Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004Bitstream added on 2014-06-13T19:09:43Z : No. of bitstreams: 1 sottovia_ad_me_araca.pdf: 2059510 bytes, checksum: e9b2f0d0b2c64d77047403265c977f7d (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo deste trabalho foi analisar o processo de reparo do reimplante tardio de dentes de ratos, após a remoção do ligamento periodontal por meio de fricção com gaze embebida em solução de hipoclorito de sódio a 1%, seguido de tratamento com solução de fluoreto de sódio a 2%, pH 5,5. Vinte e quatro ratos, divididos em 3 grupos de 8 animais, tiveram o incisivo superior direito extraído e mantido sobre bancada para ressecamento, pelo período de 60 minutos. Posteriormente, os dentes do grupo I foram imersos em soro fisiológico por 2 minutos. No grupo II, os dentes tiveram a superfície radicular friccionada com gaze embebida em soro fisiológico por 2 minutos e no grupo III a fricção foi realizada empregando-se a solução de hipclorito de sódio a 1%. Todos os dentes tiveram a superfície radicular tratada com ácido fosfórico a 37% seguido de imersão em solução de fluoreto de sódio a 2%, pH 5,5. Os canais foram obturados com pasta de hidróxido de cálcio e então reimplantados. Os resultados demonstraram diferença estatisticamente significante (p<0,05) quando a área total de raiz reabsorvida e o perímetro de cemento reabsorvido foram considerados entre os grupos. A estrutura radicular e a extensão de cemento foram mais comprometidas pela reabsorção no grupo III. Todos os grupos foram comprometidos pela reabsorção radicular sendo que o tratamento realizado no grupo III foi o menos efetivo para o seu controle. O tratamento realizado nos grupos I e II proporcionou resultados semelhantes entre si. / The aim of this study was to assess the healing process on the delayed replantation of rat teeth, after removal of the periodontal ligament by scrubbing with gauze soaked in 1% sodium hypochlorite solution, followed by treatment with 2% sodium fluoride solution at pH 5,5. Twenty-four rats, assigned to 3 groups of 8 animals each, had the maxillary right incisor extracted and left undisturbed on the workbench for desiccation during 60 minutes. Afterwards, the teeth on the group I were immersed in saline for 2 minutes. In group II, the root surfaces were scrubbed with gauze soaked in saline for 2 minutes; and in group III, scrubbing was done with gauze soaked in 1% sodium hypochlorite solution. Thereafter, all teeth had the root surface treated with 37% phosphoric acid, followed by immersion in 2% sodium fluoride solution at pH 5,5. Root canals were filled with calcium hydroxide-based paste and the teeth were then replanted. The analysis of the results revealed statistically significant difference (p<0.05) among the groups, when the total area of root resorption and the cementum resorption perimeter were considered. The root structure and cementum extension were more affected by resorption in group III. All groups were affected by root resorption, but the treatment performed in group III appeared as the less effective on its control. The treatment accomplished in groups I and II yielded similar results to each other.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-12-08Bitstream added on 2014-06-13T19:26:50Z : No. of bitstreams: 1 ricieri_cb_me_araca.pdf: 2075652 bytes, checksum: dbcad38024cbe0957e1fc226b16fd3b2 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O prognóstico de um dente reimplantado está relacionado a integridade do ligamento periodontal cementário e da camada de cemento. Esta, por sua vez, e influenciada por vários fatores, sendo os principais, o periodo extra-alveolar e o meio de conservação. Existem dúvidas, no entanto, se alterações sistêmicas, como o diabetes, também podem interferir no prognóstico do reimplante dentário. Portanto, o propósito deste trabalho foi avaliar o processo de reparo do reimplante de incisivos de ratos diabéticos nao controlados após a manutenção dos dentes em leite bovino pasteurizado. Para tanto, 32 ratos foram divididos em dois grupos de 16 animais cada, sendo que no Grupo I foi administrada, por via endovenosa, injeção de tampão citrato e no Grupo II inoculada estreptozotocina dissolvida em tampão citrato pela mesma via, para a indução do diabetes. Após controle glicêmico e a comprovação das altas taxas de glicemia, o incisivo superior direito de cada animal foi extraído e mantido em leite durante sessenta minutos. Na sequência, realizou-se o tratamento endodontico com a colocação de curativo de hidróxido de cálcio e o posterior reimplante dos dentes em seus respectivos alveolos. A antibioticoterapia sistêmica foi instituida no pós-operatório imediato. Decorridos 10 e 60 dias após o reimplante, realizou-se a eutanasia dos animais e as peças obtidas foram submetidas ao processamento laboratorial para a obtenção dos cortes, os quais foram corados com hematoxilina e eosina e Tricromicro de Masson para análise histologica e histométrica. Os resultados demonstraram que o tecido conjuntivo adjacente a superfície radicular se apresentou desorganizado nos animais diabéticos. Ìndices menores de reabsorção radicular externa e anquilose também foram encontrados neste grupo, porém, sem diferenças estatísticas significantes. / The prognosis of a replanted tooth is related to the integrity of the cemental periodontal ligament and the cementum layer, which, in turn, is influenced by several factors. Among these factors, the extra-alveolar time and the storage medium are the most important. However, it remains unclear whether systemic alterations, such as diabetes, may also interfere with the prognosis of tooth replantation. Therefore, the purpose of this investigation was therefore to evaluate the healing process of non-controlled diabetic rats' incisors replanted after storage of the teeth in bovine pasteurized milk. A total of 32 rats were assigned to two groups of 16 animals each. In group I, a citrate buffer injection was administered intravenously to rats while the animals in group II received an intravenous injection of streptozotocin dissolved in citrate buffer to induce diabetes. After confirmation of high glycemic levels, the maxillary right incisor of each animal was extracted and stored in milk during 60 minutes. Thereafter, the teeth were endodontically treated, with placement of a calcium hydroxide-based intracanal dressing, and the teeth replanted into their sockets. Systemic antibiotic therapy started in the immediate postoperative period. The animals were euthanized 10 and 60 days postoperatively. The anatomical pieces were removed, submitted to routine laboratorial processing and serially sectioned to obtain cuts that were stained by hematoxylin and eosin and Masson's Trichrome for histologic and histometric analyses. The results showed that the connective tissue adjacent to the root surface was disorganized in the diabetic rats. Lower indices of external root resorption and ankylosis were also observed in the diabetic group, though with no statistically significant difference.

Submitted by Caio Vinícius Lourenço Debortoli null (caiodebortoli@hotmail.com) on 2018-03-09T13:52:15Z No. of bitstreams: 1 DEBORTOLI, Caio Vinícius Lourenço - Influência da oclusão traumática no processo de reparo do periodonto em dentes submetidos a luxação extrusiva.pdf: 2808226 bytes, checksum: 651fb07f9b62528946ea07e2de0854f3 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Rimoli de Oliveira null (anapaula@foa.unesp.br) on 2018-03-09T17:31:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 debortoli_cvl_me_araca_int.pdf: 2808226 bytes, checksum: 651fb07f9b62528946ea07e2de0854f3 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-09T17:31:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 debortoli_cvl_me_araca_int.pdf: 2808226 bytes, checksum: 651fb07f9b62528946ea07e2de0854f3 (MD5) Previous issue date: 2018-02-23 / O tratamento luxação extrusiva visa o reparo das estruturas de suporte do periodonto com o dente em posição original, contudo pode ser prejudicado por alguns fatores como a oclusão traumática. Este estudo avaliou a influência da oclusão traumática no processo de reparo dos tecidos de suporte periodontais de dentes que sofreram luxação extrusiva. Sessenta ratos Winstar foram divididos em três grupos: Grupo Controle (n=20), Grupo Luxação Extrusiva (n=20) e Grupo Luxação Extrusiva e Oclusão Traumática (n=20), nos períodos experimentais de 7 e 30 dias. O dente de estudo foi o primeiro molar inferior direito. A luxação extrusiva foi simulada pela indução de forças no sentido axial até o seu deslocamento e reposição do dente por pressão digital. A oclusão traumática foi induzida por restauração de resina composta e fio metálico na superfície oclusal, criando uma plataforma plana.Cortes histológicos longitudinais foram corados com hematoxilina e eosina, Picrosirius red e técnica imunoistoquímica para detecção da TRAcP. Foi avaliada a reabsorção óssea e dentária, área de fibras colágenas, matriz extracelular não fibrilar e vasos sanguíneos, número de perfil nuclear e células TRAcP, organização do ligamento periodontal, extensão e intensidade do processo inflamatório. O teste de Kruskal-Wallis e post hoc de Dunn foram utilizados para a comparação entre os grupos (α=0,05). Dentre as diferenças significativas observou-se: aos 7 dias um aumento de células TRAcP e uma diminuição da área óssea do septo inter-radicular em L e LOT, bem como um aumento da reabsorção óssea marginal no grupo LOT quando comparado ao grupo controle; aos 30 dias, as fibras colágenas tipo I tiveram um aumento no grupo L, bem como, aumento da reabsorção óssea marginal nos grupos experimentais. No modelo experimental estudado, a oclusão traumática gerou prejuízo significativo na recuperação nas estruturas de suporte do dente submetido a luxação extrusiva a curto prazo. / The extrusive luxation treatment aims to repair the structures of the periodontium with the tooth in original position, however it can be impaired by some factors such as traumatic occlusion. This study aims to evaluate the influence of traumatic occlusion on the repairing process of the periodontal tissues of the tooth submitted to extruded luxation. Sixty Winstar rats was divided into three groups: Control group (n=20), Extrusive luxation group (n=20) and Extrusive luxation and Traumatic Occlusion group(=20), in the experimental periods of 7 and 30 days. The experimental tooth was the first lower right molar. The extrusive luxation was simulated by the induction of forces in the axial direction until its displacement and replacement of the tooth by digital pressure. Traumatic occlusion was induced by restoration of composite resin and metallic wire on the occlusal surface, creating a flat platform. Longitudinal histological sections were stained with hematoxylin and eosin, Picrosirius red and immunohistochemical technique for the detection of TRAcP. Bone and dental resorption, area of collagen fibers, extracellular non-fibrillar matrix and blood vessels, number of nuclear profile and TRAcP cells, periodontal ligament organization, extent and intensity of the inflammatory process were evaluated. The Kruskal-Wallis and post hoc Dunn tests were used to compare the groups (α = 0.05). Among the significant differences were observed at 7 days an increase of TRAcP cells and a decrease of the inter-radicular septum bone area in the L and LTO groups, as well as an increase in the marginal bone resorption in the LTO group when compared to the control group; at 30 days, type I collagen fibers had an increase in the L group, as well as increased marginal bone resorption in the experimental groups. In the experimental model studied, traumatic occlusion generate a significanty impairment in the recovery of the periodontal support structures of the tooth submitted to extrusive luxation in a short period

Orientador: Celso Koogi Sonoda / Resumo: O objetivo deste trabalho foi analisar o processo de reparo do reimplante tardio de dentes de ratos, após a remoção do ligamento periodontal por meio de fricção com gaze embebida em solução de hipoclorito de sódio a 1%, seguido de tratamento com solução de fluoreto de sódio a 2%, pH 5,5. Vinte e quatro ratos, divididos em 3 grupos de 8 animais, tiveram o incisivo superior direito extraído e mantido sobre bancada para ressecamento, pelo período de 60 minutos. Posteriormente, os dentes do grupo I foram imersos em soro fisiológico por 2 minutos. No grupo II, os dentes tiveram a superfície radicular friccionada com gaze embebida em soro fisiológico por 2 minutos e no grupo III a fricção foi realizada empregando-se a solução de hipclorito de sódio a 1%. Todos os dentes tiveram a superfície radicular tratada com ácido fosfórico a 37% seguido de imersão em solução de fluoreto de sódio a 2%, pH 5,5. Os canais foram obturados com pasta de hidróxido de cálcio e então reimplantados. Os resultados demonstraram diferença estatisticamente significante (p<0,05) quando a área total de raiz reabsorvida e o perímetro de cemento reabsorvido foram considerados entre os grupos. A estrutura radicular e a extensão de cemento foram mais comprometidas pela reabsorção no grupo III. Todos os grupos foram comprometidos pela reabsorção radicular sendo que o tratamento realizado no grupo III foi o menos efetivo para o seu controle. O tratamento realizado nos grupos I e II proporcionou resultados semelhantes entre si. / Abstract: The aim of this study was to assess the healing process on the delayed replantation of rat teeth, after removal of the periodontal ligament by scrubbing with gauze soaked in 1% sodium hypochlorite solution, followed by treatment with 2% sodium fluoride solution at pH 5,5. Twenty-four rats, assigned to 3 groups of 8 animals each, had the maxillary right incisor extracted and left undisturbed on the workbench for desiccation during 60 minutes. Afterwards, the teeth on the group I were immersed in saline for 2 minutes. In group II, the root surfaces were scrubbed with gauze soaked in saline for 2 minutes; and in group III, scrubbing was done with gauze soaked in 1% sodium hypochlorite solution. Thereafter, all teeth had the root surface treated with 37% phosphoric acid, followed by immersion in 2% sodium fluoride solution at pH 5,5. Root canals were filled with calcium hydroxide-based paste and the teeth were then replanted. The analysis of the results revealed statistically significant difference (p<0.05) among the groups, when the total area of root resorption and the cementum resorption perimeter were considered. The root structure and cementum extension were more affected by resorption in group III. All groups were affected by root resorption, but the treatment performed in group III appeared as the less effective on its control. The treatment accomplished in groups I and II yielded similar results to each other. / Mestre

The design of a tissue engineered pulmonary valve (TEPV) involves cells source(s), scaffold, in vitro conditioning system and the functional stability of the TEPV in vivo. Vascular cells (pulmonary artery smooth muscle (SMCs) and endothelial cells (ECs)) and periodontal ligament derived stem cells (PDLSCs) are relevant sources for the designing of TEPVs. In this study, labeling of these cell populations with super paramagnetic iron oxide microparticles along with concomitant usage of transfection agents was followed by visualization using magnetic resonance, while Intracellular iron oxide was confirmed by prussian blue staining and fluorescence microscopy. Also, the potential of PDLSC as a feasible source for TEPVs was investigated, expressing differentiative capacity to both SMC and EC phenotypes by a combination of biochemical and mechanical stimulation. Flow conditioning in a u-shaped bioreactor augmented collagen production in SMC-EC (99.5% for n=3) and PDLSC (93.3% for n=3) seeded scaffolds after a 3-week culturing period (P<0.05).

Orientador: Pedro Duarte Novaes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-27T00:17:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Peroni_LeonardoVieira_M.pdf: 2591831 bytes, checksum: cb9ff6e79f251a6f1318c8e8daa209f7 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: A radioterapia causa efeitos adversos em grande parte dos tecidos nos quais é utilizada. Na cavidade oral, tem sido evidenciado que o periodonto é sensível à radiação em altas doses. Além de causar mudanças histofisiológicas, a radiação ionizante pode propiciar o desenvolvimento de alterações estruturais nos tecidos de suporte, incluindo osso e ligamento periodontal. As metaloproteinases de matriz (MMPs) estão presentes no ligamento periodontal e são enzimas que atuam na remodelação da matriz extracelular, degradando alguns de seus componentes. Acredita-se que sua expressão possa alterar a estrutura do ligamento periodontal. Sendo assim, neste trabalho teve-se como objetivo avaliar o efeito da radiação ionizante no ligamento periodontal do dente incisivo de rato, por meio da microscopia de polarização, do teste mecânico e da zimografia, estabelecendo possíveis correlações entre os testes. A amostra constituiu-se de 63 ratos machos da linhagem Wistar (Rattus norvegicus albinus) divididos em 3 grupos: o grupo controle, sendo o único grupo não irradiado (n=21), o grupo de animais mortos 14 dias após a irradiação (n=21) e grupo de animais mortos 28 dias após a irradiação (n=21). Os grupos irradiados foram submetido à sessão única de radioterapia com dose de 15. A análise dos resultados mostrou que o teste de força e a microscopia de polarização apresentaram diferença estatisticamente significante entre os grupos (p<0,001), o que não ocorreu para os resultados da zimografia. Os coeficientes de correlação de Pearson (R) detectaram forte correlação diretamente proporcional entre os testes de força e polarização (R=0,808), e moderada correlação inversamente proporcional entre a polarização e a zimografia de MMP-2 na forma ativa (R=-0,446). Portanto, concluiu-se que a radioterapia pode levar à diminuição da resistência à força de intrusão e provocar a desorganização do colágeno no ligamento periodontal; além disso, a expressão das metaloproteinases 2 e 9 não foi influenciada pela radiação ionizante e apenas a organização do colágeno apresentou correlação com a resistência das fibras do ligamento periodontal e com a expressão da metaloproteinase de matriz 2 na sua forma ativa / Abstract: Radiotherapy causes adverse effects in most tissues in which it is used. In the oral cavity, it has been shown that the periodontium is sensitive to high doses of radiation. Besides causing histophysiological changes, ionizing radiation can promote the development of structural changes in the supporting tissues, including bone and periodontal ligament. The matrix metalloproteinases (MMPs) are in the periodontal ligament and are enzymes that remodel extracellular matrix by degrading some of its components. Structure of periodontal ligament may be changed by its expression. Thus, this study aimed to evaluate the effect of ionizing radiation on the periodontal ligament of the rat incisor, by polarizing microscopy, strength and zymography test, establishing correlations among these tests. The sample consisted of 63 male Wistar rats (Rattus norvegicus albinus) divided into 3 groups: control group, the only group that wasn¿t irradiated (n=21); a group of animals killed 14 days after irradiation (n=21) and a group of animals killed 28 days after irradiation (n=21). Irradiated groups were submitted to a single session of radiotherapy with 15 Gy dose. The results showed that only the strength test and the polarization microscopy had a statistically significant difference between groups (p<0.001), differently from zimography results. The Pearson correlation coefficients (R) detected strong direct correlation between the strength tests and polarization (R= 0.808), and moderate inverse correlation between polarization and MMP-2 zymography in the active form (R= -0.446). Thereby, the conclusion was that radiotherapy can lead to a diminished resistance to the intrusion strength and to a disorganization of the periodontal¿s ligament collagen. The expression of metalloproteinases 2 and 9 was not affected by radiotherapy and only collagen organization had correlation with periodontal ligament fibers strength and expression of matrix metalloproteinase 2 in its active form / Mestrado / Radiologia Odontologica / Mestre em Radiologia Odontológica

Orientador: Karina Gonzales Silvério Ruiz / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-27T02:48:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_GuilhermeHenriqueCosta_M.pdf: 1623320 bytes, checksum: af95c8df2b95e735fcae950c2260eb9e (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: Células mesenquimais isoladas do ligamento periodontal (PDLSCs) de dentes humanos mostraram ser multipotentes e possuem a capacidade de se diferenciar em adipócitos osteoblastos in vitro. Além disso, possuem a capacidade de formar tecido semelhante ao cemento e ao ligamento periodontal quando transplantadas para animais imunossuprimidos. Por outro lado foi mostrado na literatura uma grande heterogeneidade destas linhagens de células e muito tem sido feito na tentativa de isolar grupos com fenótipos mais favoráveis a diferenciação em tecido mineralizado. A literatura aponta que existe uma modulação na expressão do marcador de superfície CD166 durante a diferenciação osteoblástica e a partir destes achados levanta-se a hipótese de sua participação neste processo. Em acréscimo, células positivas para este marcador mostraram alta capacidade de diferenciar-se em fenótipo osteoblástico. Deste modo, este estudo tem como objetivo avaliar se um grupo de células enriquecido para o marcador CD166 através de separação magnética (PDL/CD166+) apresenta maior potencial de diferenciação osteoblástica/cementoblástica quando comparado ao pool de células não separadas (PDL) e ao grupo de células que não foram retidas na coluna magnética (PDL/CD166-). Este estudo ainda se propõe a avaliar se o marcador de superfície CD166 é regulado no processo de diferenciação osteoblástica. Após a separação magnética de três populações celulares, os grupos PDL/CD166+ foram submetidos a citometria de fluxo para que fosse comprovado a alta expressão de CD166. Em seguida os três grupos, PDL, PDL/CD166+ e PDL/CD166- das três populações, foram submetidos aos ensaio de Alizarina para avaliar a capacidade formação de nódulos minerais in vitro, foram ainda caracterizados por real-time PCR para avaliação da expressão de genes relacionados ao fenótipo osteoblástico (fator de transcrição relacionado a Runt-2 -Runx-2; a fosfatase alcalina ¿ ALP ¿ e a osteocalcina ¿ OCN). Nos grupos PDL e PDL/CD166+ também foi avaliado a expressão de CD166 por qPCR e citometria de fluxo. Os grupos enriquecidos apresentaram uma expressão média de 91,5% (±4,3%) de CD166. Apenas um grupo PDL/CD166- de uma população não apresentou depósitos minerais in vitro e foi identificado diferença estatisticamente significante entre os grupos PDL/CD166+ e PDL/CD166- (p<0,05). Quanto a expressão dos marcadores biológicos do tecido ósseo, foi identificado uma tendência a aumento da expressão destes marcadores quando as células foram cultivadas sob indução e ao longo do tempo de cultura. Os grupos cultivados em meio osteogênico apresentaram maior expressão de CD166 por PCRq e também foi identificado que o grupo PDL/CD166+ mostrou uma expressão significativamente maior que o PDL, ambos sob indução (p<0,05). Por citometria de fluxo, foi identificado um acréscimo na expressão de CD166 no terceiro dia de diferenciação nas células PDL/CD166+ e foi estatisticamente significativo comparado ao meio padrão (p<0,05). Ao longo do tempo de cultivo sob indução, a expressão deste marcador foi diminuída. Através dos resultados deste estudo é possível concluir que o grupo enriquecido na expressão de CD166 apresenta um alto potencial de formação de nódulos minerais in vitro. Além disso, foi notado que os três grupos apresentam uma tendência a maior expressão de Runx-2, ALP e OCN quando cultivados em meio osteogênico e que a grande heterogeneidade destas três populações dificulta a identificação de diferenças significativas tanto na análise intergrupo como intragrupo e compromete a identificação de um subgrupo com fenótipo mais favorável a diferenciação osteoblástica. A expressão gênica de CD166 é aumentada sob indução e ao longo do tempo de cultura e por citometria de fluxo observa-se que as células cultivadas em OM tendem a reduzir a expressão deste marcador / Abstract: Mesenchymal stem cells from periodontal ligament (PDLSCs) isolated from human teeth were shown to be multipotent and have the capacity to differentiate into adipocytes and osteoblasts in vitro. Moreover, they have the ability to form cement and periodontal ligament-like tissues when transplanted into immunosuppressed animals. On the other hand, it has been shown in literature a great heterogeneity of these cell lines and much has been done in the attempt to isolate groups with a phenotype more prone to differentiate into mineralized tissues. The literature suggests that there is a modulation of the CD166 surface marker expression during osteoblast differentiation and from these findings it is hypothesized of its participation in this process. In addition, cells positive for this marker have shown strong ability to differentiate into osteoblastic phenotype. Thus, this study aims to assess whether an enriched cell group for the CD166 marker (PDL/CD166+) has greater potential for osteoblastic/cementoblastic differentiation when compared to the not separated cell pool (PDL) and cell group which are not enriched (PDL/CD166-). Then, the three groups PDL, PDL/CD166+ and PDL/CD166- from three populations were submitted to Alizarin red-based assay to evaluate the ability of mineral nodule formation in vitro, groups were further characterized by qPCR for the evaluation of the expression of genes related to the osteoblastic phenotype (transcription factor related to Runt-2 -Runx-2; alkaline phosphatase - ALP - and osteocalcin - OCN). In the PDL and PDL/CD166+ groups the CD166 expression was also assessed by qPCR and flow cytometry. Enriched groups showed an average expression of 91.5% (± 4.3%) of CD166. Only a PDL/CD166- group from one population showed no mineral deposits in vitro and it was identified statistically significant difference between the groups PDL/CD166+ and PDL/CD166- (p <0.05). Regarding the expression of bone tissue biomarkers, it was noted a tendency to increased expression of these markers when cultured under osteogenic induction and along time in culture. Groups cultured in osteogenic medium showed higher expression of CD166 by qPCR and it was also identified that the PDL/CD166+ group showed a significantly higher expression than the PDL group, both under osteogenic induction (p <0.05). By flow cytometry, it was noticed an increase in CD166 expression on the third day of differentiation in PDL/CD166+ cells and it was statistically significant compared to the standard medium (p <0.05). Along time in culture, the expression of this marker was decreased. Through the results of this study it is possible to conclude that the group enriched in CD166 expression has a high potential to form mineral nodules in vitro. In addition, it was noted that the three groups have a tendency to increased Runx-2, ALP and OCN expression when cultured in osteogenic medium and the great heterogeneity of these three populations difficult to identify significant differences both intra and inter-group analysis what may jeopardize the identification of a subgroup with a phenotype more prone to osteoblastic differentiation. Gene expression for CD166 is increased under induction e through culture time and by flow cytometry it is observed that cells cultured in OM tend to reduce the expression of this marker / Mestrado / Periodontia / Mestre em Clínica Odontológica

Orientador: Wilson Roberto Poi / Banca: Sônia Regina Panzarini Barioni / Banca: Maurício Zardo / Banca: Wilson Roberto Poi / Resumo: Quando um dente é avulsionado, o reimplante dentário imediato é o procedimento ideal, porém nem sempre é uma realidade clínica. Diante desta situação, vários protocolos de tratamento têm sidos propostos para o reimplante tardio cujos objetivos são retardar o início da reabsorção radicular e aumentar a sobrevida do dente avulsionado. O objetivo deste trabalho é analisar o processo de reparo do reimplante tardio após o tratamento do ligamento periodontal necrosado de dentes de ratos com ácido cítrico. Trinta ratos, divididos em 3 grupos de 10 animais, tiveram o incisivo superior direito extraído e mantido em meio ambiente durante 5 minutos no Grupo I (Controle) e nos outros 2 grupos por 60 minutos. Posteriormente, os dentes do grupo I foram reimplantados. No grupo II, os dentes tiveram sua papila dentária removida, a polpa extirpada e o canal radicular preenchido com hidróxido de cálcio e reimplantados. No grupo III, os mesmos cuidados foram tomados, mas antes do preenchimento do canal com o hidróxido de cálcio, o dente foi mantido imerso em solução de ácido cítrico, pH1, por 3 minutos. Os resultados obtidos após os 60 dias de sacrifício demonstraram diferença estatisticamente significante (p<0,05) entre os grupos quanto à reabsorção por substituição, não apresentando diferença quanto à anquilose e reabsorção inflamatória. Quando a reabsorção por substituição foi avaliada, o grupo controle apresentou menor quantidade em relação outros grupos, apresentando diferença estatisticamente significante. A estrutura radicular e a extensão de cemento foram mais acometidas pela reabsorção por substituição e anquilose no grupo II (tardio) do que no grupo tratado com ácido, mas sem diferenças significativas. De acordo com os resultados obtidos, foi possível concluir que o reimplante tardio com tratamento do ligamento periodontal necrosado com ácido... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: When it happens the dental avulsed, the immediate dental reimplant it is the ideal procedure, however not always it is a clinical reality. Due to this situation, several treatment protocols has been proposed for the late reimplante tends as objective delays the beginning of the radicular reabsorption and to improve the prognostic of the avulsed tooth. The objective of this article is to analyze the process of repair of the delayed reimplant after treatment, with citric acid, of the death periodontal ligament of rat's teeth. Forty rats, divided in 3 groups of 10 animals, had the incisor extracted right superior and maintained in environment by the period of 5 minutes in the Group I (Controls) and in the other 3 groups for 60 minutes. Later, the teeth of the group I, were reimplanted. In the group II, the teeth had your dental papilla removed, the extirpated pulp and the radicular channel filled out with hydroxide of calcium and reimplanted. In the group III the same carefuls were been but before the completion of the channel with the hydroxide of calcium, the tooth was maintained submerged in citric acid solution pH1 for 3 minutes. The results demonstrated significant statistic difference (p <0,05) among the groups with relationship to the reabsorption for substitution, not presenting difference with relationship to the anquilose and inflammatory reabsorption. When appraised the reabsorption for substitution, the group control presented smaller amount in relation to the other groups, presenting significant statistic difference. The structure radicular and the cemento extension were more committed for the reabsorption for substitution and anquilose in the group II (late) than in the treated group with acid, but without significant differences. In agreement with the obtained results, it can be concluded that the late reimplant with treatment of the ligament periodontal necrosado with citric... (Complete abstract, click electronic address below) / Mestre

ABSTRAKT:Isolering och karaktärisering av mesenkymala stamceller från periodontalligamentet hos friskatänderSYFTE: Att isolera och odla celler från periodontalligamentet samt karaktärisera dem sommesenkymala stamceller.MATERIAL OCH METOD: Friska premolarer gjordes tillgängliga vid ortodontiskaextraktioner. Den mellersta 1/3 av periodontalligamentet skrapades varpå en enzymatiskmetod användes för isolering av individuella celler. Resulterande celler odlades understandardiserade metoder. Karaktärisering av celler skedde genom flödescymetri med 2 olikapaneler av cellyta markörer; en för etablerat positiva uttryck och en för kända negativauttryck hos mesenkymala stamceller. Möjlighet av celler att differentieras in vitro tilladipocyter och osteocyter testades genom tillförsel av specifika substanser till odlingsmediet.RESULTAT: Celler från 11 av 13 tänder isolerades och odlades framgångsrikt adherenta tillodlingsytan i upp till 8 generationer. Celluttryck av de positiva markörerna CD73, CD90 samtCD44 bekräftades genom flödescymetri. Inget uttryck observerades för den negativa panelenCD45, CD34, CD11b, CD19 eller HLA class II. Uttrycket av CD105 kunde inte fastställas pgaofullständigt data. Försök till differentiering av celler till adipocyter och osteocyter visade påfenotypiska förändringar efter 21 dagar.SLUTSATS: Den här studien har bidragit till framgångsrik isolering och delvis karaktäriseringav mesenkymala stamceller från periodontalligamentet hos friska tänder. En icke-invasivmetod av detta slag, resulterande i tillgång till denna cellpopulation utgör ett lovande verktygför framtida studier med goda möjligheter till ytterligare kunskap applicerbart till kliniskasituationer inom tandvården. / ABSTRACT:Isolation and Characterization of Mesenchymal Stem Cells from the Periodontal Ligament ofHealthy TeethAIM: To isolate and culture viable cells from the periodontal ligament and confirming theiridentity as mesenchymal stem cells.METHODS AND MATERIALS: Healthy premolars were collected at the time oforthodontic extractions. The middle 1/3 of the periodontal ligament was scraped andsubsequent cell isolation was performed using an enzymatic method; yielding single cellisolates. Cells were cultured and maintained under standard culture conditions. Cellcharacterization was performed by flow cytometry using two sets of cell surface markers; oneknown to be present and one known to be absent in mesenchymal stem cells. Ability of thecells for in vitro differentiation into adipogenic and osteogenic lineages was tested usingspecifically formulated media supplements.RESULTS: Cells were successfully isolated from 11 of 13 teeth and were maintained asadherent cultures for up to 8 generations. Cellular expression of positive markers; CD73, CD90and CD44 were confirmed by flow cytometry. For the negative marker panel, expression ofCD45, CD34, CD11b, CD19 and HLA class II were not detectable. The expression of CD105was inconclusive. As determined by phenotypic changes, cells appeared to have undergoneadipogenic and osteocytic differentiation at 21 days.CONCLUSION: This study has resulted in successful isolation and partial characterization ofmesenchymal stem cells from the periodontal ligament of healthy teeth. Non-invasive accessto these cells, provides an excellent tool for future studies, potentially leading to beneficialknowledge transferable to the dental clinical situation.

O Sistema Renina-angiotensina (SRA), e um sistema capaz de gerar hormonios peptideos com grande impacto na regulacao cardiovascular e na patogenese das doencas cardiovasculares. Este sistema opera, por meio das acoes da Angiotensina II, tanto em nivel sistemico (endocrino) quanto tecidual (local, paracrino/autocrino) controlando importantes funcoes, varias delas relacionadas a facilitacao da instalacao e progressao do processo inflamatorio. Por este motivo, a producao desta proteina nos tecidos pode estar relacionada a patogenese de muitas doencas, dentre elas a doenca periodontal (DP), tendo em vista seu carater infeccioso-inflamatorio e os achados da literatura que mostram que a inibicao da formacao de Ang II, diminui a perda óssea da DP em animais. Desta forma, o presente trabalho teve como objetivos: Avaliar in vitro, a) A expressao de componentes do SRA (ANGT, RENINA, ECA, ECA-2, AT1, AT2 e Mas) por fibroblastos de gengiva e ligamento periodontal humanos, por RT-qPCR; b) A producao de componentes do SRA (RENINA, ECA, ECA-2) no sobrenadante de culturas de fibroblastos de gengiva e ligamento periodontal humanos, por ELISA; c) A producao dos receptores do SRA (AT1, AT2 e Mas), nestes fibroblastos, por Imunofluorescencia e d) Se a expressao e a producao dos componentes do SRA por fibroblastos de gengiva e ligamento periodontal humanos, se alteram com a estimulacao por LPS de P. gingivalis e E. coli. Apos a coleta, os dados foram analisados com o auxilio do programa GraphPad Prism 5.0. por meio da analise de variancia a 2 criterios (ANOVA-two way) seguida do pos teste de Bonferroni, com nivel de significancia de 5% para a verificacao das possíveis diferencas. Foi detectada a expressao genica para alguns dos componentes do SRA (ANGT, RENINA, ECA, AT1) por fibroblastos tanto de gengiva quanto de ligamento periodontal. Foi detectada ainda uma expressao genica diferenciada entre fibroblastos de gengiva e ligamento periodontal para a ECA, sendo significativamente maior nos fibroblastos da gengiva. Houve imunomarcacao positiva tanto nos fibroblastos de gengiva quanto de ligamento periodontal compativel com a presenca dos receptores AT1 e Mas. Pode-se observar por fim que o contato com LPS de P. gingivalis e E. coli, na concentracao de 10 g/mL/24 h, nao alteram a expressão dos componentes do SRA. Portanto, pode-se concluir que os fibroblastos tanto de gengiva quanto de ligamento periodontal apesar de nao expressarem e produzirem todos oscomponentes do SRA necessarios para a formacao local de Ang II, poderiam contribuir, ainda que parcialmente, com outras celulas do microambiente dos tecidos periodontais para a formacao e acao locais da Ang II, e assim, para a instalacao e progressao da DP. / The Renin-angiotensin system (RAS) can generate hormones that have a high-impact on cardiovascular regulation as well as in the pathogenesis of cardiovascular disease. This system acts through both systemic (endocrine) and local (paracrine/autocrine) effects of Angiotensin II, controlling important functions related to the facilitation of installation and progression of the inflammatory process. For this reason, this proteins production in tissues can be associated to the pathogenesis of many diseases, including periodontal disease (PD). In the PD setting, a infectious-inflammatory characterized disease, the literature findings shows that inhibition of the Ang II formation can decrease the bone loss in animals. In this context, the aims of the present study were: to investigate in vitro: a) the expression of RAS components (ANGT, RENIN, ECA, ECA- 2, AT1, AT2 and Mas) by human gingival and periodontal ligament fibroblasts by RT-qPCR; b) the production of RAS receptors (AT1, AT2 and Mas) by human cultured gingival and periodontal ligament fibroblasts by Immunofluorescence and d) the production of RAS components (RENIN, ECA, ECA-2) if the expression and production of RAS components by gingival and periodontal ligament fibroblasts modify under P. gingivalis and E. coli LPS stimulation. After collected, the data were analysed using GraphPad Prism 5.0, by the two way ANOVA followed by Bonferroni post test with a significance level of 5%. Gene expression was detected for some of the RAS components (ANGT, RENIN, ECA, AT1) by both gingival and periodontal ligament fibroblasts. It was detected a differential gene expression between gingival and periodontal ligament fibroblasts for ECA, being significantly higher in gingival fibroblasts. There was a stain in Immunofluorescence compatible with the production of RAS receptors (AT1 and Mas). It must be noted that the stimulation with P. gingivalis and E. coli LPS, in a concentration of 10 g/mL/24 h, did not altered the expression of RAS components. In conclusion, despite of neither gingival or periodontal ligament fibroblasts express all components of RAS, needed to local formation of Ang II, they might also contribute to the local formation and action of Ang II and in consequence, to the installation and the progression of DP.