Orientador: Alberto Carlos Botazzo Delbem / Banca: Sandra Helena Penha de Oliveira / Banca: Cínthia Pereira Machado Tabchoury / Banca: Nuno Gonçalo Pereira Mira / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana/antibiofilme e a viabilidade celular de nanopartículas de prata (NPsAg) obtidas por uma síntese 'green' associadas ou não ao β-glicerofosfato de cálcio (GPCa) contra Streptococcus mutans e espécies de Candida (cepas de referência e isolados clínicos orais incluindo cepas resistentes ao fluconazol). O efeito destes nanocompostos em combinação com o tirosol (TIR), fluconazol (FLC), nistatina (NIT) e anfotericina B (AnB) também foi avaliado. Além disso, nós avaliamos comparativamente as alterações do transcriptoma de células de C. glabrata CBS138 após exposição às NPsAg e ao Íon prata (Ag+). Inicialmente, as NPsAg foram sintetizadas por meio da redução do nitrato de prata com extratos de diferentes partes (casca, folha e semente) de uma romã (Punica granatum L.) associadas ou não ao GPCa. A Concentração Inibitória Mínima (CIM) e as Concentrações Fungicida/Bactericida Mínima (CFM e CBM) dos nanocompostos (NPsAg e NPsAg-GPCa) associados ou não ao TIR contra S. mutans e C. albicans foram determinadas pelo método de microdiluição. E, a ação das NPsAg combinadas com FLC, NIT e AnB também foi avaliada em condição planctônica contra isolados clínicos orais de espécies de Candida. O efeito dos nanocompostos associados ou não ao TIR sobre a viabilidade celular de fibroblastos da linhagem L929 e a produção de citocinas foi avaliado através dos ensaios de MTT e ELISA, respectivamente. O número de hifas foi quantificado em biofi... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to evaluate the antimicrobial/antibiofilm activities and the cell viability of silver nanoparticles (AgNPs) obtained by a 'green' synthesis associated or not to β-calcium glycerophosphate (CaGP) against Streptococcus mutans and Candida species (reference strains and oral clinical isolates including azole-resistant strains). The effect of these nanocompounds in combination with tyrosol (TYR), fluconazole (FLC), nystatin (NYT) and amphotericin B (AmB) also was evaluated. Furthermore, we evaluated, comparatively, the transcriptome alterations of cells of C. glabrata CBS138 after exposition to AgNPs and to silver ion (Ag+). Initially, AgNPs were synthesized by reducing silver nitrate with extracts of different parts (peel, leaves and seeds) of a pomegranate (Punica granatum L.) associated or not to CaGP. Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Fungicidal/Bactericidal Concentrations (MFC and MBC) of the nanocomposites (AgNPs and AgNPs-CaGP) associated or not to TYR against S. mutans and C. albicans were determined by the microdilution method. And, the action of the AgNPs combined with FLC, NYT and AmB also was evaluated in planktonic condition against oral clinical isolates of Candida species. The effect of the nanocomposites associated or not to TYR on cell viability of fibroblasts (L929) and cytokines production was evaluated through MTT and ELISA assays, respectively. The number of cells undergoing filamentation was quantified in C. albicans... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2017-03-14T14:10:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-07-29. Added 1 bitstream(s) on 2017-03-14T14:42:45Z : No. of bitstreams: 1 000874567_20180729.pdf: 739207 bytes, checksum: 096d06efa6c645b9cd46c526ab46691f (MD5) Bitstreams deleted on 2018-07-31T11:21:36Z: 000874567_20180729.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2018-07-31T11:22:29Z : No. of bitstreams: 1 000874567.pdf: 2611072 bytes, checksum: c96b34ee605e5658c74f4eafc173b3c1 (MD5) / O presente estudo avaliou a eficácia da terapia fotodinâmica (PDT) na inativação de Candida albicans em modelos murino de candidíase oral. Adicionalmente, este estudo avaliou se a PDT causa danos ao núcleo da célula fúngica. Dessa forma, foram conduzidos três estudos: 1. Avaliou a eficácia da cloro-alumínio-ftalocianina encapsulado em nanoemulsão catiônica (ClAlP NE) na inativação de Candida albicans presente em modelo murino de candidíase oral; 2. Avaliou a eficácia da PDT mediada pelo Photodithazine®(PDZ) como tratamento para candidíase oral induzida; 3. Avaliou o potencial da inativação fotodinâmica (PDT) mediado pelo fotossensibilizador (PS) Curcumina (CUR) associado ao LED azul em causar danos no DNA de C albicans. No estudo 1, 75 camundongos fêmeas com 6 semanas foram imunossuprimidos e inoculados com C. albicans para induzir candidíase oral. A PDT foi realizada sobre a língua pela aplicação dos fotossensibilizadores ClAlP NE ou ClAlP DMSO e luz LED (100 J/cm2 - 660 nm). Em seguida, a avaliação microbiológica foi realizada por meio da recuperação de C. albicans da língua dos animais. Diluições seriadas foram realizadas, as colônias viáveis foram quantificado e o número de UFC mL determinado. Os animais foram sacrificados 24 horas após a PDT e as línguas foram removidas cirurgicamente para análise histológica e para análise de expressão de citocinas pró e antiinflamatórias (IL-1, TNF-α e IL-6) por ensaio de RT-qPCR. Os dados foram analisados por One-Way ANOVA. A PDT mediada por ClAIP-NE reduziu 2,26 log10 da viabilidade celular de C. albicans em comparação ao grupo controle (p <0,05). A PDT mediada por ClAlP DMSO não apresentou atividade antifúngica. A análise histológica revelou que a PDT não promoveu efeitos adversos sobre o tecido língual dos animais. A terapia mediada por ambos os fotossensibilizadores induziu a expressão... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / This study evaluated the efficacy of photodynamic therapy (PDT) in the inactivation of C. albicans in a murine models of oral candidosis. Additionally, this study evaluated the poetencial of PDT to promote DNA damage of fungal cell. For this purpose, three studies were conducted: 1. Evaluated the photodynamic effect of chloro-aluminum phthalocyanine encapsulated in cationic nanoemulsions (ClAlP NE) to inactivate Candida albicans in a murine model of oral candidiasis. 2. Evaluated the photoinactivation (PDT) of Candida albicans in a murine model of oral candidosis, mediated by Photodithazine® (PDZ). 3. Evaluated the potential of PDT mediated by Curcumin (CUR) associated with the blue LED in causing DNA damage of C. albicans. In the first study, 75 6-week-old female Swiss mice were immunosuppressed and inoculated with C. albicans to induce oral candidiasis. PDT was performed on the tongue by the application of the photosensitizers and LED light (100 J cm-² - 660 nm). Next, microbiological evaluation was carried out by recovering C. albicans from the tongue via colony forming units (CFU mL-1). Then, the animals were sacrificed and the tongues were surgically removed for histological analysis and analysis of inflammatory cytokines expression (IL-1, TNF-α and IL-6) by RT-qPCR. Data were analyzed by ANOVA test. ClAlP NE-mediated PDT was able to reduce C. albicans recovered from the tongue (2.26 log10) when compared with control (p<0.05). ClAlP DMSO-mediated PDT did not present antifungal activity. Histological analysis revealed that PDT did not promote adverse effects on the tongue tissue. PDT mediated by both photosensitizers induced the TNF-α expression when compared with control (P<0.05). ClAlP mediated by PDT induced the expression of inflammatory cytokines, TNF-α, irrespective of the drug system delivery used. In the second study, a new murine model of oral...(Complete abstract electronic access below)

Orientador: Ana Cláudia Pavarina / Banca: Juliana Campos Junqueira / Banca: Gilberto Leite Braga Ubida / Banca: Lívia Nordi Dovigo / Banca: Marlise Inêz Klein Furlan / Resumo: O presente estudo avaliou a eficácia da terapia fotodinâmica (PDT) na inativação de Candida albicans em modelos murino de candidíase oral. Adicionalmente, este estudo avaliou se a PDT causa danos ao núcleo da célula fúngica. Dessa forma, foram conduzidos três estudos: 1. Avaliou a eficácia da cloro-alumínio-ftalocianina encapsulado em nanoemulsão catiônica (ClAlP NE) na inativação de Candida albicans presente em modelo murino de candidíase oral; 2. Avaliou a eficácia da PDT mediada pelo Photodithazine®(PDZ) como tratamento para candidíase oral induzida; 3. Avaliou o potencial da inativação fotodinâmica (PDT) mediado pelo fotossensibilizador (PS) Curcumina (CUR) associado ao LED azul em causar danos no DNA de C albicans. No estudo 1, 75 camundongos fêmeas com 6 semanas foram imunossuprimidos e inoculados com C. albicans para induzir candidíase oral. A PDT foi realizada sobre a língua pela aplicação dos fotossensibilizadores ClAlP NE ou ClAlP DMSO e luz LED (100 J/cm2 - 660 nm). Em seguida, a avaliação microbiológica foi realizada por meio da recuperação de C. albicans da língua dos animais. Diluições seriadas foram realizadas, as colônias viáveis foram quantificado e o número de UFC mL determinado. Os animais foram sacrificados 24 horas após a PDT e as línguas foram removidas cirurgicamente para análise histológica e para análise de expressão de citocinas pró e antiinflamatórias (IL-1, TNF-α e IL-6) por ensaio de RT-qPCR. Os dados foram analisados por One-Way ANOVA. A PDT mediada por ClAIP-NE reduziu 2,26 log10 da viabilidade celular de C. albicans em comparação ao grupo controle (p <0,05). A PDT mediada por ClAlP DMSO não apresentou atividade antifúngica. A análise histológica revelou que a PDT não promoveu efeitos adversos sobre o tecido língual dos animais. A terapia mediada por ambos os fotossensibilizadores induziu a expressão... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study evaluated the efficacy of photodynamic therapy (PDT) in the inactivation of C. albicans in a murine models of oral candidosis. Additionally, this study evaluated the poetencial of PDT to promote DNA damage of fungal cell. For this purpose, three studies were conducted: 1. Evaluated the photodynamic effect of chloro-aluminum phthalocyanine encapsulated in cationic nanoemulsions (ClAlP NE) to inactivate Candida albicans in a murine model of oral candidiasis. 2. Evaluated the photoinactivation (PDT) of Candida albicans in a murine model of oral candidosis, mediated by Photodithazine® (PDZ). 3. Evaluated the potential of PDT mediated by Curcumin (CUR) associated with the blue LED in causing DNA damage of C. albicans. In the first study, 75 6-week-old female Swiss mice were immunosuppressed and inoculated with C. albicans to induce oral candidiasis. PDT was performed on the tongue by the application of the photosensitizers and LED light (100 J cm-² - 660 nm). Next, microbiological evaluation was carried out by recovering C. albicans from the tongue via colony forming units (CFU mL-1). Then, the animals were sacrificed and the tongues were surgically removed for histological analysis and analysis of inflammatory cytokines expression (IL-1, TNF-α and IL-6) by RT-qPCR. Data were analyzed by ANOVA test. ClAlP NE-mediated PDT was able to reduce C. albicans recovered from the tongue (2.26 log10) when compared with control (p<0.05). ClAlP DMSO-mediated PDT did not present antifungal activity. Histological analysis revealed that PDT did not promote adverse effects on the tongue tissue. PDT mediated by both photosensitizers induced the TNF-α expression when compared with control (P<0.05). ClAlP mediated by PDT induced the expression of inflammatory cytokines, TNF-α, irrespective of the drug system delivery used. In the second study, a new murine model of oral...(Complete abstract electronic access below) / Doutor