Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Cucumis melo is one of the most important horticultural species representing the family Cucurbitaceae, moreover, it is the leader fruit concerning value and volume of exportation in Brazil. As in other cultures, both physiological and health quality of seeds used in the crop establishment are critical to ensure an appropriate population of plants and with high quality and productivity. Treatment of seeds is employed in order to protect them against pathogens, as well as, to accelerate and uniform their germination. Thus, this study aims to evaluate the physiological and health quality of melon seeds, cv. Gaúcho Redondo‟, treated with chemical fungicides, biocontrol agents, micronutrients and polymer. Application rates followed recommendations described by manufacturers. Evaluation of physiological traits was undertaken by means of germination, seedlings length, cold storage, germination at low temperatures, greenhouse emergence and emergence speed index tests. Health quality tests, by the other hand, were determined by Blotter test , transmission and pathogenicity of Fusarium spp. isolated from melon seeds. Treatments with micronutrients, purely or combined with polymer coating, incremented in seed germination, as well as, the emergence and the emergence speed index. Trichoderma spp. also provided a significant increase in the first count and germination. The fungicide Captan® acted efficiently on Fusarium spp. present in the seeds, though it had not been totally eradicated. This pathogen associated with melon seeds did not affect the germination process of them. / Cucumis melo é uma das principais hortaliças representantes da família Cucurbitaceae, além disso, é a fruta líder em valor e volume de exportação no Brasil. Como em todas as culturas, a qualidade fisiológica e sanitária das sementes utilizadas na implantação da lavoura é fundamental para garantir uma população adequada de plantas e com elevada qualidade e produtividade. O tratamento de sementes é utilizado para promover a proteção das sementes contra patógenos causadores de doenças e proporcionar uma germinação mais rápida e uniforme. Dessa forma, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a qualidade fisiológica e sanitária das sementes de melão, cultivar Gaúcho Redondo, após tratamento das mesmas com fungicidas químicos, agentes de biocontrole, micronutrientes e polímero. As doses de aplicação dos produtos seguiram as recomendações dos fabricantes e as avaliações da qualidade fisiológica das sementes foram realizadas através do teste de germinação, comprimento de plântulas, teste de frio, germinação a baixas temperaturas, emergência em casa de vegetação e índice de velocidade de emergência. Já a qualidade sanitária foi determinada pelo teste de sanidade, transmissão e patogenicidade de isolados de Fusarium spp. obtidos das sementes de melão. Os tratamentos com micronutrientes, isolados ou com recobrimento de polímero, promoveram incremento na germinação das sementes, assim como na emergência e no índice de velocidade de emergência. Trichoderma spp. também proporcionou aumento significativo na primeira contagem e na germinação. O fungicida Captan® atuou de forma eficiente no controle de Fusarium spp. presente nas sementes, embora não tenha erradicado totalmente. Este patógeno, associado às sementes de melão, não interferiu no processo germinativo das mesmas.

Fundação de Amparo a Pesquisa no Estado do Rio Grande do Sul / Trichoderma spp. is one of the most studied funguses as a biocontrol agent, being antagonistic to various plant pathogens in different cultures. This work aimed the production of liquid bio formulate of Trichoderma harzianum and Trichoderma viride based on biopolymer Xanthan Gum (GX) and carboxymethylcellulose (CMC) and the polymer polyvinylpyrrolidone (PVP).The bio formulates were composed of glycerol 10.0 gL -1, yeast extract 0.5 gL -1, MgSO 4 .7 H 2 0 0.2 gL -1, K 2 HPO 4 0.5 gL -1 and NaCl 0.1 gL -1. These amounts were determined by assessing the shortest period of time between the inoculation and sporulation of the fungus in Petri dishes containing PDA culture medium (potato dextrose agar) and bio formulates. The purpose of the use of these products were to make available a formulation that presents 180 days of shelf validity, as regarding the survival parameters (number of spores), evaluated using a Neubauer chamber and infectivity in vitro evaluated by testing direct confrontation with Fusarium oxysporum Schlecht . The evaluations were performed at intervals of 30, 60, 90, 120 and 180 days. The treatments used were G 1 P 1 C 2 (GX, 1.0 gL -1; PVP, 1.0 gL -1; CMC, 2.0 g L -1), G 0.5 P0.5 C1 (GX, 0.5 gL -1; PVP, 0.5 gL -1; CMC, 1.0 g L -1), G 2P 2C (GX, 2.0 gL -1; PVP, 2.0 gL-1) and GPC1 (CMC, 1.0 gL-1), stored in sterile plastic container at room temperature. T. harzianum showed the best result with G 0.5 P0.5C 1 in all periods of assessment. For T. viride none of the treatments was better than the control in the assessed periods. Polymers make possible to develop effective means of storage, extending the life of bio formulates. / Trichoderma spp. é um dos fungos mais pesquisados como agente de biocontrole, sendo antagonista a vários fitopatógenos em diferentes culturas. Este trabalho teve como objetivo a produção de bioformulado líquido de Trichoderma harzianum e Trichoderma viride a base de biopolímeros Goma Xantana (GX) e Carboximetilcelulose (CMC) e o polímero Polivinilpirrolidona (PVP). Os bioformulados foram compostos por glicerol 10,0 gL-1, extrato de levedura 0,5 gL-1, MgSO4.7H20 0,2 gL-1, K2HPO4 0,5 gL-1 e NaCl 0,1 gL-1. As quantidades foram determinadas através da avaliação do menor período de tempo entre a repicagem e a esporulação do fungo em placas de Petri, contendo meio de cultura BDA (batata dextrose ágar) e os bioformulados. A finalidade do uso destes produtos foi disponibilizar uma formulação que apresente 180 dias de validade em prateleira, quanto aos parâmetros sobrevivência (número de esporos), avaliado através de Câmara de Neubauer e infectividade in vitro avaliado através de teste de confrontação direta com Fusarium oxysporum Schlecht. Os intervalos de avaliações ocorreram aos 30, 60, 90, 120 e 180 dias. Os tratamentos utilizados foram G1P1C2 (1,0gL-1 GX, 1,0 gL-1 PVP, 2,0 gL-1 CMC), G0,5P0,5C1 (0,5 gL-1 GX, 0,5 gL-1 PVP, 1,0 gL-1 CMC), G2P2C (2,0 gL-1 GX, 2,0 gL-1 PVP) e GPC1 (1,0 gL-1 CMC), armazenados em embalagens plásticas e estéreis, em temperatura ambiente. T. harzianum apresentou melhor resultado com G0,5P0,5C1 em todos períodos de avaliação. Para T. viride nenhum dos tratamentos foi melhor do que o controle nos períodos avaliados. Os polímeros permitem desenvolver meios eficazes de armazenamento, prolongando a vida útil de bioformulados.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-05-05T14:51:13Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 592470 bytes, checksum: cc8ef864c2b3e01b5ab1475f19179564 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-05T14:51:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 592470 bytes, checksum: cc8ef864c2b3e01b5ab1475f19179564 (MD5) Previous issue date: 2014-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Micro-organismos têm se mostrado como uma das fontes mais ricas e promissoras de novos compostos com atividade fitotóxica e reguladora do crescimento de plantas. Os Trichoderma spp. vêm se destacando como agentes de biocontrole bem como na promoção do crescimento de plantas. A atividade biológica desses fungos pode estar associada aos diferentes metabólitos voláteis produzidos por eles. Este trabalho teve como objetivo a avaliação dos extratos de Trichoderma asperellum, Trichoderma harzianum, Trichoderma pseudokonigii, Trichoderma viride e Trichoderma virens sobre a promoção o crescimento de plantas. A partir dos extratos obtidos do meio de mineral foi possível detectar metabólitos voláteis pela técnica de cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas (CG-EM). Foram identificados diversos compostos, dentre eles ácido desidroacético, 2-feniletanol e ciclo prolina-isoleucina, o qual, até o presente momento, nunca havia sido descrito para Trichoderma sp. A lactona 6-pentilpiran-2-ona foi identificada em T. asperellum, T. harzianum e T. viride. As atividades fitotóxicas dos extratos foram avaliadas sobre o crescimento radicular e a germinação de sorgo (Sorghum bicolor L.) e pepino (Cucumis sativus L.) nas concentrações de 31,25; 62,50; 125; 500 e 1000; ppm. Os extratos não afetaram a germinação das sementes de pepino, mas influenciaram na germinação das sementes de sorgo. Os extratos induziram o crescimento radicular tanto do pepino quanto do sorgo, sendo que os extratos de T. pseudokoningii e T. asperellum aumentaram esse crescimento em 366 e 249% e em 43 e 33%, respectivamente. Em casa de vegetação, os extratos de T. viride e de T. virens foram os que aumentaram mais o crescimento radicular nas plântulas de pepino, em 95 e 88% respectivamente, e de sorgo em 44 e 41%, enquanto o extrato de T. virens aumentou em até 334% o crescimento da corda de viola (Ipomoea grandifolia). Verifica-se, portanto, que as espécies de fungo estudadas apresentam substâncias que promovem o crescimento vegetal. / Microorganisms have been shown to be one of the richest and most promising sources of new compounds with phytotoxic activity and regulating plant growth . Trichoderma spp. have been highlighted as biocontrol agents and promoting plant growth. The biological activity of these fungi can be associated with different volatile metabolites produced by them. This study aimed to evaluate the extracts Trichoderma asperellum, Trichoderma harzianum, Trichoderma pseudokonigii, Trichoderma viride and Trichoderma virens on promoting the growth of plants. From the extracts of the mineral medium volatile metabolites could be detected by the technique of gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). Various compounds, among them were identified dehydroacetic acid, 2 - phenylethanol and isoleucine- proline cycle, which, until now, had never been described for Trichoderma sp . The lactone 6- pentilpiran -2-one was identified in T. asperellum, T. harzianum and T. viride. The phytotoxic activities of the extracts were evaluated on root growth and germination of sorghum (Sorghum bicolor L.) and cucumber ( Cucumis sativus L.) at concentrations of 31.25 ; 62.50; 125 ; 500 and 1000 ; ppm. The extracts did not affect the germination of cucumber, but influenced the germination of sorghum seeds. The extracts induce root growth of cucumber so as sorghum, and extracts from T. pseudokoningii and T. asperellum this growth increased 366 and 249 % and in 43 and 33%, respectively. In the greenhouse, the extracts of T. viride and T. virens were increased more than root growth in cucumber seedlings at 95 and 88 % respectively, and sorghum in 44 and 41%, while the extract of T. virens increased by up to 334% growth string viola ( Ipomoea grandifolia ) . It is apparent, therefore, that the fungus species have studied substances which promote plant growth.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Pinus elliottii is an important forestal culture, whose seeds, in terms of health quality, display high vulnerability to fungal pathogenic agents, especially to the association of especially by association of Fusarium spp. which is a responsible agent for seedlings losses in the nursery. This study aims to determine the appropriate method to assess the pathogenicity of Fusarium sp. associated with seeds of P. elliottii, and characterize the fungus, morphological- and molecularly, on its species level, as well as to verify the efficiency of its in vitro and in vivo biological control. Pathogenicity to different treatments were applied: T1 - Contact + Fusarium sp.; T2 - Contact + film coating + Fusarium sp.; T3 - film coating + Fusarium sp.; T4 film coating; T5 - Contact PDA and T6 - No treatment. Morphological characterization was performed using a specific identification key for the genus Fusarium, and the molecular identification, we sequenced three genomic regions of isolate, which are: ITS, elongation factor 1-α and beta-tubulin. In tests of biological control used is Trichoderma spp. and Bacillus subtilis in the commercial forms Agrotrich Plus® and Rizolyptus®, respectively. The control tests were performed in vitro by the method of paired comparison of cultures (pathogen x antagonist) and in vivo tests were carried out in nursery conditions. Fusarium s species that was identified on the seeds was characterized as Fusarium sambucinum, which is pathogenic to P. elliottii, when the seeds are inoculated via contact to the fungal culture during 48 hours. Microbilization of seeds with Bacillus subtilis and Trichoderma spp. provided improvement on the germination potential of them, and, in the case of Agrotrich Plus®, reduced the incidence of rot agent fungi, such as Penicillium sp. and Aspergillus sp.. The antagonistic agents were efficient on the in vitro control of F. sambucinum. Rizolyptus® stood out against the pathogen on the in vivo biocontrol test; it reduced seedlings losses and increased values of their length, as well as, of their green and dry masses. / Pinus elliottii é uma espécie de importância no setor florestal e que apresenta vulnerabilidade na qualidade sanitária de suas sementes, especialmente pela associação de Fusarium spp., responsável por perdas de plântulas no viveiro. O presente trabalho tem como objetivo determinar o método adequado para avaliar a patogenicidade de Fusarium spp. associado a sementes de P. elliottii e caracterizar morfologica e molecularmente o patógeno em nível de espécie, bem como verificar a eficiência do controle biológico in vitro e in vivo do fungo. Para patogenicidade foram aplicados diferentes tratamentos: T1- Contato + Fusarium sp.; T2 - Peliculização + Contato + Fusarium sp.; T3 - Peliculização + Fusarium sp.; T4 Peliculização; T5 - Contato com meio BDA e T6 - Sem tratamento. A caracterização morfológica foi realizada, utilizando uma chave de identificação específica para o gênero Fusarium, e para a identificação molecular, foram sequenciadas três regiões genômicas do isolado, sendo elas: ITS, fator de elongação 1- α e beta-tubulina. Nos testes de controle biológico utilizou-se Trichoderma spp. e Bacillus subtilis, nas formas comerciais Agrotrich Plus® e Rizolyptus®, respectivamente. Os testes de controle in vitro foram realizados pelo método de confronto pareado de culturas (antagonista x patógeno) e os testes in vivo, foram desenvolvidos em condições de viveiro. A espécie de Fusarium identificada nas sementes foi caracterizada como Fusarium sambucinum, patogênico a P. elliottii, quando inoculado via contato com a cultura fúngica por 48 horas. A microbiolização das sementes com Rizolyptus® e Agrotrich Plus® promoveu incremento no potencial germinativo e, no caso do Agrotrich Plus®, reduziu a incidência de fungos apodrecedores como Penicillium sp. e Aspergillus sp. Os antagonistas foram eficientes no controle in vitro de F. sambucinum e, no teste de biocontrole in vivo, o produto Rizolyptus® destacou-se, reduzindo as perdas de plântulas causadas pelo patógeno, assim como, potencializando as variáveis de comprimento de plântula, massa verde e massa seca.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The objective of the present study was to evaluate the effect of Trichoderma spp. on the physiologic potential of seeds and melon seedlings and also to evaluate the effect of Trichoderma spp. in melon seeds through the inoculation technique of water restriction. Two experiments were accomplished: in the first one, they were used as treatment of seeds, biological products to the base of Trichoderma spp. in the formulation it liquid and powder, besides the fungicide Captan isolated SC® and associate to the biological products. In the second experiment the technique of water restriction was used, where the treatments consisted of: BDA; BDA + manitol - 0,6MPa; BDA + manitol -0,8MPa; Trichoderma spp.; BDA + manitol -0,6 MPa +Trichoderma spp; BDA + manitol -0,8MPa + Trichoderma spp. The physiologic quality of the seeds was evaluated by a group of tests accomplished in controlled conditions of laboratory and greenhouse. Trichoderma spp. it was shown to be efficient in the germination test and cold without soil. In the evaluation of melon seedlings, Trichodel® and Agrotrich® using half of the recommended dose, separately or associate to the chemical fungicide, they presented the best results. The manitol use -0,8MPa + Trichoderma spp. was shown higher to the other treatments in the germination tests and test of cold without soil. Therefore, the same result was not obtained when it was evaluated the seedlings. Therefore, the technique of the water restriction it wasn t efficient in the inoculation of Trichoderma spp. / O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito de Trichoderma spp. sobre o potencial fisiológico de sementes e mudas de melão e também avaliar o efeito de Trichoderma spp. em sementes de melão através da técnica de inoculação da restrição hídrica. Foram realizados dois experimentos: no primeiro, foram utilizados como tratamento de sementes, produtos biológicos à base de Trichoderma spp. na formulação liquida e pó, além do fungicida Captan SC® isolado e associado aos produtos biológicos. No segundo experimento utilizou-se a técnica de restrição hídrica, onde os tratamentos consistiram de: BDA ; BDA + manitol -0,6MPa; BDA + manitol -0,8MPa; Trichoderma spp.; BDA + manitol -0,6 MPa+Trichoderma spp; BDA + manitol -0,8MPa + Trichoderma spp. A qualidade fisiológica das sementes foi avaliada por um conjunto de testes realizados em condições controladas de laboratório e em casa de vegetação. Trichoderma spp. mostrou-se ser eficiente nos teste de germinação e frio sem solo. Na avaliação de plântulas e mudas de melão, Trichodel® e Agrotrich® utilizando metade da dose recomendada, isoladamente ou associado ao fungicida químico, apresentaram os melhores resultados. O uso de manitol -0,8MPa + Trichoderma spp. mostrou-se superior aos demais tratamentos nos testes de germinação e teste de frio sem solo. Porém, o mesmo resultado não foi obtido quando avaliou-se as plântulas. Portanto, a técnica de da restrição hídrica não foi eficiente na inoculação de Trichoderma spp.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Black foot disease has described occurrence in most major wine-growing regions of the world. In Brazil, for over a decade researchers have reported the occurrence of the disease in the Serra Gaúcha region. The disease is associated mainly with fungi of the genera Campylocarpon and Ilyonectria. Because these are soil-borne pathogens, their control is limited and little is known about the use of biological products or use of resistant rootstocks. Therefore, the objective of this study was to evaluate commercial products based on Trichoderma spp. and Bacillus spp. in controlling Campylocarpon pseudofasciculare and check the occurrence of resistance in different rootstocks to Campylocarpon pseudofasciculare and Ilyonectria macrodidyma. Tests were carried out in vitro in the Phytopathology Laboratory for Universidade Federal de Santa Maria, in order to verify the efficiency of species of the genera Trichoderma and Bacillus from commercial products in pathogen control, through the method of pairing cultures and volatile metabolites In vivo test was performed in a greenhouse to evaluate the potential for biocontrol of commercial products against the pathogen inoculated in Vitis vinifera seedlings cv. Bordô, grafted on Paulsen 1103. In addition, in the greenhouse, the reaction was studied in rootstocks inoculated with Campylocarpon pseudofasciculare and Ilyonectria macrodidyma. The pairing cultures test with products based on Bacillus spp. and Trichoderma spp. showed an average value of mycelial inhibition growth of 46 and 41%, respectively. In the test of volatile metabolites isolates of Trichoderma spp. better controlled the pathogen, with an average reduction of mycelial growth of 61.5%. In in vivo testing for biocontrol Bacillus subtilis increased the length and dry weight of shoot and all treatments had better parameters than the treatment that received only the pathogen, indicating that these products are able to lessen the severity of the disease on vine plants. In the reaction test, all rootstock proved susceptible to the pathogens. / A doença pé-preto da videira tem ocorrência descrita na maioria das grandes regiões vitícolas do mundo. No Brasil, há mais de uma década pesquisadores relataram a ocorrência da doença na região da Serra Gaúcha. A doença está associada principalmente a fungos do gênero Campylocarpon e Ilyonectria. Por se tratarem de patógenos de solo, seu controle é limitado e pouco se sabe sobre a utilização de produtos biológicos ou de porta-enxerto resistente. Assim sendo, o objetivo deste estudo foi avaliar produtos comerciais à base de Trichoderma spp. e Bacillus spp. no controle de Campylocarpon pseudofasciculare e verificar a ocorrência de resistência em diferentes porta-enxertos a Campylocarpon pseudofasciculare e Ilyonectria macrodidyma. Foram realizados ensaios in vitro no Laboratório de Fitopatologia da Universidade Federal de Santa Maria, a fim de verificar a eficiência de espécies dos gêneros Trichoderma e Bacillus, oriundas de produtos comerciais, no controle do patógeno, através do método de pareamento de culturas e metabólitos voláteis. Também foi realizado teste in vivo, em casa de vegetação, para avaliar o potencial de biocontrole dos produtos comerciais sobre o patógeno inoculado em mudas de Vitis vinifera cv. Bordô, enxertadas em Paulsen 1103. Além disso, em casa de vegetação, foi estudada a reação de porta-enxertos inoculados com Campylocarpon pseudofasciculare e Ilyonectria macrodidyma. No ensaio de pareamento de culturas com os produtos à base de Bacillus spp. e Trichoderma spp., o valor médio de inibição de crescimento micelial foi de 46 e 41%, respectivamente. No teste de metabólitos voláteis, isolados de Tricoderma spp. controlaram o patógeno, com média de redução de crescimento micelial de 61,5%. Em ensaio in vivo, todos os tratamentos com produtos foram capazes de controlar os sintomas da doença, quando comparados ao tratamento que recebeu apenas o patógeno, indicando que esses produtos são capazes de diminuir a severidade da doença em plantas de videira. No ensaio de reação de porta-enxertos, todas as plantas se mostraram suscetíveis aos patógenos.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:16:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO RACHEL SILVEIRA FREITAS.pdf: 844126 bytes, checksum: 0544e2973ae364fb2429cc263d62f87a (MD5) Previous issue date: 2011-06-30 / Species of the genus Trichoderma have been used as biocontrol agents against different pathogens. The mechanisms employed by Trichoderma species against these pathogens ranging from competition for nutrients, production of non-volatile and volatile antibiotics in the production of hydrolytic enzymes, in a mechanism denominated mycoparasitism. In addition to its characteristics, many strains of Trichoderma are competent rhizosphere are able to colonize and grow in association with plant roots. The root colonization by Trichoderma spp., often is associated with the induction of local and systemic resistance. Whereas fungi of the genus Trichoderma have been described as inducers of defense responses and systemic resistance in association with maize (Zea mays), cucumber, tomato and cotton, it was our interest to analyze the interaction between Trichoderma spp. and beans. Therefore, this study aimed to identify and evaluate gene expression of protein elicitors of defense (SM1) in different isolates of Trichoderma spp. obtained from Cerrado soils. Eight isolates were selected and all showed a band of approximately 250pb, corresponding to the expected size of the gene Sm1 from T. Virens. The complete sequence of SM1 gene was obtained using as template cDNA and genomic DNA of T. harzianum. The amplification products containing an ORF of 417 bp and the protein predicted from this sequence has 138 amino acids. The ORF showed identity with sequences of other protein elicitors isolated from Trichoderma spp., and also proteins belonging to the family of cerato-platanin. Studies of the expression of SM1 with the isolate Trichoderma 37 showed that this protein is expressed in different carbon sources. / Espécies do gênero Trichoderma têm sido utilizadas como agentes de controle biológico contra diferentes tipos de fitopatógenos. Os mecanismos utilizados pelas espécies de Trichoderma contra esses fitopatógenos vão desde a competição por nutrientes, produção de antibióticos voláteis e não voláteis à produção de enzimas hidrolíticas, em um mecanismo denominado micoparasitismo. Em adição a estas características, muitas linhagens de Trichoderma são rizosfera competentes e são capazes de colonizar e crescer em associação com as raízes das plantas. A colonização da raiz pelo Trichoderma spp., frequentemente, é associada com a indução de resistência local e sistêmica. Considerando que fungos do gênero Trichoderma já foram descritos como indutores de resposta de defesa e resistência sistêmica em associação com milho (Zea mays), pepineiro, tomateiro e algodoeiro, foi nosso interesse analisar a interação entre Trichoderma spp., e feijoeiro. Sendo assim, este trabalho teve por objetivo identificar e avaliar a expressão do gene de uma proteína elicitora de defesa (Sm1) em diferentes isolados de Trichoderma spp. obtidos de solos do Cerrado. Oito isolados foram selecionados e todos apresentaram uma banda de aproximadamente 250pb, correspondendo ao tamanho esperado do gene Sm1 de T. virens. A seqüência completa do gene da Sm1 foi obtida utilizando como molde cDNA e DNA genômico de T. harzianum. Os produtos da amplificação contém uma ORF de 417 pb e a proteína predita a partir dessa seqüência tem 138 aminoácidos. Esta ORF apresentou identidade com seqüência de proteínas elicitoras de outros isolados de Trichoderma spp. e também com proteínas pertencentes a família das ceratoplataninas. Estudos de expressão da Sm1 com isolado Trichoderma 37 mostrou que esta proteína é expressa em diferentes fontes de carbono.

Pesticide use reduction is one of the alternatives usedin organic agriculture. Pesticides may bereplaced by biological agents, which are less harmful to the environment. SomeTrichoderma isolates are considered to be important and efficient biological agents. They protect plants from plant diseases when used at optimal doses and have mechanisms to enable seed germination and vegetable development. Few studies evaluate seed germination and plant development interaction with vermicomposting at highTrichoderma doses. Thus, the current study aims to test higher doses of the ICB Nutrisolo Trichoderma (ICB) biological commercial product than the recommended ones. It was done by evaluating, Eisenia andrei multiplication and development, the changes in the substrate s chemical features as well as the emergence and the initial development of lettuce seedlings in vermicompost. Regarding experiment 1, E. andrei multiplication and development, the experimental unit consisted of 6 kg of cattle manure in boxes containing 48 E. andrei earthworms. ICB commercial product doses of 0,0; 0,5; 1,0; 2,0; 4,0 and 8,0 were used at the concentration of 1011 CFU kg-1 in the substrate. The treatment without earthworms was also conducted to evaluate the vermicompost chemical features. The number of adult and young earthworms and of earthworm cocoons was counted, and the total dry weight was evaluated. As for experiment 2, which was conducted in greenhouse, the substrate was a mixture of vermicompost and commercial substrate at the ratio 1:1 (v/v). ICB doses of 0,0; 1,0; 2,0; 4,0; 8,0 and 16,0 were used at concentration of 1011 UFC kg-1 in the substrate. The inoculated substrate was placed in germination trays. Each experimental unit was composed of 10 cells, and each cell received five Regina cultivar lettuce seeds. After the seedlings emerged, a thinning was conducted by leaving one seedling per cell. The evaluated variables were germination percentage, seedling emergence speed index, height, shoot fresh and dry weight, leaf area, root volume and surface area, and P, K, Ca and Mg percentages in the leaves. The experimental designs were randomized with four replications. There was decrease in the number of earthworms when ICB doses equal to or above 4,0 were used. Doses up to 1,0 did not change the number of adult E.andrei earthworms and cocoons. However, the multiplication index was lower in all ICB treatments and doses above 2,0 decreased the total dry weight. The pH was higher in ICB treatments, and there was increased P, K and Mg percentage in the presence of earthworms. The doses studied in experiment 2 negatively influenced the plants shoot and root development. The germination percentage and the seedling emergence speed index were negatively influenced when doses above 4,0 were used. The leaf chemical analysis showed that all doses increased the percentage of analyzed nutrients. / A diminuição do uso de agrotóxicos é uma das alternativas utilizadas na agricultura orgânica, podendo estes serem substituídos por agentes biológicos menos agressivos ao ambiente. Alguns isolados de trichoderma são considerados importantes e eficientes agentes biológicos que, em doses ótimas, protegem as plantas contra doenças de plantas e possuem mecanismos que promovem tanto a germinação de sementes como o desenvolvimento de hortaliças. São raros os estudos que avaliam a germinação de sementes e o desenvolvimento de plantas em interação com a vermicompostagem em altas doses de trichoderma. Baseado nesse contexto, o objetivo do presente estudo foi testar doses superiores às recomendas do produto comercial biológico ICB Nutrisolo Trichoderma (ICB), avaliando-se a multiplicação e o desenvolvimento de Eisenia andrei, as alterações nas características químicas do substrato, bem como a emergência e o desenvolvimento inicial de plântulas de alface em vermicomposto. Para o experimento 1, multiplicação e desenvolvimento de E. andrei, a unidade experimental constituiu-se de 6 kg de esterco bovino em caixas com 48 minhocas da espécie E. andrei. Utilizou-se o produto comercial ICB nas doses 0,0; 0,5; 1,0; 2,0; 4,0 e 8,0; todas na concentração 1011 UFC kg-1 em substrato. Para avaliação das características químicas do vermicomposto foi utilizado também o tratamento sem minhocas. Foi feita a contagem do número de minhocas adultas, jovens e casulos, e avaliou-se o peso seco total. No experimento 2, conduzido em casa de vegetação, o substrato foi uma mistura de vermicomposto e substrato comercial na relação 1:1 (v/v). Foram utilizadas as doses 0,0; 1,0; 2,0; 4,0; 8,0 e 16,0 de ICB, todas na concentração 1011 UFC kg-1 em substrato. O substrato inoculado foi colocado em bandejas de germinação, sendo cada unidade experimental composta por 10 células, cada uma com cinco sementes de alface cv. Regina. Após a emergência fez-se um desbaste, permanecendo uma plântula por célula. As variáveis avaliadas foram porcentagem de germinação de sementes, índice de velocidade de emergência de plântulas, altura, massa fresca e seca da parte aérea, área foliar, volume e área superficial de raiz, e porcentagens de P, K, Ca e Mg nas folhas. Os delineamentos experimentais foram ao acaso com quatro repetições. A partir da dose 4,0 de ICB, há decréscimo do número de minhocas. Doses altas até 1,0 não alteram o número de minhocas adultas e de casulos de E. andrei, entretanto, o índice de multiplicação foi inferior em todos os tratamentos ICB e doses acima de 2,0 diminuíram o peso seco total. O pH foi superior nos tratamentos com ICB, e houve aumento na porcentagem de P, K e Mg em presença de minhocas. As doses estudadas no experimento 2 influenciaram negativamente o desenvolvimento aéreo e radicular das plantas. As variáveis porcentagem de germinação e índice de velocidade de emergência foram influenciadas negativamente quando em doses acima de 4,0. A análise química foliar demonstrou que todas as doses aumentaram a porcentagem dos nutrientes analisados.

The grapevine is a fruit that has significant importance in the world economic sector and several factors may compromise its development and especially productivity, including pathogen attack. The disease known as downy mildew is caused by Plasmopara viticola and may cause serious damage to the crop if not controlled. Thus, the major way of controling the disease is associated with the use of fungicides, which causes risks to the environment and human health. The aim of this study was to evaluate the potential of biological agents and chitosan on controlling downy mildew throughthe induced resistance mechanism in grapevine cv. Cabernet Sauvignon. It was hypothesized that the biological agents Trichoderma spp. and Bacillus subtilis, as well as chitosan have the ability to affect directly the viability of P. viticola sporangia and to elicit defense responses in leaf cells of grapevine. Germination of sporangia was measured in vitro andexperiments in greenhouse were conducted, aimed at monitoring the progress of downy mildew on plants exposed to the products studied and, two days later, inoculated with P. viticola. In another experiment, in the absence of the pathogen, leaf tissue of grapevine plants exposed to the same products was collected for conducting biochemical and biological analysis, aiming to characterize the induction of resistance (IR) in plant cells. The activity of pathogenesis related proteins (PRPs) such as guaicol peroxidases, chitinases , β-1,3-glucanases , and polyphenoloxidases in leaves exposed to the products was determined, as well as the levels of total soluble phenols and lignin. Chitosan, but not the biological control agents, reduced the viability of sporangia of P. viticola. All products promoted protection, although not significant when compared to control plants. All studied products produced alterations in the production of PRPs and total phenols. Despite the sharp increase, but not significant, in the lignin content of leaves, small reduction in the area under the mildew progress curve was observed that can be attributed to mechanisms of resistance induction activated by the products studied through elicitor action. / A videira é uma frutífera que possui relevante importância no setor econômico mundial, sendo que vários fatores podem comprometer seu desenvolvimento e consequente rendimento, incluindo o ataque de patógenos. A doença conhecida como míldio da videira, causada pelo pseudofungo Plasmopara viticola, causa sérios danos à cultura quando não controlada. Dessa maneira, a principal forma de controle da doença está associada à utilização de químicos, os quais causam riscos ao ambiente e à saúde do homem. O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial de agentes biológicos e quitosana, na viabilidade de esporângios de míldio, o efeito no progresso da doença e os mecanismos de indução de resistência vegetal, em plantas de videira cv. Cabernet Sauvignon. Hipotetizou-se que os agentes biológicos Trichoderma spp. e Bacillus subtilis, bem como quitosana têm a capacidade de afetar diretamente a viabilidade de esporângios de P. viticola, assim como atrasar ou evitar o progresso de míldio e elicitar respostas de defesa em células foliares de videira. Para tanto, a viabilidade de esporângios de P. viticola foi analisada in vitro e experimentos em casa de vegetação foram conduzidos, afim de, acompanhar o progresso de míldio em plantas de videira expostas aos produtos estudados. Em outro experimento, na ausência do patógeno, tecido foliar de plantas de videira, submetidas aos mesmos produtos, foi coletado para realização de análises bioquímicas e metabólicas, visando à caracterização da indução de resistência (IR) celular vegetal. Foram determinadas atividades de proteínas relacionadas à patogênese (PRPs) como peroxidases de guaicol, quitinases, β-1,3-glucanases e polifenoloxidases em folhas expostas aos produtos, bem como os teores de fenóis solúveis totais e lignina. A quitosana, mas não os agentes biológicos, reduziram a viabilidade dos esporângios. Todos os produtos estudados geraram alterações na produção de PRPs e fenóis totais. Os teores de lignina embora não significativos em relação à testemunha demonstraram aumento, e isso pode estar associado com a porcentagem de proteção que os produtos conferiram às plantas de videira na área abaixo da curva de progresso da doença, induzindo a produção de compostos envolvidos na síntese de lignina.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Erva mate (Ilex paraguariensis A. St.-Hil.) is a species widely cultivated in southern Brazil and adjacent countries, whose leaves and fine branches, appropriately prepared, offer the mate-tea, the most popular tea consumed in Brazil and exported to all over the world. root-rot is the main disease of this species in Brazil and may attack plantules and seedlings in nurseries as well as adult trees in orchards. The disease is caused by Fusarium spp., besides Pythium sp. and Rhizoctonia sp. causing serious damages due to the root system destruction, it causes, in the most serious cases the death of the plant. The incidence and the severity of the disease might be influenced by the cultivation methods and management of the orchard, with the use of mineral fertilizers without any technical criteria or the absence of fertilization, soil liming and orchards cultivation under the sun. In order to verify such hypothesis, 25 rural estates were marked in different counties of Vale do Taquari area in the state of Rio Grande do Sul BR. These areas had some orchards with symptoms of the disease and others in healthy conditions. Information about the crop and management characteristics, as well as soil for chemical and biological analysis, were collected and correlated through Pearson and outspread in direct and indirect effects through Path Analysis. In the nurseries, the disease incidence might be correlated to the contamination of the seed and the transmitted pathogens besides causing the death of the seedling may also have been transmitted to health seedlings, and they might had been transported to the field, contaminated areas which were previously free from the pathogen. Some practices applied by the farmers may cause the increase in the incidence of pathogens in the seeds and seedlings. In order to verify such hypothesis, some nurseries have been selected in the area of Vale do Taquari RS, where some samples of seeds, plantules, seedlings and substrata were collected in order to analyze the inoculation potential of the pathogens in each sort of sample. From the analysis of the substrata, seeds, seedlings different fungi colonies of the genre Fusarium were isolated, purified and stored for pathogenicity tests and, Trichoderma, for isolated selection with potential Fusarium antagonist. Moreover, experiments were installed in 2 nurseries, aiming at testing the benefits of commercial chemical (Captan SC®) and biological (Agrotrich® e Trichodel®) products, in the seed treatment, aiming at controlling the incidence of the disease on the seedbed. In the orchards, among the studied variables, it was noticed that the organic matter is the most influential over the Fusarium population in the soil and a linear positive correlation was obtained. Besides this variable, the calcium and phosphorus contends also have some sort of influence over the Fusarium population, however, in a less significant way. In the nurseries, the high percentage of seeds contaminated by Fusarium and Rhizoctonia was noticed. It was also noticed that the contamination begins in the flower and fruit phase. It was also observed that the technique of seed processing and stratification applied by the farmers, contribute to the increase in the incidence of pathogens. Besides the seeds, it was also noticed that the plantules and seedlings at the end of the nursery cycle, present pathogen contamination in their roots, although they did not present root-rot symptoms. The products Captan SC®, Agrotrich® and Trichodel® applied on the seed treatment, before the sowing, were not efficient in the Fusarium and Rhizoctonia control. In the Trichoderma spp. selection as potential antagonist to Fusarium, it was observed that SP-SFE-T1 isolated present high antagonic potential in in vitro tests. / A erva-mate (Ilex paraguariensis A. St.-Hil.) é uma espécie amplamente cultivada no sul do Brasil e países vizinhos, cujas folhas e galhos finos, preparados segundo método apropriado, fornecem o mate ou chimarrão, o mais popular chá consumido no Brasil e exportado para todo o mundo. A podridão-de-raízes é a principal doença da espécie no Brasil, podendo atacar plântulas e mudas no viveiro, bem como, árvores adultas em ervais. A doença é causada por Fusarium spp., além de Pythium sp. e Rhizoctonia sp. e provoca sérios danos decorrentes da destruição do sistema radicular, ocasionando, nos casos mais graves, morte da planta. Suspeita-se que a incidência e a severidade da doença são influenciadas pelos métodos de cultivo e por práticas de manejo do erval, como aplicação de adubos minerais sem critérios técnicos ou ausência de adubação, calagem do solo e cultivo de ervais a pleno sol. Para verificar tal hipótese, foram demarcadas 25 propriedades rurais, em diferentes municípios da região do Vale do Taquari-RS, as quais possuíam ervais com sintomas da doença, e outras com ervais sadios. Nesses ervais, foram coletadas informações a respeito das características de cultivo e manejo, assim como, solo para análise química e biológica. Estas informações foram correlacionadas entre si através da correlação de Pearson e desdobradas em efeitos diretos e indiretos através da Análise de Trilha. Nos viveiros, suspeita-se que a incidência da doença está correlacionada à contaminação das sementes utilizadas e que, patógenos transmitidos por sementes, além de causar mortalidade de mudas, podem ser transmitidos a mudas sadias e, estas, serem transportadas para o campo, contaminando áreas livres do patógeno. Além disso, algumas práticas utilizadas pelos viveiristas podem ocasionar aumento da incidência de patógenos nas sementes e mudas. Para verificar tal hipótese, foram demarcados viveiros na região do Vale do Taquari-RS, onde foram coletadas amostras de sementes, de plântulas, de mudas e de substrato para analisar o potencial de inóculo de patógenos presente em cada tipo de amostra. A partir das análises do substrato, das sementes e das mudas, diferentes colônias de fungos do gênero Fusarium foram isoladas, purificadas e armazenadas, para testes de patogenicidade e, Trichoderma, para seleção de isolados com potencial antagonista ao Fusarium. Além disso, foram instalados experimentos, em dois viveiros, a fim de testar a eficiência dos produtos comerciais, químico (Captan SC®) e biológico (Agrotrich® e Trichodel®), no tratamento de sementes, visando o controle da incidência da doença nas sementeiras. Nos ervais, entre as variáveis estudadas, verificou-se que a matéria orgânica é a que mais influencia na população de Fusarium do solo, obtendo-se uma correlação linear positiva. Além desta variável, os teores de cálcio e de fósforo no solo também exercem certa influencia na população de Fusarium, mas de forma menos significativa. Nos viveiros, constatou-se alta porcentagem de sementes contaminadas por Fusarium e Rhizoctonia e que, a contaminação começa já na fase de flores e frutos. Observou-se também, que a técnica de beneficiamento e estratificação das sementes, utilizada atualmente pelos viveiristas, contribui para o aumento da incidência de patógenos. Além das sementes, observou-se que plântulas e mudas no final do ciclo de viveiro, apresentam contaminação por patógenos nas suas raízes, mesmo que não apresentavam sintomas de podridão-de-raízes. Os produtos Captan SC®, Agrotrich® e Trichodel® utilizados no tratamento das sementes, previamente a semeadura, não foram eficientes no controle de Fusarium e Rhizoctonia. Na seleção de Trichoderma spp. com potencial antagonista ao Fusarium observou-se que o isolado SP-SFE-T1 apresentou alto potencial antagônico em testes in vitro .