Univ., Diss., 2009--Marburg. / Zsfassung in dt. Sprache.

A imunidade à malária é de curta duração e os indivíduos curados são susceptíveis a reinfecções. Algumas evidências sugerem que a deficiência na produção de anticorpos específicos ao parasito possa explicar a dificuldade em se desenvolver uma resposta imune eficaz contra a malária. As células B são selecionadas em um ambiente altamente regulado, denominado centro germinativo, localizado nos órgãos linfoides secundários. A interação entre as células T foliculares (Tfh) e células B do centro germinativo permite a produção de plasmócitos de vida longa que secretam anticorpos com alta afinidade pelo antígeno e a geração de células B de memória. Estudos recentes mostraram que a sinalização do receptor P2X7 pelo ATP extracelular afeta a resposta das células T. Na infecção pelo Plasmodium chabaudi, o receptor P2X7 contribui para o controle do parasito favorecendo a produção de células Th1 produtoras de IFN-y em detrimento da população de células Tfh. Neste trabalho, buscamos avaliar a participação do receptor P2X7 na produção das células Tfh e células B do centro germinativo em camundongos infectados pelo Plasmodium yoelii 17XNL. Este estudo justifica-se uma vez que a proteção contra o P. yoelli 17XNL depende principalmente dos anticorpos, enquanto o IFN-y é essencial para o controle da infecção aguda pelo o P. chabaudi. Nossos resultados mostram que camundongos nocautes para o receptor P2X7 (P2X7-/-) apresentaram menores parasitemias que os camundongos C57BL/6 na fase aguda da infecção. Porém, o tempo decorrido até pico de parasitemia e o controle do parasito foram semelhantes em ambos os grupos. Observamos ainda uma anemia menos acentuada na ausência do receptor P2X7, mas este achado deve ser confirmado pois trata-se de um único experimento. Camundongos P2X7-/- infectados apresentaram maior aumento no número de células T CD4+, células Tfh, células B, células B do centro germinativo e plasmócitos no baço, em relação aos camundongos C57BL/6 infectados. Além disso, as frequências de células mortas nas populações de células T CD4+ e B eram menores na ausência do receptor P2X7. Entretanto, na fase aguda da infeção, os níveis séricos de anticorpos IgM e IgG2c específicos ao parasito eram semelhantes nos camundongos P2X7-/- e C57BL/6. Concluindo, este estudo mostra que o receptor P2X7 prejudica a expansão das populações de células Tfh e B do centro germinativo, assim como o controle da malária causada pelo P. yoelli 17XNL. / Immunity to malaria is short-lived and cured individuals are susceptible to reinfections. Some evidence suggests that deficiency in the production of parasite-specific antibodies may explain the difficulty in developing an effective immune response against malaria. B cells are selected in a highly regulated environment, named the germinal center, located in the secondary lymphoid organs. The interaction between follicular T cells (Tfh) and germinal center B cells allows the production of long-lived plasma cells that secrete antibodies with high affinity for the antigen and generation of memory B cells. Recent studies have shown that P2X7 receptor signaling by extracellular ATP affects the T cell response. In Plasmodium chabaudi infection, the P2X7 receptor contributes to parasite control by favoring the production of Th1 cells secreting IFN- to the detriment of the Tfh cell population. In this work, we aimed to evaluate the participation of the P2X7 receptor in the production of Tfh cells and germinal center B cells in mice infected with Plasmodium yoelii 17XNL. This study is justified since the protection against P. yoelli 17XNL depends mainly on antibodies, whereas IFN- is essential for the control of acute P. chabaudi infection. Our results show that P2X7 knockout mice (P2X7-/-) displayed lower parasitemias than the C57BL/6 mice in the acute phase of infection. However, the time elapsed until the peak of parasitemia and control of the parasite were similar in both groups. We also observed less marked anemia in the absence of the P2X7 receptor, but this finding must be confirmed because a single experiment was performed. Infected P2X7-/- mice showed a greater increase in the number of CD4+ T cells, Tfh cells, B cells, germinal center B cells and plasma cells in the spleen, compared to infected C57BL/6 mice. In addition, the frequencies of dead cells in the populations of CD4+ T cells and B cells were lower in the absence of the P2X7 receptor. Nevertheless, in the acute phase of infection, serum levels of parasite-specific IgM and IgG2c antibodies were similar in P2X7-/- and C57BL/6 mice. In conclusion, this study shows that the P2X7 receptor impairs the expansion of the Tfh cell and germ center B cell populations, as well as the control of P. yoelli 17XNL malaria.

Plasmodium, like many other pathogenic organisms, relies on a balance of synthesis and scavenging of lipid species for replication. How the parasite creates this balance is particularly important to successfully intervene in transmission of the disease and to generate new chemotherapies to cure infections. This study focuses on two specific aspects in the field of lipid biology of Plasmodium parasites and their hosts. Lipoic acid is a short eight-carbon chain that serves a number of different functions with the cell. By disrupting a key enzyme in the lipoic acid synthesis pathway in the rodent species of malaria, Plasmodium berghei, we sought to investigate its role during the parasite life-cycle. Deletion of the lipoyl-octanoyl transferase enzyme, LipB in P. berghei parasites demonstrate a liver-stage specific need for this metabolic pathway. In order to explore the impact of the fatty acid and triglyceride content on the pathogenesis of Plasmodium parasites, this study tests two methods to reduce lipid content in vivo and test the propagation of P. berghei parasite in these environments. Results from this study set forth new avenues of research with implications for the development of novel antimalarials and vaccine candidates.

Thesis (M.A.) - Simon Fraser University, 2005. / Theses (Dept. of Archaeology) / Simon Fraser University. Also issued in digital format and available on the World Wide Web.

Thesis (Ph. D.)--University of Queensland, 2001. / Includes bibliographical references.

Marburg, Universiẗat, Diss., 2004.

Tübingen, Universiẗat, Diss., 2003.

Made available in DSpace on 2012-05-07T15:26:24Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 000018.pdf: 1794665 bytes, checksum: d80d7e7bbb820f44c121888af65efd06 (MD5) Previous issue date: 2007 / A resistência do Plasmodium falciparum aos principais antimaláricos ainda é o principalproblema no controle da malária humana. [...] Parasitos da malária transfectadoscom a Proteína de Fluorescência Verde (GFP) têm sido produzidos em sistema detransformação estável. Isso permite utilizar a fluorescência como um marcador paraidentificar os parasitos. Assim, buscou-se neste estudo determinar o uso potencial deparasitas da malária murina (P. berghei) e da malária humana (P.falciparum)transfectados com a GFP para os ensaios de quimioterapia experimental. Para osexperimentos in vivo, utilizou-se a cepa GFP-P. berghei que apresenta um geneexógeno de fluorescência verde e resistência à pirimetamina (Sultan et al. 1999).Camundongos suíço-albinos ou BALB/c foram infectados com a cepa GFP-P. bergheiou a cepa não transformada (NK65), por via intraperitoneal. Excluindo as drogas commecanismo de ação similar ao da pirimetamina, os resultados iniciais demonstraram quea susceptibilidade a diferentes classes de antimaláricos foi semelhante entre a cepa GFPP.berghei e a cepa P. berghei NK65. Demonstrou-se ainda que a virulência in vivo dacepa GFP-P. berghei foi similar a da cepa não transformada. A próxima etapa foivalidar a cepa GFP-P. berghei em um ensaio fluorimétrico para avaliar drogasantimaláricas. Para tal, os animais foram infectados com a cepa GFP-P. berghei,tratados com antimaláricos convencionais, e as parasitemias avaliadas pela citometria defluxo ou pelo método convencional de microscopia óptica. A parasitemia determinadapela citometria de fluxo se correlacionou com aquela determinada pela microscopiaóptica. Assim, os resultados permitiram concluir que a cepa GFP-P. berghei foiadequada para a triagem de drogas in vivo podendo substituir a técnica convencional demicroscopia óptica. [...] A cepa GFP-P.falciparum foi mantida emcultivo contínuo e as parasitemias das culturas foram analisadas, em paralelo, porcitometria de fluxo e microscopia óptica. Os resultados obtidos in vitro tambémdemonstraram que a quantificação da parasitemia obtida por citometria de fluxo eraespecífica. Finalmente, em ensaios quimioterápicos in vitro, utilizando antimaláricosconvencionais, o método fluorimétrico foi similar ao da hipoxantina tritiada. [...] O modelo descrito neste trabalho podefuncionar como uma importante ferramenta para acelerar o processo dedesenvolvimento de novas drogas para o tratamento da malária

No description available.

No description available.