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Degradação de hormônio sintético por meio de lacases fúngicas imobilizadas em fibras de Luffa cylindrica / Degradation of synthetic hormone by fungal laccases immobilized on Luffa cylindrica fibers

Lacerda, Monike Fabiane Alves Ribeiro 24 September 2015 (has links)
Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2016-01-29T13:40:00Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Monike Fabiane Alves Ribeiro Lacerda - 2015.pdf: 2186149 bytes, checksum: 3cc547d5ad7e335bd22528c5658d79f5 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2016-01-29T13:41:34Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Monike Fabiane Alves Ribeiro Lacerda - 2015.pdf: 2186149 bytes, checksum: 3cc547d5ad7e335bd22528c5658d79f5 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-29T13:41:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Monike Fabiane Alves Ribeiro Lacerda - 2015.pdf: 2186149 bytes, checksum: 3cc547d5ad7e335bd22528c5658d79f5 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-09-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The 17α-ethinylestradiol (EE2) is a synthetic estrogen used in contraceptive and hormone replacement therapies; is an environmental contaminant potential, it is not completely removed in sewage treatment plants, reaching the aquatic environment, with the aggravating factor interfere the endocrine system of humans and other animals. For this reason there is great interest in the removal of EE2 present in wastewater, surface water and groundwater. Thus the use of laccase for this purpose may be promising because of low specificity of this enzyme to the substrate. Therefore, the aim of this study was to evaluate the effectiveness of laccase produced by the fungus Pleurotus ostreatus immobilized in Luffa cylindrica (loofah) fibers in EE2 degradation. Therefore the best means for production of laccase and the best conditions of pH and temperature were investigated. The immobilization process was realized and removal of the EE2 assay was conducted in flasks and in a batch reactor. Thus, the best means for producing laccase were Potato Dextrose and Potato Dextrose Modified with guariroba straw. Readings taken with 2.2-Azino-bis (3-ethylbenzothializone-6-sulfonic acid) - ABTS revealed best pH between 3.6 and 4.6 and optimal band temperature between 30 and 50 °C for free and immobilized enzymes. The laccase produced in both media had an apparent molecular mass of 40 kDa. The best conditions found for the immobilization process were glutaraldehyde concentration of 2% and reaction with the support 1 hour under stirring (120 rpm); drying the loofah prior to the reaction with glutaraldehyde; time of 24 hours of immobilization. The immobilized enzyme showed best enzymatic activity in alkaline pH, and at higher temperatures, compared to the free enzyme. The operational stability, storage and thermostability were not significant. Best removals for tests in flasks were 79.22% and 75.0% for free and immobilized enzyme, respectively. As the tests carried out in the reactor showed removal by adsorption of 99.3% and 73.14% in the Luffa cylindrica, the immobilized enzyme. However, it is necessary to optimize the immobilization process, as well as the test in the reactor to increase the degradation EE2. / O 17α-etinilestradiol (EE2) é um estrogênio sintético utilizado na contracepção e em terapias de reposição hormonal; é um potencial contaminante ambiental, pois não é completamente removido nas estações de tratamento de esgotos, podendo alcançar o ambiente aquático, tendo o agravante de interferir no sistema endócrino de seres humanos e de outros animais. Por esse motivo existe um grande interesse na remoção do EE2 presente em águas residuárias, superficiais e subterrâneas. Assim, o uso de lacase para esse fim pode ser promissor, devido à baixa especificidade desta enzima ao substrato. Portanto, o objetivo desse trabalho foi avaliar a eficácia da lacase produzida pelo fungo Pleurotus ostreatus imobilizada em fibras de Luffa cylindrica (bucha vegetal) na degradação do EE2. Para tanto foram selecionados meios de cultivo para produção da lacase, bem como as melhores condições de pH e temperatura. Após a realização do processo de imobilização, a remoção do EE2 foi atingida em ensaios em erlenmeyers e em um reator em batelada. Assim, os melhores meios para a produção de lacase foram o Batata Dextrose e o Batata Dextrose Modificada com palha de guariroba. As leituras realizadas com 2,2-Azino-bis (3-ethylbenzothializone-6-sulfonic acid) - ABTS revelaram melhores pH entre 3,6 e 4,6 e faixas de temperaturas ótimas entre 30 e 50 ºC para as enzimas livre e imobilizada. A lacase produzida em ambos os meios apresentou massa molecular de 40 kDA. As melhores condições encontradas para o processo de imobilização foram concentração de glutaraldeído de 2% e reação com o suporte em 1 hora sob agitação (120 rpm); secagem da bucha vegetal antes da reação com glutaraldeído; tempo imobilização de 24 horas. A enzima imobilizada apresentou melhores atividades enzimáticas em pH alcalinos e em temperaturas mais elevadas, comparadas com a enzima livre. A estabilidade operacional, a de armazenamento e termoestabilidade não foram significativas. As melhores remoções do EE2 para os ensaios nos erlenmeyers foram de 79,22% e 75,0% para as enzimas livre e imobilizada, respectivamente. Enquanto os ensaios realizados no reator mostraram remoções de 99,23% por adsorção na Luffa cylindrica e 73,14%, por degradação pela enzima imobilizada. Contudo, se faz necessário otimizar o processo de imobilização, bem como o ensaio no reator para que haja aumento da degradação do EE2.
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Caracterização e avaliação de acessos de bucha vegetal / Characterization and evaluation of accessions of sponge gourd

Medeiros, Marcelo Gurgel 13 February 2015 (has links)
Made available in DSpace on 2016-08-12T19:15:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MarceloGM_DISSERT.pdf: 678165 bytes, checksum: 1cd0b4ada69fce6ba762905ef6d821c5 (MD5) Previous issue date: 2015-02-13 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This study aimed to characterize accessions and evaluate the physiological maturity in accessions of sponge gourd seeds collected in Rio Grande do Norte. The accessions belonging to the germplasm collection of cucurbits of the Plant Genetic Resources Laboratory of Universidade Federal Rural do Semi-Árido. The characterization experiments were conducted at the experimental garden and Laboratory of Plant Genetic Resources, Department of Plant Sciences of UFERSA Mossoro - RN. In the test characterization of accessions, used the an incomplete block design, consisting of two experiments in a randomized block design with four regular treatment and two treatments common to experiments, totaling ten treatments with three replications. For characterization of the accessions were applied 11 morphological descriptors: fruit weight, fiber mass, bark mass, fruit length, diameter in the lower, middle and upper portions, textured at inferior, middle and top of the fibers, and ease of release seeds. The data were subjected to joint analysis, mean comparison test Scott-Knott at 5% probability, multivariate analysis using clustering methods of Tocher and UPGMA and importance of descriptors based on generalized Mahalanobis distance using Singh method. In the study of physiological maturity in sponge gourd accessions seeds, an experiment was conducted in a seed laboratory in a completely randomized design with four replications in a factorial scheme 3x5 (three sponge gourd accessions and five seasons of harvest). In this, fruits of three accessions were harvested from the tenth day after anthesis (DAA) to the fiftieth DAA, at intervals of ten days. After each harvest was recorded fresh fruit weight, then the seeds were extracted manually fruit and subjected to the following determinations: 100 seeds, moisture content, seeds dry mass, seedling emergence and emergence speed index. There was variation among accessions studied for length and diameter of the fruits, the fiber texture, and the weight of the fruits, fiber and bark. The characterization showed genetic divergence among accessions. At ten DAA were not formed seeds observed in fruits harvested in any of the accessions. Results have show that the best physiological performance of the seeds of sponge gourd accesses, in the studied conditions, were observed at 50 DAA / O presente trabalho teve como objetivo caracterizar acessos e avaliar a maturação fisiológica de sementes de acessos de bucha vegetal coletados no Rio Grande do Norte. Os acessos pertencem à coleção de germoplasma de cucurbitáceas do Laboratório de Recursos Genéticos Vegetais da Universidade Federal Rural do Semi-Árido. Os experimentos de caracterização foram conduzidos na Horta experimental e no Laboratório de Recursos Genéticos Vegetais do Departamento de Ciências Vegetais da UFERSA em Mossoró RN. No ensaio de caracterização dos acessos, utilizou-se o delineamento em blocos incompletos, sendo composto por dois experimentos em blocos casualizados completos com quatro tratamentos regulares e dois tratamentos comuns aos experimentos, totalizando dez tratamentos, com três repetições. Para caracterização dos acessos, foram aplicados 11 descritores morfoagronômicos: massa de fruto, massa da fibra, massa da casca, comprimento do fruto, diâmetro nas porções inferior, mediana e superior, textura nas porções inferior, mediana e superior das fibras, e facilidade de soltura das sementes. Os dados foram submetidos à análise da variância conjunta, teste de comparação de médias de Scott-Knott a 5% de probabilidade, análise multivariada, utilizando os métodos de agrupamento de Tocher e UPGMA e importância dos descritores com base na distância generalizada de Mahalanobis pelo método de Singh. No estudo da maturação fisiológica de sementes de acessos de bucha, foi instalado experimento no Laboratório de Sementes em delineamento inteiramente casualizado, com quatro repetições, em esquema fatorial 3x5 (três acessos de bucha e cinco épocas de colheita). Neste, frutos de três acessos foram colhidos a partir do décimo dia após a antese (DAA) até o quinquagésimo DAA, com intervalos de dez dias. Após cada coleta registrou-se a massa fresca dos frutos, em seguida as sementes foram extraídas manualmente dos frutos e submetidas às seguintes determinações: massa de 100 sementes, teor de água, conteúdo de matéria seca, emergência de plântulas e índice de velocidade de emergência. Observou-se variação entre os acessos estudados quanto ao comprimento e diâmetro dos frutos, à textura da fibra, à massa dos frutos, da fibra e da casca. A caracterização evidenciou divergência genética entre os acessos estudados. Aos dez DAA não foram observadas sementes formadas nos frutos colhidos em nenhum dos acessos. O melhor desempenho fisiológico das sementes dos acessos de bucha, nas condições de estudadas, foi verificado aos 50 DAA
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Caracterização e avaliação de acessos de bucha vegetal / Characterization and evaluation of accessions of sponge gourd

Medeiros, Marcelo Gurgel 13 February 2015 (has links)
Made available in DSpace on 2016-08-12T19:18:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MarceloGM_DISSERT.pdf: 678165 bytes, checksum: 1cd0b4ada69fce6ba762905ef6d821c5 (MD5) Previous issue date: 2015-02-13 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This study aimed to characterize accessions and evaluate the physiological maturity in accessions of sponge gourd seeds collected in Rio Grande do Norte. The accessions belonging to the germplasm collection of cucurbits of the Plant Genetic Resources Laboratory of Universidade Federal Rural do Semi-Árido. The characterization experiments were conducted at the experimental garden and Laboratory of Plant Genetic Resources, Department of Plant Sciences of UFERSA Mossoro - RN. In the test characterization of accessions, used the an incomplete block design, consisting of two experiments in a randomized block design with four regular treatment and two treatments common to experiments, totaling ten treatments with three replications. For characterization of the accessions were applied 11 morphological descriptors: fruit weight, fiber mass, bark mass, fruit length, diameter in the lower, middle and upper portions, textured at inferior, middle and top of the fibers, and ease of release seeds. The data were subjected to joint analysis, mean comparison test Scott-Knott at 5% probability, multivariate analysis using clustering methods of Tocher and UPGMA and importance of descriptors based on generalized Mahalanobis distance using Singh method. In the study of physiological maturity in sponge gourd accessions seeds, an experiment was conducted in a seed laboratory in a completely randomized design with four replications in a factorial scheme 3x5 (three sponge gourd accessions and five seasons of harvest). In this, fruits of three accessions were harvested from the tenth day after anthesis (DAA) to the fiftieth DAA, at intervals of ten days. After each harvest was recorded fresh fruit weight, then the seeds were extracted manually fruit and subjected to the following determinations: 100 seeds, moisture content, seeds dry mass, seedling emergence and emergence speed index. There was variation among accessions studied for length and diameter of the fruits, the fiber texture, and the weight of the fruits, fiber and bark. The characterization showed genetic divergence among accessions. At ten DAA were not formed seeds observed in fruits harvested in any of the accessions. Results have show that the best physiological performance of the seeds of sponge gourd accesses, in the studied conditions, were observed at 50 DAA / O presente trabalho teve como objetivo caracterizar acessos e avaliar a maturação fisiológica de sementes de acessos de bucha vegetal coletados no Rio Grande do Norte. Os acessos pertencem à coleção de germoplasma de cucurbitáceas do Laboratório de Recursos Genéticos Vegetais da Universidade Federal Rural do Semi-Árido. Os experimentos de caracterização foram conduzidos na Horta experimental e no Laboratório de Recursos Genéticos Vegetais do Departamento de Ciências Vegetais da UFERSA em Mossoró RN. No ensaio de caracterização dos acessos, utilizou-se o delineamento em blocos incompletos, sendo composto por dois experimentos em blocos casualizados completos com quatro tratamentos regulares e dois tratamentos comuns aos experimentos, totalizando dez tratamentos, com três repetições. Para caracterização dos acessos, foram aplicados 11 descritores morfoagronômicos: massa de fruto, massa da fibra, massa da casca, comprimento do fruto, diâmetro nas porções inferior, mediana e superior, textura nas porções inferior, mediana e superior das fibras, e facilidade de soltura das sementes. Os dados foram submetidos à análise da variância conjunta, teste de comparação de médias de Scott-Knott a 5% de probabilidade, análise multivariada, utilizando os métodos de agrupamento de Tocher e UPGMA e importância dos descritores com base na distância generalizada de Mahalanobis pelo método de Singh. No estudo da maturação fisiológica de sementes de acessos de bucha, foi instalado experimento no Laboratório de Sementes em delineamento inteiramente casualizado, com quatro repetições, em esquema fatorial 3x5 (três acessos de bucha e cinco épocas de colheita). Neste, frutos de três acessos foram colhidos a partir do décimo dia após a antese (DAA) até o quinquagésimo DAA, com intervalos de dez dias. Após cada coleta registrou-se a massa fresca dos frutos, em seguida as sementes foram extraídas manualmente dos frutos e submetidas às seguintes determinações: massa de 100 sementes, teor de água, conteúdo de matéria seca, emergência de plântulas e índice de velocidade de emergência. Observou-se variação entre os acessos estudados quanto ao comprimento e diâmetro dos frutos, à textura da fibra, à massa dos frutos, da fibra e da casca. A caracterização evidenciou divergência genética entre os acessos estudados. Aos dez DAA não foram observadas sementes formadas nos frutos colhidos em nenhum dos acessos. O melhor desempenho fisiológico das sementes dos acessos de bucha, nas condições de estudadas, foi verificado aos 50 DAA
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[en] STUDY OF THE INSERTION OF SPOUNGE GOURD AS STRUCTURAL REINFORCEMENT IN CEMENT MATRICES / [pt] ESTUDO DA INSERÇÃO DE FIBRA DE BUCHA VEGETAL COMO REFORÇO ESTRUTURAL EM MATRIZES CIMENTÍCIAS

VICTOR ANTUNES QUERIDO 31 August 2018 (has links)
[pt] O objetivo do presente estudo consistiu na obtenção, caracterização mecânica e química das fibras de bucha vegetal (Luffa cylindrica) utilizadas, e o emprego das mesmas como possível reforço de compósitos cimentícios. Inicialmente, as fibras de bucha foram encaminhadas à prensa mecânica para perder o seu formato cilíndrico, propiciando uma moldagem mais facilitada, dos posteriores compósitos. A partir daí, foram submetidas a ensaio de tração direta, dividindo-se entre filamento e tecido, difração de raios-x (DRX), espectroscopia de infravermelho (IV), microscopia eletrônica de varredura (MEV) e análise em microscópio digital, com posterior análise em software digital. A matriz foi dosada, respeitando uma substituição parcial de 50 porcento de cimento, por materiais pozolânicos, como 40 porcento de metacaulinita e 10 porcento de cinza volante, com o objetivo de diminuir a quantidade de Hidróxido de Cálcio (HC), produto oriundo da hidratação do cimento. Também foi utilizado superplasticante na confecção da pasta, para melhorar a fluidez e assegurar que toda a área do molde fosse preenchida, além de prover o encharcamento uniforme da fibra. A caracterização química matriz se deu através do ensaio de termogravimetria (TGA), o qual foi capaz de corroborar a baixa presença de HC, propiciando a incorporação de fibras vegetais nessa matriz. As propriedades mecânicas foram avaliadas a partir de ensaio de flow tabe, de resistência à compressão e à flexão. O composto com a matriz supracitada foi confeccionado com as fibras de bucha vegetal nas direções do carregamento e posteriormente encaminhados ao ensaio de flexão de três pontos. Para agregar valor à discussão, foi fabricado um compósito sanduíche com a fibra de sisal (Agave sisalana) em conjunto com a fibra de bucha. Os compósitos cimentícios reforçados por fibra de bucha, e o compósito sanduíche apresentaram valores de resistência 33 porcento maiores, em relação aos corpos de prova moldados apenas com a matriz (sem reforço). / [en] The objective of this study was to obtain, mechanical and chemical fibre characterization of Loofah (Luffa cylindrica) used, and the use of same as possible reinforcement of cementitious composites. Initially, Loofah fibres were forwarded to the mechanical press for losing your cylindrical format, providing a more facilitated, molding of composite posterior. From there, were subjected to direct tensile test, dividing her time between filament and fabric, x-ray diffraction (XRD), infrared spectroscopy (IV), scanning electron microscopy (SEM) and microscope analysis Digital, with further analysis in digital software. The array was dosed, respecting a partial substitution of 50 per cent cement, Pozzolanic materials, such as 40 per cent metacaulinite and 10 per cent fly ash, with the goal of reducing the amount of calcium hydroxide (CH), native of cement hydration product. Superplasticizer was also used in the making of the folder, to improve the fluidity and ensure that the entire area of the mold were filled equally, in addition to providing the drenching fiber uniform. Chemical characterization through array of Thermogravimetry (TGA), which was able to corroborate the low presence of CH, resulting in the incorporation of vegetable fibers in this array. The mechanical properties were evaluated from flow tabe test, compression and flexural strenght. The compound with the above-mentioned matrix was made with Loofah fibres in the directions of loading and subsequently forwarded to the three-point flexural test. To add value to the discussion, made a sandwich composite with sisal fiber (Agave sisalana) in conjunction with the Loofah fiber. The cementitious composites reinforced by loofah fiber, and sandwich composite presented values of maximum 33 per cent larger in relation to specimens only molded array (no reinforcement), although it is not an improvement as significant as found in other synthetic or natural fibers, already studied and some in use by industry.

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