As investigações sobre os efeitos da oxigenoterapia hiperbárica (OHB) em lesão por ruído são escassas e apontam para diferentes efeitos em função do momento de intervenção. Dentre os trabalhos já descritos foi observado efeito lesivo da OHB quando aplicada imediatamente ao trauma acústico, contudo, efeito positivo foi observado quando aplicada após 2 e 6 horas. Com relação aos tratamentos usados para trauma acústico, alguns estudos descrevem o uso de corticoides como melhor alternativa, mas recentemente estudos apontam para a sua combinação com OHB como a terapêutica com maior beneficio nas lesões por ruído. O presente estudo teve como objetivos avaliar o momento da intervenção pela OHB após 2, 4 e 6 horas de repouso auditivo após exposição ao ruído e avaliar a associação terapêutica entre a OHB e corticoterapia (CT). Cobaias albinas foram expostas a um ruído branco na faixa de 4 kHz com intensidade igual a 110dB NPS por 72h e divididas em cinco grupos terapêuticos: OHB com início após 2, 4 e 6h de repouso auditivo após exposição ao ruído, CT isolada e OHB após 6 horas de repouso associada a CT. O tratamento durou 5 dias, sendo uma sessão terapêutica por dia. Todos os animais tiveram a função auditiva avaliada pelo Potencial Evocado Auditivo de Tronco Encefálico (PEATE) e pelas Emissões Otoacústicas Produtos de Distorção (EOAPD) em três momentos: pré-ruído, pós-ruído e pós-tratamento. Após a eutanásia dos animais e preparação dos espécimes cocleares, todas as cócleas foram analisadas através de Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Não houve diferença estatística significativa entre os momentos de intervenção pela OHB após 2, 4 e 6 horas, contudo, os dados de MEV demonstraram que uma maior otoproteção ocorreu quando a intervenção foi realizada após um maior repouso auditivo. Apesar da não diferença estatística significativa, os achados anatômicos e funcionais permitiram concluir que a associação terapêutica entre a OHB e a corticoterapia desempenhou um melhor efeito otoprotetor e terapêutico se comparada a essas mesmas terapias isoladas. / Investigations on the effects of hyperbaric oxygen therapy (HBOT) in noise injury are scarce and point to different effects depending on the time of intervention. Among the work already described has been observed damaging effect of HBOT when applied immediately after the acoustic trauma, however, positive effect was observed when applied after 2 and 6 hours of rest after the trauma. Studies describe the use of corticosteroids as the best alternative to treat acoustic trauma, but recent studies point to their combination with HBOT as the major benefit in lesions by noise. This study aimed to evaluate the time of intervention by HBOT after 2, 4 and 6 hours of rest after hearing noise exposure and to evaluate the association between HBOT and corticoid. Female guinea pigs were exposed to a white noise on 4kHz at 110dB SPL during 72 hours and divided into five treatment groups: HBOT after 2, 4 and 6 hours of rest after the noise exposure, corticosteroid therapy and HBOT combined with corticoid. The treatment lasted five days, being a therapy session per day. All animals were exposed to Distortion Product Otoacoustic Emissions (DPOAE) and Auditory Brainstem evoked Response (ABR) in three moments: before and after exposure to the noise and after the treatment. All cochleae were examined by scanning electron microscopy (SEM). There was no statistically significant difference between the moments of intervention by HBOT after 2, 4 and 6 hours, however, the SEM data showed that a greater otoprotection occurred when the intervention was performed after a higher auditory rest. Although not statistically significant, the anatomical and functional findings concluded that the association between HBOT and corticosteroid therapy played a better otoprotective and therapeutic effect compared to those same therapies alone.

As investigações sobre os efeitos da oxigenoterapia hiperbárica (OHB) em lesão por ruído são escassas e apontam para diferentes efeitos em função do momento de intervenção. Dentre os trabalhos já descritos foi observado efeito lesivo da OHB quando aplicada imediatamente ao trauma acústico, contudo, efeito positivo foi observado quando aplicada após 2 e 6 horas. Com relação aos tratamentos usados para trauma acústico, alguns estudos descrevem o uso de corticoides como melhor alternativa, mas recentemente estudos apontam para a sua combinação com OHB como a terapêutica com maior beneficio nas lesões por ruído. O presente estudo teve como objetivos avaliar o momento da intervenção pela OHB após 2, 4 e 6 horas de repouso auditivo após exposição ao ruído e avaliar a associação terapêutica entre a OHB e corticoterapia (CT). Cobaias albinas foram expostas a um ruído branco na faixa de 4 kHz com intensidade igual a 110dB NPS por 72h e divididas em cinco grupos terapêuticos: OHB com início após 2, 4 e 6h de repouso auditivo após exposição ao ruído, CT isolada e OHB após 6 horas de repouso associada a CT. O tratamento durou 5 dias, sendo uma sessão terapêutica por dia. Todos os animais tiveram a função auditiva avaliada pelo Potencial Evocado Auditivo de Tronco Encefálico (PEATE) e pelas Emissões Otoacústicas Produtos de Distorção (EOAPD) em três momentos: pré-ruído, pós-ruído e pós-tratamento. Após a eutanásia dos animais e preparação dos espécimes cocleares, todas as cócleas foram analisadas através de Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Não houve diferença estatística significativa entre os momentos de intervenção pela OHB após 2, 4 e 6 horas, contudo, os dados de MEV demonstraram que uma maior otoproteção ocorreu quando a intervenção foi realizada após um maior repouso auditivo. Apesar da não diferença estatística significativa, os achados anatômicos e funcionais permitiram concluir que a associação terapêutica entre a OHB e a corticoterapia desempenhou um melhor efeito otoprotetor e terapêutico se comparada a essas mesmas terapias isoladas. / Investigations on the effects of hyperbaric oxygen therapy (HBOT) in noise injury are scarce and point to different effects depending on the time of intervention. Among the work already described has been observed damaging effect of HBOT when applied immediately after the acoustic trauma, however, positive effect was observed when applied after 2 and 6 hours of rest after the trauma. Studies describe the use of corticosteroids as the best alternative to treat acoustic trauma, but recent studies point to their combination with HBOT as the major benefit in lesions by noise. This study aimed to evaluate the time of intervention by HBOT after 2, 4 and 6 hours of rest after hearing noise exposure and to evaluate the association between HBOT and corticoid. Female guinea pigs were exposed to a white noise on 4kHz at 110dB SPL during 72 hours and divided into five treatment groups: HBOT after 2, 4 and 6 hours of rest after the noise exposure, corticosteroid therapy and HBOT combined with corticoid. The treatment lasted five days, being a therapy session per day. All animals were exposed to Distortion Product Otoacoustic Emissions (DPOAE) and Auditory Brainstem evoked Response (ABR) in three moments: before and after exposure to the noise and after the treatment. All cochleae were examined by scanning electron microscopy (SEM). There was no statistically significant difference between the moments of intervention by HBOT after 2, 4 and 6 hours, however, the SEM data showed that a greater otoprotection occurred when the intervention was performed after a higher auditory rest. Although not statistically significant, the anatomical and functional findings concluded that the association between HBOT and corticosteroid therapy played a better otoprotective and therapeutic effect compared to those same therapies alone.

Brazil is among the world's largest consumers of pesticides and their increased use is given in agriculture, especially monoculture in large areas. Research shows that the ototoxic agents, in addition to compromising the peripheral auditory and vestybular systems, they may cause changes in central auditory pathways. O objetivo deste estudo foi verificar os aspectos ultra-estruturais de cócleas de cobaias expostas a agrotóxico e ginkgo biloba, utilizando doses comprovadamente ototóxicas, lesivas às células ciliadas externas, avaliando-se as alterações anatômicas através da microscopia eletrônica de superfície. The aim of this study was to evaluate the ultrastructural aspects of the cochlea of guinea pigs exposed to pesticides and ginkgo biloba, using ototoxic doses, damaging the outer hair cells, to evaluate the anatomic changes by surface electron microscopy. This is a prospective experimental study, conducted in guinea pigs, wich the inclusion criterion was the presence of DPOAE. The sample was divided into five groups, in which they administered 0.9% saline solution (group 1 - control), pesticides - 0.3 mg / kg / day (group 2), Ginkgo biloba - 100mg/kg/day, 90 minutes after a pesticide 0.3 mg / kg / day (group 3), pesticides - 3 mg / kg / day (group 4) and Ginkgo biloba - 100mg/kg/day, 90 minutes after a pesticide 3.0 mg / kg / days (group 5) for seven consecutive days. The pesticide used was that of methamidophos from Fersol ®. The anatomical evaluation was performed with scanning electronic microscopy. The guinea pigs subjected to pesticides showed morphological cochlear lesions in the three turns analyzed by electronic microscopy, intensified according to the dosage received from the pesticide agent. Guinea pigs treated with pesticides and Ginkgo biloba showed a maintenance of ciliary architecture in outer hair cells in all cochlear turns, whereas in the group treated only with pesticides, there was disappearance of the cilia of outer hair cells and distortion in the architecture of cilia remaining the MoU. We conclude that the greater the exposure to pesticides increased the damage in outer hair cells of the cochlea of albino guinea pigs, while those who had previously received ginkgo biloba keep outer hair cells cytoarchitecture preserved. / O Brasil está entre os principais consumidores mundiais de agrotóxicos e sua maior utilização se dá na agricultura, especialmente na monocultura, em grandes extensões. Pesquisas demonstram que os agentes ototóxicos, além de comprometer os sistemas auditivo e vestibular periféricos, provocam ainda alterações nas vias auditivas centrais. O objetivo deste estudo foi verificar os aspectos ultra-estruturais de cócleas de cobaias expostas a agrotóxico e ginkgo biloba, utilizando doses comprovadamente ototóxicas, lesivas às células ciliadas externas, avaliando-se as alterações anatômicas através da microscopia eletrônica de superfície. Trata-se de um estudo experimental prospectivo, realizado em cobaias albinas, cujo critério de inclusão foi à presença de OEAPD. A amostra foi dividida em cinco grupos, nos quais se administrou soro fisiológico 0,9% (grupo 1 - controle), agrotóxico - 0,3mg/Kg/dia (grupo 2), Ginkgo biloba - 100mg/kg/dia, 90 minutos após, agrotóxico 0,3 mg/Kg/dia (grupo 3), agrotóxico 3 mg/Kg/dia (grupo 4) e Ginkgo biloba - 100mg/kg/dia, 90 minutos após, agrotóxico 3,0 mg/Kg/dia (grupo 5) durante sete dias consecutivos. O agrotóxico utilizado foi o metamidofós da Fersol®. A avaliação anatômica foi realizada com Microscopia Eletrônica de Varredura. As cobaias submetidas ao agrotóxico apresentaram alterações morfológicas cocleares, com lesões nas três espiras analisadas na microscopia eletrônica, intensificadas de acordo com a dosagem recebida do agente. As cobaias tratadas com agrotóxico e Ginkgo biloba, apresentaram uma manutenção da arquitetura ciliar nas células ciliadas externas em todas as espiras da cóclea, enquanto que nos grupo tratado somente com agrotóxico, houve desaparecimento dos cílios das células ciliadas externas e distorção na arquitetura dos cílios remanescentes à ME. Concluímos que quanto maior a exposição ao agrotóxico maior o dano nas CCE da cóclea de cobaias albinas, enquanto que aquelas que recebem previamente o ginkgo biloba mantêm a citoarquitetura das CCE preservadas.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This paper aimed to investigate the apoptosis modulation pathway and the otoprotection mechanism of N-acetylcysteine (NAC) through the analysis of the glutathione peroxidase (GSH-Px) enzyme and the Bcl-2 protein expression in outer hair cells (OHCs) of rats treated with cisplatin. The listening function was also assessed in mice under the effect of different doses of cisplatin and NAC. Two experiments were performed, named A and B, the first being over an experimental period of five days, and the second during three days. Each experiment comprised four groups, under the following protocols: group A1 (negative control): intraperitoneally saline solution 0,9%, in the same volume corresponding to cisplatin dose; group A2 (positive control): 100mg/kg/day of NAC, oral administration by gavage; group A3 (ototoxic): 3mg/kg/day of intraperitoneally cisplatin; group A4 (ototoxic with otoprotection): 100 mg/kg/day of NAC oral administration by gavage, one hour before the administration of 3 mg/kg/day of intraperitoneally cisplatin; group B1 (negative control): intraperitoneally saline solution 0,9% in the same volume corresponding to the cisplatin dose (8mg/kg/day); group B2 (positive control): 300 mg/kg/day of NAC, oral administration by gavage; group B3 (ototoxic): 8 mg/kg/day of intraperitoneally cisplatin; group B4 (ototoxic with otoprotection): 300 mg/kg/day of NAC orally by gavage, one hour before the administration of 8 mg/Kg/day of intraperitoneally cisplatin. The animals in experiment A underwent otoscopy, distortion-product otoacustic emissions (DPOAEs) and brainstem auditory evoked potential (BAEP), before and after the administration of drugs. The animals in experiment B underwent the same testing in pre- and post-treatment, their tympanic bulla being removed ant their cochleae prepared for anatomical assessment with scanning electron microscopy and immunofluorescence for labeling the GSH-Px enzyme and the Bcl-2 protein. In experiment A, it was verified that there was no significant decrease in the signal-to-noise ratio of DPOEAs, but there was a significant increase in the electrophysiologic threshold obtained through BAEP in groups A3 e A4. In experiment B, it was verified that: there was no significant increase in the electrophysiologic threshold obtained through BAEP; the OHCs remained anatomically intact; the GSH-Px enzyme showed immunostaining absent in group B1 and immunostaining present in groups B2, B3 and B4; the Bcl-2 protein showed immunostaining absent in all groups. From the results, it was concluded that the listening function was more impaired by the exposure to a subdose of cisplatin over a longer period, the apoptosis modulation pathway in outer hair cells of mice treated with cisplatin is related to the expression of the GSH-Px enzyme and not expression of the Bcl-2 protein. / Este trabalho teve o objetivo de investigar o mecanismo de otoproteção da N-acetilcisteína (NAC) e a via de modulação da apoptose por meio da análise da expressão da enzima glutationa peroxidase (GSH-Px) e da proteína Bcl-2 em células ciliadas externas (CCEs) de ratos tratados com cisplatina. Também foi avaliada a função auditiva de ratos sob efeito de diferentes doses de cisplatina e NAC. Foram realizados dois experimentos, denominados de A e B, sendo o primeiro com um período experimental de cinco dias e o segundo de três dias. Cada experimento foi composto por quatro grupos, submetidos aos seguintes protocolos: grupo A1 (controle negativo): solução fisiológica 0,9%, via intraperitoneal, no mesmo volume correspondente à dose de cisplatina; grupo A2 (controle positivo): 100mg/Kg/dia de NAC, via oral por gavagem; grupo A3 (ototóxico): 3mg/Kg/dia de cisplatina via intraperitoneal; grupo A4 (ototóxico com otoproteção): 100 mg/Kg/dia de NAC via oral por gavagem, uma hora antes da administração de 3 mg/Kg/dia de cisplatina via intraperitoneal; grupo B1 (controle negativo): solução fisiológica 0,9% via intraperitoneal no mesmo volume correspondente à dose de cisplatina (8mg/Kg/dia); grupo B2 (controle positivo): 300 mg/Kg/dia de NAC via oral por gavagem; grupo B3 (ototóxico): 8 mg/Kg/dia de cisplatina via intraperitoneal; grupo B4 (ototóxico com otoproteção): 300 mg/Kg/dia de NAC via oral por gavagem, uma hora antes da administração via intraperitoneal de 8 mg/Kg/dia de cisplatina. Os animais do experimento A realizaram otoscopia, emissões otoacústicas produto de distorção (EOAPD) e potencial evocado auditivo de tronco encefálico (PEATE), antes e depois da administração das drogas. Os animais do experimento B realizaram estas mesmas avaliações também no pré e pós-tratamento, além de terem suas bulas timpânicas removidas e suas cócleas preparadas para a avaliação anatômica com microscopia eletrônica de varredura e imunofluorescência para a marcação da enzima GSH-Px e da proteína Bcl-2. No experimento A, verificou-se que não houve diminuição significativa da relação sinal-ruído das EOAPD, porém houve aumento significativo do limiar eletrofisiológico obtido por PEATE nos grupos A3 e A4. No experimento B, verificou-se que: não houve aumento significativo do limiar eletrofisiológico obtido por PEATE; as CCEs mantiveram-se anatomicamente íntegras; a enzima GSH-Px apresentou imunomarcação ausente no grupo B1 e imunomarcação presente nos grupos B2, B3 e B4; a proteína Bcl-2 apresentou imunomarcação ausente em todos os grupos estudados. A partir dos resultados, concluiu-se que a função auditiva foi mais prejudicada com a exposição de uma subdose de cisplatina durante um período mais prolongado, a via de modulação da apoptose nas células ciliadas externas de ratos tratados com cisplatina está relacionada com a expressão da enzima GSH-Px e não expressão da proteína Bcl-2.