Orientador : Maria Luiza Silveira Mello / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-17T20:24:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Recco-Pimentel_ShirleiMaria_D.pdf: 2434016 bytes, checksum: 82d1489e982ef730dadf0f0829df382e (MD5) Previous issue date: 1986 / Resumo: Núcleos das três regiões das glândulas salivares larvais do sciarideo Bradysia spatitergum, em três fases do desenvolvimento pós-embrionário, foram analisadas por métodos cariométricos e citoquímicos.Os resultados indicaram que os métodos cariométricos de determinação de áreas e volumes nucleares não permitiram detectar aumentos em proteínas nucleares não-histônicas relacionados à atividade fisiológica característica de cada região glandular,ao longo do desenvolvimento. Por outro lado, houve diminuição nos tamanhos nucleares em pré-pupas, o que provavelmente encontra-se relacionado ao fenômeno de histólise glandular. Dados obtidos por citofotometria de varredura em preparados corados com "naphthol yellow S" a pH 2,7, indicaram que quantidades consideráveis de proteínas nucleares não-histônicas permanecem após tratamento por NaCl 3M nas três regiões das glândulas, nas três fases do desenvolvimento, proteínas estas portadoras de resíduos de lisina e de grupamentos hidrofóbicos. As variaçoes no conteúdo de proteínas nucleares não histônicas remanescentes ao tratamento com NaCl 3M,nas amostras ou entre elas, e o fato de se comportarem diferentemente frente ao tratamento por TCA, devem estar relacionados aos tipos e quantidades de proteínas estruturais e/ou reguladoras presentes nos núcleos, bem como ao tipo sua interação com o DNA ou com complexos DNA-histonas, de acordo com a atividade fisiológica de cada região,em cada fase pode estar relacionado / Abstract: Nuclei of the three salivary gland regions of the sciarid Bradysia spatitergum, under three phases of the post-embryonary development were analyzed by karyometric and cytochemical methods. The results indicated that the karyometric methods for determination of the nuclear areas and volumes did not allow the detection of increases in nuclear non-histone proteins in relation to physiological activity of each glandular region during development. On the other hand, there was a decrease in nuclear size in pre-pupal stages, which probably is related to glandular histolytic process. Data obtained after scanning cytophotometry of preparations stained with naphthol yellow S a pH 2,7, indicated that significant amounts of non-histone nuclear proteins remained in S1, S2 and S3 glandular regions in the three developmental phases, after 3M NaCl treatment. These proteins contained lysine residues and hydrophobic groups. The variation of non-histone nuclear protein content which remains after 3M NaCl treatment occurring in or between the samples and the fact that they behaved differently to TCA treatment, must be related to the different types and quantities of structural and/or regulatory proteins present in the nucleus. The type of interaction with the DNA or with DNA-histone complexes, as a function of the physiological activity in each glandular region under different developmental phase may also be involved. / Doutorado / Doutor em Ciências

Orientador : Benedicto de Campos Vidal / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-17T20:22:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pimentel_EdsonRosa_D.pdf: 8633645 bytes, checksum: 5daaeeebe7c497b60c7b6d3b1cf9cd04 (MD5) Previous issue date: 1983 / Resumo: Neste trabalho foram considerados alguns aspectos estruturais da fração rica em histona 'H IND. 5' (FR'H IND. 5') bem como a sua participação na estrutura da cromatina. Para isto foram empregados núcleos de eritrócitos de frango, dos quais se extraiu FR'H IND. 5' . Os métodos, tais como os processos extrativos, espectrofotometria de absorção, fluorometria, complexação com corantes, estudos de anisotropia e eleytroforese, permitiram determinar algumas características intrínsecas da FR'H IND. ', bem como diferenças em relação a histona 'H IND. 1' de timo de bezerro. Com a mesma finalidade, foram feitas observações ao microscópio de polarização do material nuclear tratado com NaCl 0,7M, e corado com azul de toluidina e sirius red. Ao microscópio eletrônico foram observados tanto complexos FR'H IND. 5'-DNA como material nuclear em NaCl 0,7M. As extrações levadas a efeito usando ácido perclórico 5%, NaCl 0,7M e NaCl 0,15M-HCl pH 1,85, mostraram que este último apresenta uma maior preferência para extrair FR'H IND. 5' do que os demais. As curvas espectrais de absorção de FR'H IND. 5' e de 'H IND. 1' de timo em meios ácidos e alcalino, não mostraram diferenças nos seus perfis. No entanto, foi relevante o fato de que estas histonas quando desnaturadas em meio básico apresentaram hipercromasia em relação às nativas, ocorrendo o inverso quando em meio ácido... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: This thesis deals with structural aspects of an 'H IND. 5' histone rich fraction ('H IND. 5'RF), as well as its importance in the chromatin structure. 'H IND. 5'RF was extracted from chicken erythrocyte nuclei. Some intrinsic characteristics of 'H IND. 5'RF a few differenciating qualities in relation to the 'H IND. 1' histone of the calf thymus were determined by the following methods: an extractive process; absorption espectrophotometry; fluorometry; dye binding as measured by anisotropy and electrophoresis. These were complemented by observations, carried out with the polarization microscope, of chromatin treated with 0,7 NaCl, and stained with toluidine blue or sirius red. 'H IND. 5'RF-DNA complexes and nuclear material in 0,7M NaCl were studied with the electron microscope. Extraction were made using 5% perchloric acid, 0,7M NaCl and 0,15M NaCl at pH 1,85. This last solution was shown to extract 'H IND. 5'RF preferencially. No differences were detected in the spectral absorption profiles of 'H IND. 5'RF and calf thymus 'H IND. 1' in acid or in alkaline medium. Its is remarkable, however, that the histones, when denatured in a basic medium, were hyperchromic in relation to these some proteins in their native state. In acid medium, the opposite occurred. Fluorescence spectral curves of 'H IND. 5' RF and calf thymus 'H IND. 1' solutions indicated a more intense fluorescence for 'H IND. 5'RF than for 'H IND. 1'. The fluorescence of denatured 'H IND. 5'RF was markedly diminished in relation to that in the native condition. No important difference was noted in their spectral absorption profiles... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural