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Metilação global genômica relacionada à resistência parasitária em bovinos

Gonçalves, Juliana Alencar January 2020 (has links)
Orientador: Ricardo Velludo Gomes de Soutello / Resumo: O objetivo do trabalho foi caracterizar um rebanho de 72 novilhas ½ Angus x ½ Nelore, identificando os animais resistentes, resilientes esuscetíveis a endo e ectoparasitas, correlacionando a metilação global do DNA desses animais e o grau de parasitismo, que foi avaliado a partir da contagem de ovos por grama de fezes (OPG), moscas-dos-chifres e carrapatos. Essas contagens foram submetidas a análise de variância (ANOVA) para agrupamento em resistentes, resilientes e suscetíveis pelo teste Scott-Knott (p<0,05) noprograma SISVAR e agrupamento hierárquico no programa GENEs. O conteúdo de metilação foi analisado a partir do DNA extraído do sangue das novilhas, por meio dekit de metilação, e a quantificação feita por leitora de microplacas. Os valores absolutos médios de absorbância dos três grupos foram submetidos à ANOVA e análises pelo Tukey (p<0,05). Observou-se 36,11% de animais resistentes, 52,78% resilientese 11,11% suscetíveisa infecção por helmintos gastrintestinais, com contagens de 86, 392 e 1087 OPG, e 0,238, 0,225 e 0,197 do DNA metilado, respectivamente. Para a infestação por carrapatos, 26,39% dos animais foram classificados como resistentes, 59,72% resilientes e 13,98% suscetíveis, com contagensde 3, 8 e 19 carrapatos e 0,295, 0,216 e 0,151 do DNA metilado, respectivamente. E para a infestação por mosca-dos-chifres observou-se 54,17% de novilhas resistentes e 45,83% suscetíveis, com contagensde 17 e 32 moscas e 0,245 e 0,205 do DNA metilado, respectivamente. Na cla... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The objective of the work was to characterize a herd of 72 heifers ½ Angus x ½ Nellore, identifying the resistant, resilient and susceptible animals to endo and ectoparasites, correlating the overall DNA methylation of these animals and the degree of parasitism, which was evaluated from the egg count per gram of feces, horn flies and ticks.These counts were submitted to analysis of variance ANOVA for grouping in resistant, resilient and susceptible by the Scott-Knott test (p <0.05) in SISVAR and hierarchical grouping in the GENEs program. The methylation content was analyzed from the DNA extracted from the blood of the heifers, using a methylation kit and quantification by a microplate reader. The mean absolute values of absorbance of the three groups were submitted to ANOVA and analysis by Tukey (p <0.05). There were 36.11% of resistant animals, 52.78% resilient and 11.11% susceptible to gastrointestinal helminth infection, with counts of 86, 392 and 1087 OPG, and 0.238, 0.225 and 0.197 of methylated DNA, respectively. For tick infestation, 26.39% of the animals were classified as resistant, 59.72% resilient and 13.98% susceptible, with counts of 3, 8 and 19 ticks and 0.295, 0.216 and 0.151 of methylated DNA, respectively. And for the horn fly infestation, 54.17% of resistant and 45.83% susceptible heifers were observed, with counts of 17 and 32 flies and 0.245 and 0.205 of methylated DNA, respectively. In the second classification, 33.33% of the animals were classified as r... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Avaliação in vitro da atividade pesticida de Piper tuberculatum Jacq. (Piperaceae) para o controle das infestações de Rhipicephalus microplus (Ixodideae) e Haematobia irritans (Muscidae)

Braga, Andrina Guimarães Silva, 19-98148-2507 21 July 2017 (has links)
Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-12-26T18:07:39Z No. of bitstreams: 1 Tese_Andrina Braga.pdf: 3419509 bytes, checksum: cf371a1829a1d9fd26aa223dfca9d501 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-12-26T18:07:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_Andrina Braga.pdf: 3419509 bytes, checksum: cf371a1829a1d9fd26aa223dfca9d501 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-26T18:07:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_Andrina Braga.pdf: 3419509 bytes, checksum: cf371a1829a1d9fd26aa223dfca9d501 (MD5) Previous issue date: 2017-07-21 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / R. microplus and H. irritans are ectoparasites that cause economic losses in Brazilian livestock. Natural products extracted from plants are promising sources for pest control, reducing the negative effects caused by the uncontrolled application of commercially available acaricides. P. tuberculatum stands out in the surveys due to its insecticidal actions. Therefore, the objective of this work is to perform the phytochemical study of P. tuberculatum, as well as its insecticidal potential against H. irritans and R. microplus. In this study the insecticidal potential of extracts and isolated substances of P. tuberculatum was evaluated, extracts were obtained from leaves, fruits and stalks prepared with solvents: hexane, chloroform, ethyl acetate and ethanol in six concentrations, however, for Como Concentrations. The activity of the extracts was evaluated on engorged larvae and females of R. microplus and adults H. irritans. The isolated and identified substances were piplatin, pelitorin and 3,4,5-trimethoxy dihydrocinnamic acid isolated from ethanolic extract of P. tuberculatum fruits. There is no immersion test of adults of R. microplus, it was observed that it offers effective results of fruit extract with 99,7%, and for other extracts or fruit are also shown as promising for adult immersion test. For R. microplus larvae a 24 hour evaluation, observing LC50 of 1,23 mg/mL and 1,29 mg/mL for hexenic leaf and bead extracts, respectively. The LC50 found for H. irritans on impregnated filter paper, the ethanolic extract of stems at LC50 was 6,00 mg/mL, which was the best result for this test. However as isolated substances, the message shown (LC50 of 0,48 mg/mL), this may have been due to a combination of compounds, since in the extracts with a combination of compounds, with the most known results. Thus, the present work demonstrates that the species P. tuberculatum presents an important acaricidal action. / R. microplus e H. irritans são ectoparasitas que causam prejuízos econômicos na pecuária brasileira. Os produtos naturais extraídos de plantas são fontes promissoras para o combate de pragas, reduzindo os efeitos negativos ocasionados pela aplicação descontrolada dos acaricidas disponíveis no mercado. P. tuberculatum destaca-se nas pesquisas devido as suas várias ações inseticidas. Com isso, o objetivo desse trabalho foi realizar estudo fitoquímico de P. tuberculatum, bem como determinar seu potencial inseticida contra H. irritans e R. microplus. Neste estudo, foi avaliado o potencial inseticida de extratos e de substâncias isoladas de P. tuberculatum. Os extratos foram obtidos de folhas, frutos e talos preparados com os solventes: hexâno, clorofómio, acetato de etila e etanol em seis concentrações, no entanto, para as substâncias foram quatro concentrações. A atividade dos extratos foi avaliada sobre larvas e fêmeas ingurgitadas de R. microplus e de adultos H. irritans. As substâncias isoladas e identificadas foram a piplatina, pelitorina e ácido 3,4,5- trimetóxi-dihidrocinâmico, isoladas a partir de extrato etanólico de frutos de P. tuberculatum. No teste de imersão de adultos de R. microplus, observou-se que o extrato que apresentou eficácia foi o extrato de fruto com 99,7%, sendo que para os demais extratos o fruto também mostrou ser promissor para o teste de imersão de adultos. Para as larvas de R. microplus, a avaliação ocorreu em 24 horas, observando CL50 de 1,23 mg/mL e 1,29 mg/mL para os extratos hexânico de folhas e talos, respectivamente. Já a CL50 encontrada para H. irritans em papel filtro impregnado, o extrato etanólico de talos a CL50 foi de 6,00 mg/mL, sendo este o melhor resultado para este teste. No entanto, entre as substâncias isoladas, somente a pelitorina mostrou resultados (CL50 de 0,48 mg/mL). Isso pode ter corrido devido a não combinação de compostos, já que nos extratos, a combinação dos compostos fez com que os resultados fossem mais potencializados. Dessa forma, o presente trabalho demonstrou que a espécie P. tuberculatum apresenta importante ação acaricida.
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Comportamento da Mosca-dos-chifres, Haematobia irritans, (Diptera - Muscidae) frente aos compostos orgânicos voláteis de diferentes raças bovinas / Behavior of fly Haematobia irritans, horns, (Diptera-Muscidae) front of volatile organic compounds in different bovine breeds

Carvalho, Cenira Monteiro de 31 July 2012 (has links)
The aim of this work was to study the effect of Volatile Organic Compounds (VOCs) released by cattle of different breeds on the behavior of the horn fly (Haematobia irritans). This ectoparasite is of great economic importance because it causes damage to various livestock worldwide. The study began with the implementation of a breeding place for horn flies in the laboratory at the Federal University of Alagoas in order to perform advanced studies with this parasite, as well as to follow the development of the egg to adult. Three breedings methods were used in order to obtain the greater emergency index of H. irritans fly in laboratory. Afterwards, odors released by cattle breeds Gyr, Holstein, Brown Swiss, Nellore and Gyr (both sexes) were taken followed by the extraction of the material collected with the aid of bidestiled hexane and analysis by Gas Chromatography (GC), Gas Chromatography coupled to Mass Spectrometry (GC/MS) in all breeds; Eletroantenography Gas Chromatography (GC/EAG) performed with the chromatogram with the highest number of peaks and behavioral bioassays. The behavioral bioassays with the horn fly were performed with extracts from animal and synthetic standards identified in GC/EAD, using an olfactometer type Y. In addition, we investigated whether there are differences on VOCs released from the different genetic groups. With regard to the breeding place, in the first creation, horn flies after emergence were counted and the result was 18.61% of emergency. In the second creation, the percentage of emerged flies was 55.56% and in the third was 78.22%, considered, thus, the most appropriate method for rearing H. irritans in laboratory, when the development was within a cooling chamber. Analysis of the GC chromatograms of the Brown Swiss breed showed that the collection of VOCs in animals was efficient since most of the compounds was shown to be present in all samples. The qualitative GC analysis of all races had shown that there was not a large variation with respect to VOCs. The analysis of GC/MS confirmed the difference on compounds between the races, and nine of them were common in all races. Among them, camphene, 2-ethylhexanal, 2-heptenal, 1-octen-3-one, 1-octen-3-ol, octan-3-one, octanal, 2,2,8-trimethyldecane and 2-phenylethyl butyrate. All VOCs obtained in the analyses mentioned above were identified by their Kovats indices indexes (KI). The results of the extracts’ aeration bioassays have shown that insects are attracted by volatiles from both sexes of the European breeds and mixed Girolando. In the bioassays performed with synthetic standards, only butyl acetate showed significant responses at concentrations of 10-7, 10-6 and 10-5 mg/mL. VOCs obtained by GC/MS were similar between breeds and mixed European and otherwise distinct from the Indian races. / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O objetivo deste trabalho foi estudar o efeito dos Compostos Orgânicos Voláteis (COVs) liberados por bovinos de diferentes raças sobre o comportamento da mosca-dos-chifres (Haematobia irritans). Esse ectoparasita é de grande importância econômica, por causar diversos danos à pecuária mundial. O estudo teve início com a implantação de um criatório de moscasdos-chifres em laboratório, na Universidade Federal de Alagoas, visando à realização de estudos avançados com esse parasita, assim como acompanhar o desenvolvimento ovo-adulto. Três criações foram utilizadas para obtenção de um maior número de emergência da mosca H. irritans em laboratório. Posteriormente, foram realizadas coletas de odores exalados por bovinos das raças Girolando, Holandesa, Pardo-Suíça, Nelore e Gir (de ambos os sexos), seguindo-se extração, por hexano bidestilado, do material coletado e análises por Cromatografia Gasosa (CG); Cromatografia Gasosa acoplada à Espectrometria de Massas (CG/EM) em todas as raças estudadas; Cromatografia Gasosa acoplada a Eletroantenografia (CG/EAG) com o cromatograma que apresentou o maior número de picos e bioensaios comportamentais. Os bioensaios comportamentais com a mosca-dos-chifres foram realizados com os extratos oriundos dos animais e com padrões sintéticos identificados no CG/EAG usando olfatômetro tipo Y. Além disso, foi investigado se existe diferença dos COVs liberados entre os diferentes grupos genéticos. Com relação ao criatório de mosca-dos-chifres, após emergência, as moscas foram contadas e o resultado foi de 18,61 % de emergência, na primeira criação. Na segunda criação, a porcentagem de moscas emergidas foi de 55,56 % e na terceira criação a emergência foi de 78,22 %, sendo considerado, o método mais adequado para criação de H. irritans em laboratório, quando a criação foi desenvolvida dentro de uma câmara de refrigeração. A análise dos resultados de CG da raça Pardo-Suíça revelou que a coleta dos COVs em animais foi eficiente já que a maior parte dos compostos repetiu-se em todas as amostras analisadas. A análise em CG de todas as raças mostra que não houve uma grande variação qualitativa com relação aos COVs das amostras analisadas. A análise do CG/EM, confirmou a diferença dos compostos entre as raças, sendo que, nove foram comuns em todas as raças. Entre eles, canfeno, 2-etil-hexanal, 2-heptenal, 1-octen-3-ona, 1-octen-3-ol, octan-3-ona, octanal, 2,2,8-trimetildecano e butirato de 2-feniletila. Todos os COVs obtidos nas análises citadas acima foram identificados através do Índice de Kóvats (KI). Os resultados obtidos com os bioensaios dos extratos da aeração mostraram que os insetos foram atraídos pelos voláteis de ambos os sexos das raças europeias e da mestiça Girolando. Os bioensaios realizados com os padrões sintéticos mostraram que apenas o acetato de butila apresentou respostas significativas nas concentrações de 10-7,10-6 e 10-5 mg/mL. Os COVs obtidos por CG/EM foram similares entre as raças europeias e a mestiça e por outro lado distintos das raças indianas.

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