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Pesquisa de leishmania por meio de reação em cadeia da polimerase e identificação de espécies da subfamília phlebotominae (diptera: psychodidade) em áreas de ocorrência da leishmaniose tegumentar americana no Distrito Federal

Barreto, Mariana Boff 17 June 2011 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2011. / Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-09-02T16:33:27Z No. of bitstreams: 1 2011_MarianaBoffBarreto.pdf: 1214350 bytes, checksum: 0ccf1d6efc90add3d84b574e1ad03c40 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-09-02T16:34:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_MarianaBoffBarreto.pdf: 1214350 bytes, checksum: 0ccf1d6efc90add3d84b574e1ad03c40 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-09-02T16:34:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_MarianaBoffBarreto.pdf: 1214350 bytes, checksum: 0ccf1d6efc90add3d84b574e1ad03c40 (MD5) / As leishmanioses são protozoonoses causadas por protozoários do gênero Leishmania, as quais são transmitidas pela picada de insetos pertencentes à família Phlebotominae (Diptera: Psychodidade). A leishmaniose tegumentar americana é notificada no Distrito Federal, mas seus transmissores ainda são desconhecidos. O objetivo deste trabalho foi pesquisar a infecção natural por Leishmania por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR) em flebotomíneos capturados na Região Administrativa de Sobradinho, nas localidades de Boa Vista e Fercal. Foram capturadas as espécies Lutzomyia whitmani (89%), Lutzomyia bacula (7%) Lutzomyia davisi (3%) e Lutzomyia termitophila (1%). O maior percentual de flebotomíneos foi encontrado no peridomicílio (58%). A reação em cadeia da polimerase teve resultado negativo para a presença de Leishmania nos exemplares capturados. É provável que possa estar havendo transmissão peridomiciliar e que Lutzomyia whitmani seja o principal vetor. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Leishmaniasis is caused by protozoan of the genus Leishmania which are transmitted by the bite of insects belonging to the family Phlebotominae (Diptera: Psychodidade). Cutaneous leishmaniasis is reported in the Federal District, but their transmitters are still unknown. The objective of this study was to investigate the natural infections by Leishmania by polymerase chain reaction (PCR) in sand flies in the Sobradinho Administrative Region, in the localities of Boa Vista and Fercal. Species were captured Lutzomyia whitmani (89%), Lutzomyia bacula (7%), Lutzomyia Davis (3%) and Lutzomyia termitophila (1%). The highest percentage of sand flies were found in peridomicile habitats (58%). The polymerase chain reaction was negative for the presence of Leishmania in specimens captured. It is possible that there may be transmission and peridomicile Lutzomyia whitmani is the main vector.
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Detecção molecular de espécies de leishmania em mamíferos de unidades de conservação e entorno do Distrito Federal, Brasil

Cardoso, Rebecca Martins 19 December 2014 (has links)
Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-graduação em Medicina Tropical, 2014. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2015-05-28T16:46:46Z No. of bitstreams: 1 2014_RebeccaMartinsCardoso_Parcial.pdf: 2132419 bytes, checksum: 631e8e1c99e6ebafd085cc50c2cd2126 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2015-06-01T19:13:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_RebeccaMartinsCardoso_Parcial.pdf: 2132419 bytes, checksum: 631e8e1c99e6ebafd085cc50c2cd2126 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-06-01T19:13:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_RebeccaMartinsCardoso_Parcial.pdf: 2132419 bytes, checksum: 631e8e1c99e6ebafd085cc50c2cd2126 (MD5) / Mamíferos silvestres, sinantrópicos e domésticos podem ser hospedeiros dediferentes espécies de Leishmania. Estudos sobre possíveis reservatórios de Leishmania em diferentes áreas são fundamentais para a definição das estratégias de vigilância e controle das doenças. No presente estudo, avaliou-se a ocorrência de infecção por Leishmaniaspp. em mamíferos de duas unidades de conservação e entorno do DF, Brasília, Brasil. Pequenos mamíferos foram capturados em2011 e 2012 em duas Unidades de Conservação Federais do DF, o Parque Nacional de Brasília (PNB) e a Reserva Biológica da Contagem (Rebio), e, em 2013, foram amostrados cães de condomínios residenciais e núcleos rurais do entorno das unidades. Amostras de pele e sangue dos animais silvestres e dos cães foram avaliadas por meio de diferentes testes moleculares, direcionados à região polimórfica D7 do gene 24Sα rRNA, para a região conservada do minicírculo de kDNAe para a região espaçadora interna do DNA ribossômico ITS1 de Leishmania spp.As espécies de Leishmaniaforam identificadas mediante o sequenciamento dos produtos amplificados. As amostras de sangue dos cães foram submetidas ao teste imunocromogrático rápido (DPP) para detecção de anticorpos anti-Leishmania. Foram estudados 179 mamíferos silvestres, os quais 20,1% tiveram amostras positivas para Leishmania spp. nos testes moleculares (Clyomys laticeps, Gracilinanus agilis, Necromys lasiurus, Nectomys rattus, Rhipidomys macruruse Didelphis albiventris). Não foram observadas diferenças significativas comparando a proporção de indivíduos infectados por Leishmania spp.entre as duas áreas amostradas e entre as espécies.A maioria das amostras positivas era do roedor N. lasiurus, as quais foram identificadas como L. amazonensisouL. braziliensis. As 19 amostras dos cães estudados foram positivas ao teste DPP, porém, apenas cinco(26,3%) foram positivas para Leishmania spp. nas análises moleculares.As amostras de cães foram identificadas como L. infantum.Os resultados sugerem o envolvimento de seis espécies de mamíferos silvestres na transmissão enzoótica de Leishmania spp.no Distrito Federal, sendo o primeiro registro de L. amazonensisnoroedor silvestreN. lasiurusno Brasil Central. / Wild, synanthropic and domestic mammals are hosts of Leishmania spp. Studies on possible reservoirs of Leishmania in different areas are fundamental for the development of strategies for the surveillance and control of this disease. In the present study, we evaluated the Leishmania spp. occurrence in mammals in two conservation units and their surroundings in Brasilia, Federal District (FD) Brazil. Small mammals were captured in 2011 and 2012 in two conservation units of FD, the Brasília Nacional Park (BNP) and the Biological Reserve of Contagem (BRC). In 2013, we took samples from dogs in residential areas in the surroundings of these conservation units. Skin and blood samples were evaluated by PCR using different molecular markers (D7 24Sα rRNA, kDNA and DNA ITS1). The Leishmania species were identified by sequencing. Blood samples from the dogs were also subjected to the rapid imunocromogratical test (DPP) for detection of anti-Leishmania antibodies. 179 wild mammals were studied, of which 20.1% had DNA of Leishmania spp successfully detected in at least one positive sample. Six species were considered infected: Clyomys laticeps, Gracilinanus agilis, Necromys lasiurus, Nectomys rattus, Didelphis albiventris and Rhipidomys macrurus. No significant differences comparing the proportion of individuals infected with Leishmania spp were observed between the two sampled areas and between wild mammal species. Most of the positive samples were collected from the rodent N. lasiurus, infected by L. amazonensis or L. braziliensis. All 19 dog samples studied were positive by DPP, however, only five (26.3%) were positive for Leishmania spp. by PCR. DNA sequence of ITS1 amplicons from dog samples had 100% identity with L. infantum sequence. The results suggest the involvement of six species of wild mammals in the enzootic transmission of Leishmania spp. in FD. This is the first record of L. amazonensis in N. lasiurus in Central Brazil.

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