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Atividade antimicrobiana do peptÃdeo sintÃtico LYS-A1 frente a estreptococos orais / Antimicrobial activity of the synthetic peptide LYS-A1 against oral streptococciBruno Rocha da Silva 22 February 2013 (has links)
CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A cÃrie dental à conceituada como uma doenÃa infectocontagiosa, crÃnica e multifatorial na qual ocorre uma desmineralizaÃÃo progressiva das estruturas dentais com consequente dor e perda do elemento dental. à considerada um problema de saÃde pÃblica em todo mundo devido sua incidÃncia e consequÃncias orais e sistÃmicas. Dessa forma, novos mÃtodos de controle microbiano tÃm sido pesquisados com vista à reduÃÃo do nÃmero de casos. Os peptÃdeos antimicrobianos sÃo molÃculas presentes em diversos seres vivos e possuem uma alta atividade biocida frente a diversos microrganismos patogÃnicos. O peptÃdeo Lys-[Trp6]-Hy-A1 (Lys-a1), derivado sintÃtico do peptÃdeo Hy-A1, isolado inicialmente da espÃcie Hypsiboas albopunctatus, à uma molÃcula com atividade antimicrobiana descrita na literatura. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial antibacteriano do peptÃdeo sintÃtico Lys-a1 sobre crescimento planctÃnico e em biofilme de bactÃrias orais. As metodologias utilizadas para avaliaÃÃo do potencial antimicrobiano foram: determinaÃÃo da concentraÃÃo inibitÃria mÃnima (CIM) e concentraÃÃo bactericida mÃnima (CBM) em placas de poliestireno para o crescimento em suspensÃo; e quantificaÃÃo de biomassa por cristal violeta e contagem de unidades formadoras para crescimento em biofilme. Os micro-organismos, S. oralis, S. sanguinis, S. parasanguinis, S. salivarius, S. mutans e S. sobrinus, foram cultivados em Brain Heart Inffusion caldo suplementado com 1% de sacarose (BHIs) a 37 ÂC sob atmosfera com 10% de CO2. O peptÃdeo foi solubilizado em Ãcido acÃtico 0,1% (v/v) em diferentes concentraÃÃes (500 a 1,9 Âg.mL-1). Os grupos controle dos ensaios foram meio de cultura BHIs (controle negativo) e Gluconato de Clorexidina 0,12% (controle positivo). O peptÃdeo testado apresentou um destacado efeito antimicrobiano, sendo capaz de inibir o crescimento planctÃnico e em biofilme de todas as cepas testadas mesmo em baixas concentraÃÃes. Assim, o peptÃdeo Lys-a1 à uma importante fonte para possÃveis agentes antimicrobianos, com Ãnfase no controle e prevenÃÃo de biofilmes microbianos, um dos fatores mais importantes para o desenvolvimento do processo cariogÃnico. / Dental caries is defined as an infectious, chronic and multifactorial disease, in which there is a progressive demineralization of tooth structure with consequent pain and dental loss. It is considered a major public health problem worldwide because its high incidence, besides its oral and systemic consequences. Thus, new methods of microbial control have been investigated to reduce the number of cases. Antimicrobial peptides are molecules present in many living beings and have a high biocidal activity against various pathogenic microrganisms. The peptide Lys-[Trp6]-Hy-A1 (Lys-a1) is a synthetic derivative of the peptide Hy-A1, initially isolated from the species Hypsiboas albopunctatus. According to previous research, it is a molecule with broad antimicrobial activity. The objective of this study was to evaluate the antimicrobial activity of the synthetic peptide Lys-a1 on the planktonic and biofilm growth of oral bacteria. The methods used to evaluate antimicrobial activity include the following: determination of the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) in microtiter plates for growth in suspension and quantification of biomass by crystal violet staining and counting of colony forming units for biofilm growth. The microorganisms S. oralis, S. sanguinis, S. parasanguinis, S. salivarius, S. mutans and S. sobrinus were grown in Brain Heart Infusion broth supplemented with 1% sucrose (BHIs) at 37 ÂC under atmospheric pressure with 10% CO2. The peptide was solubilized in 0.1% acetic acid (v/v) at various concentrations (500 to 1.9 Âg.mL-1). Chlorhexidine gluconate 0.12% was used as the positive control, and BHIs culture medium was used as the negative control. The tested peptide demonstrated a remarkable antimicrobial effect, inhibiting the planktonic and biofilm growth of all strains tested, even at low concentrations. Thus, the peptide Lys-a1 is an important source for potential antimicrobial agents, especially for the control and prevention of microbial biofilms, which is one of the most important factors in cariogenic processes.
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