Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento. / La moringa es un árbol con múltiples usos y propiedades. Posee un alto contenido de calcio, hierro, vitamina A, vitamina C, beta caroteno y proteínas en las hojas, como también un alto contenido de aceite en las semillas. En el presente trabajo se investigaron los usos y características botánicas y agronómicas de la moringa (botánica, fenología, requerimientos edafoclimáticos, manejos productivos) de modo de definir posibles usos y zonas de cultivo en Chile, basado en los requerimientos climáticos de la especie y datos del Atlas Bioclimático de Chile. Se verificó en la literatura los múltiples usos de la moringa como son la producción de hojas, frutos, producción de aceite, biocombustible, diversos usos medicinales y producción de semillas para clarificación de agua. De la revisión de las características agronómicas de la planta se advirtió la alta plasticidad de la especie y la variación en la intensidad de métodos de cultivo, que van desde el cultivo anual en alta densidad hasta el cultivo perenne frutal de baja densidad. La moringa requiere precipitaciones medias, altas temperaturas y no tolera heladas. Se realizó una zonificación con límites climáticos de 250 y 500 mm de precipitaciones anuales, periodo libre de heladas igual o mayor a 350 días al año y temperaturas mínimas media del mes más cálido (enero) mayores a 11 y 13°C, donde se obtuvo una zona potencial de cultivo en secano que comprende el secano costero de la región de Valparaíso hasta la región del Maule y, para el cultivo con riego, las zonas costeras del Maule hacia el extremo norte, incluyendo parte de los valles transversales de la región de Coquimbo y Atacama. Dado el contexto de las posibles zonas productivas se propone la evaluación y desarrollo del cultivo de hojas de moringa para consumo humano o animal insertando el cultivo en rotaciones culturales del secano costero y, con riego, en las región de Coquimbo y Atacama como cultivo anual, perenne o integrado a un sistema agroforestal.

Natural products or traditional medicine has been used for centuries to treat various ailments by mankind. The World Health Organization estimates that in recent times 80% of people in emerging economies rely on traditional medicine as their primary health care [1]. However, unlike pharmaceutical products which have methods in place for quantification of the active compounds traditional medicine still requires a lot of focus in this area. Moringa oleifera is one of those species that have been used traditionally to cure various ailments for centuries. Even though extensive phytochemical and pharmacological studies have been conducted on the different parts of the plant, there is still no analytical method that enables the quantification of the compounds in the Moringa products in the market. The aim of this research was to develop an HPLC separation method that can be used to quantify the compounds found in the Moringa oleifera products. Compounds were extracted from the seeds of Moringa oleifera using the maceration method with a mixture of water and ethanol (1:1 v/v). The compounds were isolated using preparative HPLC. The structures of the compounds were elucidated using FTIR, NMR and MS. An HPLC separation method for quantification of the isolated compounds was developed and validated. The method was applied to the crude extract to quantify the isolated compounds in the extract. The following compounds 3-caffeoylquinic acid, 4-(α-L-Rhamnosyloxy) benzyl isothiocyanate, O-ethyl-[4-(α-L-Rhamnosyloxy) benzyl] thiocarbamate and O-butyl-[4-(α-L-Rhamnosyloxy) benzyl] thiocarbamate were isolated at percentage purities ranging from 90 to 99%. The HPLC separation method for quantification showed a linear relationship between peak area and concentration of the compounds with regression coefficients ranging from 0.9977 to 0.9994. The method is also precise with % RSD values between 0.01 and 1.16%. The method was shown to be specific to the compounds of interest. The percentage distribution of compounds in 50 mg of the seeds extract was between 0.25 and 1.10 % w/w. This study successfully developed and validated an HPLC separation method for four compounds found in the seeds of Moringa oleifera and quantified them in the crude extract of the seeds found in Zambia. This method can be used for identification and quantification of these four compounds in any of the Moringa products. As far as it could be ascertained this is the first time that such a method has been developed for these compounds / Chemistry / M. Sc. (Chemistry)

COSTA, R. A. Bioatividade in vitro de extratos etanólicos de sementes de Moringa oleifera frente a estirpes de Vibrio portadoras de fatores de virulência e resistentes a antimicrobianos, isoladas da hemolinfa do camarão Litopenaeus vannamei. 2011. 102 f. Tese (Doutorado em Engenharia de Pesca) - Centro de Ciências Agrárias, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2011. / Submitted by Daniel Eduardo Alencar da Silva (dealencar.silva@gmail.com) on 2015-01-20T20:23:11Z No. of bitstreams: 1 2011_tese_racosta.pdf: 1305999 bytes, checksum: 11762dc7bce1ed50c5a3cf3dfbb995ef (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2015-11-24T23:21:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_tese_racosta.pdf: 1305999 bytes, checksum: 11762dc7bce1ed50c5a3cf3dfbb995ef (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-24T23:21:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_tese_racosta.pdf: 1305999 bytes, checksum: 11762dc7bce1ed50c5a3cf3dfbb995ef (MD5) Previous issue date: 2011 / The search for antibacterial agents may provide alternative therapy for outbreaks of bacterial etiology that represents a risk to the development of aquaculture activities. Thus, the research aimed to evaluate the in vitro bioactivity of the Moringa oleifera seeds extracts against isolated vibrios from the Litopenaeus vannamei hemolymph. The profiles related to antibiotic resistance and exoenzyme expression associated to virulence factors were determined as criteria for antibacterial activity assays. One hundred strains of Vibrio were isolated and phenotypically identified, with the predominance of V. navarrensis (53%), V. brasiliensis (15%) and V. parahaemolyticus (10%). The expression of at least one exoenzyme was detected in all isolates (n = 100). It was found a percentage of phospholipase and lipase positive strains of 94 and 58%, respectively. Thirty-eight strains produced β-hemolysis on sheep blood. The ability to hydrolyze casein, gelatin and elastin was observed in 96%, 80% and 35% of vibrios, respectively. It was observed a high antibiotic resistance index (75%), with following phenotypic profiles: monoresistance (n = 42), cross-resistance to β-lactams (n = 20) and multiple resistance (n = 13). The antibacterial activity tests indicated bioactivity from the MOS-E and MOS-ES against 92% and 90% of strains tested, respectively. The Minimum Inhibitory Concentration (MIC) of MOS and MOS-E-ES able to inhibit the growth of most strains was of 32 μg mL-1. The screening of bioactive compounds revealed that only a fraction of ethyl acetate from both extracts demonstrated antibacterial effect, which made possible the isolation of the vibriocidal substances niazirine and niazimicine. / A prospecção de agentes antibacterianos pode fornecer alternativa terapêutica para epizootias de etiologia bacteriana que representam risco para o desenvolvimento de atividades aqüícolas. Considerando essa assertiva, o presente estudo teve como objetivo a avaliação da bioatividade in vitro de extratos de sementes de Moringa oleifera contra víbrios isolados da hemolinfa do camarão Litopenaeus vannamei. Como critérios de seleção para os testes de atividade antibacteriana, foram determinados perfis relacionados à resistência a antimicrobianos e à expressão de exoenzimas associadas a fatores virulentos. Foram isoladas e identificadas fenotipicamente 100 cepas de Vibrio, verificando-se predominância das espécies de V. navarrensis (53%), V. brasiliensis (15%) e V. parahaemolyticus (10%). Todas as cepas testadas (n = 100) foram capazes de expressar pelo menos uma exoenzima. As atividades fosfolipolítica e lipolítica foram verificadas em 94% e 58% das cepas, respectivamente. Trinta e oito estirpes produziram β–hemólise em sangue de ovelha. A habilidade em hidrolisar caseína, gelatina e elastina foi observada em 96%, 80% e 35% dos víbrios, respectivamente. O perfil fenotípico de susceptibilidade a antimicrobianos revelou um elevado índice de resistência (75%). Foram observados perfis de monoresistência (n = 42), resistência cruzada a β-lactâmicos (n = 20) e multiresistência (n = 13). No que se refere à atividade antibacteriana, os extratos obtidos por extração com etanol a frio (MOS-E) e a quente (MOS-ES) mostram-se bioativos contra 92% e 90% das cepas testadas, respectivamente. A Concentração Inibitória Mímima (CIM) de MOS-E e MOS-ES mais eficiente contra o maior percentual de estirpes foi a de 32 µg mL-1. A triagem bioguiada de compostos bioativos revelou que a fração acetato de etila de ambos os extratos foi à única que apresentou atividade antibacteriana. A partir do fracionamento cromatográfico da fração supracitada, isolaram se as substâncias vibriocidas niazirina e niazimicina.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:52:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4559_1.pdf: 1845137 bytes, checksum: 632a08392e2bb9b852dc91b75c7ad4ad (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / O trabalho reporta o isolamento e caracterização da lectina de sementes de Moringa oleifera (WSMoL). Seu efeito sobre a turbidez da água bem como o potencial genotoxico/mutagênico da água tratada com diferentes concentrações de sementes de M. oleifera (MoW1, MoW2, MoW3 and MoW4) ou WSMoL foram também discutidos. WSMoL, aglutinou diferentes eritrócitos, foi principalmente ativa em pH 6,5 a 7,5 e foi inibida por azocaseína. Cromatografia de gel filtração e perfis eletroforéticos revelaram WSMoL como uma proteína de 102 kDa constituída por subunidades de 5 kDa. Glicosilação não foi detectada. WSMoL apresentou propriedade coagulante similar ao sulfato de alumínio, o coagulante mais comumente usado. As preparações MoW e WSMoL foram negativas no teste de DNA plasmidial, no ensaio de transformação bacteriana e no ensaio Salmonella typhimurium usando TA97, TA98 e TA100 na presença ou ausência de metabolização hepática. MoW1 e MoW2 foram também negativas no ensaio Allium cepa, contudo formação de micronúcleos foi induzida por MoW3 e MoW4. Os resultados sugerem WSMoL como um componente ativo no processo de purificação da água pelas sementes. WSMoL não foi um agente genotóxico porém genotoxicidade was detected na água tratada com maior concentração de sementes. Este estudo é uma etapa positive no sentido da determinação do uso seguro de sementes de M. oleifera para o tratamento da água

Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-06-01T17:12:10Z No. of bitstreams: 1 TESE Maiara Celine de Moura.pdf: 6960708 bytes, checksum: a479e09581b7b68198b588dd6ecb0e5d (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-01T17:12:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE Maiara Celine de Moura.pdf: 6960708 bytes, checksum: a479e09581b7b68198b588dd6ecb0e5d (MD5) Previous issue date: 2016-07-29 / FACEPE / Bactérias são organismos procariontes capazes de se adaptar aos mais variados tipos de habitat; podem crescer e aderir a várias superfícies, formando comunidades complexas conhecidas como biofilmes. O desenvolvimento de biofilme, na maioria dos casos, resulta em riscos para a saúde em ambientes clínicos, devido a elevada patogênese, e causa perdas econômicas em diferentes setores da indústria, sendo a principal causa da biocorrosão. Estratégias de controle dos biofilmes envolve o uso de antibióticos e biocidas; entretanto, bactérias dentro de biofilmes são mais resistentes a vários tipos de tratamentos. Diversos mecanismos de resistência bacteriana aos antimicrobianos sintéticos são descritos. Pesquisas têm sido desenvolvidas com o objetivo de identificar compostos naturais capazes de agir frente a microrganismos planctônicos e em biofilmes visando aplicações médicas e industriais. As lectinas são proteínas que se ligam especificamente a carboidratos e podem ter atividades biológicas importantes, podendo atuar como agentes antibacterianos e antibiofilme. Este trabalho avaliou a atividade antibacteriana da lectina solúvel em água de sementes de Moringa oleifera (WSMoL) contra bactérias que podem estar envolvidas na biocorrosão e infecções humanas (Bacillus sp., Bacillus cereus, Bacillus pumillus, Bacillus megaterium, Micrococcus sp., Pseudomonas sp., Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas stutzeri e Serratia marcescens) investigando seu efeito no crescimento, sobrevivência e permeabilidade celular. Em adição, também estudamos a formação de biofilme por S. marcescens e Bacillus sp. (ambas bactérias sensíveis a WSMoL) e avaliamos o efeito de WSMoL na formação de biofilme e sobre biofilmes pré-estabelecidos para ambas as espécies. Um protótipo de revestimento de superfícies com WSMoL por técnica de imersão (dipping coating) e a viabilidade das células dentro de biofilmes desenvolvidos sob a superfície revestida com a lectina também foram determinados. WSMoL inibiu o crescimento bacteriano, induziu a aglutinação e promoveu o extravasamento de proteínas de todas as espécies bacterianas avaliadas. Efeito bactericida foi detectado contra Bacillus sp., B. pumillus, B. megaterium, P. fluorescens e S. marcescens. Microscopia de fluorescência de células de S. marcescens mostrou que WSMoL causou danos a sua estrutura. A lectina foi capaz de impedir a formação de biofilmes de S. marcescens e Bacillus sp., principalmente para Bacillus sp. a 41,6 e 20,8 μg/mL; o mecanismo de antiformação pode estar associado com a perda da viabilidade celular. WSMoL não destruiu a matriz de biofilmes pré-estabelecidos de S. marcescens, entretanto, as células aderidas apresentaram-se presas e danificadas em estruturas envolvidas pela lectina. Sobre biofilmes de Bacillus sp., a lectina a 208 μg/mL drasticamente reduziu o número de células aderidas a superfície. WSMoL espontaneamente aderiu a superfície de vidro produzindo uma superfície revestida com a área de 116 μg/cm2, sendo capaz de alterar a viabilidade de células de S. marcescens que aderiram a essa superfície e prevenir a adesão de células de Bacillus sp., impedindo a formação de biofilme, sem interferir na viabilidade. Esse trabalho demonstra o potencial de WSMoL como uma ferramenta no controle de biofilmes formados por bactérias corrosivas e patogênicas, que representam um desafio em ambientes clínicos e industriais. / Bacteria are prokaryotic organisms able to adapting to the most varied types of habitat; can grow and adhere to many surfaces, forming complex communities known as biofilms. Biofilm development, in most cases, results in health risks in clinical environments and causes economic losses in different industries sectors, being the main cause of biocorrosion. Control strategies of biofilms involves the use of antibiotics and biocides; however, bacteria whitin biofilms are more resistant to various treatments. Various mechanisms of bacterial resistance to antimicrobial synthetic compounds are described. Researches have been developed in order to identify natural compounds able to act against planktonic microorganisms and inside biofilms for medical and industrial applications. Lectins are proteins that bind specifically to carbohydrates and may have important biological activities, acting as antibacterial and antibiofilm agents. This work evaluated the antibacterial activity of a water-soluble Moringa oleifera seed lectin (WSMoL) against bacteria that could be involved in biocorrosion and human infections (Bacillus sp., Bacillus cereus, Bacillus pumillus, Bacillus megaterium, Micrococcus sp., Pseudomonas sp., Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas stutzeri and Serratia marcescens) by evaluating its effect on growth, survival and cell permeability. In addition, we also studied the formation of biofilm by S. marcescens and Bacillus sp. (both bacteria sensitive to WSMoL) and evaluated the effect of WSMoL on biofilm formation and under established biofilms for both strains. A prototype of WSMoL-coated surfaces by dipping coating and the viability of cells within biofilm developed under the coated-surface were also determinated. WSMoL inhibited the bacterial growth, induced agglutination and promoted the leakage of proteins from cells of all strains. Bactericidal effect was detected against Bacillus sp., B. pumillus, B. megaterium, P. fluorescens and S. marcescens. Fluorescence microscopy of S. marcescens cells showed that WSMoL caused damage to its structure. The lectin was able to impair biofilms formation of S. marcescens and Bacillus sp., mainly for Bacillus sp. at 41.6 and 20.8 μg/mL; the antibiofilm mechanism can be associated with the lost of cell viability. WSMoL did not destroy preformed S. marcescens biofilms; despite the fact that attached cells presented trapped and damaged in hollow structures made by lectin. On Bacillus sp. biofilm, the lectin at 208 μg/mL drastically reduced the number of attached cells on surface. WSMoL spontaneously adhere on glass surface producing a lectin-coated area at 116 μg/cm2 that was able to alter the viability of S. marcescens cells, which adhered to the surface and preventing Bacillus sp. attachment, impairing biofilm development, without interfering in cell viability. This work propose the use of WSMoL as a potential tool to control biofilms formed by corrosive and pathogenic bacteria, which pose a challenge in clinical and industrial settings.

Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-07-25T17:29:29Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Benny Ferreira de Oliveira.pdf: 471392 bytes, checksum: 7bdaf58f58009fe8226515f70cba5175 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-07-27T21:43:07Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Benny Ferreira de Oliveira.pdf: 471392 bytes, checksum: 7bdaf58f58009fe8226515f70cba5175 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-27T21:43:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Benny Ferreira de Oliveira.pdf: 471392 bytes, checksum: 7bdaf58f58009fe8226515f70cba5175 (MD5) Previous issue date: 2017-02-17 / FACEPE / Lectinas são proteínas capazes de formar ligação com carboidratos de forma reversível. Os anticorpos ou imunoglobulinas (Ig) também de origem proteica, são gerados pelo sistema imune, e possuem elevado padrão de especificidade aos antígenos. Quando purificados e imobilizados servem como reagentes em diagnósticos de contaminantes químicos e biológicos, além disso quando desenvolvidos contra lectinas são capazes de reconhecer proteínas homólogas. Este trabalho teve como objetivo empregar um protocolo simplificado para a purificação da lectina coagulante de sementes de Moringa oleifera (cMoL), avaliar seu potencial antimicrobiano bem como desenvolver anticorpo contra a lectina. A caracterização parcial foi efetuada através de eletroforeses para proteínas nativas, bem como eletroforese contendo sulfato sódico de dodecila (SDS-PAGE) na presença de agente redutor. A purificação de cMoL com gel de guar produzido pelo protocolo desenvolvido neste trabalho foi eficiente; a atividade hemaglutinante específica (AHE) da lectina foi de 2.500. De acordo com a eletroforese a proteína purificada é básica e possui o mesmo padrão de massa molecular da cMoL anteriormente obtida por gel de guar utilizando protocolo previamente descrito. Também foram realizados os seguintes testes de atividade biológica: ensaio hemolítico com o extrato, fração e a lectina purificada da M. oleifera, preparações que não apresentaram hemólise das hemácias em todas as concentrações testadas; um ensaio de atividade antibacteriana, com a lectina purificada no qual em concentração de 10 mg/mL, houve inibição do crescimento das espécies Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Serratia sp. e Bacillus subtilis, não houve resultado com a espécie Proteus mirabilis; e efeito bactericida não foi observado para nenhuma linhagem. cMoL inibiu as espécies leveduriformes Candida albicans, C. krusei, C. tropicales e C. glabrata; efeito fungicida foi detectado nas espécies C. albicans e C. tropicales. Um anticorpo policlonal contra a lectina foi desenvolvido e poderá após purificação ser caracterizado e aplicado a imunoensaios. Conclusivamente, a metodologia utilizada poderá servir como base para futuras aplicações de cMoL purificada à homogeneidade. A lectina não promove efeito hemolítico em eritrócitos humanos do sangue tipo O. Os ensaios antimicrobianos revelaram maior toxicidade para os fungos comparados às bactérias. Os resultados da imunodifusão foram positivos na segunda inoculação ocorrendo precipitação entre IgG, extrato e lectina demonstrando que cMoL é imunogênica. / Lectins are proteins that can form carbohydrate binding reversibly. Antibodies or immunoglobulins (Ig) also of protein origin, are generated by the immune system, and have a high specificity to the antigens. When purified and immobilized they serve as reagents in diagnostics of chemical and biological contaminants, furthermore when developed against lectins they are able to recognize homologous proteins. The objective of this work was to employ a simplified protocol for the purification of Moringa oleifera seed coagulant lectin (cMoL), to evaluate its antimicrobial potential as well as to develop antibody against the lectin. Partial characterization was performed by electrophoresis for native proteins, as wel as sodium dodecyl sulphate electrophoresis (SDS-PAGE) in the presence of reducing agent. The purification of cMoL with guar gel produced by the protocol developed in this work was efficient; The specific hemagglutinating activity (AHE) of the lectin was 2,500. According to the electrophoresis the purified protein is basic and has the same molecular mass standard of cMoL previously obtained by guar gel using protocol previously described. The following biological activity tests were also performed: hemolytic assay with extract, fraction and purified lectin of M. oleifera, in which all preparations did not show red cell hemolysis at all concentrations tested, an antibacterial activity assay with Purified lectin in which at a concentration of 10 mg / mL, inhibition of the growth of the species Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Serratia sp. And Bacillus subtilis, there was no result with the species Proteus mirabilis; A bactericidal effect was not observed for any one lineage. CMoL inhibited yeast species Candida albicans, C. krusei, C. tropicales and C. glabrata; Fungicidal effect was detected in C. albicans and C. tropicales species. A polyclonal antibody against the lectin has been developed and may after purification be characterized and applied to immunoassays. Conclusion, the methodology used may serve as a basis for future applications of purified cMoL to homogeneity. The lectin does not promote hemolytic effect in human erythrocytes of type O blood. The antimicrobial assays revealed greater toxicity to fungi compared to bacteria. The immunodiffusion results were positive for second inoculation with precipitation occurring between IgG, extract and lectin demonstrating that cMoL is immunogenic.

Orientador: Regildo Márcio Gonçalves da Silva / Co-orientador: André Rolim Baby / Banca: Isabel Cristina Cherici Camargo / Banca: Giuseppina Pace Pereira Lima / Resumo: O desenvolvimento de novos fármacos com ação antioxidante tem sido um importante objeto de estudo, uma vez que a terapêutica farmacológica atual para o tratamento de doenças como Alzheimer, Parkinson, esclerose múltipla, doença de Huntington, epilepsia e alguns tipos de neoplasias pode ser realizada devido às propriedades antioxidantes de muitos compostos naturais e/ou sintéticos. Dessa forma, a busca por novos agentes antioxidantes é extremamente necessária e atualmente é objeto de interesse em novas pesquisas pela indústria cosmética, farmacêutica e nutricional. Neste contexto, este trabalho irá permitir o aumento do conhecimento sobre Moringa oleifera por meio da avaliação do potencial antioxidante, fotoprotetor e antiglicação dos extratos desta espécie, além de elucidar relatos etnobotânicos de sua utilização e enriquecer o conhecimento científico desta espécie amplamente empregada como planta medicinal. Além disso, porque são reduzidas as informações científicas sobre as atividades que serão avaliadas neste projeto / Abstract: The development of new drugs with antioxidant action has been an important subject of study, since the current drug therapy for the treatment of diseases such as Alzheimer's, Parkinson's, multiple sclerosis, Huntington's disease, epilepsy and some types of cancer can be performed because the antioxidant properties of many natural and / or synthetic compounds. Thus, the search for new antioxidants is extremely necessary and is currently the subject of interest in new research by the cosmetic, pharmaceutical and nutritional industry. In this context, this work will enable increased knowledge on Moringa oleifera by evaluating the antioxidant potential, sunscreen and anti-glycation of the extracts of this species, besides elucidating ethnobotanical reports of its use and enrich the scientific knowledge of this widely used species with medicinal plant. In addition they are reduced scientific information on the activities to be evaluated in this project / Mestre

Tese de mestrado integrado. Engenharia do Ambiente. Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto, Universidade Agostinho Neto. 2010

Submitted by Ana Paula Macedo (ensino@ioc.fiocruz.br) on 2013-10-01T00:36:14Z No. of bitstreams: 1 Cesar Luiz Pinto Ayres Coelho da Silva.pdf: 2032867 bytes, checksum: 8f69ccba120ff9211202cd483b7fc68d (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-01T00:36:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cesar Luiz Pinto Ayres Coelho da Silva.pdf: 2032867 bytes, checksum: 8f69ccba120ff9211202cd483b7fc68d (MD5) Previous issue date: 2013 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A esquistossomose é uma doença parasitária de veiculação hídrica causada pelo trematódeo Schistosoma mansoni, que afeta mais de 200 milhões de pessoas. Nas áreas de maior endemismo, o acesso ao suprimento de água é precário sendo obtida em poços, cacimbas e pequenos açudes, que se tornam também “criadouros artificiais” de caramujos infectados pelo S. mansoni. A doença é de profilaxia complexa, já que os moluscos aquáticos são de difícil controle, e pela parasitose incidir em zonas que favorecem um maior contato do homem com a água. No Brasil ocorrem dez espécies e uma sub-espécie do gênero Biomphalaria, sendo três espécies hospedeiras naturais do S. mansoni: Biomphalaria glabrata, Biomphalaria straminea e Biomphalaria tenagophila. O controle químico é utilizado para reduzir as populações destes hospedeiros intermediários sendo a Niclosamida o moluscicida recomendado pela OMS, porém com alta toxicidade para muitos organismos aquáticos. Moluscicidas derivados de plantas têm provado sua efetividade, porém exigem cuidados no manuseio, pois muitas espécies são tóxicas a humanos e organismos não alvo. Iniciativas no passado para o uso de plantas como moluscicida foram pouco promissoras ou desencorajadas em programas em larga escala devido ao pequeno valor agregado que possuem para as comunidades ou gestores públicos. A planta Moringa oleifera não é tóxica sendo utilizada na alimentação humana e animal, com vários estudos realizados para testar seu múltiplo uso, principalmente quanto à sua vi propriedade purificadora de águas. No presente estudo a semente moída de M. oleifera (ESSMol) foi avaliada pela primeira vez quanto à sua atividade moluscicida contra os moluscos B. glabrata, Physa marmorata e Melanoides tuberculatus. Sua ação ecotoxicológica também foi avaliada com o microcrustáceo Ceriodaphnia dubia e o peixe Danio rerio. Os resultados mostraram que o ESSMol foi eficaz como moluscicida para B. glabrata (CL50 = 0,419 g/L; CL90=1,021 g/L e P. marmorata (CL50=0,339 g/L; CL90=0,789 g/L) mas sem atividade moluscicida para M. tuberculatus. Para os organismos não alvo os valores foram: CL50 = 0,12 g/L (χ2 = 14,99; gl = 3; p<0,05) para C. dubia; e CL50 = 0,20 g/L (χ2 = 2,57; gl = 4; p>0,05) para D. rerio. O efeito tóxico apresentado nos testes ecotoxicológicos com organismos não alvo ocorreu em concentrações que permitem a manutenção de populações naturais. O ESSMol demonstrou ser um produto ecologicamente menos agressivo ao ambiente e seguro para manipulação e utilização pelo homem. A grande inovação do uso da M. oleifera como moluscicida, é apresentar um potencial para agregação de valor também como alimento para humanos e animais e na prestação de serviço ecossistêmico como purificador da qualidade da água. O multi-uso da M. oleifera integrando a relação do homem, planta e ecossistemas, compõem uma cadeia na estrutura ecossistêmica que fortalece os processos ecológicos, envolvendo mais que apenas a ação sobre o ciclo de transmissão da esquistossomose. / Schistosomiasis is a waterborne parasitic disease caused by the trematode Schistosoma mansoni which affects more than 200 milion people. In the most endemic areas, access to water supply, especially in rural areas, is poor and is obtained from wells, ponds and small reservoirs, which also potentially end up turning into "artificial breeding" of snails infected by S. mansoni. The disease prophylaxis is complex, since their hosts, aquatic snails are difficult to control, and since this parasitosis occurs in very hot and irrigated areas favoring an increased human contact with the water. In Brazil there are 10 species and one subspecies of the genus Biomphalaria, three of which are natural hosts of S. mansoni: Biomphalaria glabrata, Biomphalaria straminea and Biomphalaria tenagophila. Chemical control is used to reduce populations of vector snails being Niclosamide the only recommended by the WHO, demonstrating, however, severe toxicity to some aquatic organisms. Plant derived molluscicides have proven their effectiveness requiring, however, care in handling because some species possess toxic properties to humans and non-target organisms. Past initiatives to make effective the practice of use of plants with molluscicidal property have been unpromising or not carried forward in large scale programs due to the small value such plants have to target communities or public managers. The plant Moringa oleifera is non toxic to humans and used as food for humans and other animals with several studies having been done to test the multiple uses of this plant, particularly with respect viii to its water purifying property. In this study the ground seed of M. oleifera (GSEMol) was first evaluated for its molluscicidal activity against the snails B. glabrata, Physa marmorata and Melanoides tuberculatus. Its ecotoxicological action was also evaluated for the microcrustacean Ceriodaphnia dubia and the fish Danio rerio. The results demonstrated that the GSEMol was an effective molluscicide for B. glabrata (LC50 = 0.419 g/L; LC90 = 1.021 g/L) and P. marmorata (LC50 = 0.339 g/L; LC90 = 0.789 g/L) but had no molluscicidal activity against M. tuberculatus. For the non-target organisms the values were: LC50 = 0.12 g/L (χ2 = 14.99, df = 3, p <0.05) for C. dubia, and LC50 = 0.20 g/L (χ2 = 2.57, df = 4, p> 0.05) for D. rerio. The toxic effects shown in the ecotoxicity tests against non-target organisms however, occurred at concentrations which enable the maintenance of natural populations. The GSEMol proved to be a product environmentally less aggressive and safe for handling and use by man. The great innovation of the use of M. oleifera, besides being non toxic to humans, is to present the potential to add value as food for humans and animals as well as the provision of ecosystem services such as water purifier. The multi-potential use of M. oleifera integrating the relationship between man, plants and ecosystems, make up a chain in the ecosystem structure, strengthening the ecological processes involving more than just action on the transmission cycle of schistosomiasis.

LOPES, Tiago Deiveson Pereira. Potencial antidermatofítico de Mo-CBP4, uma proteína ligante à quitina de sementes de Moringa oleifera. 2016. 104 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica)-Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-08-03T20:07:36Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_tdplopes.pdf: 2164027 bytes, checksum: f658448ab9dc0c04c309f8347b4b887d (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-08-03T20:09:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_tdplopes.pdf: 2164027 bytes, checksum: f658448ab9dc0c04c309f8347b4b887d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-03T20:09:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_tdplopes.pdf: 2164027 bytes, checksum: f658448ab9dc0c04c309f8347b4b887d (MD5) Previous issue date: 2016 / Dermatophytosis constitute an important public health problem, affecting about 25% of world population. Several drugs are available for the dermatophytosis treatment, but they cause many adverse effects, including severe toxicity, drug interactions, low efficacy and resistance. Thus, there is a need for the development of new drugs with improved efficacy and safety. Medicinal plants are a valuable source of natural products that can act as drugs, being an alternative to conventional treatments. Moringa oleifera Lamarck, a plant native from Northeast of India, is widely used for its nutritional, therapeutic and water purification properties. Thus, this study aimed to evaluate the antidermatophytic potential of Mo-CBP4, a chitin-binding protein purified from M. oleifera seeds. By in vitro assays, Mo-CBP4 showed inhibitory activity against the fungus Trichophyton mentagrophytes, with a MIC50 of 500 µg/mL. In contrast, Mo-CBP4 did not inhibit the fungus T. rubrum, even at a higher concentration (1000 µg/mL). Mo-CBP4 (500 μg/mL) was able to inhibit the conidia germination of T. mentagrophytes, but not the mycelial growth. In relation to the mode of action, the antifungal activity of Mo-CBP4 does not seem to involve the carbohydrate interaction site since the protein remained active even when incubated with 0.15 M N-acetyl-D-glucosamine. The antifungal activity of Mo-CBP4 appears to result from the increased permeability of the conidia cell membrane and induction of oxidative stress within the cell, cause by this protein. Mo-CBP4 also showed antifungal activity against T. mentagrophytes by in vivo assays. In dermatophytosis model using albino Swiss female mice the hydrogel containing Mo-CBP4 (5 and 10 mg/g) was effective, reducing the lesion severity and shortening the infection period. The findings indicate that Mo-CBP4 has potential for development of a novel antifungal drug for clinical treatment of dermatophytosis caused by the fungus T. mentagrophytes. / As dermatofitoses são consideradas um problema de saúde pública, afetando cerca de 25% da população mundial. Vários medicamentos estão disponíveis no mercado para tratar dermatofitoses, porém essas drogas trazem muitos efeitos adversos, incluindo elevada toxicidade, interações medicamentosas, pouca eficácia e desenvolvimento de resistência. Assim, a busca por novas drogas mais seguras e eficazes é imperativa. As plantas medicinais constituem uma valiosa fonte de produtos naturais capazes de atuar como fármacos, caracterizando-se como uma alternativa aos tratamentos convencionais. Moringa oleifera Lamarck, uma planta originária do Norte da Índia, é bastante utilizada por suas propriedades nutricionais, purificadora de água e terapêuticas. Diante disso, esse trabalho objetivou avaliar o potencial antidermatofítico de Mo-CBP4, uma proteína ligante à quitina, purificada de sementes de M. oleifera. Através de ensaios in vitro, Mo-CBP4 apresentou atividade inibitória frente ao fungo Trichophyton mentagrophytes, apresentando um CIM50 de 500 μg/mL. Contrariamente, Mo-CBP4 não inibiu o fungo T. rubrum, mesmo em uma concentração mais elevada (1000 μg/mL). Mo-CBP4 (500 μg/mL) foi capaz de inibir a germinação de conídios de T. mentagrophytes, mas não o crescimento micelial. Em relação ao modo de ação, a atividade antifúngica de Mo-CBP4 não parece envolver o sítio de interação a carboidrato desde que mesmo incubada com N-acetil-D-glucosamina 0,15 M permaneceu ativa. A atividade antifúngica de Mo-CBP4 parece resultar do aumento da permeabilidade da membrana dos conídios e indução de estresse oxidativo no interior das células, causado pela proteína. Atividade antifúngica de Mo-CBP4 contra T. mentagrophytes foi também verificada em ensaio in vivo. Em modelo de dermatofitose animal, utilizando camundongos albinos Swiss fêmeas, o hidrogel contendo Mo-CBP4 (5 e 10 mg/g) se mostrou eficaz no tratamento da infecção causada por T. mentagrophytes, diminuindo a gravidade das lesões e abreviando o tempo de infecção. Os dados obtidos indicam que Mo-CBP4 tem potencial para o desenvolvimento de uma nova droga antifúngica a ser utilizada no tratamento de dermatofitose causada por T. mentagrophytes.