Chu Ka-wing, Kevin. / "June 2001." / Thesis (Ph.D.)--Chinese University of Hong Kong, 2001. / Includes bibliographical references (p. 194-215) / Electronic reproduction. Hong Kong : Chinese University of Hong Kong, [2012] System requirements: Adobe Acrobat Reader. Available via World Wide Web. / Mode of access: World Wide Web. / Abstracts in English and Chinese.

published_or_final_version / abstract / Biochemistry / Doctoral / Doctor of Philosophy

No description available.

Thesis (Ph. D.)--University of Hong Kong, 2006. / Title proper from title frame. Also available in printed format.

published_or_final_version / Biochemistry / Master / Master of Philosophy

abstract / Orthopaedics and Traumatology / Doctoral / Doctor of Philosophy

(Uncorrected OCR) ABSTRACT Abstract of thesis entitled 'Chondroitin sulphate proteoglycans produced by astrocytes modulate neuron adhesion and neurite outgrowth' submitted by HO Yeung for the degree of Master of Philosophy at the University of Hong Kong in 2000 Several types of proteoglycans were known to be associated with the glial boundary during CNS development and glial scar following CNS injury. The aim of this study is to investigate the role of astroglial proteoglycans, particularly chondroitin sulfate proteoglycans (CSPGs), in modulating neuron adhesion and neurite growth. Neonatal rat cerebral cortical astrocytes as well as an astrocyte cell line DI TNCI were studied for the expression of CSPGs and their effects on neuron adhesion and neurite outgrowth. Immunocytochemical staining with CS-56, a monoclonal antibody against epitopes in the CS moiety of CSPGs, demonstrated the localization of CSPGs on both primary astrocytes and DI TNCI cell line. Immunostaining with anti-neurocan (a neuronal CSPG originally thought) showed pericellular and intracellular distribution in confluent cultures of primary astrocytes but only intracellular distribution in the DI TNCI cells, both being positive for glial fibrillary acidic protein (GFAP). Neurocan was also found deposited by primary astrocytes on the culture substratum. Western blots of the conditioned medium of primary astrocytes indicated a distinct 220 kDa neurocan core protein band. Five immunoreactive bands were also found on Western blots detected with stub-sensitve antibody against C-6-S-PG. Furthermore, RT-PCR analysis indicated the expression of neurocan mRNA in the primary astrocytes. Cortical neural cells (from E18 rats) selectively attached and extended neurites on the primary astrocytes but not on the non-cellular, neurocan immuoreactive gaps left by the astrocytes nor on the DI TNCI cells. Neuronal distribution on astrocytes remained similar even after digestion with chondroitinase or neutralization with antibody, CS-56 or antineurocan. Neurite length on the chondroitinase ABC (20mU/ml) treated astrocytes was however increased. Taken together, these in vitro observations suggest that apart from neurons, astrocytes are another cellular source of brain-specific CSPG, neurocan. They also suggest that CS components expressed on the surface of astrocytes are supportive of neuronal attachment and survival but limiting towards neurite extension. Evidence is also provided for the selective development of embryonic neurons directly on astrocytes and not on neurocan immunoreactive non-cellular routes traversed by astrocytes. 11 / abstract / toc / Biochemistry / Master / Master of Philosophy

Οι πρωτεογλυκάνες, μόρια της εξωκυττάριας ουσίας, αλληλεπιδρούν μεταξύ τους και με άλλα μορφορυθμιστικά μόρια (γλυκοπρωτεΐνες, ιντεγκρίνες) καθώς επίσης και με αυξητικούς παράγοντες (FGF, TGF-β, Wnt, hedgehog). Οι πρωτεογλυκάνες ενεργοποιούν ποικίλα μονοπάτια μεταγωγής σήματος και επάγουν πλειοτροπικές αποκρίσεις από τα κύτταρα καθώς συμμετέχουν στον έλεγχο της κυτταρικής προσκόλλησης, μετανάστευσης και πολλαπλασιασμού, διαφοροποίησης και επιβίωσης κυττάρων και της μορφογένεσης ιστών και οργάνων. Η agrin, πρωτεογλυκάνη θειικής ηπαράνης, έχει ανιχνευτεί στις βασικές μεμβράνες των εγκεφάλου, νευρομυϊκής σύναψης, πνεύμονα και νεφρού. Έκφραση της agrin δεν έχει μελετηθεί στο πρώιμο έμβρυο. Στην παρούσα εργασία μας, με τη μέθοδο της RT-PCR και του ανοσοφθορισμού, μελετήσαμε πότε αρχίζει να εκφράζεται και πού εκφράζεται η agrin κατά τη διάρκεια της ανάπτυξης του πρώιμου εμβρύου όρνιθας από το στάδιο Χ (μορίδιο) μέχρι το ΗΗ17 (29 σωμίτες/οργανογένεση). Το mRNA της agrin πρωτοανιχνεύτηκε, σε χαμηλά επίπεδα, στο στάδιο ΗΗ1-ΗΗ2 (προχωρημένο βλαστίδιο) και η έκφρασή του ρυθμίζεται αναπτυξιακά. Η έκφραση του mRNA της agrin ήταν υψηλή στο στάδιο ΗΗ3 (μέσα σταδίου γαστριδίου), χαμηλότερη στο στάδιο ΗΗ4-5 (πρώιμο νευρίδιο), υψηλή στο στάδιο ΗΗ8-9 (5-6 σωμίτες) και χαμηλότερη στο στάδιο ΗΗ10 (10 σωμίτες). Ένταση φθορισμού της πρωτεΐνης agrin ανιχνεύτηκε και στις τρεις βλαστικές στιβάδες στο στάδιο ΗΗ4 (γαστρίδιο), καθώς και στο νευροεπιθήλιο στο στάδιο ΗΗ8 (4 σωμίτες). Στο στάδιο ΗΗ11 (13 σωμίτες) ο φθορισμός της agrin ήταν ισχυρός στο νευρικό σωλήνα και στους σωμίτες, ενώ ανιχνεύτηκε αξιοσημείωτη ένταση στο άνω τοίχωμα του εντέρου και στα προκαρδιακά κύτταρα. Στο στάδιο ΗΗ17, ο φθορισμός της agrin ήταν έντονος στο νευροεπιθήλιο του νευρικού σωλήνα, ενώ ανιχνεύτηκε και στις βασικές μεμβράνες του διεγκεφάλου και μυελεγκεφάλου. Ένταση έκφρασης της agrin εντοπίστηκε στο φακό και στον αμφιβληστροειδή του οφθαλμού και στο μυοτόμο, αλλά όχι στο δερμοτόμο και σκληροτόμο των σωμιτών. Έντονη ήταν η έκφραση της agrin στο ενδοκάρδιο και στο μυοκάρδιο στην καρδία και στα τοιχώματα του εντέρου. Επίσης, μελετήσαμε το ρόλο της agrin, μέσω αναστολής της λειτουργίας της, με τη χρήση μονοκλωνικών αντισωμάτων έναντι αυτής. Τα αποτελέσματά μας έδειξαν ότι η απουσία της πρωτεΐνης agrin προκαλεί ανωμαλίες στην επιθηλιοποίηση κυρίως των σωμιτών, του καρδιακού σωλήνα και του εντέρου. Επίσης, τα αποτελέσματά μας έδειξαν ότι η agrin φαίνεται να συμμετέχει στα σηματοδοτικά μονοπάτια που καθοδηγούν τα κύτταρα των νευρικών κρηπίδων κατά τη μετανάστευσή τους. Η agrin αρχίζει να εκφράζεται με την έναρξη των μορφογενετικών κινήσεων της γαστριδίωσης, ρυθμίζεται αναπτυξιακά και είναι σημαντικός ο ρόλος της στη διαφοροποίηση κυττάρων και στη μορφογένεση ιστών και οργάνων στο πρώιμο έμβρυο. / Agrin is a heparan sulfate proteoglycan and has been studied extensively in the late embryonic and postnatal nervous system and muscle. Agrin seems to play a critical role in the mediation of axonal growth and path finding. We studied the expression of agrin by RT-PCR and immunofluorescence in the chick embryo from stages X (morula) to HH17 (29 somites). Agrin mRNA was first detectable at low levels at stage HH1-HH2 (late blastula) and its expression was developmentally regulated. Expression of agrin mRNA was high at stage HH3 (intermediate streak), lower at stage HH4-5 (head process), high at stage HH8-9 (5-6 somites) and lower at stage HH10 (10 somites). Agrin protein fluorescence was strong in the three germ layers at stage HH4 (definitive streak) and was strong in the neuroepithelium at stage HH8 (4 somites). At stage HH11 (13 somites), agrin fluorescence was strong in the neural tube and somites and was intense in the gut roof plate and in the heart primordia. By stage HH17, agrin fluorescence was strong in the neuroepithelium of neural tube and was detected in the laminal surface of the diencephalon and myelencephalon. Agrin expression was strong in the lens and retina in the eye, was strong in the myotome but was not expressed in the dermotome and sclerotome in the somites, was strong in myocardium and endocardium in the heart and in the gut walls. Immunodetection of agrin was intense in neuroepithelium and mesenchymal tissues as they epithelialize. Inhibition of function of agrin by blocking antibodies showed that agrin is crucial for maintaining basement membrane integrity which mediates the epithelialization especially in somites, heart tube and gut. It is also possible that agrin participates in the signaling pathways that guide neural crest cell migration.

Typescript (photocopy) / vi, 219 leaves : ill. ; 31 cm / Title page, contents and abstract only. The complete thesis in print form is available from the University Library. / Thesis (Ph.D.)--Dept. of Oral Biology, University of Adelaide, 1983

Thesis (Ph.D.) - Dept. of Oral Biology, University of Adelaide, 1983. / Typescript (photocopy).