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Avaliação de metaloproteinases e de marcadores inflamatorios em pacientes com sindrome metabolica / Assesment of metaloproteinases and pro-inflammatory markers in patients with metabolic syndrome

Gonçalves, Flávia Magazoni, 1983- 14 August 2018 (has links)
Orientador: Jose Eduardo Tanus dos Santos / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-14T03:26:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Goncalves_FlaviaMagazoni_M.pdf: 1731236 bytes, checksum: 1cf31c8af3a0b8e13751175c3be1b4fe (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: A síndrome metabólica (MetS) é caracterizada por conjunto de fatores de risco para doenças cardiovasculares e diabetes. As metaloproteinases (MMPs) são enzimas envolvidas na manutenção da homeostase da matriz extracelular e um desequilíbrio entre suas concentrações e as de seus inibidores endógenos (TIMPs) pode ter um papel importante nas modificações cardiovasculares associadas com a MetS. Além disso, um estado inflamatório crônico tem sido descrito em pacientes com MetS e podem levar ao desenvolvimento de aterosclerose. A hipótese deste estudo é que aumento nas concentrações de alguns marcadores pró-inflamatórios e um desequilíbrio entre as concentrações de metaloproteinases de matriz extracelular (MMPs) e seus inibidores endógenos (TIMPs) possam estar envolvidos na fisiopatologia da MetS. Para abordar esta questão, foram estudados 25 indivíduos saudáveis (controles) e 25 pacientes com MetS. As concentrações plasmáticas de pró-MMP-2 e de pró-MMP-9 foram determinadas por zimografia. A concentração plasmática de MMP-8, MMP-3, TIMP-1, TIMP-2, proteína quimioatraente de monócitos-1 (MCP-1), interleucina-6 (IL-6), molécula de adesão intracelular-1 (sICAM-1) e sP-selectina foram medidas por kits de ELISA. Os resultados revelaram um aumento nas concentrações de sP-selectina, sICAM-1, MCP-1, IL-6, pró-MMP-9, MMP-8 e TIMP-1 em pacientes com MetS comparados com controles saudáveis. Além disso, nenhuma diferença nos níveis de pró-MMP-2, MMP- 3 e TIMP-2 foi encontrada. Nossos resultados sugerem que as MMPs podem ter um papel no aumento do risco cardiovascular em pacientes com MetS e que intervenções farmacológicas no alvo das MMPs, especialmente a MMP-9 e a MMP-8 merecem maior atenção em pacientes com MetS / Abstract: The metabolic syndrome (MetS) denotes a clustering of cardiovascular and diabetes risk factors. The metalloproteinase (MMPs) are enzymes involved in maintaining the homeostasis of the extracellular matrix and an imbalance between their concentrations and their endogenous inhibitors (TIMPs) may play important role in the cardiovascular modifications associated with MetS. In addition, a chronic inflammatory state has been described in patients with MetS, thus leading to the development of atherosclerosis. We hypothesized that increased concentrations of pro-inflammatory mediators and imbalanced concentrations of matrix metalloproteinases (MMPs) and their endogenous inhibitors (TIMPs) may reflect the pathophysiology of MetS. To address this issue, we studied 25 healthy subjects and 25 MetS patients. The plasma levels of pro-MMP-2 and pro-MMP-9 were determined by gelatin zymography. The plasma concentrations of MMP-8, MMP-3, TIMP-1, TIMP-2, monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1), interleukin-6 (IL-6), intercellular adhesion molecule (sICAM-1), and sP-selectin were measured by ELISA kits. The results revealed an increase in sP-selectin, sICAM-1, MCP-1, IL-6, pro-MMP-9, MMP-8, and TIMP-1 in MetS patients compared with healthy controls. In addition, no differences in pro-MMP-2, MMP-3, and TIMP-2 levels were found. These findings suggest that MMPs may have a role in the increased cardiovascular risk of MetS patients and pharmacological interventions targeting MMPs, especially MMP-9 and MMP-8 deserve further investigation in MetS patients / Mestrado / Mestre em Farmacologia
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Análise de receptores hormonais e marcadores inflamatórios no lobo ventral da próstata de ratos consumidores voluntários de etanol (UChB) = influência da terapia hormonal com testosterona / Hormonal receptors and inflammatory markers analysis in the ventral prostate of ethanol-preferring rats (UChB) : influence of hormonal therapy with testosterone

Mendes, Leonardo de Oliveira, 1985- 25 August 2018 (has links)
Orientadores: Francisco Eduardo Martinez, Wellerson Rodrigo Scarano / Texto em português e inglês / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-25T05:09:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mendes_LeonardodeOliveira_D.pdf: 2740474 bytes, checksum: 7720a25e258ca28197be2547f35bc162 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: O etanol provoca danos reprodutivos, diretamente nos tecidos ou indiretamente via eixo hipotalâmico-hiposário-gonadal. A próstata, hormônio-dependente, é susceptível aos efeitos do etanol. Evidências atribuem papel anti-inflamatório à testosterona, com crescente interesse na ação da terapia hormonal sobre o etanol. Assim, o presente trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos da terapia hormonal com testosterona sobre o consumo de etanol: 1) nas dosagens hormonais plasmátcas e tecidual, na histopatologia, proliferação celular e na localização e expressão de receptores hormonais (artigo I); 2) nas concentrações plasmáticas e expressão de citocinas pró e anti-inflamatórias (artigo II) no lobo ventral da próstata de ratos UChB. Ratos com 90 dias de idade foram divididos em dois grupos experimentais (n = 20/grupo): C, consumo de água ad libitum,e EtOH, consumo de etanol a 10% (v/v), > 2g de etanol/kg de peso corpóreo/dia, e água ad libitum. Aos 150 dias de idade, 10 ratos de cada grupo receberam injeções subcutâneas de cipionato de testosterona (5mg/kg de peso corpóreo) diluídos em olho de milho durante quatro semanas em dias alternados, T e EtOH+T, enquanto os restantes (10/grupo) receberam somente óleo de milho como veículo. Aos 180 dias de idade, os ratos foram eutanasiados por decapitação para coleta do sangue e as próstatas ventrais foram dissecadas, pesadas e processadas. Secções da próstata ventral foram coradas com hematoxilina e eosina, impregnação pela prata e azul de toluidina. Radioimunoensaio para avaliação das concentrações plasmáticas de testosterona, estradiol, diidrotestosterona (DHT) e testosterona intraprostática, imuno-histoquímica para Ki-67, AR, ER?, ER?, DACH-1,TGF-?1, pSmad 2, e-caderina e ?-actina, western blot para AR, ER?, ER?, DACH-1, PAR4, IL-6 IL-10, TNF? e TGF-?1 e elisa para determinação das concentrações plasmáticas de IL-6, IL-10, TNF? e TGF-?1foram realizados. A terapia com testosterona aumentou o peso da próstata ventral. Houve diminuição do compartimento epitelial e aumento do luminal no EtOH com a terapia hormonal revertendo esses efeitos. O compartimento estromal do EtOH caracterizou-se pela presença de feixes de fibras reticulares delgados e esparsos, com ruptura da camada de células musculares lisas.Focos inflamatórios, metaplasia, atipia reativa inflamatória, perda de adesão entre as células epiteliais e aumento de mastócitos intactos e desgranulados foram frequentes no EtOH e ausentes no EtOH+T. Tanto testosterona como etanol não alteraram a taxa de proliferação celular, porém maior expressão de PAR4 foi observada no EtOH. Houve aumento da testosterona plasmática, intraprostática e DHT no T e EtOH+T e diminuição do estradiol plasmático no EtOH+T. Os T e EtOH+T também apresentaram níveis plasmáticos superiores de TNF? e TGF-?1, sem diferença em relação à IL-6 e IL-10. A expressão de AR, ER?, DACH-1 e IL-6 na próstata foi semelhante entre os grupos experimentais, diferentemente do que foi observado para ER?, TNF? e TGF-?1, que diminuíram após terapia hormonal.Nossos resultados indicam que o etanol foi capaz de induzir a emergência de focos inflamatórios, além de suprimir a imunorreatividade para e-caderina e ?-actina. A testosterona reverteu esses efeitos, reduzindo a expressão do ER?, TGF-?1, TNF? e NFR2, tornando-se um possível alvo a ser avaliado para as disordens causadas pelo etanol / Abstract: Ethanol induces reproductive damages, directly in the tissues or indirectly by hormonal imbalance. Prostate, a hormone-dependent gland, is susceptible to effects caused by ethanol. Emerging evidences assign to testosterone an anti-inflammatory role, with growing interest in the action of hormone therapy on the effects of ethanol. Therefore, the current research aimed to assess the effects of hormone therapy with testosterone on the ethanol consumption: 1) in tissue and plasma hormone assays, histopathology and immunolocalization and expression of hormone receptors (manuscript I); plasma levels and expression of pro and anti-inflammatory cytokines (manuscript II) in the ventral prostate of UChB rats (ethanol-preferring rat). UChB rats aged 90 days were divided into two experimental groups (n=20): C: drinking water only and EtOH: drinking 10% (v/v) ethanol at > 2 g/kg body weight/day + water. At 150 days of age, 10 rats from each group received subcutaneous injections of testosterone cypionate (5mg/kg body weight) diluted in corn oil every other day during 4 weeks, constituting T and EtOH+T, while the remaining animals (10/group) received corn oil as vehicle. All animals were euthanized at 180 days old by decapitation. Blood was collected to obtain plasma hormone and cytokines concentrations and ventral prostate was dissected, weighted and processed. Prostate sections were stained with hematoxylin and eosin, Gomori¿s reticulin and toluidine blue. The following techniques were performed: radioimmunoassay to plasma concentrations of testosterone, dihydrotestosterone (DHT), estradiol and intraprostatic testosterone, immunohistochemistry to Ki-67, AR, ER?, ER?, DACH-1, TGF-?1, pSmad 2, e-cadherin e ?-actinin, western blot to AR, ER?, ER?, DACH-1, PAR4, IL-6 IL-10, TNF? and TGF-?1 and elisa to plasma concentrations of IL-6, IL-10, TNF-? and TGF-?1. Testosterone therapy increased the ventral prostate weight. There were reducing of epithelial compartment and increasing of luminal compartment in the EtOH and hormonal therapy was able to reverse this pattern. Stroma compartment of EtOH showed thin and sparse reticular fiber bundles with rupture of smooth muscle cell layer. Inflammatory foci metaplasia, inflammatory reactive atypia, loss of cell-cell adhesion and increasing of degranulated mast cells were frequent in EtOH and absent in EtOH+T. Testosterone and ethanol did not alter the proliferation rate, but high expression of PAR4 was shown in EtOH. There was increasing of plasma and intraprostatic testosterone and plasma DHT in T and EtOH+T and decreasing of estradiol in EtOH+T. The T and EtOH+T exhibited increasing of plasma TNF? and TGF-?1, without differences regarding to IL-6 and IL-10. AR, ER?, DACH-1 and IL-6 expressions were similar among the experimental groups, differently from ER?, TNF? and TGF-?1, which decreased after hormonal therapy. Our results show that ethanol was able to induce the emergence of inflammatory foci, besides suppress the immunorreactivity to e-cadherin and ?-actinin. Testosterone was able to reverse these effects, downregulating ER?, TGF-?1, TNF? and NFR2, showing to be promising in the treatment of alcohol-related disorders / Doutorado / Biologia Tecidual / Doutor em Biologia Celular e Estrutural
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Avaliação de estresse, morbidade psiquiatrica e marcadores inflamatorios em individuos de baixo status socioeconomico / Stress, psychiatric morbidity and inflammatory markers in low socioeconomic status individuals

Souza, Aglecio Luiz de, 1979- 14 December 2007 (has links)
Orientador: Regina Celia Spadari / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-11T10:54:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Souza_AglecioLuizde_M.pdf: 1332866 bytes, checksum: 5e6eb15dfbfa806199261b6c88b3e135 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Muitos estudos demonstram associação entre baixo status socioeconômico e alta prevalência de morbidade psiquiátrica. Entretanto, em países da América Latina, incluindo o Brasil, nos quais as diferenças sociais são maiores, estes estudos são escassos. Fatores psicossociais são importantes mediadores da relação entre saúde e status socioeconômico, e as respostas neuroendócrinas e imunológicas podem explicar a patogênese de morbidade psiquiátrica associada ao estresse psicossocial. Esta resposta é modulada pelo cortisol e por mediadores inflamatórios. O objetivo deste estudo foi avaliar a associação entre índice de estresse percebido, prevalência de morbidade psiquiátrica, concentrações séricas de interleucina 6 (IL-6), fator de necrose tumoral-a (TNF-a) e proteína C reativa (PCR), bem como de cortisol salivar em indivíduos de baixo status socioeconômico. Sessenta e cinco indivíduos foram submetidos a análises psicométricas utilizando-se a Entrevista Clínica Estruturada Revisada (CIS-R), o Questionário de Estresse Percebido (QEP) e a Escala Hospitalar de Ansiedade e Depressão, e forneceram amostras de sangue e saliva para determinação da concentração dos marcadores acima mencionados. Os resultados mostraram alto índice de estresse percebido e alta prevalência de morbidade psiquiátrica, os quais apresentaram associação entre si. Os sujeitos apresentaram também alta concentração salivar de cortisol e resposta do cortisol ao acordar, sendo esta última negativamente correlacionada com a renda per capita. A concentração sérica dos marcadores inflamatórios foi maior do que a apontada na literatura em indivíduos saudáveis, porém, não houve associação entre estes marcadores inflamatórios, o estresse percebido e a prevalência de morbidade psiquiátrica. Nós concluímos que exposição crônica a estressores psicossociais, presentes no ambiente dos indivíduos avaliados, pode explicar o alto índice de estresse percebido e a alta prevalência de morbidade psiquiátrica encontrados neste trabalho. O estresse psicossocial crônico, através da concentração aumentada de cortisol, deixaria o indivíduo vulnerável à morbidade psiquiátrica. Além disso, as altas concentrações de marcadores inflamatórios encontradas indicam um estado sub-clínico de inflamação, o qual poderia contribuir para a alta prevalência de morbidade psiquiátrica e para a manutenção de concentrações elevadas de cortisol. Assim, devido às características socioeconômicas, o Brasil, comparado com países desenvolvidos, possui uma significativa parcela da população sujeita a transtornos mentais, os quais têm forte impacto negativo sobre a saúde pública, exigindo políticas de prevenção e intervenção especificamente direcionadas à população de baixo status socioeconômico / Abstract: The association between low socioeconomic status (SES) and high psychiatric morbidity prevalence has been established throughout studies performed in rich countries rather than developing countries where the social differences are huge. The aim of this work was to investigate the association between the perceived stress level, psychiatric morbidity prevalence, interleukin-6 (IL-6), a- tumoral necrose factor (a TNF) and reactive C protein (PCR) serum levels, as well as salivary cortisol concentration in individuals of low SES. Sixty-five adult male classified as belonging to low SES were submitted to a psychometric analysis by the Revised Clinical Interview Schedule (CIS-R), the Perceived Stress Questionnaire (QSP) and the Hospital Anxiety and Depression Scale (HAD). The subjects also provided blood and saliva samples for the analysis of the biological markers of stress and inflammation. The results showed association between perceived stress level and prevalence of psychiatric morbidity, with both indicators showing high scores. The salivary cortisol concentration and the awakening cortisol response (CAR) were high and the CAR showed a negative correlation to per capita income. The inflammatory markers levels were higher compared to data for healthy subjects in the literature. However, there was no association between inflammatory markers, perceived stress and psychiatric morbidity prevalence. We concluded that chronic exposure to psychosocial stressors, present in low SES environmental, might explain the higher perceived stress level and psychiatric morbidity prevalence found in this work. The chronic psychosocial stress, through the high cortisol levels, might lead to psychiatric morbidity vulnerability. Inasmuch, the higher inflammatory markers levels indicate an inflammatory state, which probably contribute to psychiatric morbidity prevalence. Therefore, considering the socioeconomic features of the Brazilian population, there is a great percentage of people exposed to high risk of mental health diseases. This picture might have a negative impact on public health and imposes the need for public actions of prevention and of intervention specifically directed toward this socioeconomic class / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

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