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Efeito da fonte de nitrog?nio na libera??o de OH-/H+ na rizosfera e a intera??o com toxidez de alum?nio, estresse de salinidade e associa??o com Trichoderma sp. / Effect of nitrogen supply in release of OH-/ H+in the rhizosphere and interaction with aluminum toxicity, salinity stress and association with Trichoderma sp

Silva, Aldir Carlos 19 December 2013 (has links)
Submitted by Celso Magalhaes (celsomagalhaes@ufrrj.br) on 2017-05-12T11:45:17Z No. of bitstreams: 1 2013 - Aldir Carlos da Silva.pdf: 2147745 bytes, checksum: 9bf6569c9f3905b19282cebf10a5b003 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-12T11:45:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013 - Aldir Carlos da Silva.pdf: 2147745 bytes, checksum: 9bf6569c9f3905b19282cebf10a5b003 (MD5) Previous issue date: 2013-12-19 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq / The present study was conducted to evaluate if changes in rhizosphere pH of the growth media, controlled by the use of nitrogen sources could alleviate aluminum toxicity or effects caused by salinization. It is well documented that if a plant is absorbing and assimilating nitrate as a nitrogen source, it releases 0H - for growth substrate. If she is absorbing, assimilating, ammonia source releases H+. This occurs because the cells need to balance its electrochemical charge balance due to differential uptake of cations and anions. Despite being a general rule, scientific research directly use the nitrogen source in the growth medium, few have used other methods to add these sources, such as foliar application of nitrogen and its implications on load balancing. In this work, several alternative management of nitrogen application and its interactions with the toxicity caused by aluminum, excess salts and Trichoderma were studied. Sunflower (Helianthus annuus L.), Passionflower (Passiflora edulis f flavicarpa L.), Pineapple (Ananas comosus Merril), Coffee (Coffea arabica L), Almond (Terminalia catapa Linn) and Sombrero (Clitoria fairchildiana Howard). To conduct studies with plants Sunflower was initially performed a selection of more tolerant to acidity and salinity plants. The experiments were conducted on various substrates, soil and sand, simple and complete nutrient solution. The interaction between Trichoderma x nitrogen source for plants was conducted with Passion fruit and Sunflower. Were selected as moderately tolerant to aluminum to grow Sunflower Helium 360 , the other cultivars to toxicity occurred in contraction equal to or superior 160?M aluminum . Was selected as tolerant to salinity the H?lio 251 > 250 > 253, cultivars, with concentrations above 25 mM NaCl (1.90 dS.m?) plants were stop grown. After this step prior experiments cultivars tolerant or sensitive were used in accordance with the experimental needs. The experiments were divided into the following steps: In the first step, we evaluated the release of OH - / H + with application of nitrogen sources directly in the growth medium, and found that the nitrogen sources were unable to minimize the toxic effects of aluminum and salinity. In the second experiment, the effects of the release OH- /H+ with application of nitrogen sources in the association of the fungus Trichoderma sp. This fungus grown in petri dishes only at pH values above 5.0. The release of OH- / H+ did not influence the association of the fungus with the roots of plants of sunflower and Passion fruit. In the third step, we assessed whether foliar application of nitrogen sources could produce the same effects on efflux of loads in the rhizosphere. It was found that the nitrogen sources applied foliar increased the pH of the solution was applied when 10 % of nitrate and reduced the pH when applied 5 % and 10 % ammonium sulfate in plants of Coffee and 10 % of nitrate in Sunflower . The foliar application of nitrogen sources did not alter the toxicity of aluminum and not the salt effect on plants and Sunflower Coffee. / O presente trabalho foi realizado com o objetivo de estudar se varia??es do pH da rizosfera e do meio de crescimento, controladas pelo uso de fontes nitrogenadas, poderiam amenizar a toxidez de alum?nio ou os efeitos provocados pela saliniza??o. Na literatura cientifica ? bem documentado que se uma planta esta absorvendo e assimilando nitrato como uma fonte nitrogenada, ela libera 0H- para o substrato de crescimento. Se ela esta absorvendo e assimilando uma fonte amoniacal libera H+. Isto ocorre devido ?s c?lulas necessitarem equilibrar o seu balan?o eletroqu?mico de carga, devido ? assimila??o diferenciada de c?tions e anions. Apesar de ser uma regra geral, os trabalhos cient?ficos usam a fonte nitrogenada diretamente no meio de crescimento, poucos utilizaram outros m?todos de adicionar estas fontes, como por exemplo, a aplica??o foliar de nitrog?nio e suas implica??es no balan?o de carga. Neste trabalho foram estudadas diversas alternativas de aplica??o de nitrog?nio e as suas intera??es com a toxidez provocada por alum?nio, excesso de sais e com o fungo Trichoderma. Foram estudas diversas plantas: Girassol (Helianthus annuus L), Maracuj? (Passiflora edulis f. flavicarpa L.), Abacaxi (Ananas comosus Merril), Caf? (Coffea arabica L), Amendoeira (Terminalia catapa Linn) e Sombreiro (Clitoria fairchildiana Howard). Para realizar os estudos com plantas de Girassol foi realizada inicialmente uma sele??o de plantas mais tolerantes a acidez e a salinidade. Os experimentos foram realizados em diversos substratos, solo, areia, solu??o nutritiva simples e completa. A intera??o entre fungo Trichoderma x fonte nitrogenada foi realizado para plantas de Girassol e Maracuj?. Foram selecionadas como medianamente tolerantes ao alum?nio a cultivar de Girassol H?lio 360, as demais cultivares a toxidez ocorreu em contra??o igual ou superiora 160?M de alum?nio. Foi selecionada como tolerante a salinidade as cultivares H?lio 251>250>253, com concentra??es acima 25mM de NaCl (1,90 dS.m?) as plantas n?o cresceram.Ap?s esta etapa foram implantados experimentos com as cultivares previamente selecionas como sens?veis ou tolerantes e estas foram utilizadas de acordo com a necessidade experimental. Os experimentos foram divididos nas seguintes etapas: Na primeira etapa, avaliou-se a libera??o do OH-/H+ com aplica??o das fontes nitrogenadas diretamente no meio de crescimento, sendo verificado que as fontes nitrogenadas n?o conseguiram minimizar os efeitos t?xicos do alum?nio e da salinidade. Na segunda etapa, avaliou-se os efeitos libera??o do OH-/H+ com aplica??o das fontes nitrogenadas na associa??o do fungo Trichoderma. Este fungo cresceu em placas de petri somente em valores de pH acima de 5,0. A libera??o de OH-/H+ n?o influenciou a associa??o do fungo com as ra?zes de plantas de Girassol e Maracuj?. Na terceira etapa, foi avaliado se a aplica??o foliar das fontes nitrogenadas poderia produzir os mesmos os efeitos nos efluxos de cargas na rizosfera. Foi verificado que as fontes nitrogenadas aplicadas via foliar aumentaram o pH da solu??o quando foi aplicado 10% de nitrato e reduziram o pH quando foi aplicado 5% e 10% de sulfato de am?nia em plantas de Caf? e com 10% de nitrato em Girassol. A aplica??o foliar de fontes nitrogenadas n?o alteraram a toxidez de alum?nio e nem do efeito salino em plantas de Caf? e Girassol.
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A Global Approach To The Hydrogen Production, Carbon Assimilation And Nitrogen Metabolism Of Rhodobacter Capsulatus By Physiological And Microarray Analyses

Afsar, Nilufer 01 September 2012 (has links) (PDF)
One of the most important parameters affecting hydrogen production in photofermentation process is the type of carbon and nitrogen sources. For this reason in this research, the effect of different nitrogen sources (5mM ammonium chloride and 2mM glutamate) and acetate concentrations (40
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Fonte alternativa de nitrogênio na adubação de pastagem de capim-tobiatã

Silva, Celso Eduardo da [UNESP] 14 August 2009 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:34Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-08-14Bitstream added on 2014-06-13T20:05:40Z : No. of bitstreams: 1 silva_ce_dr_botfmvz.pdf: 254829 bytes, checksum: 7c94d454e44648c813b0838e17fe1709 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O objetivo deste trabalho foi comparar em pastagem de capim-tobiatã (Panicum maximum cv. Tobiatã) o efeito da aplicação de duas fontes de nitrogênio, convencional (uréia) e alternativa (Amiorgan®) em relação a produtividade da pastagem e eficiência de utilização. O experimento foi realizado de janeiro a dezembro de 2008. Utilizou-se delineamento inteiramente casualizado composto por 2 fontes nitrogenadas, uréia e Amiorgan®, com 8 repetições cada. A dose de N utilizada somente no período das águas foi de 50 kg de N/ha/ciclo de pastejo. Produtividade da parte aérea da pastagem e extração e recuperação de nitrogênio pela mesma foram semelhantes entre tratamentos. Como os teores foliares de N estão acima dos recomendados na literatura e a extração e recuperação de N pela planta foram relativamente baixas, sugere-se que efeitos residuais de adubações anteriores tenham influenciado a resposta da pastagem ao estímulo da adubação nitrogenada. / This paper aims the evaluation of productivity and efficiency of an alternative nitrogen fertilizer (Amiorgan®) compared with conventional fertilizer in Panicum maximum cv Tobiatã pasture. The experiment was conducted from January to December, 2008. The treatments used two different nitrogen fertilizers: urea and Amiorgan®. The statistical application used was randomized blocks with eight repetitions of each. In the rain season (summer), the nitrogen dosage used was 50 Kg of N/ha/grazing cycle. Area pasture productivity, extraction and recovery of the nitrogen were similar among treatments. As the levels of N found on the leaves is above those recommended in the literature and the extraction and recovery of N by the plant were relatively low, it is suggested that residual effects of previous fertilizations have influenced the response of pasture to the stimulus of nitrogen fertilization.
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Assessing the Effect of Nitrogen Sources, Rates and Time of applications on Yield and Quality of Stockpiled Fescue and Tall Fescue Pastures

Yarber, Elizabeth Lee 15 July 2009 (has links)
In Virginia, tall fescue [(Schedonorus phoenix (Scop.) Holub,) formally known as Festuca arundinacea L.] can be found on more than 4 million ac of hay and pastureland. Two separate experiments were conducted at three different geographical locations over two growing seasons. The objective of Experiment 1 was to evaluate the influence of N sources and rates on yield and nutritive value of stockpiled tall fescue. Experiment 2 examined the effect of split spring and fall N applications at various rates on yield and nutritive value of tall fescue pastures. The first experiment was conducted at three locations (Blacksburg, Blackstone, and Steeles Tavern, VA) while the second experiment was conducted only at the Blacksburg and Steeles Tavern locations. In Experiment 1, the N sources included ammonium nitrate, ammonium sulfate, urea, urea + Agrotain®, Environmentally Smart N® (ESN), Nutrisphere (NSN), Nitamin® (Blackstone only), pelleted biosolids (Blackstone only), and broiler litter (Steeles Tavern only) applied at 0, 28, 56, 84, and 112 kg plant available N (PAN) ha-1. Plots were harvested in mid-December (Blacksburg and Steeles Tavern) and late January (Blackstone). The yield of the stockpiled tall fescue in 2006 ranged from 1,300 to 2,900, 1,700 to 3,000, and 2,600 to 3,300 kg DM ha-1 for the Blacksburg, Steeles Tavern and Blackstone locations, respectively. In 2007, however, the yield response to N rate and sources was significantly less than that of 2006 due to low rainfall. At the Blacksburg location, ammonium sulfate and ESN resulted in higher CP concentrations, ranging from 11-14% and 12-20% for 2006 and 2007 growing seasons, respectively. Similar variation (12-20%) was observed for the Steeles Tavern location in 2006. In general, the ADF and NDF content decreased as N rate increased from 0-112 kg ha1. Although the source and rate that resulted in high yield and nutritive value varied across location and years, N rates and sources improved the quality and yield of stockpiled fescue. Experiment 2 utilized urea which was applied in the fall at the rates of 0, 45, 90 or 135 kg N ha-1. followed by spring application of 0, 45, 90 or 135 kg N ha-1. A total of 16 treatment combinations per replication were used. Yields ranged from 1,900 to 3,600 kg DM ha-1 and 700 to 2,500 kg DM ha-1 in 2007 and 2008, respectively. At the Steeles Tavern location, yields ranged from 3,100 to 5,700 kg DM ha-1 and 2,500 to 5,100 kg DM ha-1, in 2007 and 2008, respectively. In both years CP increased with increasing N fertilization. On a dry matter basis, CP values ranged from 14 to 23% for both years. Treatments did not affect on NDF and ADF values. Split fall/spring N applications did not maximize yield of cool-season grass pastures in these experiments. / Master of Science
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Influência da luz e uréia no crescimento e conteúdo de clorofila da biomassa de Spirulina platensis / Influence of light and urea on Spirulina platensis growth and chlorophyll content

Rangel, Carlota de Oliveira 21 January 2000 (has links)
A microalga Spirulina platensis, fornece uma biomassa rica em proteínas, ácidos graxos polinsaturados, vitaminas e outros componentes de alto valor como a clorofila, a qual pode ser utilizada como corante em medicamentos, cosméticos e alimentos. No presente trabalho, estudou-se a influência da iluminação, simultaneamente com a utilização de uréia como fonte de nitrogênio por meio de processo descontínuo alimentado, no crescimento de Spirulina platensis e conteúdo de clorofila da biomassa. Foram utilizados tanques abertos, com volume de cultivo de 5L. Dentre os ensaios realizados, o melhor crescimento ocorreu com a utilização de 2500mg de uréia a 5600lux de iluminância, e o pior com 2500mg de uréia a 1400lux de iluminância. O maior conteúdo de clorofila na biomassa, por sua vez, foi obtido com 2500mg de uréia a 1400lux de iluminância, e o menor com 2500mg de uréia a 5600lux de iluminância. Uma regressão estatística para a produtividade em clorofila (mg.L-1.dia-1)foi realizada, a partir de valores codificados para os parâmetros em estudo, obtendo-se a seguinte equação de regressão: PCla= 1,53 - O,16.Mutc2 - 0,28.Ec2 + 0,2.Mutc + 0,13.Ec A partir da derivada da equação, calculou-se os valores dos parâmetros estudados correspondentes ao ponto ótimo de produtividade em clorofila para as condições deste trabalho, os quais foram 2902mg de uréia e 3845lux de iluminância, o que mostra que valores intermediários de iluminância promovem um equilíbrio entre crescimento celular e biossíntese de clorofila. / The microalga Spirulina platensis gives a high protein, fatty acids and vitamins contents biomass, besides other high value components like chlorophyll, that can be produced and used like a color in medicines, cosmetics and food. In this work, the influence of iIIuminance and utilization of urea as nitrogen source by fed-batch system in the Spirulina platensis growth and chlorophyll content was studied. Cultivates were carried out in open ponds with a 5L fermentation volume. The best growth result happened with the utilization of 2500mg of urea at 5600lux of iIIuminance, and the worst with 2500mg of urea at 1400lux of iIIuminance. The highest biomass chlorophyll content, otherwise, was observed with 2500mg of urea and 1400lux of iIIuminance, and the lowest with 2500mg of urea at 5600lux of iIIuminance. Statistical regression for chlorophyll productivity (mg.L-1.dia-1),using the studied parameters codified values was done, giving the equation below: PCla= 1,53 - O,16.Mutc2 - 0,28.Ec2 + 0,2.Mutc + 0,13.Ec From the derivative of the function, the studied parameters values correspondents to the optimal chlorophyll productivity point was calculated, concerning to the conditions of this work, being obtained 2902mg of urea and 3845lux of iIIuminance. This shows that intermediate iIIuminance values provides equilibrium between cellular growth and chlorophyll biosynthesis.
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Avaliação de Estratégias de Adaptação da levedura Pichia stipitis em hidrolisado hemicelulósico de palha de arroz visando à produção de etanol / Evaluation of Pichia stipitis cultivation strategies on rice straw hemicellulosic hydrolysate aiming to ethanol production

Carneiro, Lívia Melo 21 October 2011 (has links)
O presente trabalho teve como objetivo estudar o efeito da suplementação do meio de fermentação com diferentes fontes de nitrogênio e avaliar estratégias de aclimatação da levedura Pichia stipitis ao hidrolisado hemicelulósico de palha de arroz visando melhorar a produção de etanol. Em uma primeira etapa do trabalho foram realizados estudos em meio semissintético para avaliar o efeito das fontes de nitrogênio arginina, ácido glutâmico, uréia e fosfato de amônio sobre a produção de etanol por P. stipitis. Os resultados em meio semissintético demonstraram que o meio composto por ácido glutâmico, fosfato de amônio e extrato de levedura nas concentrações de 3 g/L proporcionou os melhores resultados de conversão (YP/S = 0,36 g/g) e produtividade (QP = 0,71 g/L.h). O estudo de suplementação nutricional do hidrolisado mostrou que o crescimento de P. stipitis foi inibido pela suplementação com ácido glutâmico, e que a presença de extrato de levedura e fosfato de amônio não apresentou qualquer efeito sobre a produção de etanol, sendo o hidrolisado hemicelulósico capaz de suprir a necessidade nutricional da levedura, dispensando a sua suplementação para o uso como meio de fermentação. Na etapa de aclimatação da levedura P. stipitis ao hidrolisado, foram avaliadas cinco estratégias (A, B, C, D e E), baseadas em transferências sucessivas de células para meios com concentrações crescentes de hidrolisado, 45, 60 e 75 % (v/v). Durante a estratégia de aclimatação A foi possível isolar uma colônia (A75-2) capaz de fermentar em hidrolisado contendo 70 g/L de xilose, alcançando valores dos parâmetros YP/S (0,35 g/g) e QP (0,23 g/L.h), 10 e 28 % superiores, respectivamente, aos obtidos pela cepa original. Os resultados das estratégias B e C mostraram que mesmo empregando um maior número de transferências, assim como a utilização de elevadas concentrações celulares, não foram capazes de contribuir com o processo de aclimatação. Na avaliação das estratégias D e E, verificou-se que o emprego de condições de maiores níveis de fornecimento de oxigênio durante as etapas de transferências sucessivas propiciaram condições mais adequadas para que a levedura superasse os efeitos de inibição ocasionados pelos compostos tóxicos presentes no hidrolisado. A estratégia E, realizada sob condição de maior aeração, apresentou os melhores resultados dentre as estratégias de aclimatação avaliadas, sendo obtida uma produção de 27 g/L de etanol após 72 horas. Além disso, esta estratégia foi a única em que a levedura foi capaz de manter os valores de YP/S (0,33 g/g) e QP (0,35 g/L.h) durante todas as transferências, indicando uma maior aclimatação ao hidrolisado. Na fermentação em biorreator, o emprego de inóculo proveniente de cultivo sucessivo de células, quando comparado à fermentação realizada sem cultivo sucessivo, proporcionou um aumento de 7 e 50% sobre os valores de YP/S e QP, respectivamente. Com os resultados do presente trabalho pode-se concluir que estratégias de aclimatação da levedura P. stipitis em hidrolisado não destoxificado são métodos eficazes para a superação de inúmeros problemas relativos às condições de stress fisiológico e inibição do metabolismo microbiano. Porém, a resposta fisiológica da levedura P. stipitis é dependente do número de transferências, concentração celular e oxigenação do meio. / In this work, different acclimatization strategies employing the yeast Pichia stipitis on rice straw hemicellulosic hydrolysate with high xylose concentration were evaluated. Initially, the effects of nitrogen sources supplementation in the semisynthetic and hydrolysate medium on P.stipitis fermentation were studied. The results showed that in semisynthetic medium the addition of glutamic acid, ammonium phosphate and yeast extract at concentrations of 3 g/L provided the best conversion (YP/S = 0.36 g/g) and productivity (QP = 0.71 g/L.h). On the other hand, the hydrolysate supplementation with yeast extract and ammonium phosphate did not show effect on the fermentative parameters, whereas glutamic acid supplementation inhibited completely the cellular growth. These results show that the hemicellulosic hydrolysate can be used as a fermentation medium without any nutritional supplementation. To overcome the effects of inhibition caused by toxic compounds present on rice straw hemicellulosic hydrolysate, five acclimatization strategies (A, B, C, D and E) were performed by sequentially transferring of the cells in hydrolysate containing increasing concentrations (45, 60 and 75% (v/v). During the strategy A was possible isolate a colony (A75-2) with ability to ferment the hydrolysate containing xylose at 70 g/L (YP/S = 0.35 g/g and QP =0.23 g/L.h), which corresponded to increase of 10 and 28%, respectively, as compared to the values obtained by the original strain. Employing a greater number of transfers, as well as the use of high cell concentrations (strategies B and C) was not possible improve to the acclimatization process. Regarding the strategy E, which employed higher levels of oxygen supply during periods of successive transfers, showed the most appropriate for the yeast overcome the effects of inhibition caused by toxic compounds present in the hydrolysate. With this strategy the best results (27 g/L ethanol after 72 hours) among all assessed, were observed. Moreover, this approach was the only in which the yeast was able to keep the values of YP/S (0.33 g/g) and QP (0.35 g/L.h) for all transfers, indicating greater acclimatization to hydrolysate. By using this strategy in bioreactor fermentation, it was obtained an increase of 7 and 50% on the values of YP/S and QP, respectively, in relation the reference fermentation (without successive transfer). It is possible conclude that acclimatization strategies of the yeast P. stipitis in no detoxified hydrolysate are effective methods to overcome numerous problems concerning the physiological stress and inhibition of microbial metabolism. However, the physiological response of yeast is dependent on the transfers number, cell concentration and oxygenation level of the medium.
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Avaliação de Estratégias de Adaptação da levedura Pichia stipitis em hidrolisado hemicelulósico de palha de arroz visando à produção de etanol / Evaluation of Pichia stipitis cultivation strategies on rice straw hemicellulosic hydrolysate aiming to ethanol production

Lívia Melo Carneiro 21 October 2011 (has links)
O presente trabalho teve como objetivo estudar o efeito da suplementação do meio de fermentação com diferentes fontes de nitrogênio e avaliar estratégias de aclimatação da levedura Pichia stipitis ao hidrolisado hemicelulósico de palha de arroz visando melhorar a produção de etanol. Em uma primeira etapa do trabalho foram realizados estudos em meio semissintético para avaliar o efeito das fontes de nitrogênio arginina, ácido glutâmico, uréia e fosfato de amônio sobre a produção de etanol por P. stipitis. Os resultados em meio semissintético demonstraram que o meio composto por ácido glutâmico, fosfato de amônio e extrato de levedura nas concentrações de 3 g/L proporcionou os melhores resultados de conversão (YP/S = 0,36 g/g) e produtividade (QP = 0,71 g/L.h). O estudo de suplementação nutricional do hidrolisado mostrou que o crescimento de P. stipitis foi inibido pela suplementação com ácido glutâmico, e que a presença de extrato de levedura e fosfato de amônio não apresentou qualquer efeito sobre a produção de etanol, sendo o hidrolisado hemicelulósico capaz de suprir a necessidade nutricional da levedura, dispensando a sua suplementação para o uso como meio de fermentação. Na etapa de aclimatação da levedura P. stipitis ao hidrolisado, foram avaliadas cinco estratégias (A, B, C, D e E), baseadas em transferências sucessivas de células para meios com concentrações crescentes de hidrolisado, 45, 60 e 75 % (v/v). Durante a estratégia de aclimatação A foi possível isolar uma colônia (A75-2) capaz de fermentar em hidrolisado contendo 70 g/L de xilose, alcançando valores dos parâmetros YP/S (0,35 g/g) e QP (0,23 g/L.h), 10 e 28 % superiores, respectivamente, aos obtidos pela cepa original. Os resultados das estratégias B e C mostraram que mesmo empregando um maior número de transferências, assim como a utilização de elevadas concentrações celulares, não foram capazes de contribuir com o processo de aclimatação. Na avaliação das estratégias D e E, verificou-se que o emprego de condições de maiores níveis de fornecimento de oxigênio durante as etapas de transferências sucessivas propiciaram condições mais adequadas para que a levedura superasse os efeitos de inibição ocasionados pelos compostos tóxicos presentes no hidrolisado. A estratégia E, realizada sob condição de maior aeração, apresentou os melhores resultados dentre as estratégias de aclimatação avaliadas, sendo obtida uma produção de 27 g/L de etanol após 72 horas. Além disso, esta estratégia foi a única em que a levedura foi capaz de manter os valores de YP/S (0,33 g/g) e QP (0,35 g/L.h) durante todas as transferências, indicando uma maior aclimatação ao hidrolisado. Na fermentação em biorreator, o emprego de inóculo proveniente de cultivo sucessivo de células, quando comparado à fermentação realizada sem cultivo sucessivo, proporcionou um aumento de 7 e 50% sobre os valores de YP/S e QP, respectivamente. Com os resultados do presente trabalho pode-se concluir que estratégias de aclimatação da levedura P. stipitis em hidrolisado não destoxificado são métodos eficazes para a superação de inúmeros problemas relativos às condições de stress fisiológico e inibição do metabolismo microbiano. Porém, a resposta fisiológica da levedura P. stipitis é dependente do número de transferências, concentração celular e oxigenação do meio. / In this work, different acclimatization strategies employing the yeast Pichia stipitis on rice straw hemicellulosic hydrolysate with high xylose concentration were evaluated. Initially, the effects of nitrogen sources supplementation in the semisynthetic and hydrolysate medium on P.stipitis fermentation were studied. The results showed that in semisynthetic medium the addition of glutamic acid, ammonium phosphate and yeast extract at concentrations of 3 g/L provided the best conversion (YP/S = 0.36 g/g) and productivity (QP = 0.71 g/L.h). On the other hand, the hydrolysate supplementation with yeast extract and ammonium phosphate did not show effect on the fermentative parameters, whereas glutamic acid supplementation inhibited completely the cellular growth. These results show that the hemicellulosic hydrolysate can be used as a fermentation medium without any nutritional supplementation. To overcome the effects of inhibition caused by toxic compounds present on rice straw hemicellulosic hydrolysate, five acclimatization strategies (A, B, C, D and E) were performed by sequentially transferring of the cells in hydrolysate containing increasing concentrations (45, 60 and 75% (v/v). During the strategy A was possible isolate a colony (A75-2) with ability to ferment the hydrolysate containing xylose at 70 g/L (YP/S = 0.35 g/g and QP =0.23 g/L.h), which corresponded to increase of 10 and 28%, respectively, as compared to the values obtained by the original strain. Employing a greater number of transfers, as well as the use of high cell concentrations (strategies B and C) was not possible improve to the acclimatization process. Regarding the strategy E, which employed higher levels of oxygen supply during periods of successive transfers, showed the most appropriate for the yeast overcome the effects of inhibition caused by toxic compounds present in the hydrolysate. With this strategy the best results (27 g/L ethanol after 72 hours) among all assessed, were observed. Moreover, this approach was the only in which the yeast was able to keep the values of YP/S (0.33 g/g) and QP (0.35 g/L.h) for all transfers, indicating greater acclimatization to hydrolysate. By using this strategy in bioreactor fermentation, it was obtained an increase of 7 and 50% on the values of YP/S and QP, respectively, in relation the reference fermentation (without successive transfer). It is possible conclude that acclimatization strategies of the yeast P. stipitis in no detoxified hydrolysate are effective methods to overcome numerous problems concerning the physiological stress and inhibition of microbial metabolism. However, the physiological response of yeast is dependent on the transfers number, cell concentration and oxygenation level of the medium.
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Influência da luz e uréia no crescimento e conteúdo de clorofila da biomassa de Spirulina platensis / Influence of light and urea on Spirulina platensis growth and chlorophyll content

Carlota de Oliveira Rangel 21 January 2000 (has links)
A microalga Spirulina platensis, fornece uma biomassa rica em proteínas, ácidos graxos polinsaturados, vitaminas e outros componentes de alto valor como a clorofila, a qual pode ser utilizada como corante em medicamentos, cosméticos e alimentos. No presente trabalho, estudou-se a influência da iluminação, simultaneamente com a utilização de uréia como fonte de nitrogênio por meio de processo descontínuo alimentado, no crescimento de Spirulina platensis e conteúdo de clorofila da biomassa. Foram utilizados tanques abertos, com volume de cultivo de 5L. Dentre os ensaios realizados, o melhor crescimento ocorreu com a utilização de 2500mg de uréia a 5600lux de iluminância, e o pior com 2500mg de uréia a 1400lux de iluminância. O maior conteúdo de clorofila na biomassa, por sua vez, foi obtido com 2500mg de uréia a 1400lux de iluminância, e o menor com 2500mg de uréia a 5600lux de iluminância. Uma regressão estatística para a produtividade em clorofila (mg.L-1.dia-1)foi realizada, a partir de valores codificados para os parâmetros em estudo, obtendo-se a seguinte equação de regressão: PCla= 1,53 - O,16.Mutc2 - 0,28.Ec2 + 0,2.Mutc + 0,13.Ec A partir da derivada da equação, calculou-se os valores dos parâmetros estudados correspondentes ao ponto ótimo de produtividade em clorofila para as condições deste trabalho, os quais foram 2902mg de uréia e 3845lux de iluminância, o que mostra que valores intermediários de iluminância promovem um equilíbrio entre crescimento celular e biossíntese de clorofila. / The microalga Spirulina platensis gives a high protein, fatty acids and vitamins contents biomass, besides other high value components like chlorophyll, that can be produced and used like a color in medicines, cosmetics and food. In this work, the influence of iIIuminance and utilization of urea as nitrogen source by fed-batch system in the Spirulina platensis growth and chlorophyll content was studied. Cultivates were carried out in open ponds with a 5L fermentation volume. The best growth result happened with the utilization of 2500mg of urea at 5600lux of iIIuminance, and the worst with 2500mg of urea at 1400lux of iIIuminance. The highest biomass chlorophyll content, otherwise, was observed with 2500mg of urea and 1400lux of iIIuminance, and the lowest with 2500mg of urea at 5600lux of iIIuminance. Statistical regression for chlorophyll productivity (mg.L-1.dia-1),using the studied parameters codified values was done, giving the equation below: PCla= 1,53 - O,16.Mutc2 - 0,28.Ec2 + 0,2.Mutc + 0,13.Ec From the derivative of the function, the studied parameters values correspondents to the optimal chlorophyll productivity point was calculated, concerning to the conditions of this work, being obtained 2902mg of urea and 3845lux of iIIuminance. This shows that intermediate iIIuminance values provides equilibrium between cellular growth and chlorophyll biosynthesis.
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Kinetic Analysis Of Glucose-6-phosphate Branch Point In Saccharomyces Cerevisiae

Alagoz, Eda 01 October 2005 (has links) (PDF)
Glycolysis is the main metabolic route in Saccharomyces cerevisiae and it is the sequence of enzyme catalyzed reactions that oxidatively convert glucose to pyruvic acid in the yeast cytoplasm. In addition to the basic steps, glycolysis involves branch points providing the intermediary building blocks of the cell (i.e amino acids and nucleotides). One of these pathways is glucose-6-phosphate branch point which is a junction of glycolytic pathway and pentose phosphate pathway. At this point glucose-6-phosphate can be converted to fructose-6-phosphate a metabolite of glycolytic pathway by phosphoglucoisomerase or it can be dehydrogenated to 6-phosphogluconolactone by glucose-6-phosphate dehydrogenase which is the first enzyme of the pentose phosphate pathway. In this study, the influence of different nitrogen sources on the flux distribution through the pentose phosphate pathway and glycolysis in Saccharomyces cerevisiae was examined. For this purpose, four different compositions of nitrogen sources were used in growth media. The growth medium contained one of the following composition of nitrogen sources / only ammonium sulfate, only yeast nitrogen base, ammonium sulfate and histidine, yeast nitrogen base and histidine. Histidine was added because its synthesis branches from pentose phosphate pathway. In order to analyse the effect of the different compositions of nitrogen sources on the physiology of the yeast, specific activities of hexokinase, phosphoglucose isomerase, glucose-6-phosphate dehydrogenase and 6-phosphogluconate dehydrogenase enzymes were measured in the crude extracts of the biomass samples taken in the late exponential phase of the cultures. Addition of histidine caused an increase in the specific activities of all the enzymes analysed in medium containing ammonium sulfate. The specific activity of hexokinase, phosphoglucose isomerase and glucose-6-phosphate dehydrogenase in medium containing yeast nitrogen base and histidine were higher than medium containing yeast nitrogen base. However, the specific activity of 6-phosphogluconate dehydrogenase decreased 3.1% in medium containing yeast nitrogen base and histidine medium with respect to medium with only yeast nitrogen base. The OD value and dry weight in the culture containing histidine aminoacid was higher than the cultures contaning only ammonium sulfate and only yeast nitrogen base. Also the period of the exponential phase was shorter in medium containing ammonium sulfate and histidine and yeast nitrogen base and histidine than medium only ammonium sulfate and only yeast nitrogen base.
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Estudo do cultivo de Spirulina platensis por processo contínuo com uréia como fonte de nitrogênio / Continuos process cultivation of Spirulina platensis using urea as a nitrogen source

Leon, Ivan Alejandro Avila 05 April 2010 (has links)
Arthrospira (Spirulina) platensis vem sendo cultivada para a produção de biomassa pelos altos conteúdos de proteína, ácidos graxos poliinsaturados e vitaminas. O nitrogênio é um nutriente que exerce influência em seu metabolismo, e o uso de fontes nitrogenadas de baixo custo pode contribuir para a viabilização da produção de A. platensis. Foi verificado o crescimento do microrganismo empregando uréia como fonte de nitrogênio por meio de processo contínuo, visando evitar níveis inibitórios de amônia no meio. Verificou-se a influência da vazão específica de alimentação (D, 0,04 a 0,44 dia-1) utilizando duas concentrações de uréia (N0) de 0,5 e 5 mM no meio de alimentação. Para N0=0,5mM, a maior produtividade em células (PX) obtida foi 201,5 mg.L-1.dia-1com D=0,44d-1; nessas condições a concentração celular em regime permanente (XP) foi 458 mg.L-1, obtendo-se uma biomassa com um teor de proteínas de 27,2%. Para N0=5mM, o máximo valor de PX encontrado foi 148,2 mg.L-1.dia-1, com D=0,12d-1; nessa vazão de alimentação, o XP foi 1235 mg.L-1 e o teor protéico na biomassa (71,9%) o mais alto encontrado. / Arthrospira platensis is being cultivated for biomass production because of its high content of proteins, polyunsaturated fatty acids and vitamins. Nitrogen is a nutrient which has a big influence in its metabolism, and the use of low cost sources of this element could contribute for the feasibility of A. platensis production. It was verified the growth of the microorganism using urea as a nitrogen source by a continuous process, to avoid ammonia inhibitory levels into the culture. It was evaluated the influence of the specific dilution rate (D, 0.04 to 0.44 day-1) in the culture applying two urea concentrations (N0) 0.5 and 5mM in the feeding medium. For N0=0,5mM, the highest cell productivity (PX) obtained was 201.5 mg.L-1.day-1using D=0.44d-1; under these conditions the cell concentration in steady state (XP) was 458 mg.L-1, obtaining a biomass with a protein content of 27.2%. For N0=5mM, the highest PX value was 148.2 mg.L-1.day-1, with D=0.12 day-1; under this dilution rate, the XP was 1235 mg.L-1 and its protein content (71.9%) was the highest achieved.

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