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ANÁLISE ESPACIAL E QUANTIFICAÇÃO DE INÓCULO DE MOFO BRANCO (Sclerotinia sclerotiorum (Lib) de Bary) NA CULTURA DA SOJA (Glycine max (L) Merril)Wutzki, Carlos Rafael 14 August 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-08-14 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O conhecimento da dinâmica espacial de doenças de plantas, aliado a quantificação de inóculo
e monitoramento das condições meteorológicas é de grande importância para a adoção de
estratégias de manejos adequados e com menor impacto ambiental. Sendo assim, os objetivos
deste trabalho de pesquisa foram caracterizar a distribuição, variabilidade espacial e possíveis
relações entre atributos referentes ao mofo branco e atributos de plantas de soja além de avaliar
técnicas de identificação e quantificação de ascósporos de Sclerotinia sclerotiorum durante o
florescimento da soja. Foram realizadas amostragens através de uma malha georreferenciada
em uma área de 12 hectares (ha) no município de Mauá-da-Serra-PR nas safras 2013/14 e
2014/15 e uma área de quatro hectares no município de Ponta Grossa-PR na safra 2015/16.
Foram utilizados quadrats com área útil de 7,2 m² para avaliação das seguintes variáveis:
escleródios presentes no solo, estande da cultura, incidência, índice de doença, rendimento,
escleródios produzidos na colheita, além da deposição do bioaerossol, partes de folha e flores
da soja como uso de Meio Semi-seletivo a Sclerotinia sclerotiorum (MSS) e Reação em cadeia
da polimerase quantitativa (qPCR), em 36 pontos de amostragem na área de Ponta Grossa-PR,
em três datas durante o florescimento da soja. Os dados foram analisados com uso de estatística
descritiva, ajuste de semivariogramas e matriz de correlação de Pearson. As condições
meteorológicas observadas nos três experimentos foram adequadas para o desenvolvimento da
cultura da soja e do mofo branco na soja. As variáveis referentes a cultura da soja apresentaram
coeficientes de variação baixos ou moderados e as variáveis referentes ao mofo branco
apresentaram coeficiente de variação muito elevados. Os ajustes dos semivariogramas
apresentaram diferenças nos três experimentos, com efeito pepita puro, ajuste linear, esférico e
exponencial. A variável escleródios do solo apresentou efeito pepita puro nos dois experimentos
em Mauá-da-Serra. Foram encontradas correlações significativas positivas entre a incidência
do mofo branco e a produção de escleródios na colheita, além de correlação negativa com o
rendimento nos três experimentos. A identificação de inóculo de mofo branco com incubação
em MSS mostrou-se a técnica com maior sensibilidade, mas demanda de até 15 dias para a
confirmação de S. sclerotiorum, tanto para bioaerossol, como flores e partes de folhas de soja.
Foi possível otimizar o protocolo de extração de DNA e ciclo de reação para qPCR, além de
gerar uma curva padrão com DNA oriundo de ascósporos de S. sclerotiorum, com ajuste ao
modelo linear (R²=0,99) e eficiência de 92,2%. O uso de qPCR mostrou-se promissor para
partes de folhas, sendo possível resultados em um dia de trabalho. / The knowledge of the spatial dynamics of plant diseases, allied with the quantification of
inoculum and monitoring of the meteorological conditions, is important for the adoption of
adequate management strategies and with less environmental impact. The aim of this work was
to characterize the distribution, spatial variability and possible relations between white mold
attributes and soybean plants attributes, as well as to evaluate techniques for identification and
quantification of ascospores of Sclerotinia sclerotiorum during soybean flowering. Samplings
were carried out through a georeferenced grid on a field of 12 hectares (ha) in the municipality
of Mauá-da-Serra-PR in the 2013/14 and 2014/15 crop seasons and, on a field of four hectares
in the municipality of Ponta Grossa-PR in the 2015/16 crop season. Quadrats with a useful area
of 7.2 m² were used to evaluate the following variables: sclerotia in the soil, crop stand,
incidence, severity, yield, sclerotia produced at harvest, as well as bioaerosol deposition,
soybean leaf parts and flowers on semi-selective medium to Sclerotinia sclerotiorum (MSS)
and quantitative polymerase chain reaction (qPCR), at 36 sampling points in the Ponta Grossa-
PR field, at three dates during soybean flowering. Data were analyzed using descriptive
statistics, semivariogram adjustment and Pearson correlation matrix. The meteorological
conditions observed in the three experiments were adequate for the development of soybean
crop and white mold disease. The variables related to soybean plants, showed low or moderate
coefficients of variation and the variables related to white mold showed a high coefficient of
variation. The semivariograms adjustments showed differences in the three experiments, with
pure nugget effect, linear, spherical and exponential adjustments. The variable sclerotia of soil
showed pure nugget effect on the two experiments in Mauá-da-Serra. Significant positive
correlations were found between the incidence of white mold and the production of sclerotia at
harvest, in addition to negative correlation to yield in the three experiments. The identification
of white mold inoculum with incubation on MSS was shown to be the most sensitive technique,
but takes up to 15 days for the confirmation of S. sclerotiorum pathogen for bioaerossol, flowers
and parts of soybean leaves. It was possible to optimize the protocol of DNA extraction and
reaction cycle for qPCR, besides generating a standard curve with DNA from ascospores of S.
sclerotiorum, adjusted to the linear model (R² =0, 99) and efficiency of 92.2%. The use of qPCR
showed promise results for leaf parts, being possible achieve concluding results in one working
day.
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