Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Pinus elliottii is an important forestal culture, whose seeds, in terms of health quality, display high vulnerability to fungal pathogenic agents, especially to the association of especially by association of Fusarium spp. which is a responsible agent for seedlings losses in the nursery. This study aims to determine the appropriate method to assess the pathogenicity of Fusarium sp. associated with seeds of P. elliottii, and characterize the fungus, morphological- and molecularly, on its species level, as well as to verify the efficiency of its in vitro and in vivo biological control. Pathogenicity to different treatments were applied: T1 - Contact + Fusarium sp.; T2 - Contact + film coating + Fusarium sp.; T3 - film coating + Fusarium sp.; T4 film coating; T5 - Contact PDA and T6 - No treatment. Morphological characterization was performed using a specific identification key for the genus Fusarium, and the molecular identification, we sequenced three genomic regions of isolate, which are: ITS, elongation factor 1-α and beta-tubulin. In tests of biological control used is Trichoderma spp. and Bacillus subtilis in the commercial forms Agrotrich Plus® and Rizolyptus®, respectively. The control tests were performed in vitro by the method of paired comparison of cultures (pathogen x antagonist) and in vivo tests were carried out in nursery conditions. Fusarium s species that was identified on the seeds was characterized as Fusarium sambucinum, which is pathogenic to P. elliottii, when the seeds are inoculated via contact to the fungal culture during 48 hours. Microbilization of seeds with Bacillus subtilis and Trichoderma spp. provided improvement on the germination potential of them, and, in the case of Agrotrich Plus®, reduced the incidence of rot agent fungi, such as Penicillium sp. and Aspergillus sp.. The antagonistic agents were efficient on the in vitro control of F. sambucinum. Rizolyptus® stood out against the pathogen on the in vivo biocontrol test; it reduced seedlings losses and increased values of their length, as well as, of their green and dry masses. / Pinus elliottii é uma espécie de importância no setor florestal e que apresenta vulnerabilidade na qualidade sanitária de suas sementes, especialmente pela associação de Fusarium spp., responsável por perdas de plântulas no viveiro. O presente trabalho tem como objetivo determinar o método adequado para avaliar a patogenicidade de Fusarium spp. associado a sementes de P. elliottii e caracterizar morfologica e molecularmente o patógeno em nível de espécie, bem como verificar a eficiência do controle biológico in vitro e in vivo do fungo. Para patogenicidade foram aplicados diferentes tratamentos: T1- Contato + Fusarium sp.; T2 - Peliculização + Contato + Fusarium sp.; T3 - Peliculização + Fusarium sp.; T4 Peliculização; T5 - Contato com meio BDA e T6 - Sem tratamento. A caracterização morfológica foi realizada, utilizando uma chave de identificação específica para o gênero Fusarium, e para a identificação molecular, foram sequenciadas três regiões genômicas do isolado, sendo elas: ITS, fator de elongação 1- α e beta-tubulina. Nos testes de controle biológico utilizou-se Trichoderma spp. e Bacillus subtilis, nas formas comerciais Agrotrich Plus® e Rizolyptus®, respectivamente. Os testes de controle in vitro foram realizados pelo método de confronto pareado de culturas (antagonista x patógeno) e os testes in vivo, foram desenvolvidos em condições de viveiro. A espécie de Fusarium identificada nas sementes foi caracterizada como Fusarium sambucinum, patogênico a P. elliottii, quando inoculado via contato com a cultura fúngica por 48 horas. A microbiolização das sementes com Rizolyptus® e Agrotrich Plus® promoveu incremento no potencial germinativo e, no caso do Agrotrich Plus®, reduziu a incidência de fungos apodrecedores como Penicillium sp. e Aspergillus sp. Os antagonistas foram eficientes no controle in vitro de F. sambucinum e, no teste de biocontrole in vivo, o produto Rizolyptus® destacou-se, reduzindo as perdas de plântulas causadas pelo patógeno, assim como, potencializando as variáveis de comprimento de plântula, massa verde e massa seca.

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:59:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_anelise_tessari_perboni.pdf: 3320042 bytes, checksum: 7a6c067308b205a4410c66d4f92e4b7c (MD5) Previous issue date: 2014-01-10 / The work aimed to evaluate the photosynthetic traits, growth and production of canola plants originated from seeds microbiolized with growth-promoting bacteria. Sequential tests were developed using different isolates of growth-promoting bacteria in association with canola hybrids. In the first test, 96 isolates were used for the mass selection of growth-promoting bacteria. JIP test parameters obtained from the chlorophyll fluorescence, leaf area and shoot dry weight of the Hyola 433 hybrid were evaluated at 55 days after sowing (DAS). The second test was conducted in two stages with isolates selected in the test I: in the stage I, chlorophyll fluorescence, gas exchange and shoot dry weight of Hyola 433 hybrid were evaluated through three measurements in different periods of the crop cycle; in the stage II, the seedlings emerged, chlorophyll fluorescence, leaf area, leaves, petioles and stems dry weight in plants of the Hyola 61 hybrid were evaluated at 41 DAS. In the third test, the isolated DFs 104, DFs 320, DFs 513 and DFs 628 were used, selected in previous experiments; the seedling emergence, performance indexes, leaf area, dry matter partitioning and chlorophyll index were evaluated during the plants growth. At the end of the experiment, the yield components per plant and grain composition of fatty acids were determined. The correlation between the JIP test parameters and growth variables allowed the determination of interest parameters (F0/FM, FV/F0, ABS/RC, TR0/RC, φPo, PIabs and PItotal) for selection of isolates with potential to promote plant growth. Generally, the JIP test parameters were able to detect changes in the operation of the electron transport chain in plants of different treatments; however the responses were highly variable in each test. Some isolates caused an increase of the growth parameters especially DFs 320, DFs 513 and DFs 628 which also showed trends of increase of yield components. In addition, these isolates did not change the fatty acid composition of canola grains, i.e., the seed microbiolization can promote plant growth without causing changes in the quality of oil obtained. We conclude that chlorophyll fluorescence can be used in the evaluation of photosynthetic responses of plants from seeds microbiolized with bacterial isolates. The seeds microbiolization with bacterial isolates DFs 320 [unidentified], DFs 513 [Pseudomonas veronii] and DFs 628 [Bacillus sp.] promotes increase of Hyola 61 hybrid canola plants growth. / O trabalho teve como objetivo avaliar as características fotossintéticas, o crescimento e a produção de plantas de canola originadas de sementes microbiolizadas com bactérias promotoras de crescimento. Foram desenvolvidos ensaios sequenciais utilizando diferentes isolados de bactérias promotoras de crescimento em associação com híbridos de canola. No primeiro ensaio foram utilizados 96 isolados para a seleção massal de bactérias promotoras de crescimento. Foram avaliados os parâmetros do Teste JIP obtidos a partir da fluorescência da clorofila, a área foliar e a massa seca da parte aérea de plantas do híbrido Hyola 433 aos 55 dias após a semeadura (DAS). O segundo ensaio foi desenvolvido em duas etapas com isolados selecionados no ensaio I: na etapa I avaliaram-se a fluorescência da clorofila, trocas gasosas e a massa seca da parte aérea das plantas do híbrido Hyola 433 por meio de três medições em diferentes períodos do ciclo da cultura; na etapa II procedeu-se a contagem das plântulas emergidas, avaliação da fluorescência da clorofila, área foliar, massa seca das folhas e dos pecíolos e caules nas plantas do híbrido Hyola 61 aos 41 DAS. No terceiro ensaio foram utilizados os isolados DFs 104, DFs 320, DFs 513 e DFs 628, selecionados nos experimentos anteriores; avaliou-se a emergência de plântulas, os índices de performance, a área foliar, a partição de massa seca e o índice de clorofila durante o crescimento das plantas. Ao final do experimento foram determinados os componentes de produção por planta e a composição de ácidos graxos dos grãos. A correlação entre os parâmetros do Teste JIP e as variáveis de crescimento permitiu a determinação de parâmetros de interesse (F0/FM, FV/F0, ABS/RC, TR0/RC, φPo, PIabs e PItotal) para seleção de isolados com potencial para promoção de crescimento das plantas. De forma geral, os parâmetros do Teste JIP foram capazes de detectar modificações no funcionamento da cadeia de transporte de elétrons nas plantas dos diferentes tratamentos, contudo as respostas apresentaram-se bastante variáveis em cada ensaio. Alguns isolados promoveram aumento dos parâmetros de crescimento destacando-se DFs 320, DFs 513 e DFs 628, os quais também apresentaram tendências de incremento dos componentes de produção. Além disso, estes isolados não modificaram a composição de ácidos graxos dos grãos de canola, ou seja, a microbiolização das sementes pode promover o crescimento das plantas sem provocar alterações na qualidade do óleo obtido. Conclui-se que a fluorescência da clorofila a pode ser utilizada nas avaliações das respostas fotossintéticas das plantas provenientes de sementes microbiolizadas com isolados bacterianos. A microbiolização das sementes com os isolados bacterianos DFs 320 [não identificado], DFs 513 [Pseudomonas veronii] e DFs 628 [Bacilus sp.] promove aumento do crescimento das plantas de canola do híbrido Hyola 61.