Orientador: Reinaldo José da Silva / Banca: Christine Strussmann / Banca: Luciano Alves dos Anjos / Banca: Lúcia Helena O'Dwyer de Oliveira / Banca: Adjair Antonio de Nascimento / Resumo: O Brasil detém uma das maiores diversidades de lagartos do mundo, com 13 famílias e 236 espécies. Embora várias espécies do território brasileiro tenham sido investigadas nos últimos anos quanto a aspectos de história natural, o conhecimento acerca do parasitismo ainda é escasso concentrado em alguns ecossistemas, como Restingas e Floresta Atlântica. No presente trabalho, a presença de helmintos foi avaliada em diversas espécies de lagartos de três ecossistemas do Brasil Central: Cerrado, Pantanal e Amazônia. Os espécimes utilizados foram provenientes de cinco coleções científicas: Coleção de Vertebrados da Universidade Federal de Mato Grosso, Coleção de Herpetologia da Universidade Federal de Góias, Coleção Zoológica de Referência do Campus de Corumbá, Coleção Zoológica de Referência da Universidade Federal de Mato Grosso do Sul e Coleção Herpetológica Arlindo de Figueiredo Bedá. Após a necropsia, os helmintos foram identificados e depositados na Coleção Helmintológica do Instituto de Biociências da UNESP de Botucatu. Foram calculados os seguintes parâmetros de infecção: Prevalência (porcentagem de indivíduos infectados em cada espécie hospedeira) e a Intensidade média da infecção (número médio de parasitos nos lagartos infectados). 0 índice de diversidade de Brillouin foi calculado para cada espécie hospedeira. Relação entre o comprimento rostro-cloacal e número total de parasitas e diversidade de helmintos foi testada através de correlação de Pearson. Análises de agrupamento (UPGMA) foram realizadas para avaliar a similaridade (índice de Sorensen) entre as áreas dentro dos biomas utilizando apenas os dados qualitativos. Um total de 955 indivíduos pertencentes a 66 espécies de lagartos foram necropsiados, dos quais 45,8% estavam parasitados. A prevalência por ecossistema foi de 58% de animais parasitados na amostra do Cerrado... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Brazilian diversity of lizards includes 236 species, although many aspects of lizard biology, including parasitism are poorly studied. These few studies are concentrated mostly on animals from Atlantic forest and Restinga. Herein we investigate the helminth parasites of lizards in three biomes of central Brazil Cerrado (savanna-like vegetation), Pantanal (floodplain) and Amazonia (rain forest). We look for helminths within the body cavity, esophagus, stomach, lungs, small and large intestines of each specimen under a stereomicroscope. Nematodes were cleared in phenol; Cestoda, Trematoda and Acanthocephala were stained in Carmim, dehydrated graded alcohols, cleared in Creosote and after identification, these helminths were deposited in the Coleção Helmintológica do Instituto de Biociências da Unesp de Botucatu, Brazil. A total of 955 individuals from 66 species of lizards representing 9 families were assessed, wherein 45.8% displayed helminthes. In the Cerrado the prevalence was 58% (a total of 436 specimens from 39 species), whereas in the Pantanal the overall prevalence was 53.9% (221 individuals from 27 species) and 54.2% (295 specimens from 31 species) was the prevalence in the Amazon. A total of 156,435 helminths from 62 species, including 8 trematodes, 2 acanthocephalans, 5 cestodes and 47 nematodes were found. Tropiduridae, Teiidae an Scincidae were the most parasitized lizard families in all biomes, while Gymnophthalmidae were lesser infected. Lizards with larger body sizes tend to have richer diversity and abundance of helminths. Cluster analysis revealed higher similarities between different populations of the same lizard species than phylogenetically closest sympatric species / Doutor

Orientador: Semíramis Guimarães Ferraz Viana / Coorientador: Teresa Cristina Goulart de Oliveira-Sequeira / Banca: Silvana Torossian Coradi / Banca: Clélia Akiko Hiruma Lima / Banca: Sérgio de Albuquerque / Banca: Ary Fernandes Junior / Resumo: Entre os alvos mais promissores para o desenvolvimento de novos agentes antiparasitários, destacam-se as proteases que nos protozoários participam de processos metabólicos e fisiológicos, atuando como importantes fatores de virulência. Como a atividade dessas moléculas pode ser controlada por inibidores específicos, essas substâncias têm sido avaliadas quanto ao potencial terapêutico em diferentes infecções parasitárias, inclusive por Giardia. O presente estudo foi desenvolvido com o objetivo de avaliar o efeito in vitro dos inibidores de cisteína (IAA e E-64) e serina-proteases (antipaina, leupeptina e TLCK) sobre o crescimento, aderência, viabilidade e ultraestrutura de trofozoítos de cepa de Giardia isolada e axenizada em Botucatu. Para isso, trofozoítos foram incubados em meio contendo os inibidores a diferentes concentrações durante 24, 48 e 72 horas. Nos ensaios de crescimento e aderência, o número de trofozoítos foi estimado a partir de contagens em hemocitômetro, enquanto que a viabilidade celular e as alterações ultraestruturais foram avaliadas, respectivamente, pelo método de redução do MTT e por microscopia eletrônica de transmissão. De acordo com as observações feitas no presente estudo, todos os inibidores de proteases apresentaram efeito sobre o crescimento, aderência e viabilidade dos trofozoítos. Entretanto, melhor desempenho quanto à capacidade de reduzir os parâmetros avaliados foi demonstrado nos ensaios com os inibidores de cisteína-proteases, especialmente a IAA. As maiores porcentagens de inibição do crescimento e aderência e as menores taxas de viabilidade foram observadas após o tratamento com IAA. Da mesma forma, as alterações ultraestruturais mais marcantes ficaram a cargo deste inibidor, principalmente após exposição a 100 μM, quando foi possível... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The quest for new antiparasitic alternatives has led researchers to base their studies on insights into biology, host-parasite interactions and pathogenesis. In light of this, the proteolytic enzymes or proteases have excited the researcher's interest, once they have been identified as important virulence factors as well as potential chemotherapeutic targets in parasites. Considering that proteases are naturally regulated by specific inhibitors, these substances have been evaluated for their therapeutic potential in parasitic infections including Giardia. In this way, we proposed to evaluate the in vitro effect of inhibitors of cysteine (IAA and E-64) and serine proteases (antipain, leupeptin and TLCK) on growth, adherence, viability and ultrastructure of Giardia trophozoites of a strain isolated and axenized in Botucatu. For this, trophozoites were incubated in medium containing the inhibitors at various concentrations for 24, 48 and 72 hours. In growth and adherence assays, the number of trophozoites was estimated microscopically in a haemocytometer, whereas cell viability and ultrastructural changes were evaluated, respectively, by the method of MTT and transmission electron microscopy. In this study, all protease inhibitors showed effect on growth, adherence and viability of trophozoites. However, better performance in their ability to reduce the parameters assessed was demonstrated in experiments with cysteine proteases inhibitors, especially IAA. The highest rates of growth and adhesion inhibition and the lowest rates of viability were detected in the IAA-treated cultures. Likewise, ultrastructural changes were most marked with this inhibitor, especially after exposure to 100 μM, when it was possible to demonstrate strong nuclear and cytoplasmic disorganization and drastic changes in... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-01-09Bitstream added on 2014-06-13T21:00:45Z : No. of bitstreams: 1 inacio_sv_me_araca.pdf: 144800 bytes, checksum: aaf49f07f683735e22c907736ab26fd7 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / No primeiro capítulo foi abordada a importância, assim como os aspectos da etiologia, biologia, epidemiologia e diagnóstico da infecção por Cryptosporidium spp. No segundo capítulo, um total de 101 amostras fecais de éguas das raças Quarto de Milha, Mangalarga Marchador, Paint Horse, Crioula e Pampa e seus respectivos potros foram analisados pela técnica de Kinyoun. A partir dos resultados obtidos neste estudo foi elaborado um artigo científico a ser submetido à Revista Brasileira de Parasitologia. A ocorrência da infecção por Cryptosporidium detectada pela técnica de Kinyoun foi de 20,8% (21/101) para potros e 17,8% (18/101) para éguas. Adicionalmente, observou-se que potros com idade superior a dois meses, independentemente da raça analisada, bem como os animais da raça Mangalarga são menos susceptíveis à ocorrência de Cryptosporidium spp / In the first chapter, the importance and aspects related to the etiology, biology, epidemiology and diagnosis of infection by Cryptosporidium spp. were addressed. The second chapter reports the analysis, using Kinyoun stain, of a total of 101 fecal samples from mares of the breeds Quarter Horse, Mangalarga Marchador, Paint Horse, Crioula and Pampa and their respective foals. The results obtained in this study were used to prepare a scientific paper to be submitted to the Brazilian Journal of Veterinary Parasitology. Occurrence of infection by Cryptosporidium, according to Kinyoun stain, was 20.8% (21/101) for foals and 17.8% (18/101) for mares. In addition, foals older than two months, regardless of the analyzed breed, as well as Mangalarga animals, are less susceptible to the occurrence of Cryptosporidium spp

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:28:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T13:56:30Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / A Doença de Chagas (DC) foi descrita por Carlos Chagas em 1909. É causada por um parasita T. cruzi, transmitido por triatomíneos, por transfusão de sangue, vertical e por via oral. A DC tem duas fases: aguda e crônica. A evolução para a forma cardíaca ocorre em cerca de 30% dos casos crônicos e é a maior responsável pela mortalidade na doença de Chagas crônica. O objetivo deste trabalho foi estudar a cardiopatia chagásica em pacientes do Tocantins, comparando com outras cardiopatias e pacientes assintomáticos do ponto de vista de exames complementares não invasivos usando energias radiantes, como ecocardiografia e RX e o ECG. Houve uma prevalência de 9,5% de pacientes chagásicos atendidos no ambulatório de cardiologia em Araguaína Tocantins, sendo que 7.3% na forma crônica e 2,21% na forma indeterminada .Dos pacientes crônicos, incluídos no estudo 50% tinham megaesôfago e 4 megacolon (20%). A maioria dos pacientes não apresentou história familiar positiva para DC, nem era tabagista ou etilista. As principais alterações eletrocardiográficas encontradas referem-se à condução. A avaliação do ICT, do chagásico crônico mostrou se aumentada em 40% dos pacientes, 40% apresentam alterações esofágicas e 20% dos pacientes s apresentavam megacolon . O ecocardiograma mostrou-se alterado em 42%). 27% dos pacientes apresentaram FE abaixo de 55% alterada. Alterações da contratilidade segmentar e Assincronia septal foram encontradas em 80% dos chagásicos crônicos. Em 80% dos pacientes foi verificada disfunção diastólica. As alterações valvares ocorreram em 75%. As alterações eletrocardiográficas,ocorreram em 80% dos pacientes com CCC, , enquanto nas outras cardiopatias tinham alterações no ECG. Observou-se que no grupo dos chagásico a diminuição da fração de ejeção esta correlacionada a maior incidência de arritmias alem da disfunção diastólica e relacionada com aumento do atrio esquerdo, ICT tem correlação com a FE e tamanho de VE e AE. Os ECG alterados também guardam relação com as disfunções. / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:28:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T13:57:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / A leishmaniose visceral (LV) é um problema de saúde pública, que tem incidência elevada em crianças. No ano de 2009 a cidade de Araguaína - Tocantins foi a cidade com maior número de casos de LV. Este estudo tem como objetivo identificar a expansão geográfica da LV no município de Araguaína, identificar o perfil epidemiológico dos casos de LV atendidos no Hospital de Doenças Tropicais (HDT) de Araguaína, principalmente de crianças e pessoas maiores de 60 anos, que representam população de risco para a gravidade da doença. A partir do número de casos notificados de 2004 a 2009, foram elaborados mapas sobre a evolução da distribuição geográfica da LV nos bairros de Araguaína, também foi realizado estudo epidemiológico, laboratorial e evolutivo dos casos de LV em crianças e pessoas acima de 60 anos atendidas no HDT. Dentre as crianças, nas menores de um ano, também foi avaliado o quadro clínico. Foram utilizados os dados do Sistema de Informação de Agravos de Notificação (SINAN) dos casos notificados no HDT, nos anos de 2004 a 2009. Foram registrados 983 casos, sendo 391 de crianças (39,8%) de zero a cinco anos e destas 71 notificações de menores de um ano (18%). Neste mesmo período foram notificados 22 casos de LV em maiores de 60 anos (2,2%). A maioria das notificações foi da cidade de Araguaína (62,5%). Os casos de LV ocorreram na maioria dos bairros de Araguaína, iniciaram nos bairros centrais e depois se expandiram para a periferia, onde fizeram o maior número de casos. Com relação ao sexo dos pacientes, houve uma discreta incidência no sexo masculino, principalmente na faixa etária dos maiores de 60 anos. O diagnóstico de LV teve confirmação laboratorial na maioria dos casos, porém o exame utilizado foi na maioria das vezes o exame sorológico, que não é o melhor método diagnóstico. O tratamento inicial da maioria dos pacientes foi com o antimoniato pentavalente. A maioria dos pacientes evoluiu para a cura. Este trabalho demonstra a expansão geográfica da LV no município de Araguaína, atingindo principalmente crianças. / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:53:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T13:58:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Atualmente, milhões de pessoas, por todo o globo, estão sob risco de serem infectados por um protozoário transmitido vetorialmente por pequenos insetos flebotomíneos. Este parasita é a Leishmania spp., causadora de uma patologia de amplo espectro, que varia desde a moléstia cutânea (tegumentar) até a visceral (kala-azar). A leishmaniose cutânea é a manifestação clínica de maior ocorrência (mais de 90% dos casos). A radiação ionizante, gerada em fonte de 60Co, tem sido utilizada com sucesso para promover alterações físico-químicas em diferentes protozoários, incluindo a Leishmania spp. Em trabalhos anteriores determinou-se que formas promastigotas de Leishmania amazonensis, irradiadas com diferentes doses de radiação gama, perdem sua viabilidade mantendo, porém, sua imunogenicidade. No presente trabalho, estudouse a utilização da radiação ionizante como ferramenta na seleção de formas metacíclicas do parasita em cultura axênica para a possível produção de imunógenos irradiados mais eficientes. Os resultados demonstram que culturas irradiadas com 400 Gy de radiação gama, possuem uma concentração de aproximadamente 75% de parasitas metacíclicos, capazes de produzir, in vitro, uma infecção que mimetiza a ocorrida naturalmente. Estes parasitas irradiados têm sua estrutura celular interna modificada mantendo, entretanto, seu arcabouço externo intacto. Camundongos de uma linhagem suscetível imunizados com leishmanias irradiadas com diferentes doses tiveram sua produção de imunoglobulinas aumentada, e mantiveram os títulos elevados após o desafio com parasitas não irradiados. Em outras linhagens pesquisadas este padrão se manteve, porém em títulos menores, sendo que camundongos imunodeficientes não responderam à imunização nem ao desafio. / Tese (Doutoramento) / IPEN/T / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:52:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T13:58:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / A Leishmaniose Visceral Humana (LVH) é uma protozoonose sistêmica grave que tem apresentado mudança no comportamento epidemiológico, com uma tendência crescente no Brasil. Na Região Norte, com a criação do Estado do Tocantins em 1989, houve aumento da incidência de LV em decorrência das modificações ecoepidemiológicas. Foi realizado um estudo descritivo de corte transversal para avaliar o quadro da LVH no município de Araguaína (TO) no período de janeiro de 2007 a agosto de 2010. Adicionalmente, foram realizados ensaios para comparar as abordagens diagnósticas sorológicas para o diagnóstico da doença. Na distribuição dos casos de LVH nos municípios do norte do estado do Tocantins, Araguaína representa 79,8% no total dos casos no período de 2.007 a agosto de 2.010. Os resultados deste estudo revelaram que, nesse período, 769 casos foram confirmados, sendo que 98,7% foram de casos novos. Houve um predomínio do sexo masculino de 57,8% e a faixa etária mais acometida foi a de 0 a 14 anos, com 71,3% dos casos notificados. Na distribuição por zona de residência, foram notificados 98,5% dos casos na zona urbana, mostrando a urbanização da doença. Nos ensaios, foram utilizadas uma abordagem usual da rede do SUS: um ensaio de imunofluorescência indireta (IFI), um ELISA convencional, somados a um ELISA dissociativo. Os ensaios de ELISA apresentaram alta reprodutibilidade. Os pacientes positivos à IFI apresentaram uma frequência de 4% de falso-positivos quando testados em ambos os ELISA. Entre os pacientes suspeitos, houve uma alta frequência de positivos ao ELISA, maior no ELISA dissociativo do que no ELISA convencional. Na população assintomática, houve um achado de amostras positivas ao ELISA dissociativo. A presença de imunocomplexos em pacientes assintomáticos no início da doença ou sua presença em pacientes com resposta humoral menos intensa, como crianças, pode explicar estes achados de maior positividade no ELISA dissociativo. A confirmação destes resultados depende da pesquisa parasitológica em pacientes positivos ao ELISA dissociativo. Estes resultados mostram a importância de novas abordagens sorológicas no diagnóstico da LVH que viabilizariam uma triagem de paciente para diagnóstico parasitológico invasivo. / Tese (Doutoramento) / IPEN/T / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:50:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:01:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 10454.pdf: 5255238 bytes, checksum: cd969166071f613d43cc12878109f140 (MD5) / Tese (Doutoramento) / IPEN/T / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:55:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:04:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Dissertação (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP / FAPESP:06/53634-3

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:27:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:05:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Leishmanioses são um complexo de doenças infecciosas causadas por protozoários intramacrofágicos do gênero Leishmania, fatal se não tratadas adequadamente. Os antimoniais pentavalentes são os medicamentos de primeira escolha para o tratamento, apesar de sua toxicidade e seu mecanismo de ação pouco esclarecido. Uma terapia mais eficaz pode ser conseguida pelo direcionamento de fármacos antileishmania para os locais de infecção. Os lipossomas são vesículas lipídicas que promovem melhora na eficácia e na ação de fármacos na célula alvo. Os lipossomas são capturados preferencialmente pelas células do sistema mononuclear fagocitário (SMF). O objetivo deste estudo foi desenvolver uma formulação de antimoniato de meglumina lipossomal, constituído por fosfatidilserina e estudar sua farmacocinética em animais sadios para esclarecer seu metabolismo e distribuição. As análises quantitativas de antimônio em lipossomas demonstram que Análise por Ativação Neutrônica foi a técnica mais sensível com cerca de 100 % de precisão. Todas as formulações de lipossomas apresentaram um tamanho de diâmetro médio de 150 nm. A determinação da CE50 em macrófagos infectados mostrou que as formulações de antimoniato de meglumina encapsulado em lipossomas foram entre 10 - 63 vezes mais eficazes do que a fármaco livre, indicando maior índice de seletividade. Por microscopia de fluorescência, foi verificada uma maior internalização de lipossomas fluorescentes em macrófagos infectados durante um curto tempo de incubação em comparação com macrófagos não infectados. A biodistribuição do antimoniato de meglumina irradiado encapsulado em lipossomas contendo fosfatidilserina mostrou que a formulação lipossomal promoveu um direcionamento seletivo do antimônio para tecidos do SMF, além do que manteve as doses elevadas nos órgãos por um período prolongado. Em conclusão, estes dados sugerem que o antimoniato de meglumina encapsulado em lipossomas apresentou maior eficácia do que a fármaco não lipossomal contra a infecção por Leishmania. O desenvolvimento de formulações lipossomais pode ser uma nova alternativa para a quimioterapia de doenças infecciosas, especialmente Leishmanioses, já que são usados como sistemas carreadores para entrega sustentada e direcionada de fármacos ao local da infecção. / Tese (Doutoramento) / IPEN/T / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP