Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-01-22T13:28:22Z No. of bitstreams: 1 marciotavaresrodrigues.pdf: 2527893 bytes, checksum: cffa1b6b9f47e12a219e28ecedcb98f3 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-01-25T18:52:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 marciotavaresrodrigues.pdf: 2527893 bytes, checksum: cffa1b6b9f47e12a219e28ecedcb98f3 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-25T18:52:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 marciotavaresrodrigues.pdf: 2527893 bytes, checksum: cffa1b6b9f47e12a219e28ecedcb98f3 (MD5) Previous issue date: 2014-02-11 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Candidíase vulvovaginal (CVV) é um dos diagnósticos mais frequentes na prática ginecológica e sua incidência tem aumentado drasticamente. Portanto, estudos regionais prospectivos tornam-se necessários para conhecimento da epidemiologia da doença. Tem sido reconhecida a emergência de outras espécies de leveduras, além de Candida albicans, como agentes etiológicos em infecções mono ou polimicrobianas, com reflexo direto na terapia antifúngica, frequentemente empírica. O objetivo deste estudo foi investigar a etiologia, o perfil epidemiológico de pacientes com candidíase vulvovaginal e possíveis fatores predisponentes, além da diversidade genética das leveduras. Secreção vaginal das pacientes foi semeada em Agar Sabouraud e amostras de leveduras foram isoladas e identificadas por PCR. Dados demográficos, clínicos e fatores predisponentes foram obtidos por meio de questionário. Genotipagem das leveduras foi realizada pela técnica de RAPD e matriz de similaridade foi construída para avaliação da diversidade de C. albicans e sua relação com os dados clínicos e epidemiológicos. Para análise estatística foram utilizados os testes t-Student, Fischer e qui-quadrado, com auxílio do software Statistical Package for the Social Sciences (SPSS), com nível de significância de 5%. Foram avaliadas 69 pacientes, entre 15 e 52 anos, predominando mulheres brancas (79,7%), com escolaridade de nível superior completo (58%), casadas (56,5%) e com vida sexual ativa (97,1%). Dentre elas, 34,8% eram gestantes, 7,2% diabéticas, 1,4% soropositivas para HIV e 36,2% usavam anticoncepcional oral. Antibioticoterapia recente foi citada por 13% das pacientes, uso de antifúngico por 5,8% e de antitricomonas por 1,4%. Uso de corticosteróides foi relatado por 2,9% das participantes e de anti-neoplásicos por 1,4%. Fluxo vaginal e prurido foram as principais queixas apresentadas, respectivamente, por 97,1% e 73,9% das pacientes, seguido de ardência (63,8%) e hiperemia (63,8%). Quando presente, o fluxo foi majoritariamente branco (88,1%) ou grumoso (86,6%). O diagnóstico foi confirmado pela cultura em 55 (79,7%) pacientes, sendo quatro casos de infecção mista. A espécie prevalente foi C. albicans, seguida por um caso de C. glabrata, que foi encontrada em mais duas pacientes em associação com C. albicans. Nas outras duas infecções polimicrobianas, C. lusitaniae foi isolada com C. albicans. A análise dos dados gerados pela genotipagem das leveduras permitiu discriminar linhagens de C. albicans na população amostrada. Foi possível evidenciar sete tipos eletroforéticos (TE) classificados como grupos I a VII, sendo os grupos I, II, III, IV, V e VI compostos por linhagens de levedura que apresentaram 100% de similaridade genética. No grupo VII foram incluídas linhagens de levedura altamente polimórficas que apresentaram no máximo 80% de semelhança. Embora nenhuma relação tenha sido estabelecida entre TE e dados clínicos e epidemiológicos, percebeu-se que os tipos I e IV são os mais prevalentes na população amostrada. Embora a positividade da cultura tenha sido alta e os dados clínicos de CVV sejam característicos, a sintomatologia não é patognomônica. C. albicans é a espécie prevalente, mas devese atentar para a ocorrência de outras espécies na etiologia de CVV, como a emergência de C. lusitaniae. Sugere-se realização do diagnóstico microbiológico com identificação da espécie envolvida e detecção de infecção mista antes da terapia antimicrobiana. / The vulvovaginal candidiases (VVC) is one of the most frequent diagnosed disease in gynecological practice and its incidence has increased drastically. Therefore, regional prospective studies become necessary to better address epidemiological issues. It has been recognized the emergence of other yeast species, besides Candida albicans, as VVC in mono or polymicrobial infections, with direct reflex in antifungal therapy, often empirical. This study was focused on the etiology investigation, the epidemiological profile of patients with vulvovaginal candidiasis (VVC) and predisposing factors, addition to the genetic diversity of yeasts. Vaginal secretions were streaked in Sabouraud agar and yeast samples were isolated and identified by PCR. Demographic and clinical data were obtained by questionnaire. For statistical analysis the Student t test, chi-square and Fischer, were applied as needed using the software Statistical Package for Social Sciences (SPSS) with a significance level of 5 %. Yeast genotyping was performed by the RAPD approach, and a similarity matrix was obtained to evaluate C. albicans diversity and their relationships with clinical and epidemiological data. Sixty nine patients were evaluated between 15 and 52 years, predominantly white (79.7 %), with higher education (58 %), married (56.5 %) and sexually active (97.1 %). Among them, 34.8 % were pregnant, 7.2% diabetic, 1.4 % seropositive for HIV and 36.2 % using oral contraceptives. Recent antibiotic therapy was mentioned by 13 % of patients, and antifungal or anti-trichomonas therapy were mentioned by 5.8% and 1.4 % of the patients. Corticosteroid use was reported by 2.9 % and antineoplastic by 1.4 %. Vaginal discharge and itching were the main complaints (97.1 % and 73.9 %), followed by burning (63.8 %) and erythema (63.8 %). When present, the vaginal flow was predominantly white (88.1 %) or lumpy (86.6 %). The diagnosis was confirmed by culture in 55 (79.7 %) patients, with mixed infections in four patients. The most prevalent species was C. albicans, followed by C. glabrata (one monoinfection and two mixed infections with C. albicans). C. lusitaniae and C. albicans were also identified in mixed infections (two patients). The analysis of data generated by yeasts genotyping allowed discriminating different C. albicans strains in the sampled population. It was identified seven electrophoretic types (ET) classified within groups I to VII. The groups I, II, III, IV, V and VI included yeast strains with of 100% genetic similarity. In group VII were included the yeast strains highly polymorphic that present less than 80% of similarity. Despite the high culture positivity and clinical data being characteristic of VVC, the symptoms are not pathognomonic. C. albicans is the most prevalent species, but other species are also involved in the VVC etiology, as the emergence of C. lusitaniae. It is suggested the diagnosis and identification of microbial species involved including detection of mixed infections before antimicrobial chemotherapy.

INTRODUÇÃO: O diagnóstico microbiológico das infecções em artroplastias é de fundamental importância para a definição da estratégia de uso dos antimicrobianos. As culturas microbiológicas convencionais apresentam elevados índices de falso-negativos, em especial, nas infecções crônicas, em que é frequente a presença do biofilme aderido ao implante. A utilização de amostras deste biofilme, viáveis à cultura, a partir de seu descolamento do implante pela técnica de sonicação, tem mostrado aumento da sensibilidade em publicações recentes. O objetivo deste estudo foi comparar os resultados das culturas microbiológicas de fragmentos de tecido periprotético, realizadas em meio sólido, àquelas obtidas pelo cultivo do líquido oriundo da sonicação do implante removido, semeado, inicialmente, em frascos de hemocultura e, posteriormente, em meio sólido. MÉTODOS: Neste estudo de análise descritiva, prospectivo e comparativo, 30 pacientes com diagnóstico de infecção em artroplastias de joelho ou quadril, com mais de 90 dias de história, tiveram seus implantes cirurgicamente removidos e foram coletadas seis amostras do tecido periprotético, de locais previamente determinados, para a realização de cultura microbiológica em meios sólidos. Simultaneamente, os implantes foram submetidos ao processo de sonicação e o material resultante foi injetado em frascos de hemocultura BD Bactec e submetidos ao processo de cultura automatizada. Todas as amostras foram pesquisadas quanto à presença de bactérias aeróbias, anaeróbias, micobactérias e fungos, e os resultados comparados por meio de análise estatística, em busca da superioridade de um método sobre o outro. Como objetivo secundário, buscou-se analisar quais os pontos de coleta do tecido periprotético teriam maior sensibilidade em suas culturas. RESULTADOS: Não houve diferenças estatisticamente significantes da amostra em relação ao gênero, patologia articular primária, tipo de artroplastia, localização do implante ou lateralidade. Em 17 casos (56,7%), houve uso de antimicrobianos no período de 15 dias que antecederam a retirada do implante. O método de cultura do fluido de sonicação mostrou sensibilidade de 86,7% e foi superior, de modo estatisticamente significante (P < 0,001), em relação à cultura dos fragmentos periprotéticos, cujos resultados tiveram sensibilidades entre 26,7 e 53,3%. O uso de antibioticoterapia recente não interferiu de modo estatisticamente significante na sensibilidade da cultura do líquido oriundo da sonicação. (P = 0,113). Quanto ao objetivo secundário, a coleta de fragmentos da membrana periprotética mostrou maior sensibilidade, estatisticamente significante, na comparação com três dos demais cinco pontos de coleta (P < 0,05). CONCLUSÕES: A cultura microbiológica do líquido obtido por sonicação dos implantes removidos de pacientes com diagnóstico de infecção periprotética e semeado inicialmente em frascos de hemocultura mostrou ter sensibilidade superior, estatisticamente significante, à cultura convencional de fragmentos do tecido periprotético semeados em meios sólidos. A cultura microbiológica da membrana periprotética mostrou ter maior sensibilidade em relação à maioria dos outros sítios que tiveram fragmentos de tecido periprotético pesquisados. / INTRODUCTION: Microbiological diagnosis in periprosthetic infection is of fundamental importance to define the most appropriate antimicrobial strategies. Conventional microbiological cultures have high rates of false negatives, especially in chronic infections, in which there is often the presence of biofilm attached to the implant. The use of samples of viable culturable biofilm taken from the detachment of the implant by sonication technique has been shown to increase the sensitivity in recent studies. The objective of this study was to compare the results of microbiological cultures of periprosthetic tissue fragments, made in a solid medium, to those obtained through the cultivation of the liquid coming from the sonication of the removed implant initially seeded in blood culture bottles and later in solid medium. METHODS: Using descriptive, prospective and comparative analysis, thirty patients with a diagnosis of infected knee or hip arthroplasty, with more than ninety days of history, had their implants surgically removed. Six periprosthetic tissue samples, collected at predetermined places, were used for microbiological culture on solid media. Simultaneously, the implants were subjected to the sonication process, and the resulting material was injected into vials of BD Bactec blood cultures and subjected to an automated culture process. All samples were screened for the presence of aerobic bacteria, anaerobes, mycobacteria and fungi and the results compared by statistical analysis to find the superiority of one method over the other. As a secondary objective, this study sought to analyze which of the periprosthetic tissue collecting points would have greater sensitivity in their cultures. RESULTS: There were no statistically significant differences in the sample as related to gender, primary joint pathology, type of arthroplasty, implant location or laterality. In seventeen cases (56.7%), antimicrobials were used within the 15-day period leading up to the removal of the implant. The sonication culture fluid showed a sensitivity of 86.7% and was higher, statistically significant (P < 0.001) in relation to the culture of periprosthetic fragments, where results displayed sensitivities between 26.7 and 53.3%. The use of recent antibiotic therapy did not affect the sensitivity of the liquid coming from the sonication culture, which was not statistically significant (P = 0.113). As for the secondary objective, the collection of periprosthetic membrane fragments showed higher sensitivity, statistically significant (P < 0.05), as compared to three of the remaining five collecting points. CONCLUSIONS: The microbiological culture liquid obtained by sonication of the implants removed from patients with diagnosis of periprosthetic infection and initially seeded in blood culture bottles was shown to have superior sensitivity, statistically significancy, as compared to conventional culture of the periprosthetic tissue fragments seeded on solid media. The microbiological culture of the periprosthetic membrane seems to be more sensitive compared to most other sites that had periprosthetic tissue fragments surveyed

INTRODUÇÃO: O diagnóstico microbiológico das infecções em artroplastias é de fundamental importância para a definição da estratégia de uso dos antimicrobianos. As culturas microbiológicas convencionais apresentam elevados índices de falso-negativos, em especial, nas infecções crônicas, em que é frequente a presença do biofilme aderido ao implante. A utilização de amostras deste biofilme, viáveis à cultura, a partir de seu descolamento do implante pela técnica de sonicação, tem mostrado aumento da sensibilidade em publicações recentes. O objetivo deste estudo foi comparar os resultados das culturas microbiológicas de fragmentos de tecido periprotético, realizadas em meio sólido, àquelas obtidas pelo cultivo do líquido oriundo da sonicação do implante removido, semeado, inicialmente, em frascos de hemocultura e, posteriormente, em meio sólido. MÉTODOS: Neste estudo de análise descritiva, prospectivo e comparativo, 30 pacientes com diagnóstico de infecção em artroplastias de joelho ou quadril, com mais de 90 dias de história, tiveram seus implantes cirurgicamente removidos e foram coletadas seis amostras do tecido periprotético, de locais previamente determinados, para a realização de cultura microbiológica em meios sólidos. Simultaneamente, os implantes foram submetidos ao processo de sonicação e o material resultante foi injetado em frascos de hemocultura BD Bactec e submetidos ao processo de cultura automatizada. Todas as amostras foram pesquisadas quanto à presença de bactérias aeróbias, anaeróbias, micobactérias e fungos, e os resultados comparados por meio de análise estatística, em busca da superioridade de um método sobre o outro. Como objetivo secundário, buscou-se analisar quais os pontos de coleta do tecido periprotético teriam maior sensibilidade em suas culturas. RESULTADOS: Não houve diferenças estatisticamente significantes da amostra em relação ao gênero, patologia articular primária, tipo de artroplastia, localização do implante ou lateralidade. Em 17 casos (56,7%), houve uso de antimicrobianos no período de 15 dias que antecederam a retirada do implante. O método de cultura do fluido de sonicação mostrou sensibilidade de 86,7% e foi superior, de modo estatisticamente significante (P < 0,001), em relação à cultura dos fragmentos periprotéticos, cujos resultados tiveram sensibilidades entre 26,7 e 53,3%. O uso de antibioticoterapia recente não interferiu de modo estatisticamente significante na sensibilidade da cultura do líquido oriundo da sonicação. (P = 0,113). Quanto ao objetivo secundário, a coleta de fragmentos da membrana periprotética mostrou maior sensibilidade, estatisticamente significante, na comparação com três dos demais cinco pontos de coleta (P < 0,05). CONCLUSÕES: A cultura microbiológica do líquido obtido por sonicação dos implantes removidos de pacientes com diagnóstico de infecção periprotética e semeado inicialmente em frascos de hemocultura mostrou ter sensibilidade superior, estatisticamente significante, à cultura convencional de fragmentos do tecido periprotético semeados em meios sólidos. A cultura microbiológica da membrana periprotética mostrou ter maior sensibilidade em relação à maioria dos outros sítios que tiveram fragmentos de tecido periprotético pesquisados. / INTRODUCTION: Microbiological diagnosis in periprosthetic infection is of fundamental importance to define the most appropriate antimicrobial strategies. Conventional microbiological cultures have high rates of false negatives, especially in chronic infections, in which there is often the presence of biofilm attached to the implant. The use of samples of viable culturable biofilm taken from the detachment of the implant by sonication technique has been shown to increase the sensitivity in recent studies. The objective of this study was to compare the results of microbiological cultures of periprosthetic tissue fragments, made in a solid medium, to those obtained through the cultivation of the liquid coming from the sonication of the removed implant initially seeded in blood culture bottles and later in solid medium. METHODS: Using descriptive, prospective and comparative analysis, thirty patients with a diagnosis of infected knee or hip arthroplasty, with more than ninety days of history, had their implants surgically removed. Six periprosthetic tissue samples, collected at predetermined places, were used for microbiological culture on solid media. Simultaneously, the implants were subjected to the sonication process, and the resulting material was injected into vials of BD Bactec blood cultures and subjected to an automated culture process. All samples were screened for the presence of aerobic bacteria, anaerobes, mycobacteria and fungi and the results compared by statistical analysis to find the superiority of one method over the other. As a secondary objective, this study sought to analyze which of the periprosthetic tissue collecting points would have greater sensitivity in their cultures. RESULTS: There were no statistically significant differences in the sample as related to gender, primary joint pathology, type of arthroplasty, implant location or laterality. In seventeen cases (56.7%), antimicrobials were used within the 15-day period leading up to the removal of the implant. The sonication culture fluid showed a sensitivity of 86.7% and was higher, statistically significant (P < 0.001) in relation to the culture of periprosthetic fragments, where results displayed sensitivities between 26.7 and 53.3%. The use of recent antibiotic therapy did not affect the sensitivity of the liquid coming from the sonication culture, which was not statistically significant (P = 0.113). As for the secondary objective, the collection of periprosthetic membrane fragments showed higher sensitivity, statistically significant (P < 0.05), as compared to three of the remaining five collecting points. CONCLUSIONS: The microbiological culture liquid obtained by sonication of the implants removed from patients with diagnosis of periprosthetic infection and initially seeded in blood culture bottles was shown to have superior sensitivity, statistically significancy, as compared to conventional culture of the periprosthetic tissue fragments seeded on solid media. The microbiological culture of the periprosthetic membrane seems to be more sensitive compared to most other sites that had periprosthetic tissue fragments surveyed