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PRODUÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE NANOCÁPSULAS CONTENDO TRANS-ANETOL E AVALIAÇÃO IN VITRO DA CAPACIDADE ANTIOXIDANTEColusso, Ariane Schneider 08 January 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-01-08 / The trans-anethole (TA) is an aromatic compound found in large amounts in the essential oil of various plants, for example, fennel, anise. Due to low water solubility, many phytochemicals, such as trans-anethole, are poorly absorbed. The nanoencapsulation provide the possibility of improving the stability of these class of substances, altering pharmacokinetics and biodistribution. This study aimed to produce trans-anethole containing nanocapsules (NCTA), characterizing them by parameters such as: stabilishment of pH, distribution of average particle size, polydispersity, zeta potential, efficiency of encapsulation and spectrophotometry UV-visible (UV-VIS). To evaluate the stability of nanocapsules applying Vieira method (2014); to analyze the toxicity in vitro using the MTT reduction test MTT-formazan, cytogenetic analysis and comet assay. Verify the antioxidant activity in vitro of the nanocapsules produced by TBARS assay and catalase (CAT) and, finally, the reduction test of DPPH. The NCTA indicated pH 4.78, average diameter of 218 nm and average polydispersity index of 0.14, which implies homogeneity in the distribution of particle size of the samples. The average zeta potential of the samples was -28.5 mV, which is a value considered appropriate to prevent aggregation and precipitation of the nanostructures. The validation of the methodology presented satisfactory values for all parameters. The NCTA formulation obtained an excellent TA association rate (Schaffazick et al. 2003), showing stability for 60 days and no cytotoxicity or genotoxicity. The NCTA and the TA did not presented antioxidant activity in the studied concentrations. It was observed that the TA, in their highest concentration, caused increase in CAT activity. There was not lipid peroxidation when used NCTA, in its highest concentration, compared to the control, which indicates greater protection of assets, reducing the possible cell damage. / O trans-anetol (TA) é um composto aromático encontrado em grande quantidade no óleo essencial de várias plantas, por exemplo, erva-doce, anis. Pela baixa solubilidade em água muitos fitoquímicos, como o trans-anetol, são pouco absorvidos, sendo a nanoencapsulação a possibilidade de melhorar a estabilidade destes, alterando a farmacocinética e a biodistribuição. Este estudo teve como objetivo produzir nanocápsulas contendo trans-anetol (NCTA), caracterizá-las através de parâmetros como: determinação de pH, distribuição do tamanho médio de partícula, índice de polidispersão, potencial zeta, eficiência de encapsulação e espectrofotometria de UV-visível (UV-VIS). Avaliar a estabilidade das nanocápsulas conforme o método de Vieira (2014), analisar a toxicidade in vitro por meio de testes de redução do MTT em MTT-formazan, análise citogenética e teste do cometa. Verificar a ação antioxidante in vitro das nanocápsulas produzidas através do ensaio TBARS e catalase (CAT), e teste de redução do radical DPPH. As NCTA apresentaram pH de 4,78, diâmetro médio de 218 nm e índice de polidispersão médio de 0,14, indicando a homogeneidade na distribuição de tamanho de partícula das amostras. O potencial zeta médio das amostras foi de -28,5 mV, valor este considerado adequado para manter o sistema sem agregação e precipitação das nanoestruturas. A validação da metodologia apresentou valores satisfatórios para todos os parâmetros analisados. A formulação de NCTA obteve uma excelente taxa de associação do TA, conforme Schaffazick et al. (2003), demonstrou estabilidade durante 60 dias e não demonstrou citotoxicidade nem genotoxicidade. As NCTA e o TA não apresentaram atividade antioxidante nas concentrações estudadas. Observou-se que o TA, na sua maior concentração testada, causou aumento da atividade da CAT. Não ocorreu peroxidação lipídica quando utilizada NCTA na sua maior concentração, comparado ao controle, indicando maior proteção do ativo, reduzindo os possíveis danos celulares.
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IDENTIFICAÇÃO DE GENES DIFERENCIALMENTE EXPRESSOS EM GLIOBLASTOMA E SUA RELAÇÃO NAS VIAS DO SISTEMA IMUNOLÓGICO Santa Maria, RS 2016Baú, Carlos Eduardo Giuliani 30 March 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-03-30 / Microarrays are instruments for measurement and analysis of several genes simultaneously, one of its uses is the verification of distinguishing gene expression in diseases. This work aims to verify the distinction between the expression of proteins in glioblastoma, using the data collected from the Gene Expression Omnibus database, because this cancer is characterized as of high incidence and it’s difficult to treat. After computational statistical analysis, it was found that the genes TNIP2, TOLLIP, IKBKB, PSMF1, RASGRF2, NEFL, DNM1, CDC42, YES1, C1S and PAK1, are differentially expressed in the pathways of the immune system, however, only the genes TNIP2, TOLLIP, IKBKB, are part of the NF-KB pathway, known to fight inflammation. The expectation of this work, and it´s future studies, hope to demonstrate different expressed genes in the immune system and thus help to better understand the development of the disease and its treatment, by nanoencapsulation of temozolimoda, a drug used along with radiotherapy. / Microarranjos são instrumentos para leituras e análise de vários genes simultaneamente, sendo uma de suas utilizações a verificação da distinção de expressão de genes em doenças. A partir disso, este trabalho busca verificar a distinção de expressão entre as proteínas de glioblastoma, por meio de dados recolhidos do banco de dados Gene Expression Omnibus, por caracterizar-se como um câncer de grande incidência e difícil tratamento. Na análise estatística computacional realizada, constatou-se que os genes TNIP2, TOLLIP, IKBKB, PSMF1, RASGRF2, NEFL, DNM1, CDC42, YES1, C1S e PAK1, encontram-se diferencialmente expressos nas vias do sistema imunológico, porém, somente os genes TNIP2, TOLLIP, IKBKB, fazem parte da via NF-KB, conhecida no combate à inflamação. Espera-se com esse trabalho, além de aprimorá-lo em estudos futuros, complementar os estudos nesta área, pois sua análise poderá demonstrar diferentes genes expressos nas vias do sistema imunológico, podendo, assim, auxiliar na melhor compreensão no desenvolvimento da doença, bem como, seu tratamento, por meio da nanoencapsulação do temozolimoda, medicamento utilizado juntamente com radioterapia.
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INTERAÇÃO DE ANTIANSIOLÍTICOS COM GRAFENO: UMA ABORDAGEM TEÓRICASilva, Pedro Celso Alves 31 March 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-03-31 / The exaggerated use of anxiolytic drugs can cause environmental problems if there is no destination and treatment, leading to contamination of water resources and biological tissues and aquatic organisms. In addition, some microorganisms develop resistance to these drugs affect the ecosystem with its toxicity and remain in the environment, which justifies the growing concern about these environmental pollutants that were found in various parts of the world. There are some studies in the literature of the use of graphene as a filter for the removal of metals such as Na, Mg, K, Ca and Ni environment. Other studies show that graphene can be used to remove drugs such as aspirin, caffeine, acetaminophen and ciprofloxacin the aqueous media. The objective of this study was to evaluate, through computer simulations based on Density Functional Theory (DFT), the structural and electronic properties of anxiolytic drugs interacting with pure graphene, because until now few methods of treating wastewater for removal anxiolytic drugs are not effective, and in other cases the methods are expensive. In this study, we analyzed the interaction of pure graphene with anxiolytics (alprazolam, clonazepam, clobazam, diazepam and the nordiazepam) commonly found in the environment and highly resistant to photobleaching. The results show that the interaction of graphene with diazepam stabilized with binding energy ranging between -0.29 eV and -0.35 eV and load transfers between -0.002 e- and +0.036 e-. As for the nordiazepam interacting with graphene, the binding energy remained between -0.23 eV and -0.31 eV and cargo transfers between -0.002 e- and +0.069 e-. For alprazolam the binding energy remained between -0.19 eV and -0.86 eV and cargo transfers between -0.004 and +0.041 e-. For clobazam the binding energy varied between -0.23 eV and -0.76 eV and load transfers between -0.005 e- and +0.040 e- and clonazepam remained between -0.52 eV and -0, 75 eV and load transfer between -0.005 e- and +0.070 e-. For every interaction was observed which can occur graphene load transfer to the drug (indicated by positive values) or drug for graphene (indicated by negative values). There was a physical adsorption for all pure graphene interactions with anxiolytic drugs with binding energy ranging between -0.19 eV and -0.86 eV and a charge transfer between -0.018 e- and +0.070 e-, and that the electronic properties of the systems were not changed significantly. The results for the interaction of graphene with anxiolytics, are important to contribute to the development of filters to remove these drugs from aqueous media and sewage treatment plants, since there are no reports in the literature on the interaction of graphene with anxiolytic agents for through computer simulation. / O uso exagerado de fármacos ansiolíticos pode acarretar problemas ambientais, caso não haja destino e tratamento adequado, ocasionando a contaminação dos recursos hídricos e de tecidos biológicos e de organismos aquáticos. Além disso, alguns micro-organismos criam resistência a esses fármacos afetando o ecossistema com sua toxicidade e permanência no meio ambiente, justificando a crescente preocupação sobre estes poluentes ambientais que foram encontrados em várias partes do mundo. Já existem na literatura alguns estudos do uso do grafeno como filtro para remoção de metais como: Na, Mg, Ca, K e Ni do meio ambiente. Outros estudos mostram que o grafeno pode ser utilizado para remoção de fármacos como: aspirina, cafeína, acetaminofeno e ciprofloxacina dos meios aquosos. O objetivo deste trabalho é avaliar, por meio de simulações computacionais baseadas na Teoria do Funcional da Densidade (DFT), as propriedades estruturais e eletrônicas de fármacos ansiolíticos interagindo com o grafeno puro, pois até o presente momento alguns métodos de tratamento dos efluentes para remoção de ansiolíticos não são eficazes e em outros casos os métodos são caros. Neste estudo, foi analisada a interação do grafeno puro com os ansiolíticos (alprazolam, clobazam, clonazepam, diazepam e o metabólito nordiazepam) frequentemente detectados no meio ambiente e altamente resistentes a fotodegradação.
Os resultados mostram que a interação do grafeno com o diazepam se estabilizou com energia de ligação variando entre -0,29 eV e -0,35 eV e as transferências de carga entre -0,002 e- e +0,036 e-. Já para o nordiazepam interagindo com o grafeno, a energia de ligação se manteve entre -0,23 eV e -0,31 eV e as transferências de carga entre -0,002 e- e +0,069 e-. Para o alprazolam a energia de ligação permaneceu entre -0,19 eV e -0,86 eV e as transferências de carga entre -0,004 e- e +0,041 e-. Para o clobazam a energia de ligação variou entre -0,23 eV e -0,76 eV e as transferências de carga entre -0,005 e- e +0,040 e- e para o clonazepam manteve-se entre -0,52 eV e -0,75 eV e a transferência de carga entre -0,005 e- e +0,070 e-. Para todas as interações observou-se que pode ocorrer transferência de carga do grafeno para o fármaco (indicados pelos valores positivos) ou do fármaco para o grafeno (indicados pelos valores negativos). Ocorreu uma adsorção física para todas as interações do grafeno puro com os fármacos ansiolíticos, com energia de ligação variando entre -0,19 eV e -0,86 eV e uma transferência de carga entre -0,018 e- e +0,070 e-, sendo que, as propriedades eletrônicas dos sistemas não foram alteradas significativamente. Os resultados obtidos para a interação do grafeno com ansiolíticos,
são importantes para contribuir com o desenvolvimento de filtros para remoção destes fármacos dos meios aquosos e estações de tratamento de esgotos, já que não há relatos na literatura sobre a interação do grafeno com agentes ansiolíticos por meio de simulação computacional.
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TOXICIDADE DE NANOTUBOS DE CARBONO FUNCIONALIZADOS E NÃO FUNCIONALIZADOS IN VITROMenezes, Patrick Flôres 29 August 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-08-29 / Carbon nanotubes (CNT) are structures of a few centimeters in length, and with a
nanometer radius. The application of CNT has been diverse, from nanosensors to drug
carriers, and therefore its toxicological evaluation is of great importance. Among the
various properties of CNT, the most worrying in toxicological terms is its great
insolubility. The insolubility in aqueous medium is one of the factors that decrease the
biocompatibility, reducing cell viability in vitro. Functionalization techniques of
nanostructures can be used to increase the solubility of CNT, thus increasing their
biological compatibility. The objective of this work was to investigate the cytotoxicity
caused by nonfunctionalized and functionalized multiple-walled carbon nanotubes
(MWCNT) through a chemical method and subsequent purification. For the in vitro
tests, the treated cells (RAW 264.7 and VERO cells) were cultured with various
concentrations of CNT described in the literature for comparison (5, 10, 25, 50 and 100
μg / ml). Cells from the control group with culture medium were cultured with DMEM
culture medium supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS), and the positive
control for cell damage with 100 mM of hydrogen peroxide. Cells remained in
treatments for the 24 hour periods. Cell viability was then determined by the tripan blue
exclusion method, which remained around 70%. Biochemical tests for cytotoxicity were
carried out by the release of the enzyme lactate dehydrogenase (LDH) in the cell
supernatant, nitric oxide in the macrophages, MTT, and a cell count of the supernatant
after treatment. The results showed no significant difference in cytotoxicity of the
samples, so the experiment was repeated using a VERO cell line, and concentrations
were increased (100, 250, 500, 1000 and 5000 μg / ml). The MTT, LDH, neutral red and
tripan blue counts were again performed. This second result demonstrated that
functionalization decreases the cytotoxic effect of the MWCNT used. The methodology
used was easy to apply and could be used for future analyzes of cytotoxicity using these
nanomaterials. / Nanotubos de carbono (NTC) são estruturas de comprimento de poucos centímetros, e
com um raio nanométrico. A aplicação dos NTC tem sido diversa, de nanosensores a
carreadores de fármacos, e por isso sua avaliação toxicológica é de grande importância.
Entre as diversas propriedades dos NTC, a mais preocupante em termos toxicológicos é
a sua grande insolubilidade. A insolubilidade em meio aquoso é um dos fatores
determinantes que diminuem a biocompatibilidade, diminuindo a viabilidade celular in
vitro. Técnicas de funcionalização de nanoestruturas podem ser utilizadas, para
aumentar a solubilidade dos NTC, aumentando assim sua compatibilidade biológica.
Com isso, o objetivo desse trabalho foi investigar a citotoxicidade causada pelos
nanotubos de carbono de paredes múltipla (NTCPM) não funcionalizados e
funcionalizados, através de um método químico e posterior purificação. Para a
realização dos testes in vitro, as células tratadas (RAW 264.7 e Células VERO) foram
cultivadas com diversas concentrações de NTC descritas na literatura a fim de
comparação (5, 10, 25, 50 e 100 μg/ml). As células do grupo controle com meio de
cultura foram cultivadas com meio de cultura DMEM suplementado a 10% de soro
bovino fetal (SBF), e o controle positivo para dano celular com 100 mM de peróxido de
hidrogênio. As células permaneceram em tratamentos pelos períodos de 24 horas. Em
seguida foi determinado a viabilidade celular, através do método de exclusão pelo azul
tripan, a qual permaneceu em torno de 70%. Em seguida foram conduzidos os testes
bioquímicos de citotoxicidade através da liberação da enzima lactato desidrogenase
(LDH) no sobrenadante celular, óxido nítrico na linhagem de macrófagos, MTT e uma
contagem celular do sobrenadante celular após tratamento. Os resultados não
demonstraram diferença significativa na citotoxicidade das amostras, sendo assim, o
experimento foi repetido utilizando uma linhagem celular de células VERO, e as
concentrações foram aumentadas (100, 250, 500, 1000 e 5000 μg/ml). Foram realizados
novamente os ensaios do MTT, LDH, vermelho neutro e a contagem com azul tripan.
Este segundo resultado demonstrou que a funcionalização diminui o efeito citotóxico
dos NTCPM utilizados. A metodologia utilizada, mostrou-se de fácil aplicabilidade e
passível de ser utilizada para futuras análises de citotoxicidade utilizando estes
nanomateriais.
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SÍNTESE E CARACTERIZAÇÃO DE NANOCOMPÓSITOS POLIMÉRICOS COM PROPRIEDADES DE ATENUAÇÃO PARA O USO EM PROTEÇÃO RADIOLÓGICACadó, Ronan Gorski 31 August 2016 (has links)
Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-17T12:00:46Z
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Previous issue date: 2016-08-31 / Ionizing radiations with X-rays energy range offer risk to human health and might be source of
interference on sensitive devices. The increased use of ionizing radiations causes the need of
development of new materials for radiological protection. The main goal of this study is to
determine the attenuation properties of X-rays in polymeric nanocomposites with insertion of
metal oxides. To obtain the nanocomposite, lead, cooper and tungsten oxides were synthesized.
The oxides were characterized by X-ray diffraction, infrared spectroscopy and zeta potential
with different pH. The synthesized oxides have average crystallite size between 25 and 55 nm.
Polymeric films were made by dissolving polyamide 6.6 pellets in different combinations of
formic acid / chloroform, determining by stress-strain tests that the combination 75/25 (%/%)
of the reagents had better condition for the polymeric film use as fabric. The oxides were
dispersed on the polymer solution for homogenization, obtaining polymer nanocomposites with
0.2 g, 0.08 g and 0.02 g of PbO, 0.2 g, 0.08 g and 0.02 g of CuO and 0.2 g of WO3.The
nanocomposites were evaluated by X-ray diffraction, showing diffraction peaks in the
amorphous region of the polymer film. The attenuation of X-rays was measured with the aid of
an ionization chamber, varying the voltage of the X-ray tube (kV), and the time of exposure
(mAs). The results showed attenuation of 26% compared to the polymeric film, in combination
kV/mAs 40/10 and 13.11% in 100/10, for the nanocomposite with higher amounts of PbO. The
nanocomposite with WO3 showed attenuation of 21,78% and 11,5% compared to the polymeric
film, in the combinations 40/10 and 100/10, respectively. The nanocomposite of CuO with the
larger amount of the oxide, showed attenuation of 10.11% and 4.5%, compared to the polymeric
film, in combinations of 40/10 and 100/10, respectively. These results suggest that the
nanocomposites produced has great potential for application in radiological protection. / As radiações ionizantes com energias na faixa dos raios X oferecem riscos para a saúde humana
e podem ser fontes de interferência em equipamentos sensíveis. O aumento do uso das radiações
ionizantes ocasiona na necessidade do desenvolvimento de novos materiais para uso em
proteção radiológica. Este estudo tem por objetivo determinar as propriedades de atenuação dos
raios X em nanocompósitos poliméricos com inserção de óxidos metálicos. Para a obtenção dos
nanocompósitos, foram sintetizados óxidos de chumbo, de cobre e de tungstênio. Os óxidos
foram caracterizados por difração de raios X, espectroscopia de infravermelho e por potencial
zeta em diferentes pH. Os óxidos sintetizados possuem tamanho de cristalito médio entre 25 e
55 nm. Foram produzidos filmes poliméricos a partir da dissolução de grãos de poliamida 6.6
em diferentes combinações de ácido fórmico/clorofórmio, determinando por ensaios de tensãodeformação
que a combinação 75/25 (%/%) dos reagentes apresentou melhor condição para o
do filme polimérico como tecido. Os óxidos foram dispersos na solução polimérica para
homogeneização, obtendo nanocompósitos poliméricos com 0,2 g, 0,08g e 0,02 g de PbO, 0,2
g, 0,08g e 0,02 g de CuO e 0,2 g de WO3. Os nanocompósitos foram avaliados por difração de
raios X, apresentando picos de difração na região amorfa do filme polimérico. A atenuação dos
raios X foi avaliada com auxílio de uma câmara de ionização, variando as condições de tensão
do tubo de raios X (kV) e do tempo de exposição (mAs). Os resultados obtidos demonstraram
atenuação de 26% em relação ao filme polimérico, na combinação kV/mAs 40/10 e 13,11% na
100/10, para o nanocompósito com maior quantidade de PbO. O nanocompósito de WO3
apresentou atenuação em relação ao filme polimérico de 21,78% e 11,5% nas combinações
40/10 e 100/10, respectivamente. O nanocompósito de CuO com maior quantidade de CuO
apresentou atenuação em relação ao filme polimérico de 10,11% e 4,5%, nas combinações
40/10 e 100/10. Estes resultados sugerem aos nanocompósitos produzidos um grande potencial
para aplicação em proteção radiológica.
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DESENVOLVIMENTO, CARACTERIZAÇÃO E ATIVIDADE ANTIOXIDANTE DE NANOCÁPSULAS DE RESVERATROL COM ÓLEO ESSENCIAL DE PIPER DILATATUM RICH COMO NÚCLEO LIPÍDICOMartellet, MÔNICA CERUTTI 14 February 2017 (has links)
Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-17T19:03:31Z
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Previous issue date: 2017-02-14 / Resveratrol is a natural compound, more specifically a phytoalexin, which was originally identified in the vitis vinifera grapes, with potential antioxidant activity among others already studied. Resveratrol has low solubility in water, besides chemical instability against external factors such as light, humidity and high temperature, which limits its use in some formulations by oral administration. Nanotechnology emerges with the strategy of preserving the physico-chemical properties of these compounds by nanoencapsulating them as well as increasing their bioavailability in body fluids. In this way, 0,5 mg / mL Resveratrol nanocapsules were prepared by the precipitation technique of the preformed polymer, using Eudragit S100® as a biopolymer and the essential oil of the plant Piper dilatatum Rich, as a lipid core. Nanocapsule suspensions were characterized by determination of mean particle diameter, polydispersity index, zeta potential, pH, encapsulation efficiency, drug dosage and morphology. To evaluate the biological activities, tests of antimicrobial activity by disc-diffusion and antioxidant activity were performed by the radical DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) radical method. To evaluate the cytotoxic profile, the cell viability test was performed through MTT (3-4,5-dimethylthiazolyl-2-2,5-diphenyltetrazolium bromide). Resveratrol nanocapsules had a particle diameter of 159.8 nm, polydispersity index less than 0,2, zeta potential - 12.6 mV, relatively acidic pH, encapsulation efficiency of 90% and assay of close to 100%. High performance liquid chromatography (HPLC) was used as analytical method, where it was validated through the following parameters: specificity, linearity, robustness, accuracy and precision, using as mobile phase methanol and water (47:53, v / v) , With wavelength determination of 312 nm. The method presented linearity (r2 = 0.999) and precision (DPR = 2,36% internal reproducibility and DPR = 1,03% repeatability). The accuracy was 101%, the method was robust against the analyzed parameters. The transmission electron microscopy assay showed that Resveratrol nanocapsules presented morphological characteristics in size and homogeneity for a nanoparticle. The antimicrobial assay did not present an effective result for this formulation, since there was no rupture of the nanocapsules. In the antioxidant activity assay, the two nanoencapsulated compounds presented a potential for inhibition of the DPPH radical, using as a parameter the EC50. The cytotoxic profile was delineated with low cell viability against MRC-5 cells because of the cytotoxic character formed by polysorbate 80, excipient of the formulation. The oil of the plant Piper dilatatum Rich was characterized by the CG-EM technique, where it was
identified its major compounds, which were present in the resveratrol nanocapsules. Based on these results, we can conclude that the nanocapsules of Resveratrol with lipid core the oil of Piper dilatatum Rich, besides being an innovative alternative, because it deals with polymeric nanocarreadores, it becomes a promising system for the therapy in the route of administration Oral, preserving the physical integrity of the compounds under study. As future prospects, further preformulation research, as well as in vivo and in vitro studies, where evaluation of pharmacokinetics and cytotoxicity may be required. / O Resveratrol é um composto natural, mais especificamente uma fitoalexina, que foi originalmente identificado nas uvas da espécie Vitis vinífera, com potencial atividade antioxidante entre outras já estudadas. O Resveratrol apresenta baixa solubilidade em água, além de instabilidade química frente a fatores externos como luz, umidade e temperatura elevada, o que limita o seu uso em algumas formulações por via de administração oral. A nanotecnologia surge com a estratégia de preservar as propriedades físico-químicas destes compostos, nanoencapsulando-os, bem como pode aumentar a sua biodisponibilidade nos fluidos corporais. Desta forma, foram preparadas nanocápsulas de Resveratrol na concentração de 0,5 mg/mL pela técnica da precipitação do polímero pré-formado, utilizando o Eudragit S100® como biopolímero e o óleo essencial da planta Piper dilatatum Rich, como núcleo lipídico. As suspensões de nanocápsulas foram caracterizadas através da determinação do diâmetro médio de partícula, índice de polidispersão, potencial zeta, pH, eficiência de encapsulação, doseamento do fármaco e morfologia. Para avaliar as atividades biológicas, foram realizados os testes de atividade antimicrobiana por disco-difusão e atividade antioxidante pelo método do radical DPPH (1,1-difenil-2-picril hidrazil). Para avaliar o perfil citotóxico, foi realizado o teste de viabilidade celular através do MTT {brometo de [3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio]. As nanocápsulas de Resveratrol apresentaram diâmetro de partícula de 159,8 nm, índice de polidispersão menor que 0,2, potencial zeta -12,6 mV, pH relativamente ácido, eficiência de encapsulação de 90% e doseamento próximo de 100%. A cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) foi utilizada como método analítico, onde este foi validado através dos seguintes parâmetros: especificidade, linearidade, robustez, exatidão e precisão, empregando como fase móvel metanol e água (47:53, v/v), com determinação em comprimento de onda de 312 nm. O método apresentou linearidade (r2= 0,999) e precisão (DPR= 2,36% de reprodutibilidade interna e DPR= 1,03 % de repetibilidade). A exatidão foi de 101%, o método foi robusto frente aos parâmetros analisados. O ensaio de microscopia eletrônica de transmissão demonstrou que as nanocápsulas de Resveratrol apresentaram características morfológicas em tamanho e homogeneidade para uma nanopartícula. O ensaio antimicrobiano não apresentou resultado efetivo para esta formulação, pois não houve o rompimento das nanocápsulas. Já o ensaio de atividade antioxidante, os dois compostos nanoencapsulados apresentaram potencial de inibição do radical DPPH, usando como parâmetro o EC50.O perfil citotóxico foi delineado
com baixa viabilidade celular frente às células de MRC-5 em virtude do caráter citotóxico formado pelo polisorbato 80, excipiente da formulação. O óleo da planta Piper dilatatum Rich foi caracterizado pela técnica de CG-EM, onde houve a identificação de seus compostos majoritários, os quais estiveram presentes nas nanocápsulas de Resveratrol. Com base nestes resultados, podemos concluir que as nanocápsulas de Resveratrol com núcleo lipídico o óleo de Piper dilatatum Rich, além de ser uma alternativa inovadora, por se tratar de nanocarreadores poliméricos, torna-se um sistema promissor para a terapêutica na via de administração oral, preservando a integridade física dos compostos em estudo. Como perspectivas futuras, são necessárias mais pesquisas de pré-formulação, bem como estudos in vivo e in vitro, onde possa haver a avaliação da farmacocinética e da citotoxicidade.
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SÍNTESE DE ÓXIDO DE GRAFENO DECORADO COM FERRITA PARA ADSORÇÃO DE CROMO HEXAVALENTELopes, Bibiana Culau 31 March 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-03-31 / One of the most common methods applied to heavy metal removal from contaminated aqueous solutions is adsorption through materials like activated carbon, and silica. In general, those materials are efficient and possible to reuse, although after their lifespan they become an environment liability, especially if inappropriately discharged. So that, it is seeking for materials that show more efficiency, that are easily regenerated, reusable and that generate less environmental impact. It is promising the use of graphene oxide (GO) as an adsorbent for environmental pollutants. GO with metallic nanoparticles attached to it, they confer magnetic features to GO, which makes it separation from the aqueous solution easy. In this study it was synthesized graphene oxide through Hummers & Offeman (1958) adapted method. Synthesized GO as well as commercial graphene oxide (Sigma) were submitted to hydrothermal process for insertion of ferrite (NiFe3O4) in its structure, then forming a nanocomposite NiFe2O4/GO. Nanomaterials were characterized by DRX, FTIR, Raman spectroscopy, MEV, BET and magnetization test, which all prove the formation and magnetization of the material. A solution of 100 mg.L-1 concentration of potassium dichromate (K2Cr2O7), was used as Cr(VI) source, for adsorption tests. The results show great efficiency of adsorption, which was stable in 150 min of stirring for more concentrated solutions of Cr(VI). It was used 500 mg.L-1 concentration of potassium dichromate in the photocatalytic process, which resulted in significant decrease of Cr(VI) and release of Cr(III) in the solution. The results obtained show high efficiency in the adsorption and the removal mechanism defined was through electrostatic attraction, due to the difference between charges of adsorbent and pollutant. A solution with 0.03 g of commercial graphene oxide decorated with ferrite and potassium dichromate in a concentration of 80 mg.L-1, adsorption reaction achieved the equilibrium, approximately, 20 minutes after the reaction started. When tested concentrations of 100, 80 and 40 mg.L-1 of potassium dichromate, the reaction achieved the equilibrium in 30 minutes. Adsorption reactions in concentrations of 300, 250 and 150 mg.L-1 of potassium dichromate stabilized 150 minutes after the reaction started. All tests were done with a fixed mass of 0.30 g of commercial graphene oxide decorated with ferrite. The results indicated that the major efficiency, when higher concentrations of Cr(VI)
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source, depends on the adjustment of adsorbent added. Photocatalytic reaction promoted the reduction of Cr(VI) to Cr(III), which was proved through the difference in absorbance solution. The removal mechanism was through difference between charges, photocatalytic reaction also promoted the desorption of Cr(III) from the adsorbent surface, as it has negatively charged, they naturally repel. / Um dos métodos mais comuns aplicado para remoção de metais pesados de soluções aquosas contaminadas é por adsorção através de materiais, como carvão ativado e sílica. Em geral esses materiais são eficientes e possibilitam a reutilização, porém ao final de sua vida útil se tornam passivo ambiental, principalmente se não forem descartados de forma correta. Desta forma busca-se por materiais que apresentem maior eficiência, facilidade de regeneração, de reutilização e que gerem menor impacto ambiental. O uso do óxido de grafeno como adsorvente, para remoção de poluentes de amostras ambientais, tem se mostrado promissor, principalmente se tratando de íons de metais. Quando o óxido de grafeno é agregado a nanopartículas metálicas, isso promove um caráter magnético, o que facilita a separação deste da solução aquosa. No presente estudo foi sintetizado o óxido de grafeno através do método adaptado de Hummers, Offeman (1958). O óxido de grafeno sintetizado, assim como óxido de grafeno comercial (Sigma), foram submetidos a um processo para inserção de ferrita (NiFe3O4) em sua estrutura via processo hidrotermal, formando o nanocompósito NiFe2O4/GO. Os nanomateriais obtidos foram caracterizados por difração de raios-x, espectroscopia no infrevermelho, espectroscopia Raman, microscopia eletrônica de varredura, teste de Brunauer-Emmett-Taller e teste de magnetização, os quais comprovam formação do óxido de grafeno e da magnetização do mesmo. Para os testes de adsorção e fotocatálise, utilizou-se solução de dicromato de potássio (K2Cr2O7) como fonte de Cr(VI). Os resultados obtidos demonstram alta eficiência de adsorção e o mecanismo de remoção definido foi por atração eletrostática, devido a diferença de cargas entre o adsorvente e o poluente. Para uma solução contendo 0,30 g de óxido de grafeno comercial decorado com ferrita e com uma concentração de 80 mg.L-1 de dicromato de potássio, a reação de adsorção atingiu o equilíbrio aproximadamente 20 minutos depois do inicio do processo. Quando testadas as concentrações de 100, 80 e 40 mg.L-1 de dicromato de potássio, a reação atingiu o equilíbrio em 30 minutos. As reações de adsorção em concentrações de 300, 250 e 150 mg.L-1 de dicromato de potássio estabilizaram depois de 150 minutos depois do inicio da reação. Todos os testes foram realizados com a quantidade fixa de 0,30 g de óxido de grafeno comercial decorado com ferrita. Os resultados indicam que a maior eficiência,
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quando em maiores concentrações de fonte de Cr(VI), depende do ajuste na quantidade de adsorvente adicionado. A reação de fotocatálise promoveu a redução do Cr(VI) para Cr(III), o que foi comprovado através da diferença medida nas absorbâncias da solução. O mecanismo de remoção foi por por diferença de cargas, a reação de fotocatálise promove também a dessorção do Cr(III) da superfície do adsorvente, já que esse é carregado negativamente, eles se repelem naturalmente.
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DESENVOLVIMENTO, CARACTERIZAÇÃO E ATIVIDADE ANTIFÚNGICA FRENTE À Glomerella cingulata DE NANOEMULSÕES CONTENDO MANCOZEBE E EUGENOLOliveira, Daniela Alves de 26 September 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-09-26 / Viticulture in Brazil has a great economic importance and an extension of approximately 80,000 hectares, generating employment and income for several families, however it is quite prone to infectious processes, which drastically reduces its productivity. Among these agents is Glomerella cingulata, which is controlled by fungicides, such as mancozeb. However, the use of this commercial product is related to contamination of the environment, in addition to a known toxic effect for humans. In this context the use of a naturally occurring substance, such as eugenol, could be a promising alternative. However, eugenol, which has an antimicrobial action, presents high volatilization and low solubility in water, thus impairing its administration and efficacy. One possibility to minimize toxicity of the fungicide, and the instability of eugenol, is nanoencapsulation. Therefore, the aim of this work was to verify the feasibility of co-encapsulation of mancozeb and eugenol in nanoemulsions and to evaluate the potential antifungal activity of nanoemulsions containing these compounds isolated and associated with Glomerella cingulata. Nanoemulsions containing eugenol (NE-E), mancozeb and eugenol (NE-ME), nanoemulsions with mancozeb (NE-M) and white nanoemulsions, without the active ones (NE-B) were prepared by the spontaneous emulsification method. The formulations were characterized according to mean diameter, polydispersity index (PDI), zeta potential, pH, content and morphology. The stability of the formulations for 30 days under different storage conditions and the antifungal activity against G. cingulata were also evaluated. The nanoemulsions had a mean diameter of approximately 200 nm, PDI of approximately 0.170, zeta potential of -11.0 mV, pH close to 5.0 and eugenol content, for NE-E and NE-ME, around 40%. Transmission electron microscopy showed spherical shape. The antifungal activity assay was performed by the macrodilution technique, and the active compounds were analyzed: free eugenol, mancozeb, mancozeb and eugenol and the same nanoencapsulated ones. The NE-M obtained a minimum inhibitory activity of 0.009 μg / mL, a satisfactory result, followed by NE-ME 0.02 μg / mL mancozeb + 2 μg/mL eugenol compared to its free forms. The best condition for storage of the formulations was under refrigeration and antifungal activity was potentiated after nanoencapsulation for all formulations. This study presents an innovative alternative for the treatment of G. cingulata through the use of nanotechnology. / A viticultura no Brasil apresenta uma grande importância econômica e uma extensão de aproximadamente 80.000 hectares, gerando emprego e renda para várias famílias, entretanto é bastante propensa a processos infecciosos, o que diminui drasticamente sua produtividade. Dentre estes agentes está a Glomerella cingulata, cujo controle é realizado por fungicidas, como o mancozebe. Entretanto o uso deste produto comercial está relacionado com contaminação do ambiente, além de conhecido efeito tóxico para os seres humanos. Neste contexto o uso de substância de origem natural, como o eugenol, poderia ser uma alternativa promissora. Entretanto, o eugenol, que possui ação antimicrobiana, apresenta alta volatilização e baixa solubilidade em água, prejudicando assim sua administração e eficácia. Uma possibilidade para minimizar a toxicidade do fungicida, e a instabilidade do eugenol, é a nanoencapsulação. Sendo assim, a proposta deste trabalho foi verificar a viabilidade de co-encapsulação do mancozebe e do eugenol em nanoemulsões e avaliar a potencial atividade antifúngica de nanoemulsões contendo estes compostos isolados e associados frente à Glomerella cingulata. Foram preparadas nanoemulsões contendo eugenol (NE-E), mancozebe e eugenol (NE- ME), nanoemulsões com mancozebe (NE-M) e nanoemulsões brancas, sem os ativos (NE-B) através do método emulsificação espontânea. As formulações, foram caracterizadas de acordo com diâmetro médio, índice de polidispersão (PDI), potencial zeta, pH, teor e morfologia. Também foi avaliada a estabilidade das formulações durante 30 dias em diferentes condições de armazenamento e a atividade antifúngica frente à G. cingulata. As nanoemulsões apresentaram diâmetro médio de aproximadamente 200 nm, PDI de aproximadamente 0,170, potencial zeta de -11,0 mV, pH próximo à 5,0 e teor de eugenol, para NE-E e NE-ME, em torno de 40%. A microscopia eletrônica de transmissão demonstrou formato esférico. O ensaio da atividade antifúngica foi realizado pela técnica de macrodiluição, sendo analisados os ativos: eugenol, mancozebe, mancozebe e eugenol livres e os mesmos nanoencapsulados. A NE-M, obteve uma atividade inibitória mínima de 0,009 μg/mL, resultado satisfatório, seguida da NE-ME 0,02 μg/mL de mancozebe e 2 μg/mL de eugenol, comparada a suas formas livres. A melhor condição para armazenamento das formulações foi sob refrigeração e a atividade antifúngica foi potencializada após nanoencapsulação para todas as formulações. Este estudo apresenta uma alternativa inovadora para o tratamento da G. cingulata através do emprego da nanotecnologia.
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ESTUDO DE PRIMEIROS PRINCÍPIOS DO GRAFENO INTERAGINDO COM CLUSTERS DE DIÓXIDO DE TITÂNIOSilva Júnior, José Solon da 28 March 2018 (has links)
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Previous issue date: 2018-03-28 / Recent studies demonstrate the effectiveness of nanostructures in dentistry. Some applications reduce physiological implications, such as the non-acceptance of a dental implant by the body. A promising nanostructure in several areas of knowledge that has been little explored for this purpose is graphene. In this work, we studied the interaction of adsorbed graphene with phosphorus (P), silver (Ag) and calcium (Ca) atoms with titanium dioxide clusters (TiO2), with nomenclature (TiO2)n, with n varying from 1 to 3. The aim of this study is to identify systems that are relevant to the area of implantology, i. e., nanosystems that could facilitate the adhesion of the implant to the organism. The dopant atoms were chosen because of their biocompatibility with bone tissue (P and Ca) and antibacterial properties (Ag). The clusters of TiO2 were used to mimic the oxide that is usually formed on titanium implants. For this, we performed calculations of first principles, based on the Density Functional Theory, as implemented in the SIESTA code. The exchange and correlation potential was treated within the generalized gradient approximation and the description of the valence electrons was done using the pseudopotential method. The results showed that the interaction of graphene adsorbed with calcium with TiO2 clusters is the most promising system that meets the purposes of the work. The adsorption energies for this case vary from 2.41 eV to 4.70 eV, indicating a strong interaction. In the case of silver-adsorbed graphene, the adsorption energies are lower, but still characterize a strong interaction, which varies from 1.31 eV for the cluster with n = 2 and 2.05 eV for the cluster with n = 3. For the cluster with n = 1, the value found for the adsorption energy was 1.92 eV. The system that was not relevant to the objectives of this work was the graphene adsorbed with phosphorus interacting with the clusters. In this case, the adsorption energies were high, 3.42 eV for (TiO2)1, and 2.16 eV for (TiO2)3, however, we observed that the cluster removed the atoms adsorbed from the graphene. For the cluster (TiO2)2, the interaction was weak, with an adsorption energy of 0.46 eV. These results, while theoretical, show that graphene can be a potential candidate for the creation of thin films to be used in the coating of titanium implants. / Estudos recentes demonstram a eficácia do emprego de nanoestruturas na odontologia. Certas aplicações reduzem implicações fisiológicas como, por exemplo, a não aceitação de um implante dentário pelo organismo. Uma nanoestrutura promissora em várias áreas do conhecimento e que tem sido pouco explorada para este fim, é o grafeno. Assim, neste trabalho, estudamos a interação do grafeno adsorvido com átomos fósforo (P), prata (Ag) e cálcio (Ca) com clusters de dióxido de titânio (TiO2), com nomenclatura (TiO2)n, onde n varia de 1 a 3. O objetivo desse estudo consiste em apontar sistemas que sejam relevantes para a área de implantodontia, ou seja, nanosistemas que pudessem facilitar a adesão do implante ao organismo. Os átomos dopantes foram escolhidos por apresentar biocompatibilidade com o tecido ósseo (P e Ca) e propriedades antibactericidas (Ag). Já os clusters de TiO2 foram utilizados com o intuito de mimetizar o óxido que geralmente se forma sobre os implantes de titânio. Para isso, realizamos cálculos de primeiros princípios, baseados na Teoria do Funcional da Densidade, conforme implementado no código SIESTA. O potencial de troca e correlação foi tratado dentro da aproximação do gradiente generalizado e a descrição dos elétrons de valência foi feita utilizando o método de pseudopotenciais. Os resultados obtidos mostraram que a interação do grafeno adsorvido com cálcio com os clusters de TiO2, é o sistema mais promissor que atende os propósitos do trabalho. As energias de adsorção para esse caso variam de 2,41 eV a 4,70 eV, indicando uma interação forte. Já para o caso do grafeno adsorvido com prata, as energias de adsorção são mais baixas, mas ainda assim caracterizando uma interação forte, as quais variam de 1,31 eV para o cluster com n = 2 e 2,05 eV para o cluster com n = 3. Para o cluster com n = 1, o valor encontrado para a energia de adsorção foi de 1,92 eV. O sistema que não se mostrou relevante para os objetivos do trabalho foi o grafeno adsorvido com fósforo interagindo com os clusters. Nesse caso, as energias de adsorção foram altas, 3,42 eV para o (TiO2)1, e 2,16 eV para o (TiO2)3, porém, observamos que o cluster afastou o átomos adsorvido do grafeno. Para o cluster (TiO2)2, a interação foi fraca, com uma energia de adsorção de 0,46 eV. Esses resultados, embora teóricos, mostram que o grafeno pode ser um candidato potencial para a criação de filmes finos, a serem utilizados no revestimento de implantes de titânio.
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PRODUÇÃO, CARACTERIZAÇÃO, CITO E GENOTOXICIDADE DE NANOESTRUTURAS CONTENDO ÓLEO DE GERÂNIO E AVALIAÇÃO DO SINERGISMO SOBRE LISTERIA MONOCYTOGENES FRENTE A ÓLEOS ESSENCIAISFausto, Viviane Pedroso 28 April 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-04-28 / Listeria monocytogenes is a food-borne bacterium that causes an infection called
listeriosis, Although rare, this infection can be lethal for immunocompromised, pregnant,
and stillborn. The objective of this work was to develop, characterize, evaluate the
stability, anti-Listeria monocytogenes activity, cytotoxicity and genotoxicity of
nanostructures (nanocapsules and nanoemulsion) containing Geranium essential oil
(OEG), as well as verify synergistic effects with the essential oils of Cinnamon,
Lemongrass And Thyme. The characterization of the essential oils was performed by GCMS.
The nanocapsules (NC) were prepared by the interfacial deposition method of the
preformed polymer while Geranium nanoemulsion (NEG) was prepared by
homogenization using an Ultra-Turrax T18. The analysis of the stability indicators was
performed by the evaluation of particle size, polydispersity index, zeta potential and pH
for 60 days. The bactericidal effect of the different concentrations of the essential oils,
pure or in combination and the synergism were determined by the serial microdilution
technique, the cytotoxicity was determined by the MTT assays and determination of the
LDH in VERO cells and the genotoxicity was evaluated by the GEMO test. Results: The
NCGs produced had mean nanometer diameters of (232.6 nm), polydispersity indices
below 0.053, pH 3.5 and zeta potentials of about -20.7 mV. The study demonstrated that
the stability of the formulations is temperature dependent, remaining more stable at
refrigeration temperatures (4 °C) or at stable temperatures (25
° C). The NEG had mean nanometer diameters of (136.2.6 nm), polydispersity indices
below 0.039, pH 3.4 and zeta potentials of about -8.1 mV. The MICs obtained for
Geranium, Cinnamon, Campi-lemon and Thyme oils were 10975 mg / ml, 0.05 mg / ml,
0.18 mg / ml and 0.35 mg / ml, respectively. The CIM of NEG was 0.0625 mg / ml and
the nanocapsules did not demonstrate antimicrobial activity in the test performed. It was
possible to observe at least one point of synergism between the OE of geraniums and the
tested EOs.the nanostructures did not show synergistic effect with OE. In the MTT assay
OEG and NEG showed increased cell viability at concentrations of 10, 100 and 1000 μg
/ μl as compared to the control, the LDH assay shows that both OEG and NEG at
concentrations of 0,1, 1, 10, 100 and 1000 μg / μl were not cytotoxic. In the GEMO test
the OEG had a genoprotective effect on lymphocytes at concentrations of 10, 100 and
1000 μg / μl. The study demonstrated that both OG and NEG do not present tocicity
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and genotoxicity but present very high MIC values to be used in food, and the synergism
and nanostructuring were a good alternative to reduce the amount of oil required for an
antimicrobial response. / A Listeria monocytogenes é um microrganismo contaminante de alimentos causador da
listeriose, uma infecção que embora rara pode ser letal para indivíduos imunodeficientes,
gestantes e neonatos. O objetivo deste trabalho foi desenvolver, nanoestruturas contendo
óleo essencial de Gerânio (OEG), caracterizar, avaliar a atividade contra L.
monocytogenes, a cito e genotoxicidade, bem como verificar efeitos sinérgicos com os
óleos essenciais de Canela, Capim-limão e Tomilho. A caracterização dos óleos
essenciais foi realizada por GC-MS. As nanocápsulas (NC) foram preparadas pelo
método de deposição interfacial do polímero pré-formado enquanto a nanoemulsão de
Gerânio (NEG) foi preparada por homogeneização utilizando um T18 Ultra-Turrax. A
análise dos indicadores de estabilidade foi realizada pela avaliação do tamanho de
partícula, índice de polidispersão, potencial zeta e pH por 60 dias. O efeito bactericida
das diferentes concentrações dos óleos essenciais e o sinergismo foram determinados pela
técnica de microdiluição seriada, a citotoxicidade foi determinada pelos ensaios de MTT
e LDH e a genotoxicidade foi avaliada pelo teste GEMO. Resultados: As NCG produzidas
apresentaram diâmetros nanométricos médios de (232,6 nm), índices de polidispersão
abaixo de 0,053, pH de 3,5 e potenciais zeta de cerca de -20,7 mV. O estudo demonstrou
que a estabilidade das formulações são mais estáveis em temperatura ambiente (25 ºC).
A NEG apresentou diâmetros nanométricos médio de (136,2 nm), índices de
polidispersão abaixo de 0,039, pH de 3,4 e potenciais zeta de cerca de -8,1 mV. As CIM
obtidas para os óleos de Gerânio, Canela, Campi-limão e Tomilho foram de 10975 mg/ml,
0,05 mg/ml, 0,18 mg/ml e 0,35 mg/ml respectivamente. A CIM da NEG foi de 0,0625
mg/ml e as nanocápsulas não demonstraram atividade antimicrobiana no teste realizado.
Foi possível observar pelo menos um ponto de sinergismo entre o OEG os OE testados.
As nanoestruturas não apresentaram efeito sinérgico com os OE. No ensaio de MTT o
OEG e a NEG apresentaram um aumento da viabilidade celular nas concentrações de 10,
100 e 1000 μg/μl quando comparado com o controle. O ensaio de LDH mostrou que tanto
o OEG quanto a NEG nas concentrações de 0,1, 1, 10, 100 e 1000 μg/μl não foram
citotóxicas. No teste GEMO o OEG apresentou um efeito genoprotetor sobre os linfócitos
nas concentrações de 10, 100 e 1000 μg/μl. O presente estudo demonstrou que tanto o
OEG quanto a NEG não apresentaram toxicidade e genotoxicidade porém apresentam
valores de CIM muito altos para poder serem utilizados em alimentos, podendo ser o sinergismo e a
nanoestruturação uma boa alternativa para reduzir a quantidade de óleo necessária para
uma resposta antimicrobiana.
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