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Viabilidade e capacitação espermáticas, geração de peróxido de hidrogênio(H2O2) e lipoperoxidação no sêmen ovino adicionado de plasma seminal ou antioxidante após a criopreservação

Sicherle, Carmem Cecilia [UNESP] 14 December 2007 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-12-14Bitstream added on 2014-06-13T18:39:06Z : No. of bitstreams: 1 sicherle_cc_me_botfmvz.pdf: 396651 bytes, checksum: 98075f2e6d3318aa8f8806472a54bc87 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Objetivou-se avaliar a adição de plasma seminal e dos antioxidantes, catalase e Trolox, ao sêmen ovino após sua congelação e descongelação. Constituíram–se quatro grupos, CO (controle - com adição de 200µL PBS), CAT (catalase - 12,5 mg/mL = 8 µL + 162 µL PBS), TRO (Trolox - 100 µMol/ 100 x 106 sptz = 3,4 µL + 166,6 µL PBS), PS ( 60% de plasma seminal em PBS = 200 µL) em que os aditivos foram acrescidos (v/v) na proporção de 1:1, às amostras de sêmen criopreservado de 13 carneiros. Os parâmetros de cinética espermática determinados através da análise computadorizada (CASA), a integridade de membrana avaliada pela combinação das sondas fluorescentes Iodeto de Propídeo e Diacetato de Carboxifluoresceína, bem como a capacitação espermática constatada pelo ensaio da Clortetraciclina não foram influenciados pelo tratamento (P>0,05). A adição de plasma seminal teve um efeito deletério sobre a lipoperoxidação avaliada pela produção de TBARS (substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico), e geração de peróxido de hidrogênio (H2O2) pelo método do Phenol Red de H2O2. O Trolox foi efetivo em controlar a produção de TBARS nos sistema geradores (adição de +FeSO4). Uma vez que a adição de antioxidantes foi benéfica, por prevenir a formação adicional de TBARS e geração de H2O2 no sistema gerador, sua utilização em sêmen ovino após a criopreservação pode ser indicada, principalmente em situações de maior desafio oxidativo. / The aim of this study was to evaluate the addition of the antioxidants, catalase e Trolox, and the seminal plasma in frozen thawed ram semen. Four groups was established, CO (control 200 µL PBS), CAT (catalase - 12,5 mg/mL = 8 µL + 162 µL PBS), TRO (Trolox - 100 µMol/ 100 x 106 sptz = 3,4 µL + 166,6 µL PBS), PS ( 60% of seminal plasma in PBS = 200 µL) added in the proportion of 1:1 (v/v) in cryopreserved semen of 13 rams.The spermatozoa kinematics was determined by CASA, the membrane integrity was determined by the combination of the fluorescent probes Propidium Iodide and Carboxyfluorescein, and the capacitation status was assessed by Chlortetracycline assay. No statistic difference were found for these parameters (P>0,05).The addition of seminal plasma was deleterious on lipid peroxidation analysed by the production of TBARS (thiobarbituric acid reactive species) and on the generation of hydrogen peroxide (H2O2) assessed by Phenol Red assay. An effective effect was found in the production of TBARS in the addition of Trolox in the generation system (addition of +FeSO4). Once the addition of antioxidants were beneficial in prevent de additional generation of TBARS and H2O2 in the generator system, they can be use after the cryopreservation of ram semen, especially in case of oxidative stress.
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Viabilidade e capacitação espermáticas, geração de peróxido de hidrogênio(H2O2) e lipoperoxidação no sêmen ovino adicionado de plasma seminal ou antioxidante após a criopreservação /

Sicherle, Carmem Cecilia. January 2007 (has links)
Orientador: Sony Dimas Bicudo / Banca: Maria Denise Lopes / Banca: André Luis Rios Rodrigues / Resumo: Objetivou-se avaliar a adição de plasma seminal e dos antioxidantes, catalase e Trolox, ao sêmen ovino após sua congelação e descongelação. Constituíram-se quatro grupos, CO (controle - com adição de 200µL PBS), CAT (catalase - 12,5 mg/mL = 8 µL + 162 µL PBS), TRO (Trolox - 100 µMol/ 100 x 106 sptz = 3,4 µL + 166,6 µL PBS), PS ( 60% de plasma seminal em PBS = 200 µL) em que os aditivos foram acrescidos (v/v) na proporção de 1:1, às amostras de sêmen criopreservado de 13 carneiros. Os parâmetros de cinética espermática determinados através da análise computadorizada (CASA), a integridade de membrana avaliada pela combinação das sondas fluorescentes Iodeto de Propídeo e Diacetato de Carboxifluoresceína, bem como a capacitação espermática constatada pelo ensaio da Clortetraciclina não foram influenciados pelo tratamento (P>0,05). A adição de plasma seminal teve um efeito deletério sobre a lipoperoxidação avaliada pela produção de TBARS (substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico), e geração de peróxido de hidrogênio (H2O2) pelo método do Phenol Red de H2O2. O Trolox foi efetivo em controlar a produção de TBARS nos sistema geradores (adição de +FeSO4). Uma vez que a adição de antioxidantes foi benéfica, por prevenir a formação adicional de TBARS e geração de H2O2 no sistema gerador, sua utilização em sêmen ovino após a criopreservação pode ser indicada, principalmente em situações de maior desafio oxidativo. / Abstract: The aim of this study was to evaluate the addition of the antioxidants, catalase e Trolox, and the seminal plasma in frozen thawed ram semen. Four groups was established, CO (control 200 µL PBS), CAT (catalase - 12,5 mg/mL = 8 µL + 162 µL PBS), TRO (Trolox - 100 µMol/ 100 x 106 sptz = 3,4 µL + 166,6 µL PBS), PS ( 60% of seminal plasma in PBS = 200 µL) added in the proportion of 1:1 (v/v) in cryopreserved semen of 13 rams.The spermatozoa kinematics was determined by CASA, the membrane integrity was determined by the combination of the fluorescent probes Propidium Iodide and Carboxyfluorescein, and the capacitation status was assessed by Chlortetracycline assay. No statistic difference were found for these parameters (P>0,05).The addition of seminal plasma was deleterious on lipid peroxidation analysed by the production of TBARS (thiobarbituric acid reactive species) and on the generation of hydrogen peroxide (H2O2) assessed by Phenol Red assay. An effective effect was found in the production of TBARS in the addition of Trolox in the generation system (addition of +FeSO4). Once the addition of antioxidants were beneficial in prevent de additional generation of TBARS and H2O2 in the generator system, they can be use after the cryopreservation of ram semen, especially in case of oxidative stress. / Mestre
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Avaliação do testículo e da cauda do epidídimo de carneiros na pré-puberdade, na maturidade sexual, no criptorquidismo e na insulação escrotal : concentrações de testosterona plasmática e tecidual, histamina, fator de necrose tumoral-alfa e óxido nítrico /

Rodrigues, André Luís Rios. January 2004 (has links)
Orientador : Sony Dimas Bicudo / Resumo: Foram estudados 77 carneiros, caracterizados como 34 da raça Suffolk pré-púberes e 15 maduros sexualmente, e nos modelos de estresse térmico, 6 da raça Santa Inês submetidos a insulação escrotal por 96 horas, 6 controle não insulados e 16 criptorquídicos bilaterais. Foram avaliadas a histopatologia, as concentrações de histamina, testosterona plasmática e tecidual testicular, fator de necrose tumoral-alfa e óxido nítrico no testículo e na cauda do epidídimo, sendo as duas últimas, realizadas apenas nos grupos sob insulação escrotal e seu controle. A avaliação histológica testicular e da cauda do epidídimo não caracterizou alterações do ponto de vista morfológico. As concentrações de histamina no testículo e na cauda do epidídimo foram dependentes da condição reprodutiva, sendo superiores na pré-puberdade. Para o modelo estresse térmico, as concentrações de histamina no testículo e na cauda do epidídimo foram maiores no criptorquidismo, não sofrendo influência da insulação escrotal. Ao considerar todos os animais estudados, houve uma correlação negativa entre a concentração de testosterona plasmática com as de histamina no testículo; e na cauda do epidídimo, esta correlação ocorreu individualmente nos grupos estudados. O modelo de insulação 96 horas foi suficiente para causar alterações andrológicas na consistência testicular, nos parâmetros motilidade e defeitos espermáticos menores, porém, não evidenciou se a histamina, testosterona plasmática e tecidual, fator de necrose tumoral-alfa e óxido nítrico estão intimamente envolvidos no mecanismo de resposta ao estímulo térmico agressor. / Abstract: It has been used 77 rams, 34 pre-puberty and 15 sexually mature both Suffolk, 16 cryptorchids Santa Inês, 6 undergone to scrotal insulation for 96 hours, and 6 control group without insulation. The testis and the epididymis tail were evaluated by histopatology, concentrations of histamine, plasma and testicular tissue testosterone, tumor necrosis factor-alpha and nitric oxide, the last two ones just in scrotal insulation group and control group. Histopatology did not show any important change in the testis and epididymis tail in all groups. The concentration of histamine in both testis and epididymis tail were higher in pre-pubescent compared to mature rams. Histamine concentration was significantly higher in the cryptorchidism condition compared to insulation group and its control, which were not different from each other. Analyzing all the rams, there was a negative correlation between plasma testosterone and histamine concentration in the testis; in the epididymis tail this correlation occurred individually in each group. The insulation model for 96 hours was able to cause changes in testicular consistence, seminal motility and minor defects in spermatozoa. Nevertheless it does not cause evidence if the concentration of histamine, testosterone and testicular tissue testosterone, tumor necrosis factor-alpha and nitric oxide were strongly involved in the response mechanism to the heat stress stimuli over testis and epididymis. / Doutor
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Viabilidade de embriões ovinos vitrificados ou congelados submetidos às técnicas direta e indireta de inovulação /

Green, Renata Elisa. January 2007 (has links)
Orientador: Sony Dimas Bicudo / Banca: Fernanda da Cruz Landim e Alvarenga / Banca: Anneliese de Souza Traldi / Resumo: O objetivo do presente trabalho foi testar a viabilidade de embriões ovinos produzidos in vivo criopreservados pelo método de vitrificação em OPS (Open Pulled Straw) ou congelação tradicional, comparando dois métodos (direto e indireto) de transferência dos embriões pós-aquecimento. Ao mesmo tempo, foi avaliado o efeito da criopreservação em diferentes estadios de desenvolvimento embrionário. Um grupo de 137 embriões com qualidades boa ou excelente foram obtidos de ovelhas Ile de France superovuladas. Mórulas e blastocistos foram distribuídos em três grupos: embriões frescos (n=50), embriões congelados (n=44) e embriões vitrificados (n=43). Os embriões destinados ao congelamento foram primeiramente equilibrados em solução de etilenoglicol em três passos (0,5M, 1,0M e 1,5M) por 5 minutos em cada passo, e criopreservados em equipamento automático de congelação. Os embriões vitrificados foram equilibrados em solução de 10% EG e 10% DMSO poe 1 minuto e 45 segundos e depois transferidos a solução de vitrificação com 20% EG e 20% DMSO por 30 segundos. Os embriões foram inovulados em receptoras sincrônicas, sendo utilizado dois métodos de transferência para os embriões criopreservados: direto e indireto. A viabilidade dos embriões foi determinada pela taxa de prenhez aos 30 dias através de ultra-sonografia em tempo real. A taxa de prenhez em receptoras inovuladas com embriões a fresco foi de 50%, sendo similar as taxas encontradas para embriões congelados (38,6%) e vitrificados (55,8%). No entanto, embriões vitrificados e inovulados pela técnica direta (57,1%) resultaram em maior taxa de gestação que os embriões congelados (34,8%) (P=0,07). Adicionalmente, embriões vitrificados mostraram maior viabilidade em estadio de mórula em relação aos embriões congelados no mesmo estadio (64,0% versus 38,9%) (P=0,07). Conclui-se que a vitrificação de embriões ovinos produzidos in vivo é uma biotécnica eficaz... / Abstract: The aim of this study was to evaluate the viability of sheep embryos cryopreserved using vitrification in OPS or traditional freezing after direct and indirect transfer. The effect of cryopreservation was evaluated on different embryos stage. A total of 137 in vivo produced sheep embryos, which were classified as good or excellent by morphological criteria, were obtained from adult Ile de France ewes. Morulae and blastocysts were distributed into three groups. In the first group, non-cryopreserved embryos were transfer to recipients as counterpart (n=50). In group 2, embryos were cryopreserved by slow freezing method (n=44). In the third group, embryos were vitrified using OPS (n=43). In a first set of experiments, embryos at morulae and blastocysts stage were frozen in an automatic freezer using three steps of equilibrium in ethylene glycol (0.5M, 1.0M and 1.5M) for 5 minutes in each step. A second group of embryos were loaded into open pulled straw (OPS) and plunged into liquid nitrogen after exposure at room temperature (20°C) in 10% EG + 10% dimethyl sulphoxide (DMSO) for 1 minute and 45 seconds, then in 20% EG + 20% DMSO + 0.5 M sucrose for 30 seconds. The cryopreserved embryos were transferred directly and indirectly into synchronized recipients. Pregnancy rates were recorded 30 days after transfer. No significant difference was observed among fresh, frozen or vitrified embryos on pregnancy rate (50.0%, 38.6% and 55.8%). However, the pregnancy rate after direct transfer of OPS vitrified embryos was significantly higher than direct transfer of frozen embryos (57.1% versus 34.8%) (P=0.07).In the same way, early cleavage stage embryos vitrified (morulae) had higher viability than that frozen embryos (64.0% versus 38.9%) (P=0.07). In conclusion, our results indicate that the OPS vitrification technique in association with direct transfer improves the viability of sheep embryos with potential applications to field conditions. / Mestre
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Viabilidade e fertilidade de sêmen ovino criopreservado com glicerol e dimetilacetamida acrescido de trealose EDTA /

Bittencourt, Rodrigo Freitas. January 2009 (has links)
Orientador: Eunice Oba / Banca: Sony Dimas Bicudo / Banca: Frederico Ozanam Papa / Banca: Rubens Paes Arruda / Banca: Wilter Ricardo Russiano Vicente / Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia e o efeito dos crioprotetores glicerol (GLI) e dimetilacetamida (DMA) em duas concentrações (3 e 6%), em meio diluidor com e sem trealose (TRE), associada ou não ao EDTA, sobre a viabilidade espermática pós-descongelação. Para tanto, foram utilizadas quarenta e nove amostras de sêmen de 20 carneiros da raça Santa Inês. Os estudos foram divididos em três experimentos. O primeiro comparou as duas concentrações de GLI em meio com ou sem a TRE, associada ou não ao EDTA. O segundo experimento avaliou a DMA em duas concentrações (3 e 6%) em meio com ou sem TRE, associada ou não ao EDTA. O terceiro experimento testou os dois diluidores com os melhores resultados in vitro no experimento 1 e os dois do experimento 2. Todos os experimentos tiveram os parâmetros da cinética espermática avaliados subjetivamente e pela análise computadorizada (CASA). A análise da viabilidade espermática foi realizada através da associação das sondas fluorescentes iodeto de proprídio, JC-1 e FITC-PSA. Para a análise estatística das características avaliadas, foi empregado o programa estatístico (SAS), versão 5.0 (1996). A DMA a 6% apresentou toxicidade e a 3% demonstrou baixo efeito crioprotetor sobre o espermatozóide ovino. A adição da TRE promoveu efeito negativo sobre a cinética espermática, entretanto melhorou os níveis de integridade das membranas espermáticas pós-descongelação. O diluidor com GLI a 6% sozinho foi o protocolo mais eficaz para a manutenção da integridade espermática, entretanto a taxa de prenhez das fêmeas não diferiu entre os grupos / Abstract: The objective of this study was to evaluate the efficacy and the effect of the cryoprotectants glycerol (GLY) and dimethyl acetamide (DMA) in two grades (3 and 6%) in extender with and without trehalose (TRE) extender associated or not with EDTA, on the post-thawing sperm viability. For that, they were used forty nine semen samples of 20 rams of the Santa Inês breed. The studies were divided into three experiments. The first one compared the two GLY grades (3 and 6%) in extender with or without TRE, associated or not with EDTA. The second experiment evaluated the DMA at two concentrations (3 e 6%) in medium with or without TRE, associated or not with EDTA. The third one tested the two extenders with the best in vitro results in experiment 1 and the two from experiment 2. All experiments had the kinetics sperm parameters evaluated subjectively and by computer analysis (CASA). The sperm viability evaluation was performed through the multiple sperm parameter staining with propidium iodide, JC-1 and FITC-PSA. For the statistical analysis of the characteristics evaluated was used the statistical package (SAS), version 5.0 (1996). The DMA at 6% was toxic and at 3% had a poor cryoprotective effect for ram semen. The addition of TRE promoted negative effect on sperm kinetics, entertain improved levels of sperm membranes integrity post-thawing. The extender with GLI at 6% alone was the best protocol for maintaining the sperm integrity, however the pregnancy rates of the ewes did not present difference (P>0.05) among the groups / Doutor
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Desenvolvimento reprodutivo e níveis plasmáticos de testosterona em machos Santa Inês no período pré-puberal /

Oliveira, Sylvia Bonci de. January 2006 (has links)
Orientador: Sony Dimas Bicudo / Banca: Carlos Antonio de M. Bonfim / Banca: André Luis Rios Rodrigues / Resumo: Em 20 carneiros da raça Santa Inês com idade entre 60 e 135 dias, realizaramse observações semanais quanto ao grau de separação entre o pênis e o prepúcio, tentativas de colheita de sêmen com eletro ejaculador e análise microscópica a procura de presença de espermatozóides. As biometrias corporal e testicular foram mensuradas e após o período de observação os animais foram destinados ao abate comercial e os testículos retirados para análise. Os animais foram divididos em dois grupo distintos em relação a média de ganho de peso diário individual (Grupo 1 <191 g/dia, n=10 e Grupo 2 >191 g/dia, n=10). Animais de ambos os Grupos apresentaram valores crescentes (P<0,05) das biometrias corporais e testiculares no decorrer do experimento, não havendo diferença (P>0,05) entre os grupos. Constatou-se não haver diferença (P>0,05) em relação às medidas testiculares pré-abate, pós-abate através das biometrias, e volume testicular pós-abate pelo deslocamento de líquido. Os valores obtidos neste experimento foram característicos de animais pré-puberes. / Abstract: Twenty sheep males from Santa Inês breed, aging between 60 and 135 days were submitted to weekly observations in respect to the degree of separation between penis and prepuce. In addition semen collection using electro ejaculator followed by microscopy analysis and searching for presence of spermatozoa was performed. Corporal and testicular biometry were measured and after the observations were completed, the animals were conducted to commercial slaughter with removal of testicles for further analysis. The animals were divided in two distinct groups considering the average daily weight gain for each animal (Group 1 < 191 g/day, n=10 and Group 2 > 191 g/day, n=10). The animals from both groups presented increased values (P<0.05) of corporal biometry and testicles during the experiment period, with no difference between groups (P>0.05). No difference in measurements of testicles at pre and post slaughter was verified (P>0.05) regarding biometry and post slaughter testicular volume which were measured through liquid displacement. The values obtained in this experiment are typical traits from animals at the pre pubertal period. / Mestre
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Avaliação do testículo e da cauda do epidídimo de carneiros na pré-puberdade, na maturidade sexual, no criptorquidismo e na insulação escrotal: concentrações de testosterona plasmática e tecidual, histamina, fator de necrose tumoral-alfa e óxido nítrico

Rodrigues, André Luís Rios [UNESP] January 2004 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004Bitstream added on 2014-06-13T19:45:13Z : No. of bitstreams: 1 rodrigues_alr_dr_botfmvz.pdf: 508834 bytes, checksum: 3e16ee0bb126193985096e9ae819dcc2 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Foram estudados 77 carneiros, caracterizados como 34 da raça Suffolk pré-púberes e 15 maduros sexualmente, e nos modelos de estresse térmico, 6 da raça Santa Inês submetidos a insulação escrotal por 96 horas, 6 controle não insulados e 16 criptorquídicos bilaterais. Foram avaliadas a histopatologia, as concentrações de histamina, testosterona plasmática e tecidual testicular, fator de necrose tumoral-alfa e óxido nítrico no testículo e na cauda do epidídimo, sendo as duas últimas, realizadas apenas nos grupos sob insulação escrotal e seu controle. A avaliação histológica testicular e da cauda do epidídimo não caracterizou alterações do ponto de vista morfológico. As concentrações de histamina no testículo e na cauda do epidídimo foram dependentes da condição reprodutiva, sendo superiores na pré-puberdade. Para o modelo estresse térmico, as concentrações de histamina no testículo e na cauda do epidídimo foram maiores no criptorquidismo, não sofrendo influência da insulação escrotal. Ao considerar todos os animais estudados, houve uma correlação negativa entre a concentração de testosterona plasmática com as de histamina no testículo; e na cauda do epidídimo, esta correlação ocorreu individualmente nos grupos estudados. O modelo de insulação 96 horas foi suficiente para causar alterações andrológicas na consistência testicular, nos parâmetros motilidade e defeitos espermáticos menores, porém, não evidenciou se a histamina, testosterona plasmática e tecidual, fator de necrose tumoral-alfa e óxido nítrico estão intimamente envolvidos no mecanismo de resposta ao estímulo térmico agressor. / It has been used 77 rams, 34 pre-puberty and 15 sexually mature both Suffolk, 16 cryptorchids Santa Inês, 6 undergone to scrotal insulation for 96 hours, and 6 control group without insulation. The testis and the epididymis tail were evaluated by histopatology, concentrations of histamine, plasma and testicular tissue testosterone, tumor necrosis factor-alpha and nitric oxide, the last two ones just in scrotal insulation group and control group. Histopatology did not show any important change in the testis and epididymis tail in all groups. The concentration of histamine in both testis and epididymis tail were higher in pre-pubescent compared to mature rams. Histamine concentration was significantly higher in the cryptorchidism condition compared to insulation group and its control, which were not different from each other. Analyzing all the rams, there was a negative correlation between plasma testosterone and histamine concentration in the testis; in the epididymis tail this correlation occurred individually in each group. The insulation model for 96 hours was able to cause changes in testicular consistence, seminal motility and minor defects in spermatozoa. Nevertheless it does not cause evidence if the concentration of histamine, testosterone and testicular tissue testosterone, tumor necrosis factor-alpha and nitric oxide were strongly involved in the response mechanism to the heat stress stimuli over testis and epididymis.
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Viabilidade e fertilidade de sêmen ovino criopreservado com glicerol e dimetilacetamida acrescido de trealose EDTA

Bittencourt, Rodrigo Freitas [UNESP] 03 August 2009 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-08-03Bitstream added on 2014-06-13T19:43:41Z : No. of bitstreams: 1 bittencourt_rf_dr_botfmvz.pdf: 2402327 bytes, checksum: fd3294b446a90eae988a29bec85c0499 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia e o efeito dos crioprotetores glicerol (GLI) e dimetilacetamida (DMA) em duas concentrações (3 e 6%), em meio diluidor com e sem trealose (TRE), associada ou não ao EDTA, sobre a viabilidade espermática pós-descongelação. Para tanto, foram utilizadas quarenta e nove amostras de sêmen de 20 carneiros da raça Santa Inês. Os estudos foram divididos em três experimentos. O primeiro comparou as duas concentrações de GLI em meio com ou sem a TRE, associada ou não ao EDTA. O segundo experimento avaliou a DMA em duas concentrações (3 e 6%) em meio com ou sem TRE, associada ou não ao EDTA. O terceiro experimento testou os dois diluidores com os melhores resultados in vitro no experimento 1 e os dois do experimento 2. Todos os experimentos tiveram os parâmetros da cinética espermática avaliados subjetivamente e pela análise computadorizada (CASA). A análise da viabilidade espermática foi realizada através da associação das sondas fluorescentes iodeto de proprídio, JC-1 e FITC-PSA. Para a análise estatística das características avaliadas, foi empregado o programa estatístico (SAS), versão 5.0 (1996). A DMA a 6% apresentou toxicidade e a 3% demonstrou baixo efeito crioprotetor sobre o espermatozóide ovino. A adição da TRE promoveu efeito negativo sobre a cinética espermática, entretanto melhorou os níveis de integridade das membranas espermáticas pós-descongelação. O diluidor com GLI a 6% sozinho foi o protocolo mais eficaz para a manutenção da integridade espermática, entretanto a taxa de prenhez das fêmeas não diferiu entre os grupos / The objective of this study was to evaluate the efficacy and the effect of the cryoprotectants glycerol (GLY) and dimethyl acetamide (DMA) in two grades (3 and 6%) in extender with and without trehalose (TRE) extender associated or not with EDTA, on the post-thawing sperm viability. For that, they were used forty nine semen samples of 20 rams of the Santa Inês breed. The studies were divided into three experiments. The first one compared the two GLY grades (3 and 6%) in extender with or without TRE, associated or not with EDTA. The second experiment evaluated the DMA at two concentrations (3 e 6%) in medium with or without TRE, associated or not with EDTA. The third one tested the two extenders with the best in vitro results in experiment 1 and the two from experiment 2. All experiments had the kinetics sperm parameters evaluated subjectively and by computer analysis (CASA). The sperm viability evaluation was performed through the multiple sperm parameter staining with propidium iodide, JC-1 and FITC-PSA. For the statistical analysis of the characteristics evaluated was used the statistical package (SAS), version 5.0 (1996). The DMA at 6% was toxic and at 3% had a poor cryoprotective effect for ram semen. The addition of TRE promoted negative effect on sperm kinetics, entertain improved levels of sperm membranes integrity post-thawing. The extender with GLI at 6% alone was the best protocol for maintaining the sperm integrity, however the pregnancy rates of the ewes did not present difference (P>0.05) among the groups
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Viabilidade de embriões ovinos vitrificados ou congelados submetidos às técnicas direta e indireta de inovulação

Green, Renata Elisa [UNESP] 31 July 2007 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-07-31Bitstream added on 2014-06-13T20:19:20Z : No. of bitstreams: 1 green_re_me_botfmvz.pdf: 227813 bytes, checksum: 81c65c7153ef1899ecd83611ad6f331f (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O objetivo do presente trabalho foi testar a viabilidade de embriões ovinos produzidos in vivo criopreservados pelo método de vitrificação em OPS (Open Pulled Straw) ou congelação tradicional, comparando dois métodos (direto e indireto) de transferência dos embriões pós-aquecimento. Ao mesmo tempo, foi avaliado o efeito da criopreservação em diferentes estadios de desenvolvimento embrionário. Um grupo de 137 embriões com qualidades boa ou excelente foram obtidos de ovelhas Ile de France superovuladas. Mórulas e blastocistos foram distribuídos em três grupos: embriões frescos (n=50), embriões congelados (n=44) e embriões vitrificados (n=43). Os embriões destinados ao congelamento foram primeiramente equilibrados em solução de etilenoglicol em três passos (0,5M, 1,0M e 1,5M) por 5 minutos em cada passo, e criopreservados em equipamento automático de congelação. Os embriões vitrificados foram equilibrados em solução de 10% EG e 10% DMSO poe 1 minuto e 45 segundos e depois transferidos a solução de vitrificação com 20% EG e 20% DMSO por 30 segundos. Os embriões foram inovulados em receptoras sincrônicas, sendo utilizado dois métodos de transferência para os embriões criopreservados: direto e indireto. A viabilidade dos embriões foi determinada pela taxa de prenhez aos 30 dias através de ultra-sonografia em tempo real. A taxa de prenhez em receptoras inovuladas com embriões a fresco foi de 50%, sendo similar as taxas encontradas para embriões congelados (38,6%) e vitrificados (55,8%). No entanto, embriões vitrificados e inovulados pela técnica direta (57,1%) resultaram em maior taxa de gestação que os embriões congelados (34,8%) (P=0,07). Adicionalmente, embriões vitrificados mostraram maior viabilidade em estadio de mórula em relação aos embriões congelados no mesmo estadio (64,0% versus 38,9%) (P=0,07). Conclui-se que a vitrificação de embriões ovinos produzidos in vivo é uma biotécnica eficaz... / The aim of this study was to evaluate the viability of sheep embryos cryopreserved using vitrification in OPS or traditional freezing after direct and indirect transfer. The effect of cryopreservation was evaluated on different embryos stage. A total of 137 in vivo produced sheep embryos, which were classified as good or excellent by morphological criteria, were obtained from adult Ile de France ewes. Morulae and blastocysts were distributed into three groups. In the first group, non-cryopreserved embryos were transfer to recipients as counterpart (n=50). In group 2, embryos were cryopreserved by slow freezing method (n=44). In the third group, embryos were vitrified using OPS (n=43). In a first set of experiments, embryos at morulae and blastocysts stage were frozen in an automatic freezer using three steps of equilibrium in ethylene glycol (0.5M, 1.0M and 1.5M) for 5 minutes in each step. A second group of embryos were loaded into open pulled straw (OPS) and plunged into liquid nitrogen after exposure at room temperature (20°C) in 10% EG + 10% dimethyl sulphoxide (DMSO) for 1 minute and 45 seconds, then in 20% EG + 20% DMSO + 0.5 M sucrose for 30 seconds. The cryopreserved embryos were transferred directly and indirectly into synchronized recipients. Pregnancy rates were recorded 30 days after transfer. No significant difference was observed among fresh, frozen or vitrified embryos on pregnancy rate (50.0%, 38.6% and 55.8%). However, the pregnancy rate after direct transfer of OPS vitrified embryos was significantly higher than direct transfer of frozen embryos (57.1% versus 34.8%) (P=0.07).In the same way, early cleavage stage embryos vitrified (morulae) had higher viability than that frozen embryos (64.0% versus 38.9%) (P=0.07). In conclusion, our results indicate that the OPS vitrification technique in association with direct transfer improves the viability of sheep embryos with potential applications to field conditions.
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Desempenho e características de carcaça de ovinos da raça Santa Inês e seus cruzamentos em sistema intensivo de produção / Performance and carcass caracteristics of Santa Inês sheep and their crossbread in intensive production system

Cardoso, Maximiliano Tadeu Memória 03 1900 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2008. / Submitted by Luana Patrícia de Oliveira Porto (luana_porto_23@hotmail.com) on 2010-03-10T19:18:04Z No. of bitstreams: 1 2008_MaximilianoTadeuMCardoso.pdf: 2749233 bytes, checksum: 26716042b2f64865a106485a9423717b (MD5) / Approved for entry into archive by Carolina Campos(carolinacamposmaia@gmail.com) on 2010-03-16T13:08:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_MaximilianoTadeuMCardoso.pdf: 2749233 bytes, checksum: 26716042b2f64865a106485a9423717b (MD5) / Made available in DSpace on 2010-03-16T13:08:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_MaximilianoTadeuMCardoso.pdf: 2749233 bytes, checksum: 26716042b2f64865a106485a9423717b (MD5) Previous issue date: 2008-03 / Neste experimento foi avaliado o desempenho de diferentes grupos genéticos de ovinos no sistema de alimentador privativo (creep-feeding), confinamento e os aspectos quantitativos das carcaças em diferentes pesos ao abate. Foram utilizados 53 ovinos machos inteiros e fêmeas, de parto simples (43 animais) e gemelares (10 animais), oriundos de três grupos genéticos diferentes, sendo 24 animais da raça Santa Inês (SI), 21 oriundos do cruzamento das raças Ile de France x Santa Inês (ILE x SI), 8 oriundos do cruzamento do Texel x Santa Inês (TX x SI), com idade média de 8 meses e com pesos médios de 30, 35, 40 e 45 Kg de peso vivo. Os animais cruzados com as raças paternas Texel e Ile de France apresentaram resultados superiores aos animais Santa Inês para ganho em peso, tempo para desmama em dias e em relação aos aspectos quantitativos da carcaça no creep-feeding e confinamento e em relação aos aspectos quantitativos da carcaça dos animais experimentais. Quanto ao melhor peso de abate a ser indicado para os animais dos três grupos genéticos analisados, os animais cruzados com as raças paternas Texel e Ile de France devem ser abatidos com o peso médio de 35 kg. Os animais Santa Inês devem ser abatidos com o médio vivo de 40 kg. Para as fêmeas de todos os grupos genéticos estudados, orienta-se o abate com peso inferior aos indicados para os machos, dentro de cada grupo genético, pela deposição precoce de gordura na carcaça. Usando correlações, notou-se que a espessura de gordura e a área de olho de lombo de maneira geral, diminuem com o aumento das medidas morfométricas, indicando que animais maiores, possivelmente serão mais tardios em relação ao acabamento de carcaça que animais de porte menor. O peso da carcaça frio teve correlação negativa com peso do pernil, e em geral os maiores correlações foram entre os componentes não-carcaça. Em sistema de confinamento os animais cruzados mostraram vantagens sobre animais puros deslanadas. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The difference between different genetic groups of sheep in creep feeding, confinement and aspects of carcass at different slaughter weights were evaluated. Fifty three entire males and females were used, from simple (43 animals) and twins (10 animals) lambings, from three different genetic groups, 24 animals Santa Inês (SI), 21 from a cross between Ilê de France x Santa Inês (ILE x SI), 8 from cross between Texel x Santa Inês (TX x SI). Slaughter occurred at a mean age of 8 months and live weights 30, 35, 40 and 45 Kg. The crossbred Texel and Ile de France animals showed superior growth rates, time to weaning, as well as quality aspects of the carcass than Santa Inês. In terms of best slaughter weight, the crossbred animals should be slaughtered at a mean live weight of 35 kg, while Santa Inês should be slaughtered at 40 kg. For females of all genetic groups, the slaughter weight should be lower than males within each genetic group due to earlier deposition of fat in the carcass. Correlations showed that fat depth and eye muscle área decreased with an increase in morphometric measures, indicating that larger animals are possibly less precoce in terms of carcass finishing compared to smaller animals. The cold carcass weight had a negative correlation with leg weight and in general larger correlations were with non-carcass components. In confinement crossbred animals were shown to have advantages over pure bred hair sheep.

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