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Caracterização genotípica e sequenciamento de enterotoxinas (HBL, NHE e BceT) de linhagens de B. thuringiensis isoladas no estado do Amazonas

Pessoa, Marcos Cézar Fernandes 15 July 2009 (has links)
Submitted by Geyciane Santos (geyciane_thamires@hotmail.com) on 2015-07-03T15:08:24Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Marcos César Fernandes Pessoa.pdf: 6006738 bytes, checksum: 6bf14f8b1d3cb3d2908ac7e37e22c668 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-13T15:51:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Marcos César Fernandes Pessoa.pdf: 6006738 bytes, checksum: 6bf14f8b1d3cb3d2908ac7e37e22c668 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-13T15:56:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Marcos César Fernandes Pessoa.pdf: 6006738 bytes, checksum: 6bf14f8b1d3cb3d2908ac7e37e22c668 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-13T15:56:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Marcos César Fernandes Pessoa.pdf: 6006738 bytes, checksum: 6bf14f8b1d3cb3d2908ac7e37e22c668 (MD5) Previous issue date: 2009-07-15 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Bacillus thuringiensis is a Gram-positive bacterium commonly used in the tropical disease vectors and agriculture pragues control. Despite of its use both agriculture and human health, this bacterium can be enterotoxins producer that are also present in a few Bacillus cereus strains, emphasizing the non-haemolytic enterotoxin (NHE), haemolysin BL (HBL) and enterotoxin T (BceT) that have been related to food poisoning outbreaks reported in the literature. Thereby, this work had as a purpose to identify and to realize a genotypic characterization of these enterotoxins in one hundred B. thuringiensis strains isolated in the Amazon State, as well as to achieve the sequencing of these enterotoxin genes starting from the product of Polymerase Chain Reaction (PCR). The prevalence of these enterotoxin genes in B. thuringiensis strains by PCR method was relatively high, of which the results for the seven genes researched (bceT, hblA, hblD, hblC, nheA, nheB and nheC) showed different between themselves. By the genotypic profile were determined 27 groups and was evidenciated that 41% of the strains were positives for all the enterotoxin genes, whereas 3% were negatives for all the genes studied.. The analysis of the nucleotides and amino acids sequences of the Amazonian B. thuringiensis strains identified similarities with the nucleotides and amino acids sequences that are deposited in the GenBank and EMBL databases. / Bacillus thuringiensis é uma bactéria Gram-positiva comumente utilizada no controle de vetores de doenças tropicais e pragas da agricultura. Apesar de seu uso tanto na agricultura quanto em saúde humana, esta bactéria pode ser produtora de enterotoxinas que estão presentes também em algumas linhagens de Bacillus cereus, destacando-se a enterotoxina não-hemolítica (NHE), a hemolisina BL (HBL) e a enterotoxina T (BceT), que têm sido relacionadas a surtos de intoxicação alimentar relatados na literatura. Em vista disso, este trabalho teve como objetivo identificar e caracterizar genotipicamente estas enterotoxinas em 100 linhagens de B. thuringiensis isoladas no Estado do Amazonas, bem como realizar o seqüenciamento destes genes de enterotoxinas a partir do produto da Reação em Cadeia de Polimerase (PCR). A prevalência dos genes destas enterotoxinas nas estirpes de B. thuringiensis pelo método de PCR foi relativamente alta, cujos resultados para os sete genes pesquisados (bceT, hblA, hblD, hblC, nheA, nheB e nheC) mostraram-se distintos entre si. Pelo perfil genotípico foram determinados 27 grupos e ficou evidenciado que 41% das linhagens deram positivas para todos os genes de enterotoxinas, enquanto que 3% foram negativas para todos os genes estudados. A análise das sequências de nucleotídeos e de aminoácidos das linhagens de B. thuringiensis amazônicas identificou similaridades com as sequências de nucleotídeos e aminoácidos que estão depositadas no banco de dados do GenBank/EMBL.

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