Orientador: Pilar Rodriguez de Massaguer / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-11T10:09:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Reyes_AlessandraFrias_M.pdf: 1180565 bytes, checksum: ee4bb25ea0aef0febacb24863bdf2728 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: O objetivo desta pesquisa foi realizar um levantamento microbiológico da linha de processo de requeijão cremoso (pH 5,8)e avaliar sua vida de prateleira em função da sua contaminação por microrganismos esporulados e pelos patogênicos L. monocytogenes, S. aureus coagulase positiva e Coliformes ( 45°C), além de determinar o(s) sobreviventes ao processo térmico. Foram analisadas 50 amostras, de dois lotes distintos, o lote 1 produzido no inverno e o lote 2 no verão. A detecção de L. monocytogenes foi realizada através do kit ¿Mini Vidas LMOII¿ (BioMerieux). As análises de quantificação de S. aureus coagulase e DNAse positivo , de Coliformes, de C. perfringens, e de esporulados foram procedidas segundo método APHA ¿( American Public Health Association). Não foi detectada contaminação por L. monocytogenes, S. aureus coagulase positiva, Coliformes ( 45 ºC) e C. perfringens em nenhuma amostra de Produto Final. Assim, todas as amostras analisadas estavam de acordo com o regulamento técnico 82 do Mercosul, e com a regulamentação RDC-12 da Anvisa. O ingrediente mais contaminado por esporulados mesófilos e termófilos anaeróbios e aeróbios, foi o Concentrado Protéico (4 log10 esporos/10 g), seguido da massa Petit Swiss, em ambos os lotes. A carga destes ingredientes contaminados não foi totalmente eliminada pelo tratamento térmico. Foram contabilizados 207 isolados de esporulados do lote 1 e 270 do lote 2. O maior número isolados foram esporulados mesófilos aeróbios. Os ingredientes menos contaminados foram o Citrato de Sódio e a água. A média da contaminação das amostras do lote 2 produzido no verão foi maior e significativamente diferente (p<0.1) daquela do lote 1 com relação aos seguintes grupos de esporulados: mesófilos aeróbios, termófilos causadores de ¿flat sour¿ acidúrico e mesófilos e termófilos anaeróbios. A carga do Concentrado Protéico apresentou maior efeito sazonal A vida de prateleira foi acompanhada analisando 5 amostras/semana, de requeijão cremoso do lote 2, incubadas a 4°C por at é 50 dias, sendo realizadas as mesmas análises microbiológicas citadas acima Durante o estudo da vida de prateleira do requeijão cremoso em amostras do lote 2, não foi detectada contaminação por L. monocytogenes, S. aureus coagulase positiva e coliformes totais e fecais nem C. perfringens. Não foi observados sinal de alteração, na cor, odor e textura do produto. Até o 22°dia de vida útil a produção de esporos de anaeróbios aumentou enquanto que os esporulados aeróbios se reduziram, sugerindo que este ultimo grupo germinou, e consumiu o oxigênio residual do sistema. Após o 22° dia, a população de esporulados aeróbios aumentou pelo efeito adverso das barreiras temperatura e sorbato de potássio. Já os anaeróbios entraram em germinação tardia, no entanto, seu crescimento foi limitado pelas barreiras indicadas acima. O processo térmico aplicado ao requeijão cremoso, não foi desenhado para eliminar a alta carga dos contaminantes esporulados, conseguindo apenas 1,3 reduções decimais na população de esporulados termófilos totais, no Produto de Linha do lote 2, devendo portanto, ser redimensionado com base na carga contaminante do Produto de Linha (2,8 log10esporos/10g). Foi observado também um incremento de 1 ciclo log na população de esporulados mesófilos aeróbios do Produto Final envasado (lote 2) sugerindo possível contaminação da linha nesta seção Foram isolados 325 esporulados durante toda a vida de prateleira do requeijão, sendo o maior número proveniente do 1° e do 22° dia de estocagem. Assim sendo, todos os isolados destas datas foram induzidos à esporulação ¿in vitro¿ para determinação do(s) sobrevivente(s) mais termoresistente(s).Cada um de 58 esporulados aeróbios estritos receberam choques térmicos sucessivos de 95°C/5¿, ate 130 oC/3'. Apenas um isolado resistiu o choque 130ºC/3.'De maneira análoga, 46 esporulados anaeróbios estritos e facultativos receberam choques de 130 °C/3¿ ate 140 ºC/1¿. Sobreviveram ao ultimo choque 30 isolados tendo predominância os Bacillus mesófilos anaeróbios facultativos (18 isolados) sendo estes na sua maioria capazes de coagular e hidrolisar a caseína, produzir proteólise e gás abundante Não foi detectada deterioração após o ensaio de vida de prateleira a 4ºC assim sendo a ação das barreiras físicas e químicas impostas ao produto foram suficientes para mantê-lo estável até o 50° dias de estocagem. No entanto, considerando a alta carga de esporulados, potencialmente deteriorante, este produto não pode ser submetidos a temperaturas de abuso de refrigeração durante sua distribuição e venta / Abstract: The objective of this research was to carry out a microbiological survey of Brazilian cream cheese ¿Requeijão¿ ( pH 5,8 ), production line and to evaluate its shelf life, in relation to contamination by sporeformers and pathogens such as L. monocytogenes, coagulase positive S. aureus and Coliforms ( 45°C) and to determinate the microorganism(s), surviving the thermal process. Fifty samples, from two different lots were analized, lot 1 was produced during winter and lot 2 during summer . The detection of L. monocytogenes was carried through with the "Mini Vidas LMOII" kit (BioMerieux). The essays for enumeration of S. aureus coagulase and DNAse positive, Coliforms (45ºC), C. perfringens and sporeformers were tested according to APHA methods ¿ ¿American Public Health Association¿. No contamination of L. monocytogenes and coagulase positive S. aureus, Coliforms at 45°C and C. perfringens was observed in any of the samples of final product. Therefore all samples analyzed were in agreement to Mercosul Technical Regulation 82, and RDC 12 ANVISA resolution. The most contaminated ingredient, with mesophilic and thermophilic anaerobic and aerobic sporeformers, was protein concentrate (4log10spores/10g), followed by Petit Swiss mass, in both lots. The spore load from these contaminated ingredients was not totally eliminated after the thermal process. There were isolated 207 sporeformers from lot 1 and 270 from lot 2. The less contaminated ingredients were sodium citrate and water. The mean contamination from lot 2 samples was higher and significatively different (p< 0,1) than that of lot 1 in regard to the following groups of spore former : mesophilic aerobic, thermophilic aciduric flat sour producers and mesophilic and thermophilic anaerobic. Tle microbial load of protein concentrate from lot 2 showed highest seasonal effect. During cream cheese shelf life studies, five samples from lot 2 per week, were incubated at 4°C for up to 50 days. The result s from shelf life survey showed no contamination by L. monocytogenes, coagulase positive S. aureus, Coliforms at 45°C and C. perfringens. No alteration was observed on color, flavor and texture. Until the 22th day of incubation, the anaerobic sporoformers increased in number while the aerobic sporoformers were reducing its population suggesting germination, and consumtion of the package residual oxygen . After the 22th day, the sporulation of the aerobic sporoformers organisms increased by the adverse effect of temperature and potassium sorbate barriers, while the anaerobic sporoformers started late germination, nevertheless limited by the barriers indicated above. The thermal process applied to Requeijão cream cheese was not dimensioned to eliminate the unexpected high contamination of the sporoformers organisms. This can be justified by the low decimal reductions, of only 1,3 log cycles, on the inline product population of total thermophilic sporoformers, from lot 2 . So, the commercial process had to be re-dimensioned on the basis of the contamination in the in line product from lot 2.It was observed also an increased in the final product mesophilic aerobic sporoformer population from lot 2 suggesting line contamination in this section of the processing line . There were isolated, 325 cultures during the shelf life studies. The largest number of these isolates came from 1st and 22th storage days; therefore, all isolates from these dates were induced to "in vitro" sporulation in order to determinate the most resistant microorganism(s) from the cream cheese. Each one of 58 aerobic sporeformers isolates were submitted to successive thermal shocks from 95°C/5 ' to 130°C/3 '.Only one isolate survived 130ºC/3'heat sh ock In the same manner, 46 strict and facultative anaerobic sporeformers received thermal shocks from 130°C/3' to 140ºC/1¿. Thirty isolates survived the last heat shock The facultative anaerobic mesophilic sporeformers predominated among the survivors (18 isolates) most of them were able to coagulate and hidrolisate casein, to produce proteolisis and liberate gas. As it was not detected deterioration after shelf life monitoring at 4ºC it was concluded that the temperature and antibacterial hurdles were efficient to maintain the final product stable up to 50 days. However, considering the high sporeformers contamination, which can potentially deteriorate the final product, Requeijão cream cheese can not be submitted to abuse refrigeration temperatures, during its sale and distribution / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos