada seis horas por cinco dias), micropartículas de poli-lactatoco- glicolato (PLGA) contendo ciprofloxacina nos grupos G2 e G4, e colírio de ciprofloxacina no grupo G3 (a cada seis horas por cinco dias). Humor aquoso foi coletado no quinto dia de tratamento para análise por High-performance liquid chromatography (HPLC) da quantidade de ciprofloxacina na câmara anterior. As concentrações médias obtidas foram de 0,013μg/ml, 0,3μg/ml e 0,03μg/ml para os grupos G2, G3 e G4 respectivamente. Swab e biópsia da superfície ocular foram coletados para cultura no quinto dia de experimento. Apenas um animal do grupo G1 teve cultura positiva para S. aureus no material processado. Exame histopatológico revelou a presença bacteriana em todos os animais do grupo G1 e em dois animais do G3. Também foi constatado uma leve reação inflamatória no local da aplicação do sistema de liberação controlada. A análise dos dados mostrou que o tratamento com as micropartículas de PLGA foi eficaz no tratamento de ceratite bacteriana, eliminando completamente a presença de S. aureus e não sendo completamente biocompatível e biodegradável após cinco dias. / Abstract: The proposal of this study was to compare the conventional treatment with eye drops with the controlled delivery system of PLGA, in the treatment of Staphylococcus aureus keratitis with ciprofloxacin. We used 20 rabbits, divided into four groups. The groups G1, G3 and G4 were inoculated with the bacterial 2.5μl (108UFC) in the corneal stroma. The G2 group did not receive the application of inoculum. The treatment was performed with basic saline solution in G1 (every six hours for five days), microparticles of poly-lactate co-glycolate (PLGA) containing ciprofloxacin in G2 and G4, and ciprofloxacin eye drops in group G3 (every six hours for five days). Aqueous humor was collected on the last day of treatment for analysis by High-performance liquid chromatography (HPLC) of the amount of ciprofloxacin in the anterior chamber. The average concentrations were obtained from 0013μg/ml, 0.3μg/ml and 0.03μg/ml for G2, G3 and G4 respectively. Swab and biopsy of the ocular surface were collected for culture on the fifth day of experiment. Only one animal in the G1 had positive culture for S. aureus in the processed material. Histological examination showed a bacterial presence in all animals of G1 and two animals of G3. It was also noted some light inflammatory reaction at the site of application of the controlled release. Data analysis showed that treatment with the microparticles of PLGA was effective in treating bacterial keratitis, completely eliminating the presence of S. aureus, not being completely biocompatible and biodegradable after five days. / Doutor

Orientador: Cláudia Valéria Seullner Brandão / Banca: José Joaquim Titton Ranzani / Banca: Alexandre Lima de Andrade / Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar e comparar por meio de exames oftalmológicos, histopatológicos e imuno-histoquímica para PCNA, o processo de reparação corneal de úlceras superficiais induzidas em coelhos, frente à utilização de colírios de óleo essencial de Citrus lemon, produto até então não utilizado em oftalmologia. Foram utilizadas 50 fêmeas da espécie leporina, todas submetidas à indução da úlcera superficial, constituindo-se 5 grupos experimentais de 10 animais cada. Em três grupos foram instilados colírios à base de óleo essencial de Citrus lemon, em diferentes concentrações, sendo 1,5% (GL1,5), 3% (GL3) e 5% (GL5). O grupo controle (GC) recebeu substituto da lágrima, e o grupo Tween 80 8% (GT) foi tratado com o diluente utilizado na produção dos colírios de citrus. Todos os protocolos foram realizados quatro vezes ao dia. Os grupos foram divididos, aleatoriamente, em dois subgrupos, de acordo com o período final de avaliação, sendo M1, coelhos avaliados após 24 horas, e M5, após 5 dias. Não houve diferença entre os tratamentos utilizados quanto aos sinais clínicos secreção ocular, hiperemia conjuntival, quemose e opacidade corneal. O grupo tratado com colírio de óleo essencial de Citrus lemon na concentração 1,5%, no período final de avaliação, apresentou maior sensibilidade ocular em relação ao GC, além de aumento da celularidade corneal, representada principalmente por células inflamatórias. Nas comparações entre os momentos iniciais e finais, os grupos tratados com substituto da lágrima, Tween 80 8% e colírio à base de óleo essencial de Citrus lemon 5% promoveram aumento na espessura epitelial na periferia da córnea e maior percentual de proliferação celular, na avaliação final. Quanto à úlcera de córnea, houve redução significativa da extensão total para leve... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The purpose of this study was to evaluate and compare through ophthalmic exams, histopathology and immunohistochemistry for PCNA, the repair process in superficial corneal ulcers induced in rabbits using eyedrops of Citrus lemon essential oil, a product not used in ophthalmology yet. Fifty female rabbits were submitted to induction of the corneal ulcer and then divided into 5 experimental groups of 10 animals each. Were instilled into three groups eyedrops of Citrus lemon essential oil, in different concentrations, being 1.5% (GL1, 5), 3% (GL3) and 5% (GL5). The control group (CG) received a tear substitute, and the Tween 80 8% group (GT) was treated with the diluent used in the production of eyedrops of citrus. All protocols were performed four times a day. The groups were divided randomly into two subgroups, according to the final period of evaluation, in the M1 rabbits were evaluated after 24 hours, and in the M5 after 5 days. There was no difference between treatments for clinical signs: ocular discharge, conjunctival hyperemia, chemosis and corneal opacity. In the final period of evaluation, the group treated with eyedrops of Citrus lemon essential oil in the concentration 1.5% showed a higher ocular sensitivity compared to the GC, and increased of corneal cellularity, represented mainly by inflammatory cells. In the comparison between the initial and final moments, the groups treated with tear substitute, Tween 80 8% and eyedrops of Citrus lemon essential oil 5% led to an increase in epithelial thickness at the periphery of the cornea and a higher percentage of cell proliferation, in the final evaluation. In the clinical evaluation of corneal ulcer, there was significant reduction in total length for mild or absent at the time of final evaluation in all groups; the exception was GL 3%, that showed a lower... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Resumo: Estudaram-se os efeitos do sulfato de condroitina 3% (SC), da N-acetilcisteína 10% (NAC), do EDTA 1% (EDTA) e solução salina (GC), sobre a viabilidade do epitélio corneal e a concentração de metaloproteinases (MMP-2 e MMP-9), em córneas de ratos submetidos à ulceração química por NaOH 1N. Compuseram-se quatro grupos de vinte e quatro animais, que foram submetidos à queimadura química corneal com NaOH 1N. Os tratamentos foram realizados a intervalos de 6 horas e as córneas fotografadas, nos mesmos períodos, após tingimento com fluoresceína, até a reepitelização. Doze animais de cada grupo foram submetidos à eutanásia humanitaria, 20 horas após ulcerações. O mesmo procedimento foi repetido às 42 horas para os outros doze animais de cada grupo. As córneas foram processadas para quantificação de microvilosidades do epitelio corneal por microscopia eletrônica de varredura e para quantificação da MMP-2 e -9, por zimografia. O tempo médio de epitelização em horas foi de 28,00±12,82 (SC), 29,00±11,01 (NAC), 35,00±7,01 (EDTA) e de 35,00±7,01 (GC), sem diferença signficativa (p=0,46) entre os grupos. Não se observou diferença quanto ao número de MEC entre os grupos (p>0,05). Às 20 e às 42 horas, a forma latente da MMP-2 foi significativamente mais elevada nos grupos NAC e SC (p<0,001), e às 42 horas observou-se maior concentração em EDTA, relativamente ao GC (p<0,001). Às 42 horas, a concentração da MMP-2, em sua forma ativa, foi significativamente maior, no grupo SC, relativamente aos demais grupos (p<0,001). A MMP-9 só se expressou em sua forma latente, sendo sua concentração significativamente mais elevada, no grupo NAC, às 42 horas (p<0,001). Concluiu-se, que das substâncias testadas, só o sulfato de condroitina acelerou a epitelização corneal, mas nenhuma delas apresentou efeitos protetores às microvilosidades do epitélio corneal ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study aimed evaluate the effects of topical 3% chondroitin sulfate (SC), 10% N-acetylcysteine (NAC), 1% EDTA (EDTA) and 0,9% NaCl on corneal epithelial viability and the expression of matrix metalloproteinase-2 and -9 (MMP-2 and -9), in alkali burned rat corneas. Ninety eight healthy rats were divided into four groups and animals were submitted to corneal burn with NaOH 1N. All treatments occurred every 6 hours, and the corneas were photographed at the same time points until lesions were fluorescein negative. Twelve animals of each group were euthanized 24 and 42 hours after burn, and corneas were processed for corneal epithelial microvilli quantification (CEM) by scanning electron microscopy and MMP-2 and -9 evaluation by zimography. Images were quantified by Image J. Average corneal wound healing rate was 28,00±12,82 (SC), 29,00±11,01 (NAC), 35,00±7,01 (EDTA) and 35,00±7,01 hours in controls (GC) (p=0,46). CEM count did not change significantly among groups (p>0,05). At 20 and 42 hours, MMP-2 latent form quantity was significantly increased in NAC and SC groups (p<0.001); at 42 hours, MMP-2 latent form was significantly elevated in EDTA, in comparison to GC (p<0,001). At 42 hours, MMP-2 active form was significantly increased only in SC (p<0,001). MMP-9 was expressed only in its latent form, being significantly higher in NAC, at 42 hours (p<0,001). This study indicated that only 3% chondroitin sulfate accelerated corneal wound healing. 10% N-acetylcysteine, 1% EDTA and 3% chondroitin sulfate did not protect the corneal epithelial microvilli. In addition, none of the tested agents showed any benefit over MMPs inhibition in alkali burned / Orientador: José Luiz Laus / Coorientador: Adriana Morales / Banca: Cristiane dos Santos Honsho / Banca: Alexandre Lima de Andrade / Mestre