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Ensaio de citotoxicidade de extratos naturais após determinação da concentração microbicida mínima para Staphylococcus spp., Streptococcus mutans e Candida spp /

Oliveira, Jonatas Rafael de. January 2011 (has links)
Resumo: A proposta deste estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana e citotoxicidade dos extratos vegetais de Equisetum arvense L. (cavalinha), Glycyrrhiza glabra L. (alcaçuz), Punica granatum L. (romã) e Stryphnodendron barbatimam Mart. (barbatimão). A atividade antimicrobiana dos extratos vegetais foi analisada em cepas de Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus mutans, Candida albicans, Candida glabrata e Candida tropicalis, sendo uma ATCC e nove clínicas, através do teste de microdiluição em caldo, contudo para se determinar a Concentração Microbicida Mínima (CMM) dos extratos foram feitas semeaduras do conteúdo dos poços das placas de microdiluição. A citotoxicidade das CMM dos extratos naturais foi verificada pelo método colorimétrico MTT e pela quantificação da produção de citocinas IL-1β e TNF-α pelo teste ELISA, para tanto, foram utilizadas culturas celulares de macrófagos de camundongos (RAW 264.7). Os resultados foram analisados estatisticamente pelo teste ANOVA complementado por Tukey, com significância de 5%. Para o extrato de cavalinha, romã e barbatimão foi determinada como CMM efetiva para todas as cepas a concentração de 50 mg/mL e para o extrato de alcaçuz 100 mg/mL. Quanto à citotoxicidade destas concentrações, pelo método MTT, foi observada redução significativa da viabilidade celular (p≤0,05), em relação ao grupo controle, para 48% no grupo tratado com cavalinha, 79% para alcaçuz, 76% para romã e 86% para barbatimão. Em relação à quantificação de IL-1β, os grupos tratados com extratos de alcaçuz e cavalinha exibiram semelhanças ao grupo controle (p≥0,05) com produção de 1,99 e 1,32 pg/mL respectivamente, contudo o grupo tratado com extrato de barbatimão produziu 3,98 pg/mL (p<0,05) e o grupo que recebeu tratamento com extrato de romã a produção foi de 7,72 pg/mL (p<0,01), diferindo... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The objective of this study was to verify the antimicrobial activity and cytotoxicity of Equisetum arvense L. (horsetail), Glycyrrhiza glabra L. (licorice), Punica granatum L. (pomegranate) and Stryphnodendron barbatimam Mart. (barbatimam) glycolic extracts. The antimicrobial activity of the extracts was analyzed in Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus mutans, Candida albicans, Candida glabrata and Candida tropicalis strains, being one ATCC and nine clinics through the method of microdilution in broth according to NCCLS. It was realized sowing of the contents from the well of microdilution plate, after incubation, for determination of MMC of the natural extracts. The cytotoxicity of the extracts was evaluated for MTT assay, having as an experimental model cultivation of mice macrophages (RAW 264.7), and through the ELISA test, for cytokyne quantification IL-1β and TNF-α produced by the cellular cultivation after a period of 24 hours exposed to the extracts MMC. The results were subordinated to statistical analisys (ANOVA and Turkey test), with p≤0,05. Related to the antimicrobial activity, the natural extracts of horsetail, pomegranate and barbatimam eliminated all the strains to the concentration of 50 mg/mL and the natural extract of licorice promoted the eliimination of 100 mg/mL. Regarding to the cellular viability of the active MMC for the 100% of strains, it was observed meaningful reduction (p<0,01) in all the natural extracts compared to the control group, and, as a result, horsetail exhibited an average of 48%; licorice, 79%; pomegranate, 76%; e barbatimam, 86%. As the production of cytokyne the pomegranate extract presented production of IL-1β (7,72 pg/mL) significantly superior to the other groups, including the control (p<0,05). The barbatimam extract exhibited an intermediate average value of IL-1β (3,98 pg/mL), being statistically... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Luciane Dias de Oliveira / Coorientador: Luana Marotta Reis de Vasconcellos / Banca: Rosilene Fernandes da Rocha / Banca: Mariella Vieira Pereira Leão / Mestre
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Avaliação in vitro da atividade antimicrobiana de associações de extratos de Araçá (Psidium cattleianum) e hidróxido de cálcio frente a biofilme multiespécie de Enterococcus faecalis e Candida albicans /

Sangalli, Jorgiana. January 2010 (has links)
Resumo: Extratos da folha de araçá (Psidium cattleianum) apresentam biocompatibilidade e atividade inibitória frente a microrganismos bucais. O objetivo do estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana in vitro de associações de extratos de araçá (Psidium cattleianum) associados ao hidróxido de cálcio (Ca(OH)2 frente a biofilme multiespécie de Enterococcus faecalis e Candida albicans. Tubos de dentina de incisivos bovinos foram infectados in vitro durante 14 dias com cepas de Enterococcus faecalis ATCC 29212 e Candida albicans ATCC 10231. A luz dos canais radiculares foi preenchida com pasta de extrato etanólico de Psidium cattleianum com Ca(OH)2, extrato propilenoglicólico de Psidium cattleianum com Ca(OH)2 e hidróxido de cálcio com água destilada. Como controle foi empregado o soro fisiológico. Os períodos experimentais foram de 24 horas, 3, 7 e 14 dias. Após cada período realizou-se irrigação com solução salina para remoção dos medicamentos e secagem com cones de papel estéril. Brocas de diâmetros crescentes foram utilizadas para a coleta de pó de dentina. Essas amostras eram replicadas em placas ágar contendo caldo infuso de cérebro e coração (BHI), e levadas em contador digital de colônias. Para Enterococcus faecalis as associações de hidróxido de cálcio com extrato de araçá etanólico e propilenoglicólico apresentaram maior propriedade antimicrobiana que o hidróxido de cálcio associado à água destilada (p<0,01). O extrato etanólico exibiu em 24h atividade antibacteriana que o extrato propilenoglicólico e água levaram de 7 a 14 dias para atingir. Para Candida albicans todos os medicamentos foram efetivos em reduzir significativamente o número de unidade formadora de colônias em todos os períodos de tempo. Nas condições experimentais empregadas pode ser concluído que o extrato etanólico de Psidium... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Araça (Psidium cattleianum) extracts exhibit biocompatibility and inhibitory activity against oral microorganisms. The aim of this estudy was in vitro evaluation of antimicrobial activity of Psidium cattleianum extracts associated with calcium hydroxide Ca(OH)2 against multispecies biofilm of Enterococcus faecalis and Candida albicans. Dentin tubes of extracted bovine maxillary central incisors were infected for 14 days with Enterococcus faecalis ATCC 29212 and Candida albicans ATCC 10231. The root canals were filled with paste of ethanolic extract of Psidium cattleianum with Ca(OH)2, propyleneglycolic extract of Psidium cattleianum with Ca(OH)2 and calcium hydroxide with distilled water. Saline was used as control. The experimental periods were 24 hours, 3, 7 and 14 days. After each period, irrigation with sterile saline to remove the medicament was performed and the canals were dried with sterile paper points. Burs of increasing diameters were used to collect dentin chips. The collected samples were replicated in agar plates with BHI, and taken into digital counter of colonies. The associations of calcium hydroxide with ethanolic extract and with propyleneglycolic extract of Psidium cattleianum presented higher antimicrobial property than calcium hydroxide associated with distilled water (p<0.01). The ethanolic extract showed the same antibacterial activity in 24 hours than that of Ca(OH)2 associated to propyleneglycolic extract or water in 7 days of activity. All drugs were effective to significantly reduce the number of CFU in all periods of time for Candida albicans. In the experimental conditions used it can be concluded that ethanolic extract of Psidium cattleianum associated with Ca(OH)2 was faster and more effective against E. faecalis than Ca(OH)2 associated with propyleneglycol extract or distilled water. The... (Complete abstract, click electronic address below) / Orientador: Elói Dezan Júnior / Coorientador: Élerson Gaetti Jardim Júnior / Banca: Marco Antonio Húngaro Duarte / Banca: Cristiane Yumi Koga Ito / Mestre
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Detecção e ação antimicrobiana e antiendotóxica do extrato glicólico de gengibre utilizado como substância química auxiliar durante o retratamento endodôntico /

Cardoso, Flávia Goulart da Rosa. January 2011 (has links)
Orientador: Marcia Carneiro Valera / Banca: Flaviana Bombarda de Andrade / Banca: Carlos Henrique Ribeiro Camargo / Resumo: O presente estudo teve como objetivo detectar espécies bacterianas, quantificar microrganismos e endotoxinas em canais radiculares com insucesso endodôntico e presença de lesão periapical, correlacionando-os com os sinais e sintomas clínicos e, avaliar a ação do hipoclorito de sódio 1% e extrato glicólico de gengibre 20% sobre estes microrganismos e endotoxinas. Foram selecionados para o estudo dez dentes tratados endodonticamente com lesões periapicais persistentes que foram divididos em 2 grupos (n=5), de acordo com a substância química auxiliar utilizada durante o preparo biomecânico (PBM): hipoclorito de sódio 1% e extrato glicólico de gengibre 20% intercalado com solução salina fisiológica. Foram realizadas coletas do conteúdo do canal radicular imediatamente após a desobturação do dente, imediatamente após a instrumentação e, imediatamente após 14 dias da ação da medicação intracanal (MIC) de hidróxido de cálcio. Para todas as coletas foram realizados os seguintes testes: a) avaliação da atividade antimicrobiana por cultura microbiológica e através do método molecular - PCR; b) quantificação de endotoxinas verificada pelo lisado de amebócitos de Limulus. Os resultados foram submetidos a análise estatística de Wilcoxon e Mann-Whitney e mostraram que tanto o PBM quanto à MIC foram capazes de reduzir a quantidade de microrganismos e de endotoxinas, independente da solução utilizada. No entanto, endotoxinas não foram completamente neutralizadas. Espécies de E. faecalis, T. denticola, T. forsythia, P. endodontalis, P. gingivalis, P. nigrescens, P. intermedia, P. micra foram detectadas nos canais radiculares. Observou-se correlação positiva entre a quantidade de endotoxinas e o diâmetro das lesões. Concluiuse que as substâncias testadas foram eficazes na redução de microrganismos e de endotoxinas / Abstract: The aim of the present study was to detect bacterial species, quantify microorganisms and endotoxins within failed root canals presenting periapical lesion, to correlate them with clinical signs and symptoms, and to evaluate the effect of 1% sodium hypochlorite and 20% glycolic ginger extract on microorganisms and endotoxins. Ten endodontically treated teeth presenting persistent periapical lesion were selected for this study and divided into 2 groups (n=5), according to the auxiliary chemical substance employed during the biomechanical preparation (BMP): 1% sodium hypochlorite and 20% glycolic ginger extract interposed with saline solution. Root canal contents were collected right after root canal filling removal, right after instrumentation, and 14 days of calcium hydroxide intracanal medication (ICM) activity. The following tests were performed for every collection: a) antimicrobial activity evaluation by means of microbiologic culture and molecular biology - PCR; b) endotoxins quantification assessed by Limulus amebocyte lysate. The results were submitted to statistical analysis by Wilcoxon and Mann-Whitney tests. Both BMP and ICM were able to reduce microorganisms and endotoxins quantity, regardless the employed solution. However, endotoxins were not completely neutralized. E. faecalis, T. denticola, T. forsythia, P. endodontalis, P. gingivalis, P. nigrescens, P. intermedia, P. micra species were detected within root canals. A positive correlation was detected for the endotoxin quantity and the diameter of lesion. It can be concluded the tested substances were efficient for endotoxin and microorganisms reduction / Mestre

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