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Identificação e correlação dos agentes microbianos isolados a partir da secreção do umbigo e de amostras de sangue de bezerros com onfalite / Identification and correlation of microbial agents isolated from secretion of the navel and blood samples from calves with omphalitis

Reis, Gabriela Alves 13 January 2017 (has links)
Dentre as diversas doenças que podem acometer os neonatos bovinos, as onfalopatias destacam-se como sendo uma das mais importantes devido a sua alta incidência e consequentes perdas econômicas. A porção do umbigo que permanece em contato com o meio ambiente contaminado aumenta a exposição do neonato aos microrganismos e as chances de ocorrer uma onfalopatia infecciosa, principalmente quando há falhas no manejo dos bezerros (fornecimento de colostro e cura do umbigo) e de higiene do ambiente em que eles vivem. Os componentes do umbigo representam uma importante porta de entrada para os microrganismos, podendo levar à infecção ascendente, com complicações secundárias, o que aumenta a geração de prejuízos econômicos. Com a finalidade de se evitar tais consequências, a realização da identificação dos microrganismos mais frequentemente encontrados nessa circunstância, assim como o conhecimento do perfil de sensibilidade dos mesmos, faz-se necessária, pois, com eles, é possível se direcionar a antibioticoterapia, minimizando o desenvolvimento de resistência bacteriana, além do tempo e custos do tratamento. Diante da importância dessa enfermidade, da escassez de informações sobre o assunto e da premissa de que o umbigo é uma importante porta de entrada a agentes infecciosos, podendo ocorrer bacteremia e outras complicações, o presente estudo realizou a identificação dos agentes bacterianos isolados a partir da secreção do umbigo e de amostras de sangue de bezerros de até 30 dias de vida com onfalopatia infecciosa. Além disso, verificou a sensibilidade dos microrganismos isolados frente a alguns antimicrobianos e a influência de alguns fatores sobre a presença da enfermidade e características dos isolamentos bacterianos. Foram avaliados 417 bezerros da raça Holandesa, machos ou fêmeas, oriundos de propriedades leiteiras localizadas no interior do Estado de São Paulo, desde a primeira semana até os 30 dias de vida, dos quais, 32 apresentaram onfalopatia infecciosa. Os resultados obtidos evidenciaram influência de alguns fatores do ambiente com a ocorrência de onfalopatias infecciosas e com o tipo de isolamento (único ou misto) encontrado nas amostras de secreção do umbigo; alterações do exame físico em função da coloração de Gram das bactérias encontradas nas amostras de sangue; e características das culturas obtidas em função do local de isolamento das bactérias (umbigo ou sangue) e em função do tipo de isolamento em amostras de secreção do umbigo. Durante o exame físico específico dos componentes umbilicais, foi observado que o exame ultrassonográfico é um recurso semiológico mais acurado na identificação das afecções umbilicais, principalmente as intra-abdominais, do que a palpação abdominal bimanual. Ainda, neste estudo, foi possível verificar que os microrganismos isolados a partir da secreção das estruturas umbilicais de bezerros com onfalopatia infecciosa foram, em sua maioria, Gram negativos, sendo mais frequentemente isolada Escherichia spp. (31,03%). Outras bactérias também foram isoladas, como Streptococcus spp. (13,8%), Klebsiella spp. (10,34%) e Proteus spp. (10,34%). No geral, as bactérias isoladas nas estruturas umbilicais foram resistentes a cefalexina, clindamicina, enrofloxacina, tetraciclina, benzilpenicilina, trimetoprim/sulfametoxazol, ampicilina e oxacilina. Observou-se, ainda, que a maioria dos microrganismos isolados a partir do sangue de bezerros com onfalopatia infecciosa foram Gram positivos, sendo Staphylococcus spp. (62,5%) o gênero mais frequentemente isolado. As bactérias isoladas no sangue foram, em geral, resistentes a ácido fusídico, benzilpenicilina, eritromicina, amoxicilina/ácido clavulânico, cefpodoxima, ceftiofur, cloranfenicol, nitrofurantoína e piperacilina. / Among the several diseases that can affect newborn calves, omphalopathies stand out as the most important due to their high incidence and consequent economic losses. The portion of the navel that remains in contact with the contaminated environment intensifies the neonate\'s exposure to the microorganisms and the chances of infectious omphalopathies occur; especially when there are errors in the management of the calves (colostrum supply and navel care) and in the sanitation of the environment in which they live. The components of the umbilicus represent an important entryway for microorganisms, which can lead to ascending infection with secondary complications, which increases the production of economic losses. In order to avoid such consequences, the identification of the most frequently found microorganisms in these circumstances, as well as the knowledge of their sensitivity profile, are required. Consequently, it is possible to target antibiotic therapy, minimizing both the development of bacterial resistance, and time and treatment costs. Given the importance of this disease, the scarcity of information on the subject, and the premise that the navel is an important entryway to infectious agents, leading to bacteremia and other complications, the present study isolated and identified the bacterial agents from the navel secretion and from blood samples of calves up to 30 days old with infectious omphalopathy; as well as verified the sensitivity of the microorganisms isolated against some antimicrobials, the influence of some factors on the presence of the disease, and characteristics of the bacterial isolates. We evaluated 417 male and female Holstein calves, raised in dairy farms placed in the State of Sao Paulo, from the first week up to 30 days of life. Thirty-two of the evaluated calves had infectious omphalopathy. Results evidenced the influence of some environmental factors on the occurrence of infectious omphalopathies and the type of isolation (single or mixed) found in the samples of navel secretion; the alterations found on physical examination along with the Gram staining of the bacteria found in the blood samples; and the characteristics of the cultures obtained along with the site of isolation of the bacteria (navel or blood) and the type of isolation in samples of navel secretion. During the specific examination of the umbilical components, it was observed that the ultrasonographic exam is a more accurate semiological resource in the identification of umbilical affections, mainly the intra-abdominal ones, than the bimanual abdominal palpation. Also, from this study it was possible to verify that microorganisms isolated from the umbilical structures of calves with infectious omphalopathy were Gram negative, and that Escherichia spp. was the most frequently isolated genus (31.03%). Other bacterial genus also isolated were: Streptococcus spp. (13.8%), Klebsiella spp. (10.34%), and Proteus spp. (10.34%). These isolated bacteria were, in general, resistant to cephalexin, clindamycin, enrofloxacin, benzylpenicillin, tetracycline, trimethoprim / sulfamethoxazole, ampicillin, and oxacillin. Most of the microorganisms isolated from the blood of calves with infectious omphalopathy were Gram positive, and Staphylococcus spp. was the most frequently isolated genus (62.5%). Bacteria isolated from blood were, in general, resistant to fusidic acid, benzylpenicillin, erythromycin, amoxicillin / clavulanic acid, cefpodoxime, ceftiofur, chloramphenicol, nitrofurantoin, and piperacillin.
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Avaliação da transferência de citocinas para o sangue de neonatos via ingestão de colostro de fêmeas bovinas Holandesas / Evaluation of the transfer of cytokines to the blood of neonates by colostrum ingestion of Holstein females

Shecaira, Carolina de Lara 07 November 2013 (has links)
O nascimento de um bezerro é marcado pela passagem de um meio estéril, para um ambiente contaminado, aliado o fato da placentação (sindesmocorial), que não permite a passagem de anticorpos durante a gestação e sem um sistema imunológico desenvolvido funcionalmente, o neonato necessita da ingestão do colostro para lhe conferir imunidade nos primeiros dias de vida. Além das imunoglobulinas o colostro possui leucócitos, e citocinas que parecem participar do estabelecimento da imunidade neonatal. Apesar da potencial importância desses componentes do colostro, poucos são os estudos que avaliaram a transferência das citocinas do colostro bovino e seu papel na imunidade neonatal, razão pelo qual esse projeto teve como seguintes objetivos: mensurar as concentrações das citocinas IL-1&#946, IL-6, TNF-α e IFN-y presentes no soro de bezerros neonatos da raça Holandesa e avaliar a interferência do manejo do colostro bovino e do seu oferecimento, ou não, sobre as concentrações dessas citocinas no soro desses bezerros, durante os 15 primeiros dias pós-nascimento. Utilizaram-se bezerros nascidos de parto eutócico e distribuídos igualmente por três grupos experimentais (n=5): G1- receberam 4 litros de colostro fresco provenientes de suas próprias mães; G2- receberam 4 litros de colostro provenientes de pool de colostro congelado e o G3- foram alimentados apenas com leite. Para a avaliação das citocinas referidas no soro dos bezerros, foram feitas cinco coletas de sangue durante os quinze primeiros dias de vida pós-nascimento (p.n.): T0 (antes da primeira ingestão de colostro ou leite); T1 (1 a 2 dias p.n.); T2 (3 a 4 dias p.n.); T3 (5 a 6 dias p.n.) e T4 (10 a 15 dias p.n.). Também mensurou-se as citocinas TNF-α, IL-1β e IL-6 no sobrenadante do colostro fornecido aos bezerros do grupo G1, e citocinas TNF-α, IL-1β, IFN-y e IL-6 no sobrenadante do pool de colostro fornecido aos bezerros do grupo G2. Os bezerros do grupo G1 apresentaram valores detectáveis para as citocinas referidas, atingindo picos nos tempos T1(2 a 3 dias p.n.) ou T2 (3 a 4 dias p.n.) enquanto que os bezerros do grupo G2 apresentaram valores detectáveis apenas para o tempo T3(5 a 6 dias p.n.) para a citocina IL-6, enquanto que os bezerros do grupo G3, não apresentaram concentrações detectáveis para nenhuma citocina mensurada com exceção da citocina IL-1beta no tempo 4 (10 a 15 dias p.n.).Com base nos resultados encontrados nesta pesquisa foi possível: (a) verificar a transferência de citocinas IL-6, IL-1β, TNF-α e IFN-y para o soro de bezerros do grupo G1 via ingestão de colostro fresco. (b) verificar a transferência de citocina IL-6, para a circulação de bezerros do grupo G2, via ingestão de pool de colostro. (c) verificar que bezerros recém-nascidos privados de colostro (G3) não apresentaram concentrações detectáveis de citocinas IL-6, IL-1β , TNF-α e IFN-y nos primeiros quinze dias de vida, demonstrando que concentrações detectáveis das citocinas em questão provêm do colostro. (d) verificar que o grupo de bezerros que recebeu colostro de suas próprias mães (G1) obteve maior concentração de citocinas que o grupo que recebeu pool de colostro (G2), demonstrando que as células leucocitárias presentes no colostro fresco são capazes de expressar citocinas no sangue periférico de bezerros recém-nascidos até 15 dias pós-nascimento. / The birth of a calf is marked by the passage of a sterile environment to a contaminated environment, coupled with the fact of placentation (sindesmocorial), which does not allow the passage of antibodies during pregnancy and without an immune system developed functionally, the needs of the neonate ingestion of colostrum to give it immunity during the first days of life. Besides the colostrum immunoglobulin has leukocytes and cytokines that seem to participate in the establishment of neonatal immunity. Despite the potential importance of these components of colostrum , there are few studies evaluating the transfer of cytokines from colostrum and its role in neonatal immunity, reason why this project had the following objectives: to measure the concentrations of IL- 1β, IL- 6, TNF-α and IFN-y in the serum of newborn Holstein calves and evaluate the interference of bovine colostrum management and of his offering , or not , on the concentrations of these cytokines in the serum of these calves during the first 15 days after birth. We used calves born from normal delivery and equally divided into three experimental groups (n = 5): G1 - received 4 liters of fresh colostrum from their mothers; G2- received 4 liters of colostrum from a \"pool\" of frozen colostrum and G3- were fed only milk. For the evaluation of these cytokines in the serum of calves, blood collections were made during the first fifteen days of postnatal life (p.n.): T0 (before the first intake of colostrum or milk), T1 (1st 2 days p.n.), T2 (3 to 4 days p.n.), T3 (5 to 6 days p.n.) and T4 (10 to 15 days p.n.). Also measured is the cytokine TNF-α , IL-1β and IL-6 in the supernatant of colostrum fed to calves in group G1, and cytokines TNF-α , IL- 1β, IFN-y and IL -6 in supernatant \" pool\" of colostrum fed to calves in G2. Calves from G1 group had detectable values for these cytokines, reaching peaks at T1 (2 to 3 days p.n.) or T2 (3 to 4 days p.n.) while calves in G2 showed detectable values only for the period T3 ( 5 to 6 days p.n. ) for the cytokine IL-6, whereas the calves of group G3 did not show any detectable for cytokine concentrations measured with the exception of IL- 1beta 4 time ( 10 to 15 days p.n.). Based on findings of this study it was possible to: (a) verify the transfer of IL- 6, IL- 1β, TNF-&#945 and IFN-y in the serum of calves from G1 via ingestion of fresh colostrum. (b) verify the transfer of cytokine IL -6 into the circulation of calves in G2 via ingestion of \"pool\" of colostrum. (c) verify that deprived newborn calves colostrum (G3) showed no detectable concentrations of IL - 6 , IL- 1β , TNF-α and IFN-y in the first fifteen days of life , demonstrating that detectable concentrations of cytokines in question come from the colostrum. (d) verify that the group of calves that received colostrum from their mothers (G1) had higher cytokine concentrations than the group that received \"pool\" of colostrum (G2), demonstrating that leukocytes present in fresh colostrum are able to express cytokines in peripheral blood of newborns up to 15 days after birth calves.
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Avaliação da transferência de citocinas para o sangue de neonatos via ingestão de colostro de fêmeas bovinas Holandesas / Evaluation of the transfer of cytokines to the blood of neonates by colostrum ingestion of Holstein females

Carolina de Lara Shecaira 07 November 2013 (has links)
O nascimento de um bezerro é marcado pela passagem de um meio estéril, para um ambiente contaminado, aliado o fato da placentação (sindesmocorial), que não permite a passagem de anticorpos durante a gestação e sem um sistema imunológico desenvolvido funcionalmente, o neonato necessita da ingestão do colostro para lhe conferir imunidade nos primeiros dias de vida. Além das imunoglobulinas o colostro possui leucócitos, e citocinas que parecem participar do estabelecimento da imunidade neonatal. Apesar da potencial importância desses componentes do colostro, poucos são os estudos que avaliaram a transferência das citocinas do colostro bovino e seu papel na imunidade neonatal, razão pelo qual esse projeto teve como seguintes objetivos: mensurar as concentrações das citocinas IL-1&#946, IL-6, TNF-α e IFN-y presentes no soro de bezerros neonatos da raça Holandesa e avaliar a interferência do manejo do colostro bovino e do seu oferecimento, ou não, sobre as concentrações dessas citocinas no soro desses bezerros, durante os 15 primeiros dias pós-nascimento. Utilizaram-se bezerros nascidos de parto eutócico e distribuídos igualmente por três grupos experimentais (n=5): G1- receberam 4 litros de colostro fresco provenientes de suas próprias mães; G2- receberam 4 litros de colostro provenientes de pool de colostro congelado e o G3- foram alimentados apenas com leite. Para a avaliação das citocinas referidas no soro dos bezerros, foram feitas cinco coletas de sangue durante os quinze primeiros dias de vida pós-nascimento (p.n.): T0 (antes da primeira ingestão de colostro ou leite); T1 (1 a 2 dias p.n.); T2 (3 a 4 dias p.n.); T3 (5 a 6 dias p.n.) e T4 (10 a 15 dias p.n.). Também mensurou-se as citocinas TNF-α, IL-1β e IL-6 no sobrenadante do colostro fornecido aos bezerros do grupo G1, e citocinas TNF-α, IL-1β, IFN-y e IL-6 no sobrenadante do pool de colostro fornecido aos bezerros do grupo G2. Os bezerros do grupo G1 apresentaram valores detectáveis para as citocinas referidas, atingindo picos nos tempos T1(2 a 3 dias p.n.) ou T2 (3 a 4 dias p.n.) enquanto que os bezerros do grupo G2 apresentaram valores detectáveis apenas para o tempo T3(5 a 6 dias p.n.) para a citocina IL-6, enquanto que os bezerros do grupo G3, não apresentaram concentrações detectáveis para nenhuma citocina mensurada com exceção da citocina IL-1beta no tempo 4 (10 a 15 dias p.n.).Com base nos resultados encontrados nesta pesquisa foi possível: (a) verificar a transferência de citocinas IL-6, IL-1β, TNF-α e IFN-y para o soro de bezerros do grupo G1 via ingestão de colostro fresco. (b) verificar a transferência de citocina IL-6, para a circulação de bezerros do grupo G2, via ingestão de pool de colostro. (c) verificar que bezerros recém-nascidos privados de colostro (G3) não apresentaram concentrações detectáveis de citocinas IL-6, IL-1β , TNF-α e IFN-y nos primeiros quinze dias de vida, demonstrando que concentrações detectáveis das citocinas em questão provêm do colostro. (d) verificar que o grupo de bezerros que recebeu colostro de suas próprias mães (G1) obteve maior concentração de citocinas que o grupo que recebeu pool de colostro (G2), demonstrando que as células leucocitárias presentes no colostro fresco são capazes de expressar citocinas no sangue periférico de bezerros recém-nascidos até 15 dias pós-nascimento. / The birth of a calf is marked by the passage of a sterile environment to a contaminated environment, coupled with the fact of placentation (sindesmocorial), which does not allow the passage of antibodies during pregnancy and without an immune system developed functionally, the needs of the neonate ingestion of colostrum to give it immunity during the first days of life. Besides the colostrum immunoglobulin has leukocytes and cytokines that seem to participate in the establishment of neonatal immunity. Despite the potential importance of these components of colostrum , there are few studies evaluating the transfer of cytokines from colostrum and its role in neonatal immunity, reason why this project had the following objectives: to measure the concentrations of IL- 1β, IL- 6, TNF-α and IFN-y in the serum of newborn Holstein calves and evaluate the interference of bovine colostrum management and of his offering , or not , on the concentrations of these cytokines in the serum of these calves during the first 15 days after birth. We used calves born from normal delivery and equally divided into three experimental groups (n = 5): G1 - received 4 liters of fresh colostrum from their mothers; G2- received 4 liters of colostrum from a \"pool\" of frozen colostrum and G3- were fed only milk. For the evaluation of these cytokines in the serum of calves, blood collections were made during the first fifteen days of postnatal life (p.n.): T0 (before the first intake of colostrum or milk), T1 (1st 2 days p.n.), T2 (3 to 4 days p.n.), T3 (5 to 6 days p.n.) and T4 (10 to 15 days p.n.). Also measured is the cytokine TNF-α , IL-1β and IL-6 in the supernatant of colostrum fed to calves in group G1, and cytokines TNF-α , IL- 1β, IFN-y and IL -6 in supernatant \" pool\" of colostrum fed to calves in G2. Calves from G1 group had detectable values for these cytokines, reaching peaks at T1 (2 to 3 days p.n.) or T2 (3 to 4 days p.n.) while calves in G2 showed detectable values only for the period T3 ( 5 to 6 days p.n. ) for the cytokine IL-6, whereas the calves of group G3 did not show any detectable for cytokine concentrations measured with the exception of IL- 1beta 4 time ( 10 to 15 days p.n.). Based on findings of this study it was possible to: (a) verify the transfer of IL- 6, IL- 1β, TNF-&#945 and IFN-y in the serum of calves from G1 via ingestion of fresh colostrum. (b) verify the transfer of cytokine IL -6 into the circulation of calves in G2 via ingestion of \"pool\" of colostrum. (c) verify that deprived newborn calves colostrum (G3) showed no detectable concentrations of IL - 6 , IL- 1β , TNF-α and IFN-y in the first fifteen days of life , demonstrating that detectable concentrations of cytokines in question come from the colostrum. (d) verify that the group of calves that received colostrum from their mothers (G1) had higher cytokine concentrations than the group that received \"pool\" of colostrum (G2), demonstrating that leukocytes present in fresh colostrum are able to express cytokines in peripheral blood of newborns up to 15 days after birth calves.
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Identificação e correlação dos agentes microbianos isolados a partir da secreção do umbigo e de amostras de sangue de bezerros com onfalite / Identification and correlation of microbial agents isolated from secretion of the navel and blood samples from calves with omphalitis

Gabriela Alves Reis 13 January 2017 (has links)
Dentre as diversas doenças que podem acometer os neonatos bovinos, as onfalopatias destacam-se como sendo uma das mais importantes devido a sua alta incidência e consequentes perdas econômicas. A porção do umbigo que permanece em contato com o meio ambiente contaminado aumenta a exposição do neonato aos microrganismos e as chances de ocorrer uma onfalopatia infecciosa, principalmente quando há falhas no manejo dos bezerros (fornecimento de colostro e cura do umbigo) e de higiene do ambiente em que eles vivem. Os componentes do umbigo representam uma importante porta de entrada para os microrganismos, podendo levar à infecção ascendente, com complicações secundárias, o que aumenta a geração de prejuízos econômicos. Com a finalidade de se evitar tais consequências, a realização da identificação dos microrganismos mais frequentemente encontrados nessa circunstância, assim como o conhecimento do perfil de sensibilidade dos mesmos, faz-se necessária, pois, com eles, é possível se direcionar a antibioticoterapia, minimizando o desenvolvimento de resistência bacteriana, além do tempo e custos do tratamento. Diante da importância dessa enfermidade, da escassez de informações sobre o assunto e da premissa de que o umbigo é uma importante porta de entrada a agentes infecciosos, podendo ocorrer bacteremia e outras complicações, o presente estudo realizou a identificação dos agentes bacterianos isolados a partir da secreção do umbigo e de amostras de sangue de bezerros de até 30 dias de vida com onfalopatia infecciosa. Além disso, verificou a sensibilidade dos microrganismos isolados frente a alguns antimicrobianos e a influência de alguns fatores sobre a presença da enfermidade e características dos isolamentos bacterianos. Foram avaliados 417 bezerros da raça Holandesa, machos ou fêmeas, oriundos de propriedades leiteiras localizadas no interior do Estado de São Paulo, desde a primeira semana até os 30 dias de vida, dos quais, 32 apresentaram onfalopatia infecciosa. Os resultados obtidos evidenciaram influência de alguns fatores do ambiente com a ocorrência de onfalopatias infecciosas e com o tipo de isolamento (único ou misto) encontrado nas amostras de secreção do umbigo; alterações do exame físico em função da coloração de Gram das bactérias encontradas nas amostras de sangue; e características das culturas obtidas em função do local de isolamento das bactérias (umbigo ou sangue) e em função do tipo de isolamento em amostras de secreção do umbigo. Durante o exame físico específico dos componentes umbilicais, foi observado que o exame ultrassonográfico é um recurso semiológico mais acurado na identificação das afecções umbilicais, principalmente as intra-abdominais, do que a palpação abdominal bimanual. Ainda, neste estudo, foi possível verificar que os microrganismos isolados a partir da secreção das estruturas umbilicais de bezerros com onfalopatia infecciosa foram, em sua maioria, Gram negativos, sendo mais frequentemente isolada Escherichia spp. (31,03%). Outras bactérias também foram isoladas, como Streptococcus spp. (13,8%), Klebsiella spp. (10,34%) e Proteus spp. (10,34%). No geral, as bactérias isoladas nas estruturas umbilicais foram resistentes a cefalexina, clindamicina, enrofloxacina, tetraciclina, benzilpenicilina, trimetoprim/sulfametoxazol, ampicilina e oxacilina. Observou-se, ainda, que a maioria dos microrganismos isolados a partir do sangue de bezerros com onfalopatia infecciosa foram Gram positivos, sendo Staphylococcus spp. (62,5%) o gênero mais frequentemente isolado. As bactérias isoladas no sangue foram, em geral, resistentes a ácido fusídico, benzilpenicilina, eritromicina, amoxicilina/ácido clavulânico, cefpodoxima, ceftiofur, cloranfenicol, nitrofurantoína e piperacilina. / Among the several diseases that can affect newborn calves, omphalopathies stand out as the most important due to their high incidence and consequent economic losses. The portion of the navel that remains in contact with the contaminated environment intensifies the neonate\'s exposure to the microorganisms and the chances of infectious omphalopathies occur; especially when there are errors in the management of the calves (colostrum supply and navel care) and in the sanitation of the environment in which they live. The components of the umbilicus represent an important entryway for microorganisms, which can lead to ascending infection with secondary complications, which increases the production of economic losses. In order to avoid such consequences, the identification of the most frequently found microorganisms in these circumstances, as well as the knowledge of their sensitivity profile, are required. Consequently, it is possible to target antibiotic therapy, minimizing both the development of bacterial resistance, and time and treatment costs. Given the importance of this disease, the scarcity of information on the subject, and the premise that the navel is an important entryway to infectious agents, leading to bacteremia and other complications, the present study isolated and identified the bacterial agents from the navel secretion and from blood samples of calves up to 30 days old with infectious omphalopathy; as well as verified the sensitivity of the microorganisms isolated against some antimicrobials, the influence of some factors on the presence of the disease, and characteristics of the bacterial isolates. We evaluated 417 male and female Holstein calves, raised in dairy farms placed in the State of Sao Paulo, from the first week up to 30 days of life. Thirty-two of the evaluated calves had infectious omphalopathy. Results evidenced the influence of some environmental factors on the occurrence of infectious omphalopathies and the type of isolation (single or mixed) found in the samples of navel secretion; the alterations found on physical examination along with the Gram staining of the bacteria found in the blood samples; and the characteristics of the cultures obtained along with the site of isolation of the bacteria (navel or blood) and the type of isolation in samples of navel secretion. During the specific examination of the umbilical components, it was observed that the ultrasonographic exam is a more accurate semiological resource in the identification of umbilical affections, mainly the intra-abdominal ones, than the bimanual abdominal palpation. Also, from this study it was possible to verify that microorganisms isolated from the umbilical structures of calves with infectious omphalopathy were Gram negative, and that Escherichia spp. was the most frequently isolated genus (31.03%). Other bacterial genus also isolated were: Streptococcus spp. (13.8%), Klebsiella spp. (10.34%), and Proteus spp. (10.34%). These isolated bacteria were, in general, resistant to cephalexin, clindamycin, enrofloxacin, benzylpenicillin, tetracycline, trimethoprim / sulfamethoxazole, ampicillin, and oxacillin. Most of the microorganisms isolated from the blood of calves with infectious omphalopathy were Gram positive, and Staphylococcus spp. was the most frequently isolated genus (62.5%). Bacteria isolated from blood were, in general, resistant to fusidic acid, benzylpenicillin, erythromycin, amoxicillin / clavulanic acid, cefpodoxime, ceftiofur, chloramphenicol, nitrofurantoin, and piperacillin.
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Expressão de proteínas de comunicação e junções celulares no rúmen de fetos bovinos, bezerros recém-nascidos e bovinos adultos / Expression of communication proteins and cellular junctions in the rumen of bovine fetuses, newborn calves and adult bovines.

Ferrão, Juliana Shimara Pires 27 July 2018 (has links)
O estômago de ruminantes é um órgão complexo subdividido em quatro compartimentos: o rúmen, o retículo, o omaso e o abomaso, sendo os três primeiros os pré-estômagos ou pró-ventrículos. Cada um possui sua própria característica, responsável por mecanismos de ruminação essenciais. Junções gap são as únicas especializações na membrana celular que permitem a comunicação direta entre células adjacentes, enquanto que as junções de adesão são especializações que mantém a integridade tecidual. Sabe-se que elas contribuem para a homeostase tissular e são compostas por proteínas transmembrânicas chamadas conexinas (junções gap) e caderinas (junções de adesão). Além disso, essas junções estão também envolvidas no controle da proliferação celular, no controle de crescimento e diferenciação, apoptose, e a sincronização de funções eletrotônicas e metabólicas. Assim, o rúmen de bovinos pode ser um modelo para compreender a contribuição das conexinas e caderinas durante a diferenciação do epitélio ruminal a um estado funcional, que o transforma de epitélio de revestimento para um epitélio absortivo com funções de metabolização de substâncias, em especial o ácido lático e ácidos graxos. Dessa maneira, nossa hipótese é que as diferentes conexinas mudem sua dinâmica de expressão quanto ao tipo e localização, com repercussões na morfologia epitelial. Os objetivos do presente estudo foram a avaliação da expressão e localização das Conexinas 26, 32, 40 e 43 e da E-caderina no rúmen de fetos bovinos, bezerros recém-nascidos e bovinos adultos, além da avaliação morfológica do epitélio ruminal de através da microscopia óptica e eletrônica. Também possui como objetivo a avaliação da expressão gênica dessas proteínas no rúmen desses animais. Para isso, foi realizada a coleta de amostras do saco dorsal e do saco ventral do rúmen de fetos bovinos, bezerros recém-nascidos e bovinos adultos. Nos materiais coletados foram realizadas as técnicas de coloração com Hematoxilina-Eosina e morfometria, imunofluorescência, microscopia eletrônica de transmissão, extração de RNA total e sequenciamento genético. Na coleta do material as posições anatômicas observadas foram exatas às já descritas na literatura. O tecido ruminal apresentou diferenças morfométricas em relação às mensurações realizadas no tecido epitelial e na camada basal, nas idades estudadas. Além disso, foram observadas modificações teciduais ao longo do desenvolvimento ruminal na microscopia eletrônica de transmissão e na expressão das conexinas no tecido ruminal na imunofluorescência. A respeito da expressão das conexinas estudadas, ela difere em relação à idade dos animais e à localização no tecido ruminal, tornando evidente a necessidade de cada uma das conexinas em relação à idade, desenvolvimento e manutenção do tecido ruminal. A expressão tecidual da E-caderina apresentou-se semelhante nas idades estudadas. Em relação à expressão gênica e sequenciamento genético dessas proteínas, suas mudanças acompanharam as diferenças observadas na expressão tecidual através da imunofluorescência. Desse modo, pode-se concluir que ocorrem mudanças tanto na expressão tecidual quanto na expressão gênica dessas proteínas durante o desenvolvimento ruminal e sua manutenção enquanto adulto. / The stomach of ruminants is a complex organ subdivided into four compartments: the rumen, the reticulum, the omasum and the abomasum, the first three being the prestomachs or pro-ventricles. Each one has its own characteristic, responsible for essential rumination mechanisms. Gap junctions are the only cell membrane specializations that allow direct communication between adjacent cells, whereas adhesion junctions are specializations that maintain tissue integrity. It is known that they contribute to tissue homeostasis and are composed of transmembrane proteins called connexins (gap junctions) and cadherins (adhesion junctions). In addition, these junctions are also involved in the control of cell proliferation, growth and differentiation, apoptosis, and the synchronization of electrotonomic and metabolic functions. Thus, the bovine rumen may be a model for understanding the contribution of connexins and cadherins during the differentiation of the ruminal epithelium into a functional state, which transforms it from coating epithelium to an absorptive epithelium with metabolizing functions of substances, especially the lactic acid and fatty acids. Therefore, our hypothesis is that the different connexins change their expression dynamics regarding type and location, with repercussions on epithelial morphology. The objective of the present study was to evaluate the expression and location of Connexins 26, 32, 40 and 43 and E-cadherin in the rumen of bovine fetuses, newborn calves and adult bovines, as well as the morphological evaluation of ruminal epithelium through optical and electronic microscopy. It also aims to evaluate the gene expression of these proteins in the rumen of these animals. For that, samples were collected from the dorsal and the ventral sac from the rumen of bovine fetuses, newborn calves and adult bovines. Hematoxylin-Eosin staining techniques and morphometry, immunofluorescence, transmission electron microscopy, total RNA extraction and genetic sequencing were performed in the collected materials. During the collection of the material it was observed that anatomical positions were exact to those already described in the literature. The ruminal tissue presented morphometric differences in relation to the measurements made in the epithelial tissue and the basal layer, in the studied ages. In addition, tissue changes were observed along ruminal development in transmission electron microscopy and in the expression of connexins in ruminal tissue in immunofluorescence. Regarding the expression of the connexins studied, it differs in relation to the age of the animals and the location in the ruminal tissue, making evident the necessity of each of the connexins in relation to the age, development and maintenance of ruminal tissue. The tissue expression of E-cadherin was similar in the studied ages. In relation to the gene expression and genetic sequencing of these proteins, their changes accompanied the observed differences in tissue expression through immunofluorescence. Thus, it can be concluded that changes occur in both the tissue expression and the gene expression of these proteins during ruminal development and its maintenance as an adult.
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Problemas umbilicais em bezerros nos primeiros 30 dias de vida: avaliação clínica, ultrassonográfica e correlação com a transferência de imunidade passiva / Umbilical diseases in calves during the first 30 days of life: clinical, ultrasonographic and correlation with transfer of passive immunity

Seino, Caroline Harumi 07 August 2014 (has links)
As afecções umbilicais merecem destaque entre as enfermidades que acometem bezerros no primeiro mês de vida, pela alta incidência durante essa fase da vida dos neonatos e pelas relevantes perdas econômicas, decorrentes da mortalidade, custos de tratamento e atendimento veterinário, além de sequelas que poderão determinar menores ganho de peso e produção leiteira. O diagnóstico dessas enfermidades muitas vezes é prejudicado pela dificuldade em se detectar os acometimentos das estruturas intra-abdominais do umbigo, o que afetará negativamente a escolha do tratamento mais adequado e o estabelecimento do real prognóstico para cada animal. O presente estudo determinou as limitações e as vantagens de cada recurso semiológico, e demonstrou uma maior sensibilidade da ultrassonografia na detecção das afecções umbilicais intra-abdominais quando comparada com o método semiológico de rotina (palpação bimanual), com incompatibilidade de 20% dos animais no grupo onfalopatia. A maior exatidão no diagnóstico foi observada principalmente nos acometimentos das veias umbilicais, e também em afecção do úraco que foi erroneamente identificada como sendo alteração de artéria umbilical. Durante a análise com ultrassonografia dos animais com inflamação/infecção dos componentes umbilicais, foi observada que a espessura da parede dos vasos umbilicais é a medida mais adequada para determinar as alterações nesses componentes, quando comparada com aquela do diâmetro dos vasos umbilicais. Ainda, a partir desse estudo foi possível verificar algumas particularidades da involução fisiológica dos componentes intra-abdominais do cordão umbilical em bezerros da raça Holandesa, as quais foram utilizadas no grupo controle para caracterizar o comportamento das estruturas umbilicais com o evoluir da idade dos neonatos. Destaca-se que o confronto desses resultados com aqueles da rara literatura disponível mostrou-se com notáveis diferenças. Por fim validou-se critério para definir o grau de gravidade das inflamações dos componentes umbilicais a partir dos resultados obtidos pelo uso desses recursos diagnósticos, a fim de permitir uma alternativa na classificação dessa enfermidade com vistas à adequada escolha do tratamento e possibilitar uma avaliação da comparação da transferência de imunidade passiva frente às diversas apresentações clínicas das afecções inflamatórias umbilicais. / The umbilical disorders has importance among the illness that affects calves in the first month of life, by the high incidence during the current stage of life of newborns and relevant economic losses stemming due to mortality, treatment costs and veterinary care, and sequelae that may determine lower weight gain and milk production. The diagnosis of these diseases is often hampered by the difficult in detecting the extension of affected navel structures, which negatively affect the choice of the most appropriate treatment and establish a prognosis for calves. The present study verified the limitations and advantages of each semiological resource, and demonstrated a higher sensitivity of ultrasonography in the detection of intra-abdominal umbilical disorders compared with the semiological routine method (bimanual palpation), with 20% incompatibility of animals at navel illness group. The increased accuracy in diagnosis was mainly observed in the affections of the umbilical vein, and also in disease of the urachus which was erroneously identified as alteration of umbilical artery. During the ultrassonography of animals with inflammation/infection of umbilical components was observed that the wall thickness of the umbilical vessels is more appropriate extent for determining amendments in these components, as compared to that diameter of the umbilical vessels. Although, from this study we observed some peculiarities of the physiological involution of intra-abdominal umbilical cord components in Holstein calves, which were used in the control group to characterize the regression of the umbilical structures with increasing age of newborns. It is noteworthy that the comparison of these results with those of rare literature available showed up with notable differences. Finally validated the criterion for defining the severity of inflammation of the umbilical components from the results obtained from the use of these diagnostic methods in order to allow an alternative in the classification of this disease aiming to appropriate treatment choice and enable an assessment of comparison of passive transfer of immunity in front the various clinical presentations of umbilical inflammatory disorders.
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Problemas umbilicais em bezerros nos primeiros 30 dias de vida: avaliação clínica, ultrassonográfica e correlação com a transferência de imunidade passiva / Umbilical diseases in calves during the first 30 days of life: clinical, ultrasonographic and correlation with transfer of passive immunity

Caroline Harumi Seino 07 August 2014 (has links)
As afecções umbilicais merecem destaque entre as enfermidades que acometem bezerros no primeiro mês de vida, pela alta incidência durante essa fase da vida dos neonatos e pelas relevantes perdas econômicas, decorrentes da mortalidade, custos de tratamento e atendimento veterinário, além de sequelas que poderão determinar menores ganho de peso e produção leiteira. O diagnóstico dessas enfermidades muitas vezes é prejudicado pela dificuldade em se detectar os acometimentos das estruturas intra-abdominais do umbigo, o que afetará negativamente a escolha do tratamento mais adequado e o estabelecimento do real prognóstico para cada animal. O presente estudo determinou as limitações e as vantagens de cada recurso semiológico, e demonstrou uma maior sensibilidade da ultrassonografia na detecção das afecções umbilicais intra-abdominais quando comparada com o método semiológico de rotina (palpação bimanual), com incompatibilidade de 20% dos animais no grupo onfalopatia. A maior exatidão no diagnóstico foi observada principalmente nos acometimentos das veias umbilicais, e também em afecção do úraco que foi erroneamente identificada como sendo alteração de artéria umbilical. Durante a análise com ultrassonografia dos animais com inflamação/infecção dos componentes umbilicais, foi observada que a espessura da parede dos vasos umbilicais é a medida mais adequada para determinar as alterações nesses componentes, quando comparada com aquela do diâmetro dos vasos umbilicais. Ainda, a partir desse estudo foi possível verificar algumas particularidades da involução fisiológica dos componentes intra-abdominais do cordão umbilical em bezerros da raça Holandesa, as quais foram utilizadas no grupo controle para caracterizar o comportamento das estruturas umbilicais com o evoluir da idade dos neonatos. Destaca-se que o confronto desses resultados com aqueles da rara literatura disponível mostrou-se com notáveis diferenças. Por fim validou-se critério para definir o grau de gravidade das inflamações dos componentes umbilicais a partir dos resultados obtidos pelo uso desses recursos diagnósticos, a fim de permitir uma alternativa na classificação dessa enfermidade com vistas à adequada escolha do tratamento e possibilitar uma avaliação da comparação da transferência de imunidade passiva frente às diversas apresentações clínicas das afecções inflamatórias umbilicais. / The umbilical disorders has importance among the illness that affects calves in the first month of life, by the high incidence during the current stage of life of newborns and relevant economic losses stemming due to mortality, treatment costs and veterinary care, and sequelae that may determine lower weight gain and milk production. The diagnosis of these diseases is often hampered by the difficult in detecting the extension of affected navel structures, which negatively affect the choice of the most appropriate treatment and establish a prognosis for calves. The present study verified the limitations and advantages of each semiological resource, and demonstrated a higher sensitivity of ultrasonography in the detection of intra-abdominal umbilical disorders compared with the semiological routine method (bimanual palpation), with 20% incompatibility of animals at navel illness group. The increased accuracy in diagnosis was mainly observed in the affections of the umbilical vein, and also in disease of the urachus which was erroneously identified as alteration of umbilical artery. During the ultrassonography of animals with inflammation/infection of umbilical components was observed that the wall thickness of the umbilical vessels is more appropriate extent for determining amendments in these components, as compared to that diameter of the umbilical vessels. Although, from this study we observed some peculiarities of the physiological involution of intra-abdominal umbilical cord components in Holstein calves, which were used in the control group to characterize the regression of the umbilical structures with increasing age of newborns. It is noteworthy that the comparison of these results with those of rare literature available showed up with notable differences. Finally validated the criterion for defining the severity of inflammation of the umbilical components from the results obtained from the use of these diagnostic methods in order to allow an alternative in the classification of this disease aiming to appropriate treatment choice and enable an assessment of comparison of passive transfer of immunity in front the various clinical presentations of umbilical inflammatory disorders.
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Estudo sobre métodos de avaliação da anemia ferropriva em bezerros neonatos / Study of evaluation methods of iron deficiency anemia in newborn calves

Santos, Rogerio Batista dos 17 December 2013 (has links)
A zinco protoporfirina (ZPP) eritrocitária é um metabólito formado pela adição do zinco no sítio do ferro durante a formação da molécula de hemoglobina, quando este último está total ou parcialmente indisponível. O objetivo deste trabalho foi realizar a padronização dos valores da ZPP eritrocitária em bezerros sadios com até um mês de vida, assim como a validade da ZPP como previsora da ocorrência de anemia ferropriva em bezerros neonatos, em comparação com outros métodos. Para tanto foram utilizados 134 bezerros da raça Holandesa, com idades variando do nascimento até 30 dias de vida, provenientes de fazendas produtoras de leite localizadas no Estado de São Paulo, classificados como sadios (67 animais) e anêmicos (67 animais). Os animais foram monitorados por meio de exames físico e complementares (hemograma e reticulocitometria, teores de ferro sérico (FT) e capacidade total de ligação do ferro (CTLF), teores de bilirrubinas e de uréia séricas, e concentrações da ZPP). Durante a padronização do exame, os valores médios encontrados foram: concentração de ZPP eritrocitária das amostras de hemácias não lavadas em até 3 horas após a colheita de sangue de 30 animais sadios - 80,90 &#181;mol ZPP/mol heme; concentração de ZPP eritrocitária, após a lavagem de hemácias, determinadas até 3 horas e 12 horas após colheita de sangue do mesmo grupo - 61,40 &#181;mol ZPP/mol heme e 61,03 &#181;mol ZPP/mol heme, respectivamente. Com base nos resultados obtidos, foi possível concluir que as amostras de sangue colhidas para a mensuração da ZPP podem ser armazenadas, sob refrigeração a 4°C, por até 12 horas após a colheita, sem alterações significativas dos seus valores, sendo recomendável a lavagem das hemácias antes da mensuração dos valores da ZPP eritrocitária devido à presença de substâncias interferentes no plasma do animal. Foi encontrada diferença significativa nas concentrações da ZPP e de todos os componentes do eritrograma, assim como nos teores do metabolismo de ferro entre os animais anêmicos e sadios. As concentrações de bilirrubinas e ureia séricas apresentaram-se no intervalo fisiológico de variação, não interferindo na mensuração da ZPP nos eritrócitos dos bezerros com ou sem anemia. A correlação entre os valores encontrados dos teores de ferro sérico e da capacidade total de ligação do ferro com as concentrações de ZPP foram: rs = - 0,45, p < 0,001 (ZPP x FT) e rs = 0,51, p < 0,001 (ZPP x CTLF), respectivamente, demonstrando que quanto menores os teores de ferro, maiores serão as concentrações de ZPP. Portanto, a utilização da ZPP como previsora dos quadros de anemia ferropriva em bezerros neonatos com até um mês de vida se mostrou válida e, considerando que a hematofluorometria é um método rápido e não oneroso, pode ser recomendado como exame complementar de rotina. / The zinc protoporphyrin (ZPP) is a metabolic originated by zinc addition in the iron site during the synthesis of hemoglobin molecule, when iron is total or partially unavailable. The aim of this study was to standardize the values of zinc protoporphyrin (ZPP) in erythrocyte of healthy calves until one month of life, and to evaluate this determination as a predictor of the occurrence of iron deficiency anemia in newborn calves, compared with other methods. Therefore, 134 Holstein calves were used, aged from birth to 30 days of life, from dairy farms located in the São Paulo State, splitted into two groups, classified as healthies (67 animals), and anemics (67 animals). The animals were monitored by physical examination and laboratory assessments (complete blood cell count and reticulocytes, serum iron (SI) and total iron binding capacity (TIBC), levels of serum bilirubin and urea, and ZPP levels). During the exam standardization, the mean values found were: erythrocyte ZPP of unwashed erythrocytes within 3 hours after blood sampling of 30 healthy animals - 80.9 &#181;mol ZPP/mol heme; erythrocyte ZPP after washing of red blood cells, determined by 3 hours and 12 hours after blood collection, from the same group were 61.40 &#181;mol ZPP/mol heme and 61.03 &#181;mol ZPP/mol heme, respectively. Based on these results, it was concluded that blood samples taken for measurement of ZPP may be stored under refrigeration at 4 °C for up to 12 hours, without significant changes of the values of erythrocyte ZPP, and it is also advisable to wash the red cells before erythrocyte ZPP values measuring, due to the presence of interfering substances in the animal plasma. A significant difference was found in the ZPP levels and in all erythrogram components, as well as on the levels of iron metabolism between anemic and healthy animals. The bilirubin and serum urea levels remained within physiological variation, does not interfering with the measurement of erythrocyte ZPP of calves with or without anemia. The correlation values between SI and TIBC with ZPP levels were: rs = - 0.45, p < 0.001 (ZPP x SI) and rs = 0.51, p < 0.001 (ZPP x TIBC), respectively, i.e. decreasing biochemical levels of iron metabolism will increase levels of ZPP. Therefore, the use of ZPP as an iron deficiency anemia predictor in newborn calves up to one month of life has proven its validity, and considering hematofluorometry as a quick and inexpensive method, it might be recommended as a routine exam.
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Estudo sobre métodos de avaliação da anemia ferropriva em bezerros neonatos / Study of evaluation methods of iron deficiency anemia in newborn calves

Rogerio Batista dos Santos 17 December 2013 (has links)
A zinco protoporfirina (ZPP) eritrocitária é um metabólito formado pela adição do zinco no sítio do ferro durante a formação da molécula de hemoglobina, quando este último está total ou parcialmente indisponível. O objetivo deste trabalho foi realizar a padronização dos valores da ZPP eritrocitária em bezerros sadios com até um mês de vida, assim como a validade da ZPP como previsora da ocorrência de anemia ferropriva em bezerros neonatos, em comparação com outros métodos. Para tanto foram utilizados 134 bezerros da raça Holandesa, com idades variando do nascimento até 30 dias de vida, provenientes de fazendas produtoras de leite localizadas no Estado de São Paulo, classificados como sadios (67 animais) e anêmicos (67 animais). Os animais foram monitorados por meio de exames físico e complementares (hemograma e reticulocitometria, teores de ferro sérico (FT) e capacidade total de ligação do ferro (CTLF), teores de bilirrubinas e de uréia séricas, e concentrações da ZPP). Durante a padronização do exame, os valores médios encontrados foram: concentração de ZPP eritrocitária das amostras de hemácias não lavadas em até 3 horas após a colheita de sangue de 30 animais sadios - 80,90 &#181;mol ZPP/mol heme; concentração de ZPP eritrocitária, após a lavagem de hemácias, determinadas até 3 horas e 12 horas após colheita de sangue do mesmo grupo - 61,40 &#181;mol ZPP/mol heme e 61,03 &#181;mol ZPP/mol heme, respectivamente. Com base nos resultados obtidos, foi possível concluir que as amostras de sangue colhidas para a mensuração da ZPP podem ser armazenadas, sob refrigeração a 4°C, por até 12 horas após a colheita, sem alterações significativas dos seus valores, sendo recomendável a lavagem das hemácias antes da mensuração dos valores da ZPP eritrocitária devido à presença de substâncias interferentes no plasma do animal. Foi encontrada diferença significativa nas concentrações da ZPP e de todos os componentes do eritrograma, assim como nos teores do metabolismo de ferro entre os animais anêmicos e sadios. As concentrações de bilirrubinas e ureia séricas apresentaram-se no intervalo fisiológico de variação, não interferindo na mensuração da ZPP nos eritrócitos dos bezerros com ou sem anemia. A correlação entre os valores encontrados dos teores de ferro sérico e da capacidade total de ligação do ferro com as concentrações de ZPP foram: rs = - 0,45, p < 0,001 (ZPP x FT) e rs = 0,51, p < 0,001 (ZPP x CTLF), respectivamente, demonstrando que quanto menores os teores de ferro, maiores serão as concentrações de ZPP. Portanto, a utilização da ZPP como previsora dos quadros de anemia ferropriva em bezerros neonatos com até um mês de vida se mostrou válida e, considerando que a hematofluorometria é um método rápido e não oneroso, pode ser recomendado como exame complementar de rotina. / The zinc protoporphyrin (ZPP) is a metabolic originated by zinc addition in the iron site during the synthesis of hemoglobin molecule, when iron is total or partially unavailable. The aim of this study was to standardize the values of zinc protoporphyrin (ZPP) in erythrocyte of healthy calves until one month of life, and to evaluate this determination as a predictor of the occurrence of iron deficiency anemia in newborn calves, compared with other methods. Therefore, 134 Holstein calves were used, aged from birth to 30 days of life, from dairy farms located in the São Paulo State, splitted into two groups, classified as healthies (67 animals), and anemics (67 animals). The animals were monitored by physical examination and laboratory assessments (complete blood cell count and reticulocytes, serum iron (SI) and total iron binding capacity (TIBC), levels of serum bilirubin and urea, and ZPP levels). During the exam standardization, the mean values found were: erythrocyte ZPP of unwashed erythrocytes within 3 hours after blood sampling of 30 healthy animals - 80.9 &#181;mol ZPP/mol heme; erythrocyte ZPP after washing of red blood cells, determined by 3 hours and 12 hours after blood collection, from the same group were 61.40 &#181;mol ZPP/mol heme and 61.03 &#181;mol ZPP/mol heme, respectively. Based on these results, it was concluded that blood samples taken for measurement of ZPP may be stored under refrigeration at 4 °C for up to 12 hours, without significant changes of the values of erythrocyte ZPP, and it is also advisable to wash the red cells before erythrocyte ZPP values measuring, due to the presence of interfering substances in the animal plasma. A significant difference was found in the ZPP levels and in all erythrogram components, as well as on the levels of iron metabolism between anemic and healthy animals. The bilirubin and serum urea levels remained within physiological variation, does not interfering with the measurement of erythrocyte ZPP of calves with or without anemia. The correlation values between SI and TIBC with ZPP levels were: rs = - 0.45, p < 0.001 (ZPP x SI) and rs = 0.51, p < 0.001 (ZPP x TIBC), respectively, i.e. decreasing biochemical levels of iron metabolism will increase levels of ZPP. Therefore, the use of ZPP as an iron deficiency anemia predictor in newborn calves up to one month of life has proven its validity, and considering hematofluorometry as a quick and inexpensive method, it might be recommended as a routine exam.
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Evidências de atividade da via metabólica da frutose em neonatos bovinos derivados de embriões produzidos in vitro e in vivo e seu efeito no período neonatal imediato / Evidence of the frutose metabolic pathway activity and its effects on the immediate neonatal period of in vivo and in vitro derived newborn calves

Schütz, Luís Fernando 27 March 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2016-12-08T16:24:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCA12MA106.pdf: 7444114 bytes, checksum: 2547058845886ef40cf92c5b6a4e6867 (MD5) Previous issue date: 2012-03-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Newborn calves derived from in vitro fertilization (IVF) procedures often have difficulties to adapt to life ex utero, with high birth weights usually associated with high plasma fructose levels in some in vitro-produced calves. We hypothesize that the fructose metabolic pathway is active at birth, with the fructosemia levels being either detrimental or beneficial to animal survival depending on the respiratory function in the neonate. To investigate this hypothesis, four and five newborn calves derived from in vitro- and in vivo-produced embryos were evaluated for morpho-physiological and clinical normality at birth, and for subsequent signs adaptation to life ex utero in the first 24 h of life. At birth, animals were subjected to gene expression analyses for key enzymes in the fructose metabolic pathway and to the collection of fetal fluids and urine for fructose analysis. In addition, during the period between birth and 24 h of life, animals were evaluated for clinical signs, plasma concentrations of metabolic substrates, blood chemistry, hemogasometry, and hematologic parameters. Neonatal physical, clinical, and behavioral traits were compared with physiological, biochemical, metabolic, and molecular findings observed at birth and in the first 24 h of life for the determination of physiological alterations and relationships of biological significance between the experimental groups. In vitro-derived newborn calves were heavier and larger at birth, having lower respiratory rate and thermoregulatory response than in vivo-derived controls, with no significant differences in fructose, glucose and lactate levels between groups. Nevertheless, physiological and metabolic findings at birth, in general, were widely similar and normal between groups. However, during the first 24 h of life, IVF-derived calves showed physiological, metabolic, biochemical, hemogasometric, and hematologic features indicative of a lower adaptation to life ex utero, particularly in the first 4 to 6 h of life. The main differences indicated that larger animals, mainly the IVF-derived calves, had more difficulties to maintain plasma oxygen levels, likely due to a less efficient hematosis, with evidence of a metabolic shift and elevation of metabolic substrates (mostly lactate), and a trend for acidosis followed by a compensatory normalization of the acid-base balance, predominantly in the first 6 h of life. The physiological and metabolic role of fructose was apparent, but not conclusive / Neonatos bovinos derivados de fecundação in vitro (FIV) frequentemente apresentam dificuldades de adaptação à vida ex utero, estando o excesso de peso ao nascer associado a elevadas concentrações plasmáticas de frutose em alguns bezerros de FIV. A hipótese deste trabalho é que a via metabólica da frutose é ativa ao nascimento, podendo ser benéfica ou prejudicial à sobrevivência neonatal, dependendo da função respiratória do neonato. Para investigar esta hipótese, quatro neonatos bovinos derivados de embriões produzidos in vitro e cinco de embriões in vivo foram avaliados quanto à normalidade morfo-fisiológica e clínica ao nascimento, e quanto a sinais de adaptação ao ambiente extrauterino nas primeiras 24 h de vida. Ao nascimento, os animais foram submetidos à análise de expressão gênica de enzimas da via metabólica da frutose e à coleta de fluídos fetais e de urina para mensuração da frutose. Durante o período do parto até as 24 h de vida, foram avaliados os sinais clínicos, as concentrações plasmáticas de substratos metabólicos, a bioquímica sanguínea, a hemogasometria e o hemograma. As características físicas, clínicas e comportamentais dos neonatos foram comparadas aos parâmetros fisiológicos, bioquímicos, metabólicos e moleculares avaliados ao parto e nas primeiras 24 h de vida para a determinação de alterações fisiológicas e inter-relações de significância biológica entre os grupos experimentais. Os neonatos bovinos derivados de FIV foram mais pesados e maiores ao nascimento, apresentando uma menor frequência respiratória e uma menor resposta termoregulatória que animais SOV, não havendo diferenças nos níveis de frutose, glicose e lactato entre os grupos. Não obstante, os parâmetros fisiológicos e metabólicos ao nascimento foram, em geral, amplamente similares e normais entre os grupos experimentais. Porém, ao longo das primeiras 24 h, os neonatos de FIV apresentaram características fisiológicas, metabólicas, bioquímicas, hemogasométricas, e hematológicas indicativas de uma maior dificuldade de adaptação à vida ex utero, em especial nas primeiras 4 a 6 h após de vida. As principais diferenças indicaram que animais maiores, em especial os de FIV, apresentaram maior dificuldade para a manutenção da normóxia, por uma hematose menos eficiente, mudanças metabólicas e uma elevação de substratos metabólicos (principalmente o lactato), e uma tendência à acidose com normalização compensatória do balanço ácido-base, principalmente nas primeiras 6 h de vida. O papel fisiológico e metabólico da frutose foi aparente, mas não conclusivo

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