À ce jour, cette thèse n’a pas été déposée auprès de l’université de soutenance. L’Université Clermont Auvergne est donc dans l’impossibilité d’en assurer le traitement, la conservation et la diffusion. / To date, this thesis has not been deposited. The Université Clermont Auvergne is therefore unable to ensure its processing, conservation and dissemination.

Tableau d’honneur de la Faculté des études supérieures et postdoctorales, 2012-2013. / Les canaux Na dépendants du voltage sont responsables de la phase ascendante des potentiels d’action. Ils sont formés d’une sous-unité principale  et d’une ou plusieurs sous-unités secondaire . La sous-unité  seule est suffisante pour former un canal fonctionnel cependant, les sous-unités  modulent la location, l’expression ainsi que les propriétés fonctionnelles de la sous-unité . Ma thèse ce concentre sur 3 canaux Na neuronaux (Nav1.6, Nav1.7 et Nav1.8) ainsi qu’un canal sodique du muscle squelettique (Nav1.4). Les canaux Na neuronaux sont importants pour la propagation de l’influx électrique tout au long de l’axone. Nav1.7 et Nav1.8 sont les principales sous-unités exprimées dans les ganglions dorsaux. L’altération de l’expression et de la modulation de ces canaux suite à une lésion ou à l’inflammation, joue un rôle important dans la nociception et dans les douleurs chroniques. Nav1.6 est fortement concentré aux nœuds da Ranvier, il y tient un rôle important dans la conduction saltatoire et dans la répétition des potentiels d’action à hautes fréquences. Des mutations sur le canal Nav1.4 provoquent des canalopathies du muscle squelettique. Voici les questions qui ont guidé notre étude : 1) De quel façon les sous-unités  régulent les canaux Na neuronaux Nav1.7 et Nav1.8? 2) Quel anomalie biophysique est provoquée par la mutation M1476I, une mutation liée à l’effet fondateur sur le gène SCN4A qui provoque une myotonie douloureuse induite par le froid chez des Canadiens français? 3) Quels sont les propriétés biophysiques du courant persistant de Nav1.6? 4) Quel est le patron d’expression des sous-unités  et comment celles-ci régulent Nav1.7 dans les neurones de ganglions dorsaux? Afin de répondre à ces questions, plusieurs techniques ont été utilisées, notamment la technique du patch-clamp en configuration cellule entière et l’enregistrement des canaux unitaire sur des systèmes d’expression hétérologue, de la RT-PCR sur les cellules uniques, immunohistochimie et l’immunoprécipitations dans les neurones de ganglions dorsaux. Premièrement, nous avons utilisé la RT-PCR sur les cellules uniques sur des neurones dissociés de ganglions dorsaux pour identifier l’expression des sous unités 1-4 dans les neurones sensitifs de petits diamètres. Nos résultats indiques que les neurones expriment largement Nav1.6 et Nav1.8 et les sous unités 1-3. Pour étudier la régulation par les sous-unités , nous avons co-exprimés les canaux Na avec les sous-unités . La sous-unités 1 provoque une augmentation de la densité de courant de Nav1.8 lorsque co-exprimée dans des cellules HEK293 mais elle n’affecte pas la densité de courant de Nav1.6. Le domaine C-terminale de la sous-unité 1 est fortement impliqué dans la modulation de Nav1.8. Ces résultats proviennent de l’étude de l’effet de chimère 1/2 conservant différentes régions de la sous-unité 1 et de la sous-unité 2. Deuxièmement, nous avons étudié les anomalies biophysiques provoquées par la mutation M1471I de Nav1.4 en utilisant la technique du patch-clamp en mode configuration cellule entière sur des cellules tsA-201. La mutation provoque des effets similaires à d’autres mutations qui provoquent une myotonie aggravé par le potassium, incluant une augmentation du courant persistant, un ralentissement de la décroissance du courant, une dépolarisation de l’inactivation et une accélération de la récupération de l’état inactivé. Un abaissement de la température ralentit les cinétiques pour les canaux mutants et les canaux sauvages, mais il empire le défaut de l’inactivation de la mutation M1476I en augmentant l’amplitude du courant persistant. La mexiletine aide à soulager la myotonie causée par cette mutation en supprimant l’augmentation du courant persistant. Cependant, la mexiletine à une efficacité réduite sur le bloque utilisation-dpendant des canaux mutés M1476I et elle est associée à une récupération plus rapide du bloque provoqué par la mexiletine sur les canaux mutants. Troisièmement, nous avons caractérisé les propriétés du courant persistant de Nav1.6 en mode cellule entière et en courant unitaire dans des cellules HEK293 exprimant ce canal. Nous avons noté que le courant persistant de Nav1.6 est sensible à la composition du milieu intracellulaire et que l’utilisation de CsF au lieu de CsCl rendait ce courant rarement détectable. En substituant le CsF par du CsCl, nous avons montré que l’amplitude du courant persistant de Nav1.6 en mode cellule entière est de 3 à 5% du courant transitoire. Cette amplitude est similaire au ratio observé entre le maximum de probabilité d’ouverture et la probabilité d’ouverture du courant persistant observé en enregistrement de courant unitaire. L’occurrence de la réouverture des canaux explique le courant sodique persistant typique de Nav1.6. Finalement, nous avons utilisé une combinaison des techniques de RT-PCR sur les cellules uniques, immunohistochimie et d’immunoprécipitation pour étudier l’expression des sous-unités  dans différentes sous-population de neurones sensitifs. Les sous-unités  sont différentiellement exprimés dans la population de neurones de petits diamètres des ganglions dorsaux (2, 3) et dans la population de neurones de grands diamètres des ganglions dorsaux (1, 2). L’ARNm de Nav1.7 était significativement co-exprimé avec les sous-unités 2 et 3 dans la même population de neurones de petits diamètres des ganglions dorsaux. Ils forment un complexe protéine-protéine stable et sont colocalisés dans la membrane plasmatique des neurones. Lorsque les sous-unités 3 et 1 sont coexprimés avec Nav1.7, on observe un déplacement de la courbe d’activation et de la courbe d’inactivation ainsi qu’une augmentation marqués du courant de fenêtre. Nos données indiques une expression préférentielle des sous-unités  dans les neurones de petit et de grands diamètres ainsi qu’une régulation spécifique de Nav1.7 dans ces sous populations de neurones sensitifs. / Voltage-gated Na channels are responsible for the rising phase of action potentials, and consist of a pore-forming α subunit and one or more auxiliary β subunits. The α subunit alone is sufficient for the functional expression of Na channels, however, β subunits modulate the location, expression and functional properties of α subunits. My thesis will focus on three neuronal Na channels (Nav1.6, Nav1.7 and Nav1.8) and one skeletal muscle Na channel (Nav1.4). Neuronal Na channel are key players in the impulse propagation along axon. Nav1.7 and Nav1.8 are the main Na channels expressed in DRG neurons, and their altered expression and modulation following injury and inflammation play a major role in nociception and chronic pain. Nav1.6 is highly concentrated at nodes of Ranvier, and has a critical role not only in saltatory conduction but also in high-frequency repetitive firing. Skeletal muscle Na channel Nav1.4 is the initiator of muscle contraction. Mutations in Nav1.4 cause skeletal muscle channelopathies. Guiding questions for our investigations were: 1) How do auxiliary β subunits regulate peripheral nerve Na channel Nav1.6 and Nav1.8? 2) What is the underlying biophysical defect of M1476I, a novel founder SCN4A mutation associated with painful cold-induced myotonia in French Canadians? 3) What is the biophysical characterization of the Nav1.6 persistent current? 4) What is the expression pattern of auxiliary  subunits, and how do β subunits regulate Nav1.7 in DRG neurons? We addressed these questions by multiple approaches including patch clamp techniques for whole-cell and single-channel recordings in heterologous expression systems; immunohistochemistry, single-cell RT-PCR and immunoprecipitation in DRG neurons. Firstly, we employed single-cell RT-PCR of acutely dissociated DRG neurons to identify the expression of β1-4 subunits in small-diameter sensory neurons. Our results indicated that small-diameter DRG neurons widely expressed Nav1.6 and Nav1.8 channels and β1-β3 subunits. Co-expression studies were used to assess the regulation of Nav1.6 and Nav1.8 by β subunits. The β1 subunit induced a significant increase in the current density of Nav1.8 when co-expressed in HEK293 cells, but had no effect on that of Nav1.6. In addition, the C-terminal domain of β1 was involved in the modulation of Nav1.8 channel based on the results of experiments with β1/β2 chimeras harboring various regions of the strongly regulating β1 together with the weakly regulating β2 subunit. Secondly, we investigated the biophysical defects of M1476I mutation in Nav1.4 channels using whole-cell patch-clamp technique in tsA201 cells. M1476I mutant channel exhibited similar biophysical defects compared with other PAM-causing mutations, including an increased persistent current of Nav1.4, a slower current decay, a positive shift of fast inactivation, and an accelerated recovery from fast inactivation. Lowering the temperature slowed the kinetics for both wide-type and mutant channels, and worsened the defective fast inactivation of M1476I channels by further increasing the amplitude of the persistent current. Mexiletine helps relieve myotonia in M1476I carriers by effectively suppressing the increased persistent current, except for the use-dependent block. However, mexiletine had a reduced effectiveness on the use-dependent block of M1476I channels, and that was associated with a faster recovery from mexiletine block of mutant channels. Thirdly, we characterized the whole-cell and single-channel properties of Nav1.6 persistent currents expressed in HEK293 cells. We noted that Nav1.6 persistent current was highly sensitive to the composition of the internal solution, and persistent current was rarely detectable when CsF instead of CsCl was used. By substituting CsF for CsCl in the intracellular solution, we showed that Nav1.6 persistent current in the whole-cell configuration was 3–5% of the peak transient current. This amplitude of persistent current was similar to the ratio between peak and persistent open probability observed in the single-channel recording, indicating that the occurrence of late channel reopenings accounts for the persistent macroscopic Na current typical of Nav1.6. Finally, we employed a combination of single-cell RT-PCR, immunocytochemistry and immunoprecipitation to investigate  subunit expression in subpopulations of sensory neurons.  subunits were differentially expressed in small (2, 3) and large (1, 2) DRG neurons. Nav1.7 mRNA was significantly co-expressed with the 2 and 3 subunits in the same population of small-diameter DRG neurons. They formed stable protein-protein interactions and co-localized within the plasma membranes of neurons.When co-expressed in HEK293 cells, 3 and 1 subunits shifted activation and inactivation curves respectively and induced a marked increase in Nav1.7 window current. Our data indicated a preferential expression of  subunits in small and large DRG neurons and a subunit-specific Nav1.7 regulation in these subpopulations of sensory neurons.

Négligées pendant des siècles, les cellules gliales révolutionnent notre conception du système nerveux. En effet, ces cellules pourraient être des éléments clés dans le développement de plusieurs maladies et depuis quelques années elles apparaissent comme des modulateurs importants dans la transmission des signaux nociceptifs. Ces cellules une fois « activées » pourraient contribuer à l'initiation et au maintien de la douleur neuropathique. Dans la présente étude, nous avons caractérisé le patron temporel et spatial de la prolifération gliale, l'une des plus marquantes caractéristiques de l'activation gliale, dans le cadre d'un modèle neuropathique induit par la lésion d'un nerf périphérique. En se servant du bromodeoxyuridine (BrdU) comme marqueur mitotique, nous avons analysé la prolifération des cellules dans la moelle épinière, identifié le phénotype des cellules en division, et retracé leur destinée cellulaire, en faisant une corrélation avec les phénomènes comportementaux typiques chez les animaux présentant une douleur neuropathique. Nos résultats ont démontré qu'une lésion de nerf périphérique induit une prolifération cellulaire précoce et transitoire dans la moelle épinière du côté ipsilatéral à la lésion. La majorité des cellules en prolifération sont des microglies Iba-1+ , de concert avec quelques progéniteurs d'oligodendrocytes NG2+ , et quelques astrocytes GFAP+ . On a observé une étroite corrélation temporelle et spatiale entre cette prolifération microgliale dans la corne dorsale de la moelle épinière et les réponses de douleur anormalement exagérées, ce qui suggère une importante contribution de la nouvelle microglie à la genèse des symptômes présents dans les cas de douleur neuropathique. / Neglected for centuries, glial cells are revolutionizing our understanding of the nervous system. Indeed, these cells could be key players in the development of many diseases and in recent years they have appeared as important modulators in the transmission of nociceptive signals. These cells once "activated" could contribute to the initiation and maintenance of neuropathic pain. In this study, we characterized the temporal and spatial pattern of glial proliferation, one of the most striking features of glial activation, in the context of a neuropathic pain model induced by peripheral nerve injury. Using bromodeoxyuridine (BrdU) as a mitotic marker, we analyzed cell proliferation in the spinal cord, identified the phenotype of dividing cells, and traced their fate, and correlated these phenomena with behavioral assays of the neuropathic pain syndrome. Our results demonstrated that peripheral nerve injury induced an early and transient cell proliferation, on the spinal cord ipsilateral to the nerve lesion. The majority of proliferating cells are microglia Iba-1+ , together with a few progenitors of oligodendrocytes NG2+ , and a few GFAP+ astrocytes. There was a close temporal correlation between microglial proliferation in the spinal cord dorsal horn and the abnormal pain responses, suggesting a contribution of the new microglia to the genesis of neuropathic pain symptoms.

Tableau d’honneur de la Faculté des études supérieures et postdoctorales, 2007-2008. / Les nerfs et les vaisseaux sanguins sont souvent associés. De plus, il a été démontré que les nerfs périphériques peuvent induire les vaisseaux sanguins cutanés à se différencier dans un phénotype artériel. Nous avons développé par génie tissulaire le premier modèle d'étude tridimensionnel permettant l'analyse in vitro de la formation de pseudocapillaires (capillary-like tubule; CLT) sur un réseau nerveux préétabli. Les cellules neurales ont induit une augmentation de 27 % du nombre de pseudocapillaires formé dans les tissus reconstruits. Cet effet était aboli par l'utilisation de K252a, un inhibiteur de TrkA, B, et C, les récepteurs respectifs du NGF, du BDNF et du NT-3. De plus, nous avons démontré qu'en ajoutant 10 ng/ml de NGF, 0.1 ng/ml de BDNF, 15 ng/ml de NT-3 et 50 ng/ml of GDNF en absence de cellules neurales, une augmentation majeure de 40 à 80% du nombre de CLT était induite. Collectivement, nos résultats suggèrent que les cellules neurales peuvent induire l'angiogenèse en sécrétant des facteurs neurotrophiques. De plus, nous démontrons pour la première fois que le NT-3 et le GDNF peuvent induire l'angiogenèse in vitro.

Le génie tissulaire permet de reconstruire des tissus hautement physiologiques qui constituent des modèles tridimensionnels utiles à de nombreuses applications, notamment pour étudier des interactions cellules-cellules ou cellules-matrice. Notre objectif était de modéliser par génie tissulaire le système nerveux périphérique (SNP) sensoriel et moteur, afin de permettre l'étude in vivo et in vitro de la régénération nerveuse et des différents facteurs qui la favorisent, aussi bien que l'étude de la myélinisation et des diverses maladies du SNP, dans le but d'approfondir les connaissances sur ces phénomènes. Nous voulions aussi développer des méthodes permettant d'obtenir des cellules de la moelle épinière murine ainsi que des neurones humains pouvant éventuellement être utilisés dans la reconstruction tissulaire et pour l'étude du SNP. En se basant sur l'expertise déjà acquise au laboratoire, nous avons fabriqué une peau humaine reconstruite en prenant comme base une éponge de collagène et avons étudié son innervation dans un contexte in vivo chez la souris. Nos résultats ont révélé que cette peau pouvait être innervée en 2 à 4 mois par des axones en régénération et que l'invasion de cellules de Schwann précédait cette innervation. Cette peau reconstruite a été par la suite utilisée et adaptée pour développer un modèle unique de régénération nerveuse périphérique sensorielle in vitro. Des neurones sensoriels murins ont été ensemencés sur des éponges de collagène colonisées par des cellules endothéliales et/ou des fibroblastes et, dans certains cas, des kératinocytes. Une forte croissance des prolongements nerveux a été observée et l'addition de cellules endothéliales a provoqué l'association des prolongements nerveux avec les pseudocapillaires reconstruits dans le modèle. Ce modèle constitue un outil puissant pour étudier l'effet de diverses cellules et/ou molécules sur la croissance des prolongements nerveux sensoriels in vitro. Dans le but d'adapter ce modèle à l'étude des neurones moteurs, nous avons d'abord optimisé différentes techniques afin d'obtenir des neurones moteurs de la moelle épinière embryonnaire de souris. Notre méthode a permis l'obtention de populations de neurones moteurs pures à 97%. Par la suite, ces neurones ont été ensemencés sur des éponges de collagène colonisées par des cellules de Schwann et/ou des fibroblastes. Notre modèle a permis la survie, l'élongation et la maturation des prolongements des neurones moteurs. Lorsque des cellules de Schwann étaient présentes, la formation de gaines de myéline autour des prolongements nerveux a été détectée. En plus de son utilité pour des études fondamentales sur la myélinisation et la régénération nerveuse motrice, ce modèle peut être complété par l'addition d'astrocytes, de microglies et de cellules musculaires afin de mieux comprendre les maladies des neurones moteurs. Finalement, nous avons cultivé des précurseurs provenant de la peau humaine adulte et les avons différenciés en neurones matures. Les cellules en différenciation exprimaient de façon séquentielle différents marqueurs du développement normal des neurones pour finalement révéler des marqueurs neuronaux tardifs. Ceci ouvre la voie à de nombreuses applications thérapeutiques potentielles et procure de nouvelles possibilités d'études sur des neurones d'origine humaine. En conclusion, le génie tissulaire nous a permis d'effectuer des études uniques sur le comportement en coculture tridimensionnelle de plusieurs types cellulaires avec des neurones du SNP par l'utilisation des nouveaux modèles que nous avons développés. Ces derniers sont hautement flexibles et s'avéreront très utiles pour plusieurs études fondamentales en neuroscience et pour l'acquisition de nouvelles connaissances sur les diverses maladies du SNP. / Tissue engineering allows the in vitro reconstruction of highly physiological tissues which constitute three-dimensional models useful for numerous applications, particularly to study cell-cell or cell-matrix interactions. Our objective was to modelize the sensory and motor peripheral nervous System (PNS) by tissue engineering, allowing the in vivo and in vitro study of nerve regeneration and the various factors that influence it, as well as myelination and PNS diseases in the aim of looking further into our knowledge on these phenomena. Since the reconstruction of tissues begins with cell isolation, we wanted also to develop methods allowing us to obtain spinal cord cells, including motor neurons, and human neurons to eventually use them in our models. Based on the expertise acquired by our laboratory, we reconstructed a human skin using a collagen sponge and studied its in vivo innervation after graft on mice. Our results revealed that this skin can be innervated in 2 to 4 months by regenerating axons and that this innervation was preceded by Schwann cell invasion. This permissive reconstructed skin was then adapted for the development of a unique in vitro model of sensory nerve regeneration. Murine sensory neurons were seeded onto collagen sponges populated by endothelial cells and/or fibroblasts and, in certain cases, keratinocytes. A robust neurite outgrowth was observed and the addition of endothelial cells allowed the association of neurite with capillary-like tubes formed in the model. This model constitutes a powerful tool for the in vitro study of various cells and/or molecules on sensory neurite outgrowth. In the aim of adapting this system to the study of motor neurons, we optimized different techniques to obtain motor neurons from mouse embryonic spinal cord. Our method allowed the harvesting of a population of 97% pure motor neurons. Afterward, these motor neurons were seeded onto collagen sponges populated with Schwann cells and/or fibroblasts. Our model allowed the survival, neurite outgrowth and maturation of motor neurons. When Schwann cells were added, myelin formation and axon ensheathment was observed. In addition to its utility for fundamental studies on myelination and motor nerve regeneration, this model may be completed by the coculture of astrocytes, microglia and muscle cells to better understand motor neuron diseases. Finally, we cultured precursor cells from adult human skin and differentiated them into mature neurons. Differentiating cells sequentially expressed markers of normal neural development to finally reveal markers of terminally differentiated neurons. This opens the way for numerous potential therapeutic applications and provides new possibilities for the study of human neurons. In conclusion, the tissue-engineered models we developed allowed us to perform unique studies on the three-dimensional coculture comportment of many cells types with PNS neurons with the use of new models that we have developed. Those models are highly flexible and will be very useful for many fundamental neuroscience studies and for acquiring new knowledge on various PNS diseases.

Thèse (M.Sc.)--Université Laval, 2007. / Bibliogr.: f. [76]-90. Publié aussi en version électronique dans la Collection Mémoires et thèses électroniques.

Thèse (Ph. D.)--Université Laval, 2004. / Sur la p. de t., les "v" de Nav1.7 et Nav1.8 apparaissent en indice. Le "B" de B-subunits est le bêta de l'alphabet grec. Bibliogr. Publié aussi en version électronique.

Ces dernières années, il est apparu que les espèces réactives de l'oxygène (ROS) ne sont pas seulement des substances délétères qui induisent des dommages de molécules biologiques, mais qu’elles sont également impliquées dans la signalisation cellulaire. Des niveaux contrôlés de H2O2 sont en particulier impliqués dans le processus de régénération chez différentes espèces. Nous avons donc étudié la régulation de la signalisation de H2O2 au cours de régénération de la nageoire caudale chez le poisson zèbre adulte. Nous avons montré que les nerfs contrôlent les niveaux de H2O2 à la fois dans les tissus normaux et après blessure; ce processus est médié par les cellules de Schwann qui expriment Shh. En plus, H2O2 stimule la croissance des nerfs, ce qui suggère la présence d'une boucle de rétrocontrôle positif.Les niveaux redox sont très dynamiques non seulement lors de la régénération, mais aussi au coursdu développement. Nous avons ensuite examiné le rôle de H2O2 pendant la morphogenèse et plusprécisément, son impact sur la croissance axonale et sa relation avec la signalisation Shh. Nous avons constaté que la réduction des niveaux de H2O2, normalement très élevé au cours de la morphogenèse, altère les projections axonales et que cet effet peut être sauvé par l'activation de la voie de signalisation de Shh.Les cibles de la signalisation redox comprennent des protéines dont l'activité est dépendante d'une cystéine, car l'état d'oxydation de cet acide aminé peut être modifié par les niveaux de H2O2. Le processus de S-acylation, qui est très important pour le processus de croissance des projections axonales et pour la voie de signalisation de Shh, consiste en la fixation covalente d'un acide gras, souvent le palmitate, au group sulfurique d’une cysteine et il est donc une cible potentielle de signalisation de ROS. Nous avons mis en évidence une corrélation entre le niveau de palmitoylationd’une protéine et les niveaux de H2O2 dans la cellule. La pertinence de cette observation estactuellement testée in vivo. / In the recent years it is becoming evident that reactive oxygen species (ROS) are not only deleterious compounds that induce damage of biological molecules, but are also important molecules that can mediate different signaling pathways. Controlled ROS, and in particular H2O2, levels have been found to be involved in the regenerative process of different species. We then focused on the regulation of H2O2 signaling during regeneration of the adult zebrafish caudal finand we showed that nerves control H2O2 levels both in normal tissue and after lesioning; this process is mediated by Schwann cells, through Shh signaling. In addition, there is also a reciprocal action of H2O2 on nerve growth, suggesting the presence of a positive feedback loop.Redox levels are highly dynamic not only during regeneration, but also during development. We then looked at the role of H2O2 during morphogenesis and more specifically, its impact on axonal growth and its relationship with Shh signaling. We found that reduction of H2O2 levels, normally very high during morphogenesis, impairs axon projections and that this effect can be rescued by the activation of Shh signaling. Moreover, we found that different redox levels modify the intracellulardistribution of Shh protein and also its extracellular availability. These results further strengthen the relationship between H2O2 and Shh signaling pathways.It is widely accepted that targets of redox signaling include proteins whose activity is dependent on an active cysteine because the oxidative status of this amino acid can be modified by H2O2 levels.The process of S-acylation, which is very important for both the processes of axonal projections growth and Shh signaling, consists in the covalent attachment of a fatty acid, often palmitate, to a cysteine sulphur and it is then a possible target of ROS signaling. We asked whether a relationship between H2O2 levels and protein S-palmitoylation could exist and we found that augmentation of H2O2 levels downregulates the S-palmitoylation process. The relevance of this observation iscurrently being tested in vivo.

Tableau d’honneur de la Faculté des études supérieures et postdoctorales, 2007-2008. / Chaque année, 130 000 personnes subissent une lésion de la moelle épinière, entraînant une paralysie totale ou partielle de leurs membres. Le seul traitement approuvé, un glucocorticoïde, demeure controversé puisque le rôle de la réponse inflammatoire qui se développe à la suite d'une lésion est encore mal compris. Par l'étude d'un nerf périphérique pouvant régénérer de façon autonome, il est possible d'évaluer l'importance de l'inflammation dans le processus de régénérescence axonale. Notre étude porte sur le rôle des récepteurs Toll-like (TLRs) dans l'initiation de la réponse immunitaire, la dégénérescence Wallérienne et le recouvrement locomoteur suite à une lésion nerveuse périphérique. Les expériences furent effectuées en utilisant des animaux déficients en TLR2, TLR4 et MyD88, ou en employant des agonistes ou inhibiteurs des TLRs. Nos résultats suggèrent que les TLRs seraient activés par des molécules endogènes présentes ou relâchées lors d'une blessure physique et, par l'initiation d'une réponse immune, favoriseraient l'élimination des débris de myéline et la régénérescence nerveuse. / Each year, 130 000 people suffer a spinal cord injury, inducing a total or partial paralysis of their members. The only approved treatment, a glucocorticoid, is still controversial since the role of the inflammatory response that develops after injury is still poorly understood. With the study of a peripheral nerve that can regenerate in an autonomous manner, it is possible to evaluate the importance of inflammation in the process of axonal regeneration. Our study involves the role of the toll-like receptors (TLRs) in the initiation of the immune response, Wallerian degeneration and behavioural recovery after a peripheral nerve lesions. The experiments were performed using mice deficient for TLR2, TLR4 and MyD88, or by employing agonists or inhibitors of TLR signaling. Our results indicate that TLRs could be activated by endogenous molecules present or expressed following traumatic injury and, through initiation of immune responses, could permit the elimination of myelin debris and nerve regeneration.

Thèse numérisée par la Division de la gestion de documents et des archives de l'Université de Montréal