Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-05-12T13:54:19Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) versão digital tese jose 2015.pdf: 8580297 bytes, checksum: 1e0e729cc7e941d9baed6b48fa7e55b7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-12T13:54:19Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) versão digital tese jose 2015.pdf: 8580297 bytes, checksum: 1e0e729cc7e941d9baed6b48fa7e55b7 (MD5) Previous issue date: 2015-11-12 / CAPEs / CNPq / FACEPE / Investigamos se alterações simpático-respiratórias e de quimiossensibilidade poderiam estar envolvidas no desenvolvimento de hipertensão arterial (HA) em ratos expostos à restrição proteica durante a gestação e lactação. Pesquisamos também o perfil de expressão de genes no músculo e fígado envolvidos com metabolismo de glicose e ácidos graxos. Ratas Wistar foram alimentadas com dieta normoproteica (grupo controle) ou com dieta hipoproteica (grupo experimental) durante a gestação e lactação. Após o desmame, a prole de ratos machos (grupo NP provenientes de mães controle e grupo HP provenientes de mães experimentais) foram alimentados com dieta padrão e os estudos funcionais realizados ao 30º e 90º dia de vida. A pressão arterial (PA) foi aferida de forma direta pelo implante de cânula na artéria femoral e a ventilação foi mensurada por pletismografia. O registro da atividade do nervo simpático torácico e frênico foi realizado na preparação coração tronco cerebral isolados. Quimiorreceptores periféricos (QRP) foram ativados por KCN (0.04 μg/Kg, 100uL/rato). QRP foram removidos para investigar o seu papel na gênese da hipertensão arterial. Músculo esquelético, fígado e tronco encefálico foram coletados. Ensaios de expressão gênica foram realizados por PCR-RT e proteica por Western Blotting. No tronco encefálico os níveis de peroxidação lipídica (avaliado pelos níveis de malondialdeído-MDA) e atividade das enzimas antioxidantes SOD e catalase foram avaliados. Os resultados mostraram que aos 30 dias de vida, ratos HP apresentaram PA semelhante ao grupo NP. Contudo, o grupo HP exibiu, nesta idade, aumento na atividade simpático-respiratória associada com maior sensibilidade de quimiorreceptores periféricos. Aos 90 dias, ratos HP apresentaram HA, associado, em parte, com um aumento de peroxidação lipídica e redução na atividade de SOD e catalase na área ventral do tronco encefálico. A remoção dos QRP atenuou a PA e a atividade simpática em ratos HP. Aos 30 dias de vida, observamos uma redução na expressão gênica da PDK4, βHAD no músculo sóleo e de HK2, PFK, CS e PGC1a no músculo EDL de ratos HP. A expressão gênica de G6Pase, βHAD e CS foi aumentada no fígado de ratos HP. Verificamos também, um aumento na expressão proteica de HK2 e uma redução na expressão proteica de PDK4 e βHAD no músculo sóleo de ratos HP. Analisando o músculo EDL, o grupo HP exibiu uma redução na expressão proteica de HK2 e PFK, mas sem alteração na expressão de βHAD e CS. Aos 90 dias de vida, ratos HP exibiram redução na expressão gênica de PDK4 no músculo sóleo e EDL. Em nível hepático, o grupo HP apresentou maior expressão gênica de FAS e baixa expressão gênica de PGC1a associado com redução na expressão proteica de βHAD. Os resultados indicam a) hiperatividade simpática e respiratória associada com maior sensibilidade de quimiorreceptores periféricos no início da vida; b) remoção de QRP atenua HA em ratos HP; c) HA na vida adulta de ratos HP está associada a um desequilíbrio oxidativo; d) a expressão de genes metabólicos envolvidos no metabolismo da glicose e dos ácidos graxos está alterada no fígado e músculo de ratos HP. / In the present study, we investigated whether the sympatho-respiratory and chemosensory alterations can be involved in the development of arterial hypertension in protein-restricted offspring rats during gestation and lactation. In addition, we researched in these animals, the profile of gene expression in the muscle and liver involved with glucose and fatty acids metabolism. Females Wistar rats received normoproteic diet (17% of protein, control group, NP) or low protein diet (8% of protein, experimental group, LP) during gestation and lactation. After the weaning, the male offspring received standard diet and the functional studies were performed at 30 and 90-d-old. The straight register of arterial blood pressure was measured by femoral artery catheter and the ventilation was recorded by pletismography. The recording of thoracic sympathetic and phrenic nerve was realized by isolated brainstem-heart preparation (WHBP). The peripheral chemoreceptors were activated by KCN (0.04%, 100 μL/rat). In addition, it was realized removal of the peripheral chemoreceptors to investigate its role in the genesis of arterial hypertension. Gene expression for Hk2, PFK, PDK4, CPT1b, bHAD, CS, PGC1a, PEPCK, G6Pase, FAS, SOD1 and 2, CAT, GPX, Grin1, Gria1, e Grm1 were performed by the RT-PCR. In addition, protein expression was performed by Western blotting assay. In the brainstem were investigated the lipid peroxidation levels (by malondialdehyde-MDA assay) and enzymatic activity for superoxide dismutase and catalase. At 30 d-old Lp rats presented similar arterial pressure in comparison to Np rats. Although, Lp group exhibited, in this age, increase in the sympathetic-respiratory activity linked to higher peripheral chemosensitivity. At 90d-old, Lp rats presented hypertension, which in part, was linked to enhanced lipid peroxidation and decreased anti-oxidant enzymatic activity into ventral medulla. The carotid body removal attenuated arterial pressure and sympathetic actitiy in protein-restricted rats during pregnancy and lactation. At 30 d-old, the studies performed in skeletal muscle and liver, demonstrated a reduced mRNA expression for PDK4, βHAD in soleus muscle and the HK2, PFK, CS and PGC1a in EDL muscle of Lp group. In addition, we noted that mRNA expression for G6Pase, βHAS and Cs were enhanced in the Lp liver. We found that protein expression of HK2 was increased in Lp soleus and PDK and βHAD reduced in comparison to Np group. In EDL, protein expression for HK2 and PFJ were reduced in Lp rats. At 90 d-old, mRNA for PDK4 was dow-expressed in soleus and EDL from Lp rats. In the liver, mRNA for FAS was up-expressed in Lp rats and mRNA PGC1a and β down-regulated. The results indicates that: i) sympathetic and respiratory hiperactivity linked to with higher peripheral chemosensitivity in early life can contribute to development of arterial hypertension in adult life from Lp rats. ii) Carotid body removal attenuates the hypertension in rats submitted the perinatal protein restricted. iii) Arterial hypertension in Lp adult life is associated with oxidative disbalance. iv) metabolic genes expression involved in glucose and fatty acids metabolism are altered, at short and long-term, in liver and muscle of rats submitted the perinatal protein restricted.