Orientador: Marcelo Vasconcelos Meireles / Banca: Raphael Lúcio Andreatti Filho / Banca: Gisele Fabrino Machado / Resumo: Chlamydophila psittaci é uma bactéria que causa doença respiratória ou sistêmica em aves e em seres humanos. Há ainda, alguns relatos de infecção em aves por Chlamydophila abortus, que é um agente etiológico de problemas reprodutivos em mamíferos. Em vista do risco de transmissão para humanos a partir de aves assintomáticas o objetivo deste estudo foi detectar a presença de C. psittaci e C. abortus em amostras de fezes ou suabes cloacais de aves assintomáticas. Foram colhidas 403 amostras fecais ou suabes cloacais, provenientes de aves domésticas, selvagens ou exóticas, mantidas em cativeiro ou oriundas de apreensão. As amostras foram submetidas à PCR em tempo real para C. psittaci e C. abortus, para amplificação de fragmento parcial do gene da subunidade 16S do rRNA, utilizando o SsoFast™ EvaGreen® Supermix (Bio-Rad) e análise da curva de dissociação. Para determinação do genótipo de C. psittaci, foi utilizada a hemi- nested PCR específica para o gene OMP-A, realizada nas amostras positivas pela PCR em tempo real, seguida de sequenciamento dos fragmentos amplificados. A PCR em tempo real revelou positividade em 17 (4,21%) amostras. A hemi-nested foi positiva em 2 amostras positivas pela PCR em tempo real. O genótipo A de C. psittaci foi identificado pelo sequenciamento de uma amostra amplificada pela hemi-nested PCR / Abstract: Chlamydophila psittaci is a bacterium that causes respiratory or systemic disease in birds and humans. In birds there is also some reports of infection by Chlamydophila abortus that is responsible for abortions in mammals. Owing to the risk of transmission of Chlamydophila from asymptomatic birds to humans, the objective of this study was to detect the presence of C. psittaci and C. abortus in asymptomatic birds. Four hundred and three fecal samples or cloacal swabes were collected from domestic, wild or exotic birds kept in captivity or from apprehension. The 403 samples were examined by real time PCR specific for the 16S subunit of rRNA gene using SsoFastEvaGreen®Supermix™(Bio-Rad) and melting curve analysis. Hemi- nested PCR specific for the OMP-A gene, accomplished in real-time PCR positive samples, followed by sequencing of the amplified fragments were used to determine the genotype of C. psittaci. Real-time PCR was positive in 17 (4.21%) samples. Hemi-nested PCR revealed positivity in two samples previously positive by real-time PCR. Sequencing of the fragment amplified by hemi-nested PCR allowed for the identification of genotype A of C. psittaci in one sample / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-03-29Bitstream added on 2014-06-13T18:31:11Z : No. of bitstreams: 1 braz_ma_me_araca.pdf: 405940 bytes, checksum: bb0a5b6b5df0a0da63d3d467bb5e891c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Chlamydophila psittaci é uma bactéria que causa doença respiratória ou sistêmica em aves e em seres humanos. Há ainda, alguns relatos de infecção em aves por Chlamydophila abortus, que é um agente etiológico de problemas reprodutivos em mamíferos. Em vista do risco de transmissão para humanos a partir de aves assintomáticas o objetivo deste estudo foi detectar a presença de C. psittaci e C. abortus em amostras de fezes ou suabes cloacais de aves assintomáticas. Foram colhidas 403 amostras fecais ou suabes cloacais, provenientes de aves domésticas, selvagens ou exóticas, mantidas em cativeiro ou oriundas de apreensão. As amostras foram submetidas à PCR em tempo real para C. psittaci e C. abortus, para amplificação de fragmento parcial do gene da subunidade 16S do rRNA, utilizando o SsoFast™ EvaGreen® Supermix (Bio-Rad) e análise da curva de dissociação. Para determinação do genótipo de C. psittaci, foi utilizada a hemi- nested PCR específica para o gene OMP-A, realizada nas amostras positivas pela PCR em tempo real, seguida de sequenciamento dos fragmentos amplificados. A PCR em tempo real revelou positividade em 17 (4,21%) amostras. A hemi-nested foi positiva em 2 amostras positivas pela PCR em tempo real. O genótipo A de C. psittaci foi identificado pelo sequenciamento de uma amostra amplificada pela hemi-nested PCR / Chlamydophila psittaci is a bacterium that causes respiratory or systemic disease in birds and humans. In birds there is also some reports of infection by Chlamydophila abortus that is responsible for abortions in mammals. Owing to the risk of transmission of Chlamydophila from asymptomatic birds to humans, the objective of this study was to detect the presence of C. psittaci and C. abortus in asymptomatic birds. Four hundred and three fecal samples or cloacal swabes were collected from domestic, wild or exotic birds kept in captivity or from apprehension. The 403 samples were examined by real time PCR specific for the 16S subunit of rRNA gene using SsoFastEvaGreen®Supermix™(Bio-Rad) and melting curve analysis. Hemi- nested PCR specific for the OMP-A gene, accomplished in real-time PCR positive samples, followed by sequencing of the amplified fragments were used to determine the genotype of C. psittaci. Real-time PCR was positive in 17 (4.21%) samples. Hemi-nested PCR revealed positivity in two samples previously positive by real-time PCR. Sequencing of the fragment amplified by hemi-nested PCR allowed for the identification of genotype A of C. psittaci in one sample

A resistência aos antibióticos dos patógenos mais comuns do trato respiratório está aumentando mundialmente. Recentemente, Streptococcus pneumoniae resistente à penicilina tem sido isolado em diversos países, e a freqüência dessas cepas tem elevado de modo alarmante. O aumento da resistência, com conseqüentes implicações terapêuticas, tem levado a uma reavaliação do uso dos antibióticos ß-lactâmicos para o tratamento de infecções pneumocócicas. No presente trabalho, um total de 107 amostras de Streptococcus pneumoniae, obtidas de materiais provenientes de pacientes adultos ambulatoriais e hospitalizados, em dois centros médicos de duas cidades do Rio Grande do Sul (Porto Alegre e Caxias do Sul), os quais apresentavam quadro clínico-radiológico de infecção pulmonar, foram analisadas com o objetivo de estudar-se a resistência do germe à penicilina. As amostras constituídas de escarro (80,4%), lavado brônquico (13,5%) e aspirado traqueal (6,6%) foram coletadas no período compreendido entre Julho de 1998 e Julho de 1999. O material foi semeado em meio de Agar sangue e as colônias suspeitas de Streptococcus pneumoniae foram transferidas para meio de Mueller-Hinton para teste de optoquina e de sensibilidade à penicilina com discos de oxacilina. Um halo de inibição da oxacilina menor do que 20 mm indicava a realização de teste para determinação da concentração inibitória mínima (MIC) com E-test. Um total de nove cepas foi identificado como tendo resistência intermediária à penicilina (MIC 0,1-1,0μg/ml) e nenhuma cepa resistente (resistência elevada: MIC > 2,0 μg/ml) foi identificada. Uma monitorização local das cepas quanto à resistência antimicrobiana é de grande importância para os clínicos no manejo de infecções pneumocócicas. / Antibiotic resistance to the common respiratory tract pathogens is increasing worldwide. Recently, penicillin-resistant pneumococci have been isolated in several countries, and the incidence of these strains has risen alarmingly. The increased of resistance with consequence therapeutic implications has led to a re-evaluation of ß-lactam antibiotics for the treatment of streptococcal infections. In present study a total of 107 isolates of Streptococcus pneumoniae from samples of adult hospitalizated patients ando outpatients were prospectively collected in 2 different medical centers of Rio Grande do Sul - Brazil (Caxias do Sul and Porto Alegre) with clinical and radiologyc signs of respiratory infections, were analyzed with objective to study the penicillin-resistant pneumococci. The samples consisting of sputum (80,4%), bronchial lavage (13,5%) and inhaled traqueal (6,6%) had been colected in the period understood between 98 July and 99 July. The material was sown in agar-blood and the colonies suspicion of Streptococcus pneumoniae had been transferred to Mueller-Hinton for test of optochin and for sensitivity to penicillin test with oxacilin disks. One inhibition of the lesser that 20 mmm for oxacilin indicates the test accomplishment to determine minimum inhibitory concentration (MIC) with E-test. A total of 9 strains were intermediate-resistant to penicillin (MIC 0,1-1,0μg/ml) and neither was resistant to penicillin (MIC > 2,0 μg/ml). Monitoring local of antimicrobial resistant strains is of great importance to clinicians for the management of pneumococcal infections.

A pneumonia bacteriana é de ocorrência comum na clínica de psitacídeos. O uso de antibióticos, imprescindível nestes casos, pode acarretar em stress causado pela necessidade do manuseio frequente destas aves. Desta forma, com o intuito da diminuição do manejo, torna-se necessária a pesquisa de novas drogas que possam ser utilizadas com um maior intervalo de tempo entre as aplicações, reduzindo o risco de óbito por stress causado durante a contenção dos enfermos. A cefovecina sódica é uma cefalosporina de terceira geração já utilizada em cães e gatos, com uso recomendado de 8 mg/Kg por via subcutânea, com intervalos de duas semanas entre as aplicações e que em aves foi aplicada a cada nove dias, também por via subcutânea, com uma dose de 10 mg/Kg. A medicação foi testada em 47 aves da ordem Psitaciforme, todos provenientes de atendimentos realizados da clínica Toca dos Bichos e que apresentavam quadro clínico condizente com pneumonia. Como diagnóstico complementar foram realizados exames radiográficos de tórax e cultura bacteriana através de swab traqueal, com indicação de repetição dez dias após o término do tratamento preconizado. Também foram analisados diversos fatores que poderiam ser considerados intervenientes, como idade, peso, ambiente, alimentação e doenças concomitantes. A análise dos resultados deste teste de eficácia nos indica ser este um medicamento com resultado positivo para uso em aves que apresentam pneumonia bacteriana. / In the piscitacine practice bacterial pneumonia is very common. The use of injectable antibiotic agents in this cases can lead birds to stress due to the frequency of handling and contention. To reduce the risk of death caused by stress, researchers must find new drugs with longer application intervals. Cefovecin is a third generation cephalosporin used in dogs and cats, 8mg/Kg, subcutaneous with administration interval of two weeks, in birds it was used in the dosage of 10 mg/Kg, subcutaneous with the interval of nine days between applications. The drug was tested in 47 bird patients of a private practice, all presenting signs of clinical pneumonia. It was taken thorax radiographs and traqueal swabs cultures as complementary diagnostic and after 10 days of treatment all the exams where reapeted. Another factors where analized as age, weight, enviroment, feeding and concurent diseases. The tests results analyses indicates that this medicine has a positive result for avian use in bacteria pneumonia.

A resistência aos antibióticos dos patógenos mais comuns do trato respiratório está aumentando mundialmente. Recentemente, Streptococcus pneumoniae resistente à penicilina tem sido isolado em diversos países, e a freqüência dessas cepas tem elevado de modo alarmante. O aumento da resistência, com conseqüentes implicações terapêuticas, tem levado a uma reavaliação do uso dos antibióticos ß-lactâmicos para o tratamento de infecções pneumocócicas. No presente trabalho, um total de 107 amostras de Streptococcus pneumoniae, obtidas de materiais provenientes de pacientes adultos ambulatoriais e hospitalizados, em dois centros médicos de duas cidades do Rio Grande do Sul (Porto Alegre e Caxias do Sul), os quais apresentavam quadro clínico-radiológico de infecção pulmonar, foram analisadas com o objetivo de estudar-se a resistência do germe à penicilina. As amostras constituídas de escarro (80,4%), lavado brônquico (13,5%) e aspirado traqueal (6,6%) foram coletadas no período compreendido entre Julho de 1998 e Julho de 1999. O material foi semeado em meio de Agar sangue e as colônias suspeitas de Streptococcus pneumoniae foram transferidas para meio de Mueller-Hinton para teste de optoquina e de sensibilidade à penicilina com discos de oxacilina. Um halo de inibição da oxacilina menor do que 20 mm indicava a realização de teste para determinação da concentração inibitória mínima (MIC) com E-test. Um total de nove cepas foi identificado como tendo resistência intermediária à penicilina (MIC 0,1-1,0μg/ml) e nenhuma cepa resistente (resistência elevada: MIC > 2,0 μg/ml) foi identificada. Uma monitorização local das cepas quanto à resistência antimicrobiana é de grande importância para os clínicos no manejo de infecções pneumocócicas. / Antibiotic resistance to the common respiratory tract pathogens is increasing worldwide. Recently, penicillin-resistant pneumococci have been isolated in several countries, and the incidence of these strains has risen alarmingly. The increased of resistance with consequence therapeutic implications has led to a re-evaluation of ß-lactam antibiotics for the treatment of streptococcal infections. In present study a total of 107 isolates of Streptococcus pneumoniae from samples of adult hospitalizated patients ando outpatients were prospectively collected in 2 different medical centers of Rio Grande do Sul - Brazil (Caxias do Sul and Porto Alegre) with clinical and radiologyc signs of respiratory infections, were analyzed with objective to study the penicillin-resistant pneumococci. The samples consisting of sputum (80,4%), bronchial lavage (13,5%) and inhaled traqueal (6,6%) had been colected in the period understood between 98 July and 99 July. The material was sown in agar-blood and the colonies suspicion of Streptococcus pneumoniae had been transferred to Mueller-Hinton for test of optochin and for sensitivity to penicillin test with oxacilin disks. One inhibition of the lesser that 20 mmm for oxacilin indicates the test accomplishment to determine minimum inhibitory concentration (MIC) with E-test. A total of 9 strains were intermediate-resistant to penicillin (MIC 0,1-1,0μg/ml) and neither was resistant to penicillin (MIC > 2,0 μg/ml). Monitoring local of antimicrobial resistant strains is of great importance to clinicians for the management of pneumococcal infections.

A pneumonia bacteriana é de ocorrência comum na clínica de psitacídeos. O uso de antibióticos, imprescindível nestes casos, pode acarretar em stress causado pela necessidade do manuseio frequente destas aves. Desta forma, com o intuito da diminuição do manejo, torna-se necessária a pesquisa de novas drogas que possam ser utilizadas com um maior intervalo de tempo entre as aplicações, reduzindo o risco de óbito por stress causado durante a contenção dos enfermos. A cefovecina sódica é uma cefalosporina de terceira geração já utilizada em cães e gatos, com uso recomendado de 8 mg/Kg por via subcutânea, com intervalos de duas semanas entre as aplicações e que em aves foi aplicada a cada nove dias, também por via subcutânea, com uma dose de 10 mg/Kg. A medicação foi testada em 47 aves da ordem Psitaciforme, todos provenientes de atendimentos realizados da clínica Toca dos Bichos e que apresentavam quadro clínico condizente com pneumonia. Como diagnóstico complementar foram realizados exames radiográficos de tórax e cultura bacteriana através de swab traqueal, com indicação de repetição dez dias após o término do tratamento preconizado. Também foram analisados diversos fatores que poderiam ser considerados intervenientes, como idade, peso, ambiente, alimentação e doenças concomitantes. A análise dos resultados deste teste de eficácia nos indica ser este um medicamento com resultado positivo para uso em aves que apresentam pneumonia bacteriana. / In the piscitacine practice bacterial pneumonia is very common. The use of injectable antibiotic agents in this cases can lead birds to stress due to the frequency of handling and contention. To reduce the risk of death caused by stress, researchers must find new drugs with longer application intervals. Cefovecin is a third generation cephalosporin used in dogs and cats, 8mg/Kg, subcutaneous with administration interval of two weeks, in birds it was used in the dosage of 10 mg/Kg, subcutaneous with the interval of nine days between applications. The drug was tested in 47 bird patients of a private practice, all presenting signs of clinical pneumonia. It was taken thorax radiographs and traqueal swabs cultures as complementary diagnostic and after 10 days of treatment all the exams where reapeted. Another factors where analized as age, weight, enviroment, feeding and concurent diseases. The tests results analyses indicates that this medicine has a positive result for avian use in bacteria pneumonia.

A resistência aos antibióticos dos patógenos mais comuns do trato respiratório está aumentando mundialmente. Recentemente, Streptococcus pneumoniae resistente à penicilina tem sido isolado em diversos países, e a freqüência dessas cepas tem elevado de modo alarmante. O aumento da resistência, com conseqüentes implicações terapêuticas, tem levado a uma reavaliação do uso dos antibióticos ß-lactâmicos para o tratamento de infecções pneumocócicas. No presente trabalho, um total de 107 amostras de Streptococcus pneumoniae, obtidas de materiais provenientes de pacientes adultos ambulatoriais e hospitalizados, em dois centros médicos de duas cidades do Rio Grande do Sul (Porto Alegre e Caxias do Sul), os quais apresentavam quadro clínico-radiológico de infecção pulmonar, foram analisadas com o objetivo de estudar-se a resistência do germe à penicilina. As amostras constituídas de escarro (80,4%), lavado brônquico (13,5%) e aspirado traqueal (6,6%) foram coletadas no período compreendido entre Julho de 1998 e Julho de 1999. O material foi semeado em meio de Agar sangue e as colônias suspeitas de Streptococcus pneumoniae foram transferidas para meio de Mueller-Hinton para teste de optoquina e de sensibilidade à penicilina com discos de oxacilina. Um halo de inibição da oxacilina menor do que 20 mm indicava a realização de teste para determinação da concentração inibitória mínima (MIC) com E-test. Um total de nove cepas foi identificado como tendo resistência intermediária à penicilina (MIC 0,1-1,0μg/ml) e nenhuma cepa resistente (resistência elevada: MIC > 2,0 μg/ml) foi identificada. Uma monitorização local das cepas quanto à resistência antimicrobiana é de grande importância para os clínicos no manejo de infecções pneumocócicas. / Antibiotic resistance to the common respiratory tract pathogens is increasing worldwide. Recently, penicillin-resistant pneumococci have been isolated in several countries, and the incidence of these strains has risen alarmingly. The increased of resistance with consequence therapeutic implications has led to a re-evaluation of ß-lactam antibiotics for the treatment of streptococcal infections. In present study a total of 107 isolates of Streptococcus pneumoniae from samples of adult hospitalizated patients ando outpatients were prospectively collected in 2 different medical centers of Rio Grande do Sul - Brazil (Caxias do Sul and Porto Alegre) with clinical and radiologyc signs of respiratory infections, were analyzed with objective to study the penicillin-resistant pneumococci. The samples consisting of sputum (80,4%), bronchial lavage (13,5%) and inhaled traqueal (6,6%) had been colected in the period understood between 98 July and 99 July. The material was sown in agar-blood and the colonies suspicion of Streptococcus pneumoniae had been transferred to Mueller-Hinton for test of optochin and for sensitivity to penicillin test with oxacilin disks. One inhibition of the lesser that 20 mmm for oxacilin indicates the test accomplishment to determine minimum inhibitory concentration (MIC) with E-test. A total of 9 strains were intermediate-resistant to penicillin (MIC 0,1-1,0μg/ml) and neither was resistant to penicillin (MIC > 2,0 μg/ml). Monitoring local of antimicrobial resistant strains is of great importance to clinicians for the management of pneumococcal infections.

A pneumonia bacteriana é de ocorrência comum na clínica de psitacídeos. O uso de antibióticos, imprescindível nestes casos, pode acarretar em stress causado pela necessidade do manuseio frequente destas aves. Desta forma, com o intuito da diminuição do manejo, torna-se necessária a pesquisa de novas drogas que possam ser utilizadas com um maior intervalo de tempo entre as aplicações, reduzindo o risco de óbito por stress causado durante a contenção dos enfermos. A cefovecina sódica é uma cefalosporina de terceira geração já utilizada em cães e gatos, com uso recomendado de 8 mg/Kg por via subcutânea, com intervalos de duas semanas entre as aplicações e que em aves foi aplicada a cada nove dias, também por via subcutânea, com uma dose de 10 mg/Kg. A medicação foi testada em 47 aves da ordem Psitaciforme, todos provenientes de atendimentos realizados da clínica Toca dos Bichos e que apresentavam quadro clínico condizente com pneumonia. Como diagnóstico complementar foram realizados exames radiográficos de tórax e cultura bacteriana através de swab traqueal, com indicação de repetição dez dias após o término do tratamento preconizado. Também foram analisados diversos fatores que poderiam ser considerados intervenientes, como idade, peso, ambiente, alimentação e doenças concomitantes. A análise dos resultados deste teste de eficácia nos indica ser este um medicamento com resultado positivo para uso em aves que apresentam pneumonia bacteriana. / In the piscitacine practice bacterial pneumonia is very common. The use of injectable antibiotic agents in this cases can lead birds to stress due to the frequency of handling and contention. To reduce the risk of death caused by stress, researchers must find new drugs with longer application intervals. Cefovecin is a third generation cephalosporin used in dogs and cats, 8mg/Kg, subcutaneous with administration interval of two weeks, in birds it was used in the dosage of 10 mg/Kg, subcutaneous with the interval of nine days between applications. The drug was tested in 47 bird patients of a private practice, all presenting signs of clinical pneumonia. It was taken thorax radiographs and traqueal swabs cultures as complementary diagnostic and after 10 days of treatment all the exams where reapeted. Another factors where analized as age, weight, enviroment, feeding and concurent diseases. The tests results analyses indicates that this medicine has a positive result for avian use in bacteria pneumonia.

O Rhodococcus equi é uma das principais causas de pneumonia piogranulomatosa e linfadenite em potros de 1-6 meses de idade, resultando em alta morbidade e muitas vezes em óbito. Em propriedades endêmicas, a enfermidade é responsável por gerar altos custos para tratar e prevenir a doença. Com o objetivo de propor uma alternativa para o controle ambiental do Rhodococcus equi, foi aplicado um protocolo para isolamento de bacteriófagos. Foram isoladas 14 amostras de bacteriófagos, obtidas do ambiente de criação de cavalos. Estas apresentaram capacidade de lisar in vitro amostras de campo de Rhodococcus equi com diferentes intensidades. O resultado obtido nos possibilita sugerir que os fagos podem ser uma alternativa natural para a redução da bactéria no ambiente. / Rhodococcus equi is an important cause of pyogranulomatus pneumonia and lymphadenitis in foals 1-6 months of age, resulting in high morbidity and often mortality. In endemic properties, the disease is responsible for generating high costs to treat and prevent disease. In order to propose an alternative to the environmental control of Rhodococcus equi, a protocol for isolation of bacteriophages was applied. Fourteen bacteriophage samples were isolated obtained from horse breeding environment. They showed capacity to lyse in vitro Rhodococcus equi field samples with different sensitivities. The results obtained allows us to suggest the phage as a natural alternative to reducing R. equi population.

O Rhodococcus equi é uma das principais causas de pneumonia piogranulomatosa e linfadenite em potros de 1-6 meses de idade, resultando em alta morbidade e muitas vezes em óbito. Em propriedades endêmicas, a enfermidade é responsável por gerar altos custos para tratar e prevenir a doença. Com o objetivo de propor uma alternativa para o controle ambiental do Rhodococcus equi, foi aplicado um protocolo para isolamento de bacteriófagos. Foram isoladas 14 amostras de bacteriófagos, obtidas do ambiente de criação de cavalos. Estas apresentaram capacidade de lisar in vitro amostras de campo de Rhodococcus equi com diferentes intensidades. O resultado obtido nos possibilita sugerir que os fagos podem ser uma alternativa natural para a redução da bactéria no ambiente. / Rhodococcus equi is an important cause of pyogranulomatus pneumonia and lymphadenitis in foals 1-6 months of age, resulting in high morbidity and often mortality. In endemic properties, the disease is responsible for generating high costs to treat and prevent disease. In order to propose an alternative to the environmental control of Rhodococcus equi, a protocol for isolation of bacteriophages was applied. Fourteen bacteriophage samples were isolated obtained from horse breeding environment. They showed capacity to lyse in vitro Rhodococcus equi field samples with different sensitivities. The results obtained allows us to suggest the phage as a natural alternative to reducing R. equi population.