Thèse de doctorat--Sciences naturelles--Faculté des sciences de Paris, 1915. N°: 1576. / Notes bibliogr.

Thèse d'exercice : Médecine. Neurologie : Université de Nantes : 2005. / Bibliogr. f. 88-95 [103 réf.].

Thèse : Médecine : Paris : 1853. / N° d'ordre : 170.

Thèse de doctorat : Neurosciences : Paris 12 : 2006. / Titre provenant de l'écran-titre. Pagination : 255 p. Bibliogr. p. 220-255.

Thèse (M.Sc.)--Université Laval, 2007. / Bibliogr.: f. 71-79. Publié aussi en version électronique dans la Collection Mémoires et thèses électroniques.

Thesis (Ph. D.)--University of Wisconsin--Madison, 1960. / Typescript. Vita. eContent provider-neutral record in process. Description based on print version record. Includes bibliographical references.

Les transsections nerveuses peuvent conduire à une perte de sensibilité tactile et à une paralysie complète. Malheureusement, peu d'options s'offrent aux cliniciens. L'autogreffe nerveuse, le standard clinique, induit un déficit au site de prélèvement, en plus d'une récupération fonctionnelle incomplète. Une alternative est d'utiliser des tubes nerveux (TN) constitués de biomatériaux pour guider la migration axonale, or ceux-ci comportent plusieurs limites cliniques. Lors de la régénération nerveuse, une vascularisation efficace est essentielle, mais n'est pas rapidement mise en place avec l'utilisation de biomatériaux. Notre objectif est de fabriquer un TN vivant et autologue dans lequel un réseau capillaire sera développé in vitro par ensemencement de cellules endothéliales (CE). Un tube nerveux contenant un réseau capillaire préétabli se connectant rapidement à la microvasculature de l'hôte, telle une autogreffe, serait une option prometteuse pour réparer des lésions critiques (>3 cm). Les TN sont constitués d'un feuillet de fibroblastes humains ensemencés avec des CE et enroulé pour former une structure tubulaire. Afin de démontre leur potentiel clinique, les TN ont été implantés chez le rat pour réparer une lésion du nerf sciatique de 15 mm, puis chez le lapin néo-zélandais pour réparer une lésion beaucoup plus conséquente, soit une transsection de 4 cm du nerf fibulaire. L'analyse à long terme de la conduction nerveuse et de l'activité musculaire par électromyographie a été réalisée chaque mois. Le retour des fonctions motrices a été évalué grâce à divers tests comportementaux. La migration axonale a été suivie et quantifiée par des marquages en immunofluorescences. Notre équipe a démontré, dans un modèle de rat, que les TN prévascularisés supportaient la migration axonale à travers tout l'espace nerveux en moins de 2 mois. Une récupération partielle des fonctions motrices a été observée, et ce, avec une efficacité similaire entre le TN et l'autogreffe (p>0,05). La greffe chez le lapin, quant à elle, a permis de démontrer un retour de la conduction nerveuse dès la 18e semaine et un retour de l'activité musculaire à la 24e semaine lors d'une lésion significative de 4 cm. En produisant des tubes vivants entièrement autologues susceptibles d'accélérer la vascularisation du greffon grâce à un réseau microvasculaire préétabli, nous espérons développer une nouvelle approche thérapeutique personnalisée pour améliorer le traitement des lésions nerveuses. Les tubes nerveux intégrant des cellules vivantes représentent une voie prometteuse pour la réparation des lésions nerveuses jusqu'ici difficile à traiter avec les outils cliniques disponibles. / Nerve transections can lead to loss of tactile sensitivity and complete paralysis. Unfortunately, clinicians have limited options available. Nerve autografting, the clinical standard, results in a deficit at the donor site and incomplete functional recovery. An alternative is to use nerve tubes (NT) made of biomaterials to guide axonal migration, thereby promoting nerve regeneration. However, these come with several clinical limitations. Rapid and effective vascularization is crucial during nerve regeneration, but it is not quickly established when using inert biomaterials. Our goal is to create a living, autologous NT in which a capillary network will be developed in vitro by seeding endothelial cells (ECs). A nerve tube containing a pre-established capillary network that quickly connects to the host's microvasculature, as seen in autograft, would be a promising option to repair critical injuries (>3 cm). The NTs are made of a sheet of human fibroblasts seeded with ECs and rolled to form a tubular structure. To demonstrate their clinical potential, the NTs were implanted in rats to repair a 15 mm sciatic nerve injury, and in New Zealand white rabbits to repair a much larger injury, a 4 cm fibular nerve transection. Long-term analysis of nerve conduction and muscle activity through electrophysiology was conducted monthly. The return of motor functions was assessed using various motor and behavioral tests. Axonal migration was also tracked and quantified through immunofluorescence staining. Our team demonstrated in a rat model that pre-vascularized NTs supported axonal migration throughout the nerve space in less than 2 months. Partial recovery of motor functions was observed with similar efficiency between the NT and autograft (p>0.05). In rabbits, NTs showed a return to nerve conduction by the 18th week and muscle activity by the 24th week after a significant 4 cm nerve defect. We aim to develop a personalized therapeutic strategy for the treatment of nerve injuries by producing fully autologous living nerve tubes capable of accelerating graft vascularization through a pre-established microvascular network. Nerve tubes composed of living cells represent a promising approach to addressing nerve injuries that remain difficult to treat with current clinical tools.

Les transsections nerveuses peuvent conduire à une perte de sensibilité tactile et une paralysie complète. Malheureusement, peu d’options s’offrent aux cliniciens. L’autogreffe nerveuse, le standard en clinique, induit un déficit au site de prélèvement en plus d’induire une récupération fonctionnelle incomplète. Une alternative est d’utiliser des conduits nerveux faits de biomatériaux pour guider la migration axonale, mais ceux-ci comportent plusieurs limites cliniques. Notre objectif est de fabriquer un tube nerveux (TN) vivant complètement autologue dans lequel un réseau de capillaires sera développé in vitro par ensemencement de cellules endothéliales (CE), afin de favoriser une vascularisation rapide du greffon, ainsi que de cellules de Schwann (CS), pour permettre une croissance optimale des neurites et favoriser la migration axonale. Le TN est composé d’un feuillet de fibroblastes avec CE enroulé sur lui-même pour former un tube plein et enrichi en CS. Les TN humains sont implantés chez des rats RNU immunodéficients pour combler un déficit du nerf sciatique de 15 mm. Le remodelage du greffon est suivi en quantifiant la migration axonale par marquage en immunofluorescence des neurofilaments L après 2, 4 et 8 semaines d’implantation. Les TN ont été implantés avec succès chez le rat et leur structure interne a rapidement été remodelée. Une revascularisation des tubes sur toute leur longueur a été observée dès la 4ᵉ semaine d'implantation, y compris dans les tubes non endothélialisés. Les fibres nerveuses ont reconnecté avec le segment distal du nerf lésé à 8 semaines, la migration axonale étant similaire à celle de l'autogreffe en proximal. En produisant des tubes vivants entièrement autologues susceptibles de libérer des facteurs de croissance neurotrophiques et d’accélérer la vascularisation du greffon grâce à un réseau microvasculaire préétabli, nous espérons développer une nouvelle approche thérapeutique personnalisée pour améliorer le traitement des blessures des nerfs périphériques / Even with recent advancements, the treatment of peripheral nerve transections remains a challenge. Peripheral nerve transections may lead to loss of sensibility and motor function of the upper and lower limbs. Unfortunately, clinicians only have few options to repair the gap. Our goal is to produce a fully autologous scaffold-free nerve tube (NT) to guide axonal migration. A viable pre-vascularized tube seeded with Schwann cells (SCs) could allow a faster recovery for patients with major peripheral nerve transections by supporting an optimal axonal migration. NT’s are made from fibroblast cells which deposit their own extracellular matrix into a manipulable sheet, on which are seeded endothelial cells (ECs) and SCs to form a filled tubular structure, a technique based on the self-assembly method. NTES were implanted in immunodeficient RNU rats to repair a 15 mm sciatic nerve defect. Graft innervation was followed by quantification of axon migration using immunofluorescent staining of neurofilament L after 2, 4 and 8 weeks post-implantation. The internal structures of the NTES rapidly remodeled and successfully reconnected with the proximally severed nerve segment. Immunofluorescent labelling of rat neurites indicates that nerve fibers migrated through the construct and reached the distal nerve stump after 8 weeks. Furthermore, myelinated fibers were detected in the NTES. In its proximal section, axonal migration was similar to the autograft control. Also, revascularization was noted along the entire tube length as soon as the 4ᵗʰ week after implantation. The anastomosis of the pre-established human capillaries was successful. Indeed, rat red blood cells were identified in the lumen of human capillaries within the NT graft. Pre-vascularized NT’s with autologous ECs have the potential to greatly accelerate revascularization in the graft and thereby provide oxygen and nutriments during the process of nerve regeneration. Moreover, SC may release neurotrophic factors that can enhance peripheral nerve regeneration.

Thèse (M.Sc.)--Université Laval, 2008. / Bibliogr.: f. [101]-123. Publié aussi en version électronique dans la Collection Mémoires et thèses électroniques.

Thèse (Ph. D.)--Université Laval, 2007. / Bibliogr.: f. 255-302. Publié aussi en version électronique dans la Collection Mémoires et thèses électroniques.