A clonagem bovina por transferência nuclear de células somáticas (SCNT) é uma biotécnica ainda pouco eficiente devido aos elevados custos em sua aplicação e às altas perdas gestacionais oriundas de alterações do desenvolvimento embrionário e placentário. Desse modo, o uso comercial da clonagem bovina por SCNT é pouco viável atualmente, sendo aplicada majoritariamente em pesquisa. Nesse contexto, o presente trabalho objetivou estudar a eficiência de um programa de clonagem por SCNT, identificando pontos críticos no desenvolvimento do concepto, assim como detectar diferentes apresentações gestacionais induzidas por esta biotécnica. Para isso, 215 embriões clonados foram transferidos para receptoras de embriões e 30 prenhezes foram confirmadas pela detecção de batimentos cardíacos no concepto por ultrassonografia transretal, totalizando 14.0% de índice de gestação. Em 6.1% das receptoras foi identificado por ultrassonografia sinais das vesículas embrionárias sem presença de batimento cardíaco (gestações anembrionadas) e em 7.4% das receptoras não foram detectados sinais do concepto embora o CL tenha sido mantido por mais de 25 dias pós-ovulação (CLs persistentes). Este estudo mostrou que os maiores índices de perdas gestacionais ocorreram antes do dia 25 (dia 0 = ovulação). Ao analisar as perdas gestacionais após o diagnóstico de gestação (dia 25 a 35), um maior número de perdas ocorreu entre os dias 30 e 40 (26.7%) e entre os dias 40 e 60 (20.0%), não sendo identificada a formação de placentônios nessas prenhezes. Além disso, as receptoras gestantes que desenvolveram placentônios prolongaram a gestação após esses períodos críticos, sendo detectado um novo aumento da frequência de perdas no terço final da gestação. Sendo assim, o presente estudo confirma a baixa eficiência da técnica de clonagem bovina por SCNT e identifica os períodos críticos do desenvolvimento do concepto, sendo eles o período imediato pós-reconhecimento materno da gestação, anteriormente aos 25 dias, o período de completo desenvolvimento placentário e formação de placentônios, entre os dias 30 e 60, e o período de aumento da exigência funcional da placenta devido ao acelerado desenvolvimento do feto no terço final da gestação. Além disso, pela primeira vez na literatura é relatada a ocorrência das apresentações gestacionais aberrantes, as prenhezes anembrionadas e aquelas com CL persistente após a transferência de embriões clonados por SCNT. Novos estudos são necessários para um melhor entendimento da origem e das causas dessas apresentações, as quais podem ser decorrentes de perdas gestacionais precoces ou mau funcionamento de tecidos do concepto como o trofoectoderma e a massa celular interna. / Cloning by somatic cell nuclear transfer (SCNT) in cattle is still an inefficient biotechnique due to the high costs for its application and also to the high pregnancy losses resulted from changes in embryonic and placental development. Thus, the commercial use of the bovine cloning by SCNT is not commercially feasible, being mainly applied for research interests. In this context, the present study investigated the efficiency of a cloning program by SCNT with the objective of to identify the critical periods for conceptuses development and to detect different gestational presentations induced by this biotechnique. Two hundred fifteen embryos were transferred into embryo recipient cows and 30 pregnancies were confirmed by heart beats detection in the embryo by transrectal ultrasonography, totaling 14.0% of pregnancy rate. 6.1% of the recipients were diagnosed presenting embryonic vesicles without the presence of heart beats (anembryonic gestations) and 7.4% of the recipients did not present any signal of the conceptus and the CL kept active for more than 25 days post-ovulation (persistent CL). This study showed that the higher rates of embryo loss occurred before day 25 (day 0 = ovulation). Analyzing the data of pregnancy losses after diagnosis of pregnancy (days 25 to 35), higher amount of losses occurred between days 30 and 40 (26.7%) and between 40 and 60 (20.0%). Placentomes were not identified in any of these pregnancies. In addition, the recipient in which presented developed placentonios had their pregnancies prolonged. However, a new increase in the frequency of losses was observed in the final three months of gestation. Thus, this study confirms the low efficiency of bovine cloning by SCNT and identified the critical periods for the development of the conceptus, as the period immediately after maternal recognition of pregnancy, before 25 days of pregnancy, the period of full placental development and placentomes development, between days 30 and 60, and the period of placental functional requirements increase due to the rapid development of the fetus, during the last three months of gestation. Also, this work for the first time in the literature reported the occurrence of aberrant gestational presentations, the anembryonic and persistent CL gestations, after embryo transfer of bovine cloned embryos by SCNT. Further studies are necessary to understand the origin and causes of these aberrant gestational presentations, which may be due to early pregnancy loss or malfunction of conceptus tissues as trophoectoderm and inner cell mass.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-07Bitstream added on 2014-06-13T20:57:57Z : No. of bitstreams: 1 aono_fhs_me_botfmvz.pdf: 369733 bytes, checksum: 9c1273e6b7251a105aef760ce4a3a576 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O objetivo deste estudo foi determinar a incidência de perdas gestacionais em vacas de corte e avaliar o efeito da vacina contra IBR/BVD/Leptospirose (5,0 mL, Cattle Master® 4 + L5) na taxa de prenhez e perdas de gestação de vacas submetidas à Inseminação Artificial em Tempo Fixo [IATF, Protocolo; D0: benzoato de estradiol (2mg, Estrogin) e inserção do dispositivo intravaginal de P4 (CIDR, P4,1,9g); D7: dinoprost trometamina (PGF2α, 12,5mg, Lutalyse); D9: retirada do dispositivo intravaginal de P4, administração cipionato de estradiol (0,5mg, ECP) e remoção temporária de bezerros (RTB) por 48 horas; D11: IATF]. A avaliação de gestação foi realizada aos 30 e 120 dias pós IATF, para identificação de vacas prenhas e identificação de perdas gestacionais. No EXP1, foram avaliadas 8725 vacas para determinar a taxa de perda de gestação entre 30 e 120 dias. Foram usadas vacas pertencentes a dezenove propriedades com programas sanitários diferentes: sem imunização para doenças da reprodução (Grupo Sem, n = 7.311); com imunização semestral para Leptospirose (Grupo Leptospirose, n = 738); ou com imunização semestral para leptospirose e anual para Rinotraqueíte Infecciosa Bovina e Diarréia Viral Bovina (Grupo IBR/BVD/Leptospirose, n = 676). No EXP2 (n=1968) e EXP3 (n=2793), as vacas foram divididas aleatoriamente dentro do mesmo lote para receberem ou não a vacina contra IBR/BVD/Leptospirose (5,0 mL, Cattle Master®4 + L5): a primeira dose foi aplicada no início do protocolo de IATF e a segunda dose no momento do primeiro diagnóstico gestacional (US1/30d). No EXP2 as fazendas não utilizavam nenhum tipo de vacina preventiva para as doenças da reprodução, já no EXP3 as fazendas utilizavam vacinação contra Leptospirose. No EXP 4 foram utilizadas 367 vacas da raça Nelore... / The aim of this study was to determine the incidence of pregnancy loss in beef cows, and evaluate the effect of the vaccine against IBR/BVD/Leptospirosis (5.0 mL, Cattle Master ® 4 + L5) in pregnancy rate and pregnancy loss of cows subjected to fixed-time artificial insemination [TAI, Protocol; D0: estradiol benzoate (2mg, Estrogin) and insertion of intravaginal P4 device (CIDR, P4, 1.9 g); D7: dinoprost tromethamine (PGF2, 5mg Lutalyse), D9: withdrawal of intravaginal P4 device, administration of estradiol cypionate (0.5 mg, ECP®) and temporary calf removal for 48 hours; D11: TAI]. The pregnancy diagnosis was performed at 30 and 120 days after TAI for identify cows pregnant and pregnancy loss respectively. In EXP1 8725 cows were evaluated to determine the rate of pregnancy loss between 30 and 120 days. The cows were from nineteen farms with different health programs. Cows without immunization reproductive diseases (Group No, n = 7311), with immunization semester to leptospirosis (Leptospirosis Group, n = 738) or semester immunization against leptospirosis and annual against infectious rhinotracheitis bovine and bovine viral diarrhea (Group IBR/BVD/Leptospirosis, n = 676). In EXP2 (n = 1968) and EXP3 (n = 2793) cows were randomly assigned within the same batch to receive or not vaccine against IBR/BVD/Leptospirosis (5.0 ml, 4 Cattle Master® L5 +): the first dose was administered at the beginning of the TAI protocol and the second dose at the time of first diagnosis of pregnancy (US1/30d). In EXP2 farms did not use any kind of preventive vaccine for diseases of reproduction, as in exp3 farms used vaccination against Leptospirosis. In EXP 4 367 nelore cows were submitted to TAI, the animals were randomly assigned to receive the vaccine at different times. Animals from groups:...(Complete abstract click electronic access below)

A clonagem bovina por transferência nuclear de células somáticas (SCNT) é uma biotécnica ainda pouco eficiente devido aos elevados custos em sua aplicação e às altas perdas gestacionais oriundas de alterações do desenvolvimento embrionário e placentário. Desse modo, o uso comercial da clonagem bovina por SCNT é pouco viável atualmente, sendo aplicada majoritariamente em pesquisa. Nesse contexto, o presente trabalho objetivou estudar a eficiência de um programa de clonagem por SCNT, identificando pontos críticos no desenvolvimento do concepto, assim como detectar diferentes apresentações gestacionais induzidas por esta biotécnica. Para isso, 215 embriões clonados foram transferidos para receptoras de embriões e 30 prenhezes foram confirmadas pela detecção de batimentos cardíacos no concepto por ultrassonografia transretal, totalizando 14.0% de índice de gestação. Em 6.1% das receptoras foi identificado por ultrassonografia sinais das vesículas embrionárias sem presença de batimento cardíaco (gestações anembrionadas) e em 7.4% das receptoras não foram detectados sinais do concepto embora o CL tenha sido mantido por mais de 25 dias pós-ovulação (CLs persistentes). Este estudo mostrou que os maiores índices de perdas gestacionais ocorreram antes do dia 25 (dia 0 = ovulação). Ao analisar as perdas gestacionais após o diagnóstico de gestação (dia 25 a 35), um maior número de perdas ocorreu entre os dias 30 e 40 (26.7%) e entre os dias 40 e 60 (20.0%), não sendo identificada a formação de placentônios nessas prenhezes. Além disso, as receptoras gestantes que desenvolveram placentônios prolongaram a gestação após esses períodos críticos, sendo detectado um novo aumento da frequência de perdas no terço final da gestação. Sendo assim, o presente estudo confirma a baixa eficiência da técnica de clonagem bovina por SCNT e identifica os períodos críticos do desenvolvimento do concepto, sendo eles o período imediato pós-reconhecimento materno da gestação, anteriormente aos 25 dias, o período de completo desenvolvimento placentário e formação de placentônios, entre os dias 30 e 60, e o período de aumento da exigência funcional da placenta devido ao acelerado desenvolvimento do feto no terço final da gestação. Além disso, pela primeira vez na literatura é relatada a ocorrência das apresentações gestacionais aberrantes, as prenhezes anembrionadas e aquelas com CL persistente após a transferência de embriões clonados por SCNT. Novos estudos são necessários para um melhor entendimento da origem e das causas dessas apresentações, as quais podem ser decorrentes de perdas gestacionais precoces ou mau funcionamento de tecidos do concepto como o trofoectoderma e a massa celular interna. / Cloning by somatic cell nuclear transfer (SCNT) in cattle is still an inefficient biotechnique due to the high costs for its application and also to the high pregnancy losses resulted from changes in embryonic and placental development. Thus, the commercial use of the bovine cloning by SCNT is not commercially feasible, being mainly applied for research interests. In this context, the present study investigated the efficiency of a cloning program by SCNT with the objective of to identify the critical periods for conceptuses development and to detect different gestational presentations induced by this biotechnique. Two hundred fifteen embryos were transferred into embryo recipient cows and 30 pregnancies were confirmed by heart beats detection in the embryo by transrectal ultrasonography, totaling 14.0% of pregnancy rate. 6.1% of the recipients were diagnosed presenting embryonic vesicles without the presence of heart beats (anembryonic gestations) and 7.4% of the recipients did not present any signal of the conceptus and the CL kept active for more than 25 days post-ovulation (persistent CL). This study showed that the higher rates of embryo loss occurred before day 25 (day 0 = ovulation). Analyzing the data of pregnancy losses after diagnosis of pregnancy (days 25 to 35), higher amount of losses occurred between days 30 and 40 (26.7%) and between 40 and 60 (20.0%). Placentomes were not identified in any of these pregnancies. In addition, the recipient in which presented developed placentonios had their pregnancies prolonged. However, a new increase in the frequency of losses was observed in the final three months of gestation. Thus, this study confirms the low efficiency of bovine cloning by SCNT and identified the critical periods for the development of the conceptus, as the period immediately after maternal recognition of pregnancy, before 25 days of pregnancy, the period of full placental development and placentomes development, between days 30 and 60, and the period of placental functional requirements increase due to the rapid development of the fetus, during the last three months of gestation. Also, this work for the first time in the literature reported the occurrence of aberrant gestational presentations, the anembryonic and persistent CL gestations, after embryo transfer of bovine cloned embryos by SCNT. Further studies are necessary to understand the origin and causes of these aberrant gestational presentations, which may be due to early pregnancy loss or malfunction of conceptus tissues as trophoectoderm and inner cell mass.

Submitted by Oliveira Santos Dilzaná (dilznana@yahoo.com.br) on 2014-01-21T13:40:06Z No. of bitstreams: 1 VÍVIAN VOLKMER PONTES.pdf: 4564074 bytes, checksum: 60dcf7571f664deb09ea5711b8570d64 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Portela (anapoli@ufba.br) on 2014-02-03T14:22:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 VÍVIAN VOLKMER PONTES.pdf: 4564074 bytes, checksum: 60dcf7571f664deb09ea5711b8570d64 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-03T14:22:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 VÍVIAN VOLKMER PONTES.pdf: 4564074 bytes, checksum: 60dcf7571f664deb09ea5711b8570d64 (MD5) / A experiência de uma perda gestacional involuntária representa uma ruptura da gestação em desenvolvimento, daquilo que se esperava e que estava na iminência de acontecer: o tornar-se mãe e o nascimento de um bebê. Deste modo, implica em descontinuidade do desenvolvimento do self, desafiando entendimentos e expectativas que haviam sido construídos acerca de si mesmo e do mundo. A repetição dessas rupturas ao longo da trajetória reprodutiva ameaça o sentido do self, intensifica o nível de ambivalência e maximiza a incerteza em relação ao futuro. O presente estudo consistiu em um aprofundamento teórico e empírico sobre como o self constrói continuidade através de rupturas sucessivas ao longo da trajetória reprodutiva. Implicou entender as dinâmicas do self dialógico no fluxo do tempo, e analisá-las com o intuito de identificar processos de reorganização do self a fim de se manter coeso – apesar das rupturas, das recorrentes descontinuidades. Tendo em vista esta problemática, optou-se por tratá-la a partir do referencial teórico do Construtivismo Semiótico-Cultural, uma perspectiva teórico-metodológica que focaliza a construção inter e intrapessoal da subjetividade humana individual. Como método, realizou-se um estudo de cunho etnográfico realizado em dois contextos distintos de assistência à saúde da mulher e/ou casal com diagnóstico de aborto de repetição, na cidade do Salvador/BA, sendo um vinculado à rede pública e o outro à rede privada. No que concerne às estratégias de coleta de dados, destaque especial foi concedido às entrevistas narrativas. Já com relação à análise dos dados, foi utilizado o Modelo de Equifinalidade de Trajetórias (TEM). Participaram deste estudo dez mulheres com história de perdas gestacionais recorrentes. Após a realização de comparações descritivas entre as trajetórias reprodutivas das participantes – com a finalidade de entender os processos de rupturas e reconstruções na cultura pessoal através da aplicação do TEM –, foi construído um conceito que pudesse oferecer generalidade para o específico dessa experiência. Afinal, a experiência recorrente de rupturas significativas, exige um tipo específico de processo semiótico, que no presente trabalho foi denominado de estratégias semióticas de reparação dinâmica do self. Essas estratégias, ao serem utilizadas, levam à construção de signos específicos – os signos reparadores –, que têm o poder de restaurar a conexão dos fragmentos da trajetória interrompida, construindo alguma articulação entre esses fragmentos e resgatando certo senso de continuidade. Os signos reparadores promovem, assim, a construção de significado para o momento presente, a reconstrução de significados atribuídos às experiências no passado (perdas anteriores) e nova orientação para a gama aceitável de construções de significados orientados para o futuro, conectando-os, relançando-os numa nova narrativa, sempre singular – e, de certo modo, unificada e coerente –, acerca de si mesmo, da sua própria vida e do seu próprio “destino”. The experience of an involuntary pregnancy loss represents a rupture related to what was expected and what was about to happen: becoming a mother and the birth of a baby. Thus, this event implies discontinuity the development of self, challenging understandings and expectations that had been built about the person and the world. The repetition of these ruptures along the trajectory reproductive threatens the sense of self, intensifies the level of ambivalence and maximizes uncertainty about the future. This study consisted in a theoretical and empirical deepening about how the self builds continuity through successive ruptures along the reproductive trajectory. It was set up understand the dynamics of the dialogical self in the flow of time, and analyze them in order to identify processes of reorganization of the self in order to remain cohesive - despite the ruptures, the recurrent discontinuities. In view of this problem, we chose to approach it from the theoretical framework of Semiotic-Cultural Constructivism, a theoretical-methodological framework that focuses on building inter and intrapersonal individual human subjectivity. As a method, the ethnographic study was conducted in two distinct contexts of health care for women and / or couples with a diagnosis of recurrent abortion, in Salvador / BA: one linked to the public network and another network private. Concerning data collection strategies, special attention was given to the narrative interviews. Regarding data analysis, we used the Trajectories Equifinality Model (TEM). The participants of study were ten women with a history of recurrent pregnancy loss. After conducting descriptive comparisons between reproductive trajectories of participants - in order to understand the processes of disruptions and reconstruction in personal culture through the application of TEM - was built a concept that could provide for the generality of this specific experience. After all, the recurring experience of significant disruptions requires a specific type of semiotic process, which in this work was named Semiotic Strategies of Dynamic Self-Repairing. These strategies, when used, lead to the construction of specific signs – repairing signs – who have the power to restore the connection of the fragments of the interrupted trajectory, building a link between these fragments and rescuing some sense of continuity. Repairing signs thereby promotes the construction of meaning for the present moment, the reconstruction of meanings assigned to experiences in the past (previous losses) and new guidance for the acceptable range of constructions of meaning future-oriented, connecting them, relaunching them into a new narrative, always singular - and somehow unified and consistent - about yourself, your own life and your own "destiny".