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Micropropagação de Bambusa oldhamii Munro e biocaracterização de fungos endofíticos multifuncionais / Micropropagation of Bambusa oldhamii Munro and biocaracterization of multifunctional endofitic fungusSilveira, Andreia Alves da Costa 20 July 2018 (has links)
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Previous issue date: 2018-07-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / In micropropagation, seedlings are produced in large scale with homogeneity, which can be
potentiated with photomixotrophic systems, which improve the physiological quality of the
seedlings. Endophytic fungi of bamboo have the potential of producing substances that can
promote biofertilization and antagonism against pathogens. An example of application is
antagonism against Magnaporhe oryzae, considered the main pathogen of rice. The objective
of this work was to establish the micropropagation protocol of Bambusa oldhamii; besides
characterizing endophytic fungi of this species, verify the biofertilizer potential in rice and
potential antagonist against M. oryzae. Buds were inoculated in MS medium supplemented
with 0.45 μM Tidiazuron-TDZ, 0.2% (w / v) PPM (Plant Preservative Mixture) and 50 mg L-1
kanamycin. The treatments consisted of: different months of collection (March-December
2016) x types of cap (heterotrophic and photomixotrophic system) x luminous conditions
(100% blue (455nm), 100% red (630nm), 30% blue + 70% For the multiplication, shoots
were inoculated in MS medium + 2.27 μM TDZ or 3.40 μM Paclobutrazol - PBZ. The fungal
isolates that were observed in the in vitro culture were identified and characterized
biochemically, besides antagonism to M. oryzae and microbiolization of rice seeds, June and
July were constituted in the best months of collection, and the climatic variables that most
interfered in the morphogenesis were minimum temperature and compensated mean.
Photomixotrophic system was superior in the multiplication with TDZ, with increase of 59.51%
in 30% blue + 70% red, 70.80% in 30% red + 7 0% blue, and 50.49% in white fluorescent
lights. PBZ was higher in carotenoid production, with a mean of 128.02 μg / mL in blue light
and conventional lids. TDZ was higher than PBZ when blue was not present. Five potential
fungal isolates were identified, 29 (Acrocalymma sp.), 122 (Botryobambusa fusicoccum) 711
(Phoma sp.), 712 (Phoma sp.) And 27 (Arthrinium marii) isolates 711, 712, 27 and 29
produced PPO. The isolate 29 produced higher amounts of AIA, with 31.55 mg / mL on the
fourth day. It was observed a reduction of mycelial growth of M. oryzae by all isolates, with
emphasis on isolate 122. Isolate 711 presented phosphate solubilization, and higher mean
shoot length, fresh and dry mass in rice microbiolization. An efficient micropropagation
protocol of B. oldhamii using a photomixotrophic system with 30% blue + 70% red LEDs
could be established, as well as the identification of a fungal isolate promising for
biofertilization, which could be the basis for new studies with rooting of B. oldhamii and
promotion of growth in newly acclimatized species. / Na micropropagação, mudas são produzidas em larga escala com homogeneidade, o que pode
ser potencializado com sistemas fotomixotróficos, os quais melhoram a qualidade fisiológica
das mudas. Fungos endofíticos de bambu possuem potencial de produção de substâncias que
podem promover biofertilização e antagonismo contra patógenos. Exemplo de aplicação se dá
com o antagonismo contra Magnaporhe oryzae, considerado o principal patógeno do arroz. O
objetivo deste trabalho foi o estabelecimento de protocolo de micropropagação de Bambusa
oldhamii; além de caracterizar fungos endofíticos desta espécie, verificar o potencial
biofertilizante em arroz e potencial antagonista contra M. oryzae. Brotos foram inoculados em
meio MS suplementado com 0,45 µM de Tidiazuron – TDZ, 0,2% (p/v) de PPM (Plant
Preservative Mixture) e 50 mg L -1 de canamicina. Os tratamentos consistiram de: diferentes
meses de coleta (março-dezembro de 2016) x tipos de tampa (sistema heterotrófico e
fotomixotrófico) x condições luminosas [100% azul (455nm), 100% vermelho (630nm), 30%
azul + 70% vermelho, 30% vermelho + 70% azul ou branco fluorescente]. Para a
multiplicação, brotos foram inoculados em meio MS + 2,27 µM de TDZ ou 3,40 µM de
Paclobutrazol - PBZ. Os isolados fúngicos que foram observados no cultivo in vitro foram
identificados e caracterizados bioquimicamente, além de antagonismo à M. oryzae e
microbiolização de sementes de arroz. Junho e Julho se constituíram nos melhores meses de
coleta, e as variáveis climáticas que mais interferiram na morfogênese foram temperatura
mínima, e média compensada. LEDs 30% azul + 70% vermelho obtiveram maiores médias,
com aumento de 81,79% no número de folhas. Sistema fotomixotrófico foi superior na
multiplicação com TDZ, com aumento de 59,51% em 30% azul + 70% vermelho, 70,80% em
30% vermelho + 70% azul, e 50,49% em luzes brancas fluorescentes. PBZ foi superior em
produção de carotenoides, com médias de 128,02 µg/mL em luz azul e tampas convencionais.
Foram identificados cinco isolados fúngicos potenciais, denominados: 29 (Acrocalymma sp.),
122 (Botryobambusa fusicoccum) 711 (Phoma sp.), 712 (Phoma sp.) e 27 (Arthrinium marii)
Os isolados 711, 712, 27 e 29 produziram PPO. O isolado 29 produziu maior quantidade de
AIA, com 31,55 mg/mL no quarto dia. Observou-se redução do crescimento micelial de M.
oryzae por todos os isolados, com destaque para o isolado 122. O isolado 711 apresentou
solubilização de fosfato, e maiores médias de comprimento da parte aérea, massa fresca e
seca na microbiolização em arroz. Pôde-se estabelecer um protocolo eficiente de
micropropagação de B. oldhamii utilizando sistema fotomixotrófico com LEDs 30% azul +
70% vermelho, assim como foi possível identificar um isolado fúngico promissor para a
biofertilização, dados estes que podem ser o alicerce para novos estudos com enraizamento
de B. oldhamii e promoção de crescimento em espécies recém-aclimatizadas.
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