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FORMULAÇÕES NANOESTRUTURADAS CONTENDO RUTINA: DESENVOLVIMENTO, ATIVIDADE ANTIOXIDANTE IN VITRO E EFEITO SOBRE A CICATRIZAÇÃO CUTÂNEA / NANOSTRUCTURED FORMULATIONS CONTAINING RUTIN: DEVELOPMENT, IN VITRO ANTIOXIDANT ACTIVITY AND EFFECT ON THE CUTANEOUS WOUND HEALINGAlmeida, Juliana Severo de 16 August 2010 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This work had as main objective the development of nanostructured formulations
containing rutin, using nanoparticles prepared with alternative vegetables oils. In the first chapter
it was demonstrated the feasibility of preparing nanocapsules and nanoemulsions using grape
seed or almond kernel oil. Nanocapsule suspensions and nanoemulsions were prepared by the
interfacial deposition of preformed polymer and spontaneous emulsification, respectively. All
formulations presented nanometric mean size, polydispersity index below 0.30, negative zeta
potential, pH values between 6.5 and 7.5 remaining stable after 6 storage months. These
formulations promoted the protection of the active against UV degradation, regardless of the type
of the oily phase or vesicle. In the second chapter, formulations prepared with grape seed oil were
selected for the development of rutin-loaded nanoparticles, as well as to evaluate its in vitro
antioxidant activity and photostability. All formulations presented nanometric size, low
polydispersity index, acid pH values, negative zeta potential and encapsulation efficiency close to
100 %. Nanoparticles were able to protect rutin against UV photodegradation, if compared to
rutin ethanolic solution. In the study of the in vitro antioxidant activity, rutin-loaded nanocapsules
and nanoemulsions showed a lower rutin decay rate compared to the rutin ethanolic solution
when exposed to UV radiation in the presence of OH radical. However, its presence in
nanocapsules led to a prolonged in vitro antioxidant activity compared to the rutin-loaded
nanoemulsions. Finally, in the third chapter we studied the development of hydrogels containing
rutin (free or associated to polymeric nanocapsules). Their activity on the cutaneous wound
healing in rats was evaluated. The developed formulations showed adequate properties regarding
their cutaneous administration. In vivo response concerning the healing effect of hydrogels was
evaluated by the regression of skin lesions after six days of treatment. Markers of oxidative stress
in the lesions of rats were also evaluated, as levels of lipid peroxidation analyzed by the method
of thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), determination of protein carbonyls levels,
total proteins levels, glutathione (GSH) levels, vitamin C and evaluation of the antioxidant
enzyme catalase (CAT). This last chapter showed for the first time the feasibility of the
dermatological use of such formulations containing rutin to promote the in vivo wound healing. / Este trabalho teve como principal objetivo o desenvolvimento de formulações
nanoestruturadas contendo rutina, a partir de nanopartículas contendo óleos vegetais até então
não estudados no preparo destas formulações. No primeiro capítulo foi demonstrada a viabilidade
de preparar nanocápsulas e nanoemulsões contendo o óleo de semente de uva e de amêndoas
doce como fase oleosa. As suspensões de nanocápsulas e nanoemulsões foram preparadas pelo
método da deposição interfacial do polímero pré-formado e emulsificação espontânea,
respectivamente. Todas as formulações apresentaram tamanho médio nanométrico, índice de
polidispersão inferior a 0,30, potencial zeta negativo e valores de pH entre 6,5 e 7,5,
permanecendo estáveis após 6 meses de armazenamento. As formulações promoveram a
fotoproteção do ativo frente à degradação UV, independente do tipo de fase oleosa e do tipo de
vesícula. No segundo capítulo, as formulações contendo o óleo de semente de uva foram
selecionadas para o estudo do desenvolvimento de nanopartículas contendo rutina, bem como
avaliação de sua atividade antioxidante in vitro e fotoestabilidade. Após o preparo, todas as
formulações apresentaram tamanho nanométrico de partículas, baixo índice de polidispersão,
valores de pH ácido, potencial zeta negativo e eficiência de encapsulação próxima à 100%. As
nanopartículas protegeram a rutina frente à fotodegradação UV, quando comparadas à solução
etanólica. No estudo da atividade antioxidante in vitro, as nanocápsulas e nanoemulsões
apresentaram uma menor taxa de decaimento da rutina comparada com a solução etanólica,
quando expostas à radiação UV em presença do radical ·OH. No entanto, a presença das
nanocápsulas levou a uma atividade antioxidante in vitro mais prolongada comparada com as
nanoemulsões contendo rutina. Finalmente, no terceiro capítulo estudamos o desenvolvimento de
hidrogéis contendo rutina livre ou associada a nanocápsulas poliméricas, avaliando a sua
atividade sobre a cicatrização de lesões cutâneas em ratos. As formulações desenvolvidas
apresentaram propriedades adequadas para aplicação tópica. A resposta in vivo do efeito
cicatrizante foi avaliada através da regressão de lesões na pele após 6 dias de tratamento.
Marcadores do estresse oxidativo nas lesões dos ratos foram também avaliados, como os níveis
da peroxidação lipídica através do método de TBARS, níveis de proteína carbonilada, níveis de
proteínas totais, níveis de glutationa (GSH), vitamina C e avaliação da enzima antioxidante
catalase (CAT). Este terceiro capítulo demonstrou pela primeira vez a potencialidade do emprego
dermatológico de hidrogéis contendo rutina para a promoção de cicatrização de feridas in vivo.
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